1、实验：绿叶中色素的提取和分离 杨琪 一实验原理 实验中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇(丙酮，汽油，苯等)中，所以， 可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 绿叶中的色素不止一种，他们都能溶解在层析液中。然而，它们在层析液中 的溶解度不同；溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快；反之则慢。这样，几分 钟之后绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。且溶解度最高的 是胡萝卜素，它随层析液在滤纸上扩散的最快；叶黄素和叶绿素 a 的溶解度次之， 叶绿素 b 的溶解度最低，扩散的最慢。 二实验目的 1. 掌握提取和分离叶绿体色素的方法 2. 探究绿叶中含有几种色素 三实验材料用具 SiO、CaCO 材料
2、：新鲜的绿色叶片（如菠菜的绿叶）。无水乙醇，层析液， 23 用具:干燥的定性滤纸，烧杯（100ml）,小试管，试管架，培养皿盖，棉塞， 研钵，玻璃漏斗，尼绒布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml）,天 平，铅笔 四实验步骤 1.提取绿叶中的色素 取材：用天平称取 5g 的新鲜绿叶，剪碎，放入研钵中。向研钵中加入少许 SiO、CaCO ，再加入 10ml无水乙醇，进行快速，充分的研磨。 23 过滤：将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一块单层尼绒布）中进行过 滤。将滤液收集到小试管中，及时用棉塞将试管口塞严。 2.制备滤纸条 将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去
3、两角，并在距这一端 1cm处用铅笔画一条细的横线。 3.画滤液细线 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀的画出一条细线。待滤液干后，再 画一两次 4.分离绿叶中的色素 将适量的层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微倾斜 靠着烧杯的内壁，轻轻插入层析液中，随后用培养皿盖盖住烧杯口。注意， 不能让滤液细线触及层析液 5.观察与记录 几分钟以后，打开培养皿盖，取出滤纸条，干燥后观察滤纸条上的色素带， 以及每条色素带的颜色和宽度，将观测结果记录下来。 6观察结果分析结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图） 最宽：叶绿素 a（蓝绿色）； 最窄：叶绿素 b（黄绿色）； 相邻色素
4、带最近：叶绿素 a 和叶绿素 b； 相邻色素带最远：胡萝卜素（橙黄色）和叶黄素（黄色）。 实验关键点 1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶 等。 2.画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干 燥衙再进行，重复 2-3 次。 3.层析时不要让滤液细线触及层析液。 实验总结 （1） 在研磨绿叶时，加入少许 SiO2 是为了研磨得充分，加入少许的 CaCO3 是为了防止研磨过程中色素受到破坏，加入 10ml 无水乙醇是使色素溶解 在其中，便于提取； （2） 因无水乙醇和层析液都是易挥发且层析液是有一定毒性的有机溶剂，所以 研磨要快，收集
5、的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂 的挥发。 （3）用毛细吸管画滤液细线时，线条越细越直效果越好，重复划几次的目的是 使滤液细线中含有较多的色素 （4）如果层析液浸没了滤纸条上的滤液细线，滤纸条上就不会出现色素带，其 原因是滤液细线中的色素溶解在了烧杯中的层析液中，会导致色素带不清 晰，影响整个实验的效果。 课堂巩固练习 1.提取高等植物叶绿体中的色素，在研磨时加入少量 CaCO3 的作用是 A调节 PH 值，加速叶绿素溶解B使叶片研磨充分 C调节 PH 值，保护叶绿素不被破坏D促使 4 种色素的分开 2通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，从上而下依 次为：
6、 A胡萝卜素、叶黄素、叶绿素 a、叶绿素 b B胡萝卜素、叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素 C叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素、胡萝卜素 D叶黄素、叶绿素 a、叶绿素 b、胡萝卜素 3做色素提取和分离实验的正确装置是图中 4在叶绿体中色素的提取与分离实验中，扩散速度最快的色素是 A叶绿素 aB叶绿素 bC叶黄素D胡萝 D汽油 卜素 5下列哪一种液体不能作为叶绿体中色素提取液？ A丙酮溶液B酒精溶液C水溶液 6下面是有关叶绿体色素的提取和分离实验的问题，请回答： （1）实验中加入研钵内的丙酮的作用是 实验中加入研钵内的石英砂的作用是 ； ；实验中加 入研钵内的碳酸钙的作用是。 （ 2 ） 实 验 中
7、 将 研 磨 液 倒 入 漏 斗 中 ， 漏 斗 底 部 放 有。 （3）画滤液细线的要求是 （4）层析时的关键注意事项是 是 度最快的是 。 ；加盖的目的 ；扩散速；色素带最宽的是 。 7.某同学在做“叶绿体中色素的提取和分离”实验时，操作情况如下所述，结果 实验失败，请指出其错误所在： （1）将 5 克新鲜菠菜剪碎后，放入研钵中，加入酒精、石英砂后，迅速研磨。 （2）用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔细线小心均匀地划出一道滤液细线，并 连续迅速地重复划 2-3 次。 （3）把划好细线的的滤纸条插入层析液中，并不断振荡，以加快层析液在滤纸 条上的扩散。 8分别在 A、B、C 三个研钵中加入 2 克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按下表所示 添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄绿色（或褐 色）、几乎无色。 ABC 蒸馏水（10 毫升） 注：“”表示加；“”表示不加 试回答： （1）A 处理得到的溶液颜色是，原因 ，原因 ，原因 是 是 是 。 （2） B 处理 得到的 溶液 颜色 是 。 （3）C 处理 得到的 溶液 颜色 是 。
