微生物学沙门菌弧菌课件.ppt

1、第三节第三节 沙门菌属沙门菌属 (Salmonella)1.1.种类繁多（种类繁多（血清型超过血清型超过25002500个个)2.2.宿主范围广，多对动物致病宿主范围广，多对动物致病 3.3.只对人类致病的占少数只对人类致病的占少数 伤寒沙门菌伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌 肖氏伤寒沙门菌肖氏伤寒沙门菌 希氏伤寒沙门菌希氏伤寒沙门菌 4.4.动物沙门菌也可对人致病动物沙门菌也可对人致病 鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌 、肠炎沙门菌、鸭沙门菌肠炎沙门菌、鸭沙门菌一、生物学性状形 态 染 色1.未接种细菌3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性2.分解乳糖和葡萄

2、糖产酸不产气、硫化氢阴性4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢主要生化特性主要沙门菌的生化特性抗原结构（抗原结构（O抗原、抗原、H抗原、抗原、Vi抗原）抗原）1、沙门菌沙门菌“O”抗原抗原-耐热菌体抗原耐热菌体抗原 用阿拉伯数字用阿拉伯数字 1、2、3、表示（从表示（从167），），实际上共有实际上共有58种。不同沙门菌可有相同的种。不同沙门菌可有相同的O抗原，抗原，故将有共同故将有共同O抗原沙门菌归一群（组），共可分抗原沙门菌归一群（组），共可分40多组。多组。引起人类疾病的沙门菌，其引起人类疾病的沙门菌，其O抗原大多属于抗原大多属于AE组（

3、组（P126 表表10-5）。）。2、沙门菌沙门菌“H”抗原抗原-不耐热鞭毛抗原不耐热鞭毛抗原 H抗原分为第抗原分为第 1 相、第相、第 2 相相 第第 1 相特异性高，以英文小写字母表示相特异性高，以英文小写字母表示 第第 2 相特异性较低，以阿拉伯数字表示相特异性较低，以阿拉伯数字表示 各组沙门菌可依各组沙门菌可依H抗原不同分种、型，抗原不同分种、型，H 抗原为特异性抗原。抗原为特异性抗原。化学本质为蛋白质化学本质为蛋白质。3、沙门菌沙门菌“Vi”抗原抗原-表面抗原表面抗原 少数沙门菌（伤寒杆菌等）新从病人体内分少数沙门菌（伤寒杆菌等）新从病人体内分离标本常有表面抗原离标本常有表面抗原 V

4、i-virulence 毒力毒力 Vi抗原可阻断抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集，在抗原与相应抗体的凝集，在细菌鉴定中应予注意。细菌鉴定中应予注意。Vi抗原可刺激机体产生低效价抗体，随细菌抗原可刺激机体产生低效价抗体，随细菌清除，此抗体消失，故测定清除，此抗体消失，故测定Vi抗体有利于检抗体有利于检出出带菌者带菌者。二、致病性二、致病性 1、侵袭力、侵袭力 沙门菌有毒株经口感染沙门菌有毒株经口感染 小肠末端派伊小肠末端派伊尔淋巴结尔淋巴结M细胞细胞 被吞噬被吞噬 在吞噬细胞在吞噬细胞内增殖内增殖（不完全吞噬）（不完全吞噬）致病物质致病物质 2、内毒素、内毒素 导致体温升高、白细胞数变化等导致体

5、温升高、白细胞数变化等 3、肠毒素、肠毒素 个别沙门菌可产生肠毒素（鼠伤寒），个别沙门菌可产生肠毒素（鼠伤寒），作用作用 与大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素相似，与大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素相似，引起胃肠炎引起胃肠炎 致病物质致病物质致病菌致病菌 伤寒沙门菌，副伤寒甲、乙等沙门伤寒沙门菌，副伤寒甲、乙等沙门传染源传染源 病人、带菌者（尤为重要）病人、带菌者（尤为重要）传播途径传播途径 经粪经粪-口途径传播口途径传播易感者易感者 人群普遍易感人群普遍易感所致疾病所致疾病1、肠热症（伤寒、副伤寒）、肠热症（伤寒、副伤寒）血流（第？次菌血症、内毒素）血流（第？次菌血症、内毒素）全身淋巴组织中大量增殖（肝、脾、

6、肾、骨髓）伤寒沙门菌伤寒沙门菌胃 小肠末端M细胞肠粘膜局部淋巴组织中增殖局部炎症、症状加重局部炎症溃疡、穿孔全身症状（发热、不适、全身疼痛）全身症状（发热、不适、全身疼痛）潜伏期潜伏期/前驱期（病程第前驱期（病程第1周周）全身症状（稽留高热全身症状（稽留高热 肝脾肿大等）肝脾肿大等）极期（病程第极期（病程第2-3周周）整个病期约一个月左右整个病期约一个月左右少数患者病后带菌少数患者病后带菌（肠道内、胆囊带菌）（肠道内、胆囊带菌）成为成为重要的传染源重要的传染源 感染后体内有抗体产生，但对胞内菌无免感染后体内有抗体产生，但对胞内菌无免疫作用，常用抗体测定作为伤寒病的辅助诊疫作用，常用抗体测定作为

7、伤寒病的辅助诊断断肥达反应。肥达反应。细胞免疫逐渐增强细胞免疫逐渐增强细胞内细菌被清除细胞内细菌被清除逐步痊愈逐步痊愈病后免疫以细胞免疫为主，终身免疫 因摄入大量（因摄入大量（108）其它沙门菌污染食物）其它沙门菌污染食物后引起后引起 潜伏期潜伏期 6-12小时小时 主要表现主要表现 恶心、呕吐、腹痛、腹泻、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热持续发热持续3-5天天2、胃肠炎（食物中毒）、胃肠炎（食物中毒）3、败血症、败血症多见小儿及免疫功能低下者多见小儿及免疫功能低下者病原菌为其它沙门菌（猪霍乱、鼠伤寒等）病原菌为其它沙门菌（猪霍乱、鼠伤寒等）可致可致全身感染全身感染，败血症、脑膜炎、骨髓炎、，败血

8、症、脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎等。局部胃肠炎少见。心内膜炎等。局部胃肠炎少见。4、无症状带菌者、无症状带菌者多见伤寒、副伤寒患者多见伤寒、副伤寒患者带菌部位带菌部位 胆囊胆囊与年龄性别关系密切与年龄性别关系密切三、微生物学检查三、微生物学检查 伤寒病人按病程不同取不同标本伤寒病人按病程不同取不同标本第一周第一周第二周起第二周起病程全程病程全程食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物败血症患者取血液败血症患者取血液细菌的分离鉴定细菌的分离鉴定标标本本血血尿、粪便尿、粪便骨髓骨髓细菌分离鉴定步骤粪便、尿增菌培养SS中国兰挑取不发酵乳糖菌落血清学鉴定：直接玻片凝集血液骨

9、髓标本伤寒杆菌表现伤寒杆菌表现 葡萄糖 +乳糖 动力 +H2S +/双糖管双糖管 用已知的伤寒杆菌用已知的伤寒杆菌“O”、“H”抗原及副抗原及副伤寒甲、乙的伤寒甲、乙的“H”抗原与不同稀释度的抗原与不同稀释度的病人血清作病人血清作试管凝集试验试管凝集试验。根据血清中抗。根据血清中抗体效价及动态变化，可作为伤寒、副伤寒体效价及动态变化，可作为伤寒、副伤寒病人的辅助诊断试验。病人的辅助诊断试验。血清学试验血清学试验 肥达反应（肥达反应（Widal test)概念概念1、正常效价、正常效价 O抗体抗体 1:80 H抗体抗体 1:160 PA抗体抗体 1:80 PB抗体抗体 1:80 2、病程中动态观

10、察、病程中动态观察 二份血清二份血清,第二次效价增长四倍以上有意义第二次效价增长四倍以上有意义3、O、H抗体的区别抗体的区别 O-Ab-IgM （特点）（特点）H-Ab-IgG （特点）（特点）分析肥达反应结果 O、H均不增高均不增高伤寒、副伤寒可能性小伤寒、副伤寒可能性小 O增高、增高、H不增高不增高感染早期、其它沙门感染早期、其它沙门 菌感染菌感染 O不增高、不增高、H增高增高预防接种后、非特异性回忆预防接种后、非特异性回忆 反应反应 O、H均增高均增高伤寒、副伤寒可能性大伤寒、副伤寒可能性大 4、抗体始终不升高的可能因素、抗体始终不升高的可能因素 早期使用抗生素、免疫功能低下等早期使用抗

11、生素、免疫功能低下等例：发热两周后入院，肥达反应结果如下例：发热两周后入院，肥达反应结果如下甲：甲：O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:40乙乙 O 1:80 H 1:320 PA 1:40 PB 1:40丙丙 O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:320丁丁 O 1:320 H 1:640 PA 1:40 PB 1:40伤寒病人微生物检查阳性率02040608010012345678系列1系列2系列3系列4系列系列1-尿液中细菌培养；尿液中细菌培养；系列系列2-血液中细菌培养；血液中细菌培养；系列系列3-粪便中细菌培养；粪便中细菌培养；系列系列4-肥达反

12、应抗体效价肥达反应抗体效价阳性率病程：发 病 后 周 次 细菌培养（按前面步骤进行）Vi抗体效价测定 Vi抗体 1：10 有意义。四、防治原则（了解）预防接种：死菌苗、活菌苗（预防接种：死菌苗、活菌苗（Ty21a株）株）彻底治疗病人及带菌者彻底治疗病人及带菌者 注意饮食卫生，防止病从口入注意饮食卫生，防止病从口入 伤寒带菌者检查伤寒带菌者检查变形杆菌属（简述变形杆菌属（简述 P181）变形杆菌属肠杆菌科变形杆菌属肠杆菌科 有周身鞭毛，运动活泼，有周身鞭毛，运动活泼，培养基中迁徙生长培养基中迁徙生长 能分解尿素（重要特征）能分解尿素（重要特征）主要引起各种创伤感染、主要引起各种创伤感染、尿路感染

13、等尿路感染等变形杆菌的迁徙生长现象变形杆菌的迁徙生长现象变形杆菌的迁徙生长现象变形杆菌的迁徙生长现象 变形杆菌某些菌株的菌体抗原，与部分变形杆菌某些菌株的菌体抗原，与部分立克次体间有共同抗原成分。因此可用立克次体间有共同抗原成分。因此可用变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血清做交叉凝集反应，称外裴试验（清做交叉凝集反应，称外裴试验（Weil-Felix test)辅助诊断斑疹伤寒等疾病辅助诊断斑疹伤寒等疾病外裴试验外裴试验第第1111章章 弧菌属弧菌属(Vibrio)为一大群菌体弯曲呈弧状的革兰阴性菌为一大群菌体弯曲呈弧状的革兰阴性菌 主要特点：主要特点：有单鞭

14、毛，运动活泼有单鞭毛，运动活泼 培养要求为碱性环境培养要求为碱性环境 自然界广泛分布自然界广泛分布,尤其是水体中，尤其是水体中，致病菌主要有霍乱弧菌、副溶血性弧菌。致病菌主要有霍乱弧菌、副溶血性弧菌。与肠杆菌科不同的是氧化酶试验阳性。与肠杆菌科不同的是氧化酶试验阳性。自自1817年已发生过年已发生过7次世界性霍乱大流行，次世界性霍乱大流行，前前6次由霍乱弧菌古典生物型引起，第次由霍乱弧菌古典生物型引起，第7次由次由霍乱弧菌霍乱弧菌El Tor生物型引起。生物型引起。霍乱弧菌古典生物型的发现与命名霍乱弧菌古典生物型的发现与命名1854年首次发现，年首次发现，1884年分离成功年分离成功-Koch

15、第一节第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌霍乱弧菌病原菌的发现与命名霍乱弧菌病原菌的发现与命名 EI Tor 弧菌的发现与命名弧菌的发现与命名1905年在埃年在埃及及EI Tor检疫所检出，当时未发现与霍乱发病检疫所检出，当时未发现与霍乱发病有关系。有关系。1961年确定为霍乱病原菌，命名为年确定为霍乱病原菌，命名为EI Tor 型霍乱弧菌型霍乱弧菌 1992年出现新流行菌株年出现新流行菌株O139，是目前在东，是目前在东南亚各国流行的主要病原菌，这是首次由非南亚各国流行的主要病原菌，这是首次由非O1群霍乱弧菌引起的流行群霍乱弧菌引起的流行霍乱弧菌病原菌的发现与命名霍乱弧菌病原菌的发现与命名一、生物学性状

16、一、生物学性状 形态与染色形态与染色 G 弧形，有单鞭毛，运动十分活泼。弧形，有单鞭毛，运动十分活泼。霍乱弧菌霍乱弧菌 扫描电镜扫描电镜 15000营养要求不高，普通培养基上营养要求不高，普通培养基上 生长良好。生长良好。耐碱怕酸耐碱怕酸 pH8.89.0 碱性蛋白碱性蛋白 胨水胨水/碱性琼脂平板。碱性琼脂平板。霍乱弧菌可在霍乱弧菌可在无盐无盐的环境中生长，的环境中生长，其他弧菌不能。其他弧菌不能。培养特性培养特性霍乱弧菌具有霍乱弧菌具有 O 抗原、抗原、H 抗原抗原 O 抗原抗原 目前发现的已有目前发现的已有155个血清个血清群，群，O1、O139群引起霍乱，其他血群引起霍乱，其他血清群引起

17、人类胃肠炎等疾病。清群引起人类胃肠炎等疾病。O1群又可分为群又可分为3个血清型。个血清型。抗原构造与分型抗原构造与分型霍乱弧菌霍乱弧菌O1群血清型群血清型血清型血清型(抗原组分抗原组分)01多克隆多克隆抗体抗体01单克隆抗体单克隆抗体A B C出现出现频率频率造成造成流行流行小川型小川型(AB)常见常见是是稻叶型稻叶型(AC)常见常见是是彦岛型彦岛型(ABC)极少见极少见未知未知 抗原构造与分型抗原构造与分型根据表型差异，根据表型差异，O1群霍乱弧菌的每一个血清群霍乱弧菌的每一个血清型还可分为型还可分为2个生物型。个生物型。性性 状状古典生物型古典生物型（classical biotype）E

18、I Tor生物型生物型（EI Tor biotype）溶解羊红细胞溶解羊红细胞+凝集鸡红细胞凝集鸡红细胞+多粘菌素多粘菌素+群噬菌体裂解群噬菌体裂解+19921992年在印度、盂加拉国暴发年在印度、盂加拉国暴发O139 O139 群霍群霍乱流行。乱流行。O139 O139 群在抗原性方面与群在抗原性方面与O1 O1 群无交叉。群无交叉。WHOWHO规定，规定，霍乱的病原体包括霍乱的病原体包括O1O1群和群和 O139 O139 群霍乱弧菌群霍乱弧菌 O-1群群 有有3个血清型，个血清型，每一血清型均含有每一血清型均含有 二种生物型，古典生物型、二种生物型，古典生物型、EI Tor 生物生物型型

19、,二种生物型均可引起霍乱流行二种生物型均可引起霍乱流行 抵抗力抵抗力对酸、含氯的化学对酸、含氯的化学 消毒剂敏感消毒剂敏感 正常胃酸正常胃酸4 min 漂白粉：水漂白粉：水=1：4，1h 二、致病性二、致病性 致病物质致病物质1、侵袭力、侵袭力 鞭毛鞭毛-穿透能力强，穿过肠道粘液层，有利穿透能力强，穿过肠道粘液层，有利于细菌粘附于肠壁上皮细胞。于细菌粘附于肠壁上皮细胞。菌毛菌毛-定居因子，是细菌定居于小肠粘膜上定居因子，是细菌定居于小肠粘膜上皮细胞的重要因素。皮细胞的重要因素。2、霍乱肠毒素、霍乱肠毒素霍乱肠毒素化学结构与致病机理霍乱肠毒素化学结构与致病机理性质性质 外毒素，是肠毒素的典型代表

20、外毒素，是肠毒素的典型代表结构结构 A+B亚单位构成，亚单位构成，A是毒性部分，是毒性部分，B是运载和保护部分是运载和保护部分 致病机理致病机理 B与肠粘膜上皮细胞受体与肠粘膜上皮细胞受体(GM1)结合，形成穿膜孔道结合，形成穿膜孔道 A进入细胞内，进入细胞内，作用于细胞内腺苷环化酶作用于细胞内腺苷环化酶 细胞内细胞内cAMP 分泌增多分泌增多再吸收再吸收 剧烈吐泄剧烈吐泄 2、所致疾病、所致疾病-霍乱霍乱传染源传染源 病人，带菌者病人，带菌者传播途径传播途径 经口传播经口传播人类为唯一易感者人类为唯一易感者 霍乱弧菌对酸敏感，正常胃酸可杀死细菌。霍乱弧菌对酸敏感，正常胃酸可杀死细菌。霍乱弧菌

21、肠毒素作用后，引起剧烈腹泻、呕霍乱弧菌肠毒素作用后，引起剧烈腹泻、呕吐，典型病例大便为米泔水样。病人可严重吐，典型病例大便为米泔水样。病人可严重脱水、酸中毒；最终因循环衰竭，死亡。脱水、酸中毒；最终因循环衰竭，死亡。未经治疗者死亡率高达未经治疗者死亡率高达50%75%3、免疫性、免疫性 牢固的终身免疫牢固的终身免疫 以体液免疫为主，出现保护性抗肠毒素抗以体液免疫为主，出现保护性抗肠毒素抗体、抗菌抗体。体、抗菌抗体。O139与与O1 之间无交叉免疫：抗原基因由之间无交叉免疫：抗原基因由rfb区域编码，区域编码，O139弧菌弧菌O抗原基因大部分抗原基因大部分缺失，使缺失，使O-1菌苗对菌苗对O13

22、9弧菌不起作用。弧菌不起作用。三、微生物学检查三、微生物学检查 霍乱为烈性传染病，传播速度极快。对首例病例要及时诊断，封锁疫区，上报疫情。一般根据病情诊断，必要时将可疑物密封保存于碱性蛋白胨水，送上级检疫部门。直接镜检-动力、染色 分离培养-碱性培养基快速诊断-免疫荧光血清学鉴定检查步骤O1群霍乱弧菌死菌苗肌肉注射群霍乱弧菌死菌苗肌肉注射目前疫苗的研制转向口服疫苗、基因目前疫苗的研制转向口服疫苗、基因 工程减毒活疫苗工程减毒活疫苗治疗：补液、抗菌治疗：补液、抗菌防治原则防治原则 第五节 副溶血弧菌（了解）副溶血弧菌（原名副溶血弧菌（原名-嗜盐弧菌）嗜盐弧菌）主要引起疾病主要引起疾病-食物中毒食

23、物中毒 特点：特点：细菌嗜盐，易污染海产品，在海水中可存活细菌嗜盐，易污染海产品，在海水中可存活50天。天。培养要求培养要求3.5%氯化钠氯化钠 潜伏期短，几小时即可发病。症状严重，可潜伏期短，几小时即可发病。症状严重，可有水样、血水样便。恢复较快。有水样、血水样便。恢复较快。TCBS培养基：显示绿色菌落，非蔗糖发酵培养基：显示绿色菌落，非蔗糖发酵第12章 幽门螺杆菌（HP）G-G-杆菌，弧形、杆菌，弧形、S S形或螺旋状形或螺旋状营养要求高，生长缓慢营养要求高，生长缓慢尿素酶试验强阳性尿素酶试验强阳性抵抗力弱，易产生耐药性抵抗力弱，易产生耐药性生物学性状Helicobacter pylori

24、，是螺杆菌属的代表菌种致病性 感染普遍，粪感染普遍，粪-口传播口传播 与胃炎、十二指肠溃疡及胃癌有关与胃炎、十二指肠溃疡及胃癌有关（19831983年，澳大利亚皇家医院内科医生年，澳大利亚皇家医院内科医生 马歇尔、沃伦，马歇尔、沃伦，20052005年医学诺贝尔奖获得者）年医学诺贝尔奖获得者）致病物质及致病机制不详致病物质及致病机制不详幽门螺杆菌幽门螺杆菌微生物学检查 有创检查有创检查 直接涂片脲酶试验直接涂片脲酶试验分离培养分离培养 无创检查无创检查 碳标记呼吸试验碳标记呼吸试验 血清学试验血清学试验传统方法新法 PCRPCR、核酸探针技术、核酸探针技术治疗 抗生素（联用），痢特灵（呋喃唑酮

25、）抗生素（联用），痢特灵（呋喃唑酮）Salmonella 沙门菌属 Widal test 肥达反应 Vibrio 弧菌属 V.cholera 霍乱弧菌 non-agglutinating Vibrio,NAG 不凝集弧菌本章专业英语词汇 了解主要沙门菌的生化反应。了解主要沙门菌的生化反应。伤寒沙门菌的主要致病因素及伤寒发病过程。伤寒沙门菌的主要致病因素及伤寒发病过程。何谓肥达反应？如何观察分析肥达反应结果？何谓肥达反应？如何观察分析肥达反应结果？弧菌属的弧菌属的O抗原分型及与霍乱发病的关系。抗原分型及与霍乱发病的关系。霍乱弧菌的致病因素。霍乱弧菌的致病因素。霍乱肠毒素的致病机理。霍乱肠毒素的致病机理。本 章 要 点