1、血液一般检验白细胞检查1.白细胞计数白细胞分类计数2.白细胞(white blood cell,WBC)起源于骨髓的造血干细胞,是造血干细胞在骨髓多种造血生长因子的调控下,最终分化、发育、成熟并释放到外周血液。在显微镜下可以看到,血细胞中体积比较大、数量比较少。具有细胞核,一般呈球形。其主要作用是吞噬细菌、防御疾病。3白细胞颗粒白细胞无颗粒白细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞单核细胞淋巴细胞50%70%0.5%5%01%3%8%20%40%白细胞分类4.粒细胞动力学5贮存池的杆状核及分叶核粒细胞仅有约1/20释放到外周血中,大部分保存在贮存池内以便不断补充损耗及应激使用。成熟粒细胞进入血液
2、后约50%运行于血循环之中,构成循环池,另一半则附着于血管内壁而形成边缘池。因此,白细胞计数结果仅反映了循环池的粒细胞数量变化。边缘池及循环池的粒细胞之间保持着动态平衡,生理性、特别是病理性因素可以打破这种平衡,可导致白细胞计数结果呈大幅度波动,并影响各种类型白细胞的比例。外周血白细胞检验是临床血液一般检验的重要项目之一,以下情况可以检查白细胞:感染、炎症、组织损伤或坏死、中毒、贫血。结缔组织病、骨髓抑制。恶性肿瘤、白血病、骨髓增殖性疾病和淋巴组织增殖性疾病等。计数外周血的白细胞数量、检查染色条件下各种白细胞的形态并分类计数,是诊断疾病,尤其是对恶性血液病进行初步诊断和评估疗效的基本指标。6一
3、、白细胞计数白细胞计数(WBC)是指测定单位容积的外周血各种白细胞的总数。【检测原理】显微镜计数法:采用白细胞计数稀释液(如冰乙酸)将全血稀释一定倍数,同时破坏红细胞和固定白细胞,充入改良牛鲍(Neubauer)计数板,在低倍镜下计数一定体积内的白细胞数量,经换算求出每升血液的白细胞总数。7步骤加稀释液0.38mL采血0.02mL混匀充池、计数计算8计算结果WBC=N/41020106=N/20109/L其中N为四个大方格(蓝色部分)的白细胞总数参考值: 成人: 4.010109/L 新生儿: 1520109/L 6月2岁: 1112109/L9方法学评价(了解)显微镜计数法优点:设备简单、费
4、用低廉,不需昂贵仪器,适合于基层医疗单位和分散就诊的患者缺点:费时、重复性和准确性较差。准确性取决于操作者的技术水平,影响因素较多(如微量吸管、血细胞计数板、细胞分布情况及诸多人为因素等)。血液分析仪计数法优点:操作简便、效率高,重复性好,由于电脑计数,速度快,计数精确性高。是目前临床上常规采用的筛检方法,适合于大批量标本集中检测,国内已普及到县(区)以上医疗单位。缺点:仪器较贵,结果的准确性取决于仪器的性能及工作状态。使用前须按NCCLS规定的方法对仪器进行校准,某些人为因素(如抗凝不充分)或病理情况(如外周血出现有核红细胞、巨大血小板和血小板凝集等),可干扰白细胞计数。10.临床意义通常白
5、细胞数高于109/L称白细胞增多,低于109/L称白细胞减少。通常将其减低的临界值定为(42.5)109/L,低于2.5109/L肯定异常。白细胞数在生理或病理情况下均可有变异。由于中性粒细胞占白细胞总数的,其增高或减低直接影响白细胞总数的变化,中性粒细胞的增多或减少直接影响到白细胞总数的增多或减少,其临床意义也基本相同,因此和白细胞分类计数一起介绍。接下来我们来学习白细胞分类计数。11二、白细胞分类计数白细胞分类计数(differential leukocyte count,DLC)是在显微镜下观察染色后的血涂片上白细胞的形态,并进行分类计数,求得各种白细胞的比值(百分率)和绝对值。由于不同
6、类型的白细胞具有不同的生理功能,不同因素可导致不同类型的白细胞发生变化。因此,直接了解白细胞形态或分类的变化,较了解白细胞总数更能反映机体的生理或病理状态。方法:1.显微镜法 2.血液分析仪12显微镜法原理:将血液制成血涂片,经Wright(瑞氏)染色后,在油镜下,根据白细胞形态特点逐个分类计数(一般计数100200个白细胞),并观察其形态的变化,然后求得各种白细胞的比值(百分率)。13血液分析仪法原理:多采用电阻抗法。当有一个细胞通过小孔时,由于细胞的导电性质比稀释液要低,在电路中小孔感应区内的电阻的增加,于瞬间能上能下起了电压变化而出现一个脉冲信号,自然数为通过脉冲。电压增加的变化的程度取
7、决于非传导的细胞占据小孔感应区的体积,即细胞体积越大,引起的脉冲越,产生的脉冲振幅越高。记录脉冲的数目可以得到细胞的数目,不同大小的脉冲可以区分不同类型的细胞。14经过溶血剂处理后的白细胞可以根据体积大小初步确认其相应的细胞群:第一群是小细胞区,主要是淋巴细胞。第二群是单个核细胞区,也被称为中间细胞(MID),包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞,核象左移或白血病可有各阶段幼稚细胞及白血病细胞。第三群是大细胞区,主要是中性粒细胞(GRAN)。15.稀释液中加入溶血剂,一方面是红细胞迅速溶解,另一方面是白细胞浆经细胞膜渗出,胞膜紧裹在细胞核或颗粒物质周围,经处理后的白细胞体积与自然体积无关,
8、含颗粒的粒细胞经处理后比无颗粒的单核细胞和淋巴细胞体积要大些,所以白细胞直方图并不能代表自然状况,但可以用于判断白细胞各体积群分布情况。16.一般把体积在35-90fl为淋巴细胞,90-160fl为单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞,160fl以上为嗜粒细胞。目前医院所做的血常规检验以三分类与五分类为主,这对于白细胞分类来说的,三分类的仪器可将白细胞大体的分为大细胞(中性粒细胞)、中间细胞(其它白细胞)、小细胞(淋巴细胞)三类。五分类的仪器可将白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞五类,而在一些医院还在使用手工分类的方法。17.方法学评价方法学评价18.成人白细
9、胞分类计数参考值成人白细胞分类计数参考值19.中性粒细胞在外周血中,由于中性粒细胞占白细胞总数的50%70%,故其数量的增多或减少可直接影响白细胞总数的变化。因此,白细胞总数变化的临床意义与中性粒细胞数量变化的临床意义基本一致。但是,淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等数量上的改变也会引起白细胞总数的变化。因此,若出现白细胞总数与中性粒细胞的数量关系不相一致的情况,还应具体分析。白细胞总数与中性粒细胞数量增多及减少的参考标准20生理性变化生理性变化:多为暂时性,去除影响因素后则可恢复正常。这种变化与内分泌因素有关,主要是由于边缘池的白细胞进入循环池增多所致。主要因素:年龄 日间变化 运动、疼痛和情绪 妊娠
10、、分娩 其他如吸烟 21.中性粒细胞病理性增多反应性增多是机体对各种病理因素刺激产生应激反应,动员骨髓贮存池的粒细胞释放及(或)边缘池的粒细胞进入循环池所致异常增生性增多系造血干细胞克隆性疾病,为造血组织中粒细胞大量异常增生并释放到外周血所致,增多的粒细胞主要是病理性粒细胞或未成熟粒细胞,常伴其他系细胞改变,如红细胞或血小板增多或减少22.白细胞(中性粒细胞)反应性增高病因23.绝大多数细菌感染的白细胞为(1030)109/L,白细胞超过30109/L提示深部感染或腹膜炎,超过50109/L时提示感染严重24.正常情况下,外周血中性粒细胞以分叶核为主,胞核常分为25叶,杆状核较少。病例情况下中
11、性粒细胞的核象可发生左移或右移核左移:是指外周血中性杆状核粒细胞增多或出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞。核右移:外周血的中性粒分叶核细胞增多,并且5叶核以上的中性粒细胞大于3%时称为核右移25.异常增生性增多主要见于:异常增生性增多主要见于:(1)白血病:系造血系统恶性肿瘤,因造血组织中病理性白细胞大量异常增生并释放到外周血所致。常见于急性、慢性粒细胞白血病(急粒、慢粒)。(2)骨髓增殖性疾病(MPD):一组造血干细胞肿瘤增生性疾病,在骨髓细胞普遍增生的基础上有一个系列细胞尤其突出,呈持续不断的过度增殖。常见于真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化症。26.中性粒细胞减少中性粒
12、细胞增殖和成熟障碍。中性粒细胞在血液或组织中消耗或破坏过多。中性粒细胞分布异常。2728.嗜碱性粒细胞功能与肥大细胞相似,释放组织胺,参与超敏反应。外周血大于0.1109/L为嗜碱性粒细胞增多轻度增多,可作为骨髓增殖性疾病的一个早期征象。慢性粒细胞白血病特征表现之一。嗜碱性粒细胞减少,临床一般不容易诊断和发现,多无临床意义。2930.淋巴细胞由骨髓多能造血干细胞分化为淋巴系干细胞后分化发育而来。淋巴细胞主要分为T细胞、B细胞和自然杀伤细胞(natural killer cell)三大类。淋巴细胞是人体主要的免疫细胞,观察其数量变化,有助于了解机体的免疫功能状态成人大于4.0109/L为淋巴细胞
13、增多成人小于1.0109/L为淋巴细胞减少3132.33.单核细胞来自骨髓多能造血干细胞分化的髓系干细胞和粒-单核系祖细胞。成人单核细胞占白细胞总数3%8%。骨髓释放入外周血的单核细胞为成熟的单核细胞,在血液中停留36d,即逸出血管进入组织或体腔内,经59d,发育为巨噬细胞,形成单核-巨噬细胞系统,防御功能增强。单核细胞增多(monocytosis)是指成人外周血单核细胞绝对值大于0.8109/L,单核细胞减少临床意义不大。生理性增多:正常儿童外周血单核细胞可较成人稍高,平均为9%;2周内的婴儿可达15%或更多;妊娠中、晚期及分娩亦可增多。病理性增多:感染、结缔组织病、血液病、恶性疾病等。34单核细胞病理性增多的原因和意义3536.