1、第五章第五章 中药制剂中各类化学成分分析中药制剂中各类化学成分分析掌握中药制剂中生物碱、黄酮、三萜皂苷、醌类成分的掌握中药制剂中生物碱、黄酮、三萜皂苷、醌类成分的定性、定量原理与方法。定性、定量原理与方法。熟悉中药制剂中挥发性成分、木质素类成分的定性、定熟悉中药制剂中挥发性成分、木质素类成分的定性、定量原理与方法。量原理与方法。了解其他成分（有机酸类、环烯醚萜类、香豆素类、单了解其他成分（有机酸类、环烯醚萜类、香豆素类、单萜及二萜类、多糖类）的分析方法。萜及二萜类、多糖类）的分析方法。【目的要求目的要求】第五章第五章 中药制剂中各类化学成分分析中药制剂中各类化学成分分析学习方法结构 性质 分析
2、方法结构：母核、官能团、分子量等结构：母核、官能团、分子量等物理化学性质：溶解性、酸碱性、挥发性、氧化还原性、物理化学性质：溶解性、酸碱性、挥发性、氧化还原性、 旋光性、光谱特性等旋光性、光谱特性等分析方法：分析方法：总类成分：化学分析法、分光光度法总类成分：化学分析法、分光光度法单一成分：各种色谱法（单一成分：各种色谱法（GCGC、HPLCHPLC、HPCEHPCE、TLCSTLCS、SFCSFC等）等）一、概述1、概念：生物碱是生物界除生物体必需的含氮化合物（如氨基酸、蛋白质和B族维生素等）之外的所有含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共享电子对而大多具有碱性。2、含生物碱成分的常用中药
3、：第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析中药名称主要生物碱成分 中药名称 主要生物碱成分 山豆根制川乌 马钱子延胡索苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、金雀花碱乌头碱、次乌头碱、新乌头碱马钱子碱、番木鳖碱（士的宁）、伪马钱子碱、伪番木鳖碱延胡索乙素、延胡索甲素、原阿片碱、黄连碱 苦 参麻 黄黄 连黄 柏防 己苦参碱、槐定碱、槐果碱、氧化苦参碱麻黄碱、伪麻黄碱、去甲麻黄碱、甲基麻黄碱小檗碱、巴马丁、药根碱、黄连碱小檗碱、药根碱、木兰花碱粉防己碱、防己诺林碱、轮环藤酚碱、木兰碱 第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析二、理化性质1、溶解性 大多数生物碱难溶于水，易溶于氯仿、乙醚、乙醇、丙酮
4、及苯等有机溶剂； 与酸结合成盐后水溶性增加，但酸不同，生成的盐水溶性有差异；季铵型生物碱、有氮氧配位键的生物碱易溶于水 液体生物碱及一些小分子固体生物碱则既溶于水也可溶于有机溶剂；含有酸性官能团或酯键的生物碱还可溶于一些碱液或热苛性碱液。第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析二、理化性质2、沉淀反应大多数生物碱在酸性水溶液中可以与某些试剂生成不溶于水的复盐或分子复合物。生物碱沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子有机酸 马钱子散中生物碱成分的鉴别马钱子散中生物碱成分的鉴别取马钱子散取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时，浸泡数小时，滤过，取滤液滤过
5、，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸蒸干，残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋使溶解，加碘化铋钾试液钾试液12滴，即生成黄棕色沉淀。滴，即生成黄棕色沉淀。 第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析二、理化性质3、显色反应生物碱在一定pH条件下可与一些酸性染料（多为磺酸肽类）生成有色络合物，可被氯仿等有机溶剂定量提出 结构中具有酯键的酯碱如乌头碱等可与异羟肟酸铁试剂反应产生紫红色； 这些特点可用于中药制剂中生物碱成分的分析 第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析二、理化性质4、紫外光谱特性结构中具有共轭体系的生物碱均有紫外吸收结构中的氮原子与发色团直接连接或参与发色团的生物碱，其吸收峰位
6、置与测定时溶剂的pH有关。第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析三、定性鉴别1、一般理化鉴别沉淀反应是生物碱理化鉴别常用方法，此反应一般在酸性水溶液中进行制备样品供试液时必须净化处理，防止假阳性结果 第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析三、定性鉴别2、薄层色谱法吸附剂：硅胶、氧化铝；展开剂：多以氯仿、苯等低极性溶剂，加入其他溶剂调整展开剂的极性；由于硅胶显弱酸性，强碱性的生物碱在硅胶色谱板上能形成盐，使Rf值很小或拖尾、形成复斑等。显色剂：常用改良碘化铋钾试剂，有时喷碘化铋钾试剂之后再喷硝酸钠试剂，可使样品斑点更加清晰。如有荧光，不用显色 亦可用碘蒸汽、硫酸铈、碘铂酸等其他的
7、试剂显色。讨论：如何改进？讨论：如何改进？第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析三、定性鉴别3、纸色谱法可用于生物碱盐或游离碱的鉴别 4、HPLC：保留时间定性5、GC：可用于小分子生物碱的鉴别第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析四、含量测定（一）总生物碱的含量测定1、化学分析法 主要使用酸碱滴定法。强碱滴定生物碱盐时，在70%90%的乙醇介质中终点比在水中明显，因此常将生物碱盐溶于90%乙醇，再用标准碱乙醇液滴定。若选择的溶剂及指示终点方法合适，还可用非水滴定法进行要求：总生物碱的纯度较高，用于药味少成分简单制剂的测定第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析四、含量测
8、定（一）总生物碱的含量测定2、分光光度法 （1）直接测定法不经过化学反应、利用生物碱物质自身的光吸收直接进行比色测定的方法。一般用于药味较少、干扰小的中药制剂中总生物碱的含量测定。第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析四、含量测定（一）总生物碱的含量测定（2）酸性染料比色法（例题P124）原理： BH+ In- BH+In-（水相） BH+In-（有机相）关键：v酸性染料的选择：甲基橙、溴麝香草酚兰（BTB）和溴甲酚绿等；vpH值的选择：与生物碱和酸性染料的性质有关。v有机溶剂的选择：一般用氯仿、二氯甲烷v水分的干扰及消除第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析四、含量测定（一）
9、总生物碱的含量测定（3）雷氏盐比色法（注意事项p126）原理： BH+ Cr(NH3)2(SCN)4- BH Cr(NH3)2(SCN)4测定方法： （复盐沉淀）复盐沉淀溶于丙酮（或甲醇）直接比色测定样品定量过量的雷氏盐过滤滤液比色测定max=520nm（4）异羟肟酸铁比色法用于含有酯键结构的生物碱的测定第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析四、含量测定（二）单体生物碱成分含量测定1、TLCS生物碱不具有紫外吸收或挥发性时可用本法测定；选用的吸附剂、展开剂及显色方法与鉴别相似； 使用改良碘化铋钾等作为显色剂时，必须完全挥干展开剂后（尤其在碱性环境下展开的）才可喷洒，否则背景深、反差小，
10、影响测定。第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析四、含量测定（二）单体生物碱成分含量测定2、HPLC(例题P128)以反相高效液相色谱应用较多；在反相高效液相色谱中，由于硅胶表面残留硅醇基的影响，使生物碱分析易产生保留时间延长、峰形变宽、拖尾；可在流动相中加入硅醇基抑制剂、离子对试剂等措施以克服游离硅醇基的影响，满足定量分析的要求；中药制剂中生物碱成分进行高效液相色谱法测定时，使用较多的是紫外检测器。第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析四、含量测定（二）单体生物碱成分含量测定3、GC只适用于有挥发性的，遇热不分解的生物碱类，如麻黄碱、槟榔碱、苦参碱和颠茄类生物碱等 制备供试品
11、溶液时一般应采用冷提取，净化过程也要避免加热以防成分的流失，最后需用氯仿等低极性有机溶剂为溶媒制备成供试液。第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析五、常见生物碱成分分析化合物名称 结构式 理化性质、结构及光谱特征 常用定量分析方法 小檗碱（黄连素）Berberine(Umbellatine) （C20H18NO4；336.37）异喹啉类原小檗碱型生物碱、季铵型生物碱、有共轭体系。黄色结晶、碱性较强，易溶于热水或热乙醇，微溶或不溶于苯、氯仿、丙酮，其盐酸盐水中溶解度小。 mp：1450 UV：225 ，270 ，331。 重量法、滴定法分光光度法薄层扫描法薄层荧光扫描法高效液相色谱法脉冲
12、极谱法流动色谱分析法酶法 N+OCH3OCH3OO第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析五、常见生物碱成分分析化合物名称结构式 理化性质、结构及光谱特征常用定量分析方法 士的宁（番木鳖碱）Strychnine（C21H20N2 O2;334.40） 单萜吲哚类生物碱、环叔胺显碱性、酰胺不显碱性。难溶于水，可溶于乙醇，甲醇。易溶于氯仿，微溶于乙醚。mp：268290。UV：282。 重量法滴定法分光光度法一阶导数分光光度法薄层扫描法高效液相色谱法 NNOO第一节第一节 生物碱类成分分析生物碱类成分分析五、常见生物碱成分分析化合物名称结构式 理化性质、结构及光谱特征常用定量分析方法 乌头碱
13、Aconitine（C34H47 N O11;645.76 ） 二萜类酯型生物碱。易溶于氯仿、苯、无水乙醇和乙醚，难溶于水、微溶石油醚mp：204UV:281,273,230, 202 滴定法酸性染料比色法一阶导数紫外分光光度法薄层扫描法高效液相色谱法 H5C2H3COOHNOCH3HOOOCH3OHOOCH3OOC6H5H3C练习练习练习练习20052005版版练习练习20102010版版练习练习练习练习第二节第二节 黄酮类成分分析黄酮类成分分析一、概述1、定义：黄酮类化合物是指基本母核为2-苯基色原酮（2-phenylchromone）类化合物，现在则是泛指两苯环通过中央三碳链相互联结而成
14、的一系列化合物。2、含黄酮类成分的常见中药中药名称主要黄酮类成分 中药名称 主要黄酮类成分 黄芩 黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素 山柰 山柰酚、山柰素槐米 芦丁、槲皮素 广藿香商陆素、芹菜素 葛根 葛根素、大豆苷、大豆苷元、7-木糖苷葛根素白果 山奈酚、槲皮素、芦丁 枳实 橙皮苷、川陈皮素、新橙皮苷、5-邻-去甲基川陈皮素 高良姜 高良姜素、山奈素、槲皮素茵陈茵陈黄酮、芫花素、槲皮素补骨脂补骨脂查耳酮、异补骨脂查耳酮 山楂 槲皮素、金丝桃苷 金线草 槲皮素、山奈酚 第二节第二节 黄酮类成分分析黄酮类成分分析二、结构特征及理化性质1、结构特征苯甲酰基苯甲酰基 桂皮酰基桂皮酰基240
15、280nm 300400nm第二节第二节 黄酮类成分分析黄酮类成分分析二、理化性质2、溶解度黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有很大差异。游离苷元难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱液中；黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等。第二节第二节 黄酮类成分分析黄酮类成分分析二、理化性质3、酸碱性酸性：黄酮类化合物因分子中多有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酸性强弱：7,4- 二羟基 7-或4- 羟基 一般酚 5-羟基碱性氧原子的性质 第二节第二节 黄酮类成分分析
16、黄酮类成分分析二、理化性质4、显色反应盐酸-镁粉（锌粉）反应金属盐类试剂的配合反应可用于鉴别，但要避免假阳性结果 5、紫外光谱特征 第二节第二节 黄酮类成分分析黄酮类成分分析三、定性鉴别1、理化鉴别盐酸-镁粉（锌粉）反应金属盐类试剂的配合反应2、色谱鉴别吸附剂：硅胶、聚酰胺硅胶色谱分离弱极性化合物较好；聚酰胺色谱分离含游离酚羟基的黄酮及其苷为佳；纤维素薄层则适用于分离多糖苷混合物。显色反应：采用在紫外光下观察荧光和喷显色剂相配合的方法。第二节第二节 黄酮类成分分析黄酮类成分分析四、含量测定1、总成分的含量测定直接测定：常用芦丁作对照测定显色测定：常用铝盐做显色剂2、单体黄酮成分的含量测定TLC
17、SHPLC（05版以后药典全部使用此法）五、常见黄酮类成分（略）练习练习练习练习练习练习练习练习练习练习多种中药制剂均以多种中药制剂均以黄芩苷作为质控指标黄芩苷作为质控指标合理性？合理性？第三节第三节 三萜皂苷类成分分析三萜皂苷类成分分析一、概述1、概念2、含三萜皂苷类成分的常用中药 第三节第三节 三萜皂苷类成分分析三萜皂苷类成分分析二、结构及理化性质ROHHHCOOHO3R2OHOHR1O3206甘草酸甘草酸人参皂甙人参皂甙(A(A型型) )1 1、溶解度：、溶解度：可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，几不溶于或难溶于乙醚、苯等
18、极性小的有机溶剂；几不溶于或难溶于乙醚、苯等极性小的有机溶剂；在含水丁醇或戊醇中溶解度较好在含水丁醇或戊醇中溶解度较好第三节第三节 三萜皂苷类成分分析三萜皂苷类成分分析二、结构及理化性质ROHHHCOOHO3R2OHOHR1O3206甘草酸甘草酸人参皂甙人参皂甙(A(A型型) )1 1、溶解度、溶解度皂甙元皂甙元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等皂甙皂甙可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等，在丁醇、戊醇可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等，在丁醇、戊醇中溶解性较好。中溶解性较好。2 2、紫外光谱特征、紫外光谱特征第三节第三节 三萜皂苷类成分分析三萜皂苷类成分分析二、结构及理化
19、性质3 3、显色反应、显色反应醋酐醋酐- -浓硫酸反应浓硫酸反应冰醋酸冰醋酸- -乙酰氯反应乙酰氯反应氯仿氯仿- -硫酸反应硫酸反应金属盐类反应：金属盐类反应：+ +铅、钡、铜盐铅、钡、铜盐沉淀沉淀第三节第三节 三萜皂苷类成分分析三萜皂苷类成分分析三、定性鉴别1 1、理化鉴别、理化鉴别 泡沫反应：多用于检验含有皂苷的原料药；泡沫反应：多用于检验含有皂苷的原料药； 化学显色反应：仅在组成药物较少的中药制剂中使用。化学显色反应：仅在组成药物较少的中药制剂中使用。2 2、TLCTLC吸附剂：硅胶，氧化铝、硅藻土等。吸附剂：硅胶，氧化铝、硅藻土等。展开剂：氯仿展开剂：氯仿- -甲醇甲醇- -水（水（1
20、313：7 7：2 2）（）（1010以下放置，以下放置，下层）下层）氯仿氯仿- -醋酸乙酯醋酸乙酯- -甲醇甲醇- -水（水（1515：4040：2222：1010）（同上）（同上）显色剂：不同浓度的显色剂：不同浓度的硫酸乙醇硫酸乙醇液最常用。液最常用。第三节第三节 三萜皂苷类成分分析三萜皂苷类成分分析四、定量分析（一）总成分分析（一）总成分分析1 1、重量法、重量法 该法主要用于含皂苷的原料药质量控制。该法主要用于含皂苷的原料药质量控制。在中药制剂中，当处方中药味含皂苷类成分较多时，常用正在中药制剂中，当处方中药味含皂苷类成分较多时，常用正丁醇作溶剂，测定丁醇作溶剂，测定正丁醇浸出物正丁醇
21、浸出物。2 2、比色法：、比色法： 常用显色剂有：香草醛常用显色剂有：香草醛- -硫酸、硫酸、香草醛香草醛- -高氯酸高氯酸、醋酐、醋酐- -硫酸、硫酸、高氯酸、浓硫酸以及亚甲蓝等。高氯酸、浓硫酸以及亚甲蓝等。注意测定单体皂苷（或皂苷元）与总皂苷的关系注意测定单体皂苷（或皂苷元）与总皂苷的关系20102010药典已不用药典已不用第三节第三节 三萜皂苷类成分分析三萜皂苷类成分分析四、定量分析（二）单体成分分析（二）单体成分分析1 1、TLCTLC薄层洗脱薄层洗脱- -比色法比色法薄层扫描法薄层扫描法2 2、HPLCHPLCHPLC-UVHPLC-UV：人参皂苷、三七皂苷等可利用其在紫外区的末端；
22、：人参皂苷、三七皂苷等可利用其在紫外区的末端；有紫外吸收的甘草酸、远志皂苷，灵敏度高。有紫外吸收的甘草酸、远志皂苷，灵敏度高。HPLC-ELSDHPLC-ELSD：检测三萜皂苷类成分的应用日渐广泛：检测三萜皂苷类成分的应用日渐广泛五、常见三萜皂苷类成分五、常见三萜皂苷类成分思考v哪些药物是需要进行鉴别？v哪些药物需要需要进行含量测定？练习练习练习练习陈皮练习练习甘草练习练习甘草人参练习练习白术练习练习练习练习练习练习练习练习练习练习练习练习第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析一、概述1、概念：中药中醌类化合物主要有苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌四种类型可游离存在，也可与糖结合成苷，称为蒽苷。2、含醌
23、类成分的常用中药第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析二、结构及理化性质丹参醌丹参醌IIA大黄素大黄素OOCH3OHOHOH910OOO1 1、物理性质：、物理性质：存在的形态，升华性，光不稳定性存在的形态，升华性，光不稳定性2 2、溶解性：、溶解性：游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂，微溶于游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂，微溶于或不溶于水。或不溶于水。结合成苷后极性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在热水中也可结合成苷后极性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在热水中也可溶解，几乎不溶于苯、乙醚、氯仿等非极性溶剂中。溶解，几乎不溶于苯、乙醚、氯仿等非极性溶剂中。第四节第四节 醌类成分分
24、析醌类成分分析二、结构及理化性质3、酸性：酚羟基的酸性碱提酸沉法4、显色反应羟基蒽醌+碱橙，红，紫红，蓝+Pb2+/Mg2+ 配合物9、10位未取代的羟基蒽酮化合物+对亚硝基二甲基苯胺 紫，绿，蓝，灰第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析三、定性鉴别1、显色反应2、升华法3、TLC吸附剂：硅胶展开剂：乙酸乙酯-甲醇-水（10016.513.5）适于分离蒽醌苷元和蒽醌苷，不含水或甲醇的混合溶媒适合于分离蒽醌类的苷元。显色方法：喷碱性试剂，喷醋酸镁甲醇液、氨气熏及在紫外灯下观察荧光，可见光下直接观察色斑。练习练习第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析四、含量测定1、游离蒽醌的测定：弱极性溶剂提取后
25、，加碱比色2、结合蒽醌的测定：极性溶剂提取，水解测苷元 先酸水解后，非极性溶剂提取苷元后测定3、单体成分的含量测定TLCSHPLC-UV第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析四、含量测定例1、牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定混合碱液比色法对照品溶液测定：以1，8-二羟基蒽醌为对照品，精密称取10mg于100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度（100g/mL）。取1mL对照品液于10mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱溶解并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白，在510nm波长处测定。样品测定：游离蒽醌的测定：取牛黄解毒片10片，刮去糖衣，
26、精密称定重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL，称重，水浴上回流4小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量，滤过，吸取滤液50mL于分液漏斗中，用蒸馏水20mL洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿层用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，直至混合碱液无色，合并碱液，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿层。将混合碱液在水浴上加热数分钟至氯仿挥尽，冷却，移入100mL量瓶中，并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二羟基蒽醌含量）。第四节第四节 醌类成分分析醌类
27、成分分析四、含量测定例1、牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定混合碱液比色法总蒽醌的测定：精密称取游离蒽醌项下的牛黄解毒片粉一片置于150mL烧瓶中，加2.5mol/L硫酸30mL直火回流4小时，放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0.5小时，放冷，吸出氯仿液，再加氯仿，反复操作至氯仿无色为止。合并氯仿层液，用蒸馏水洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿液用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，至碱液无色，合并，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿液。将碱液置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入50mL量瓶中，用混合碱液稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵液为空白，在5
28、10nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二羟基蒽醌含量）。 结合蒽醌的计算：每片含结合蒽醌量=每片含总蒽醌量每片含游离蒽醌量。第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析四、含量测定例2、复方丹参片中丹参酮A含量测定高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水（73：27）为流动相；检测波长为270nm。对照品溶液的制备：精密称取丹参酮A对照品10mg，置50mL棕色量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置25mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1mL中含丹参酮A40g）供试品溶液的制备：取本品10片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细
29、，取1g，精密称定，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10L，注入液相色谱仪，测定，即得。第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析五、常见醌类成分化合物名称 结构式 理化特征 常用定量方法 大黄酸(Rhein)（C15H8O6，284.21） 为黄色针状结晶（升化法），mp321322，330分解。几乎不溶于水，溶于碱和吡啶，略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。UVmaxMeOHnm()：229(36800),258(20100),435(11100)。高效液相色谱法薄
30、层扫描法 OOHOHOCOOH第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析五、常见醌类成分化合物名称 结构式 理化特征 常用定量方法 大黄素(Emodin)（C15H10O5，270.23）为橙色针状结晶，mp265267。几乎不溶于水，溶于乙醇及氢氧化钠、碳酸钠、氨水等碱液中。25时溶于（g/100mL）:乙醚0.140、氯仿0.071、四氯化碳0.010、二硫化碳0.009。UVmaxEtOHnm(Log)：220（4.55），252（4.26），265（4.34），289（4.34），437（4.10）。 高效液相色谱法薄层扫描法 OHOHOOOHCH3第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析五
31、、常见醌类成分第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析五、常见醌类成分第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析五、常见醌类成分第四节第四节 醌类成分分析醌类成分分析五、常见醌类成分第五节第五节 挥发性成分分析挥发性成分分析一、概述 挥发性成分是指中药中一类具有芳香气并易挥发的成分，其化学组成复杂，主要包括挥发油类成分和其他分子量较小、易挥发的化合物。 萜类化合物 芳香族化合物 脂肪族化合物含挥发油成分的常用中药中药名称 挥发油中主要成分 中药名称 挥发油中主要成分 厚朴辛夷肉桂陈皮川芎薄荷广霍香-桉油醇、-蒎烯、柠檬烯、醋酸龙脑酯柠檬烯、丁香酚、桉油精、-蒎烯桂皮醛、桂皮酸、乙酸苯丙酯柠檬烯、柠檬
32、醛藁本内酯、3-丁叉苯酞、香桧烯薄荷酮、薄荷脑、乙酸薄荷酯广霍香醇、苯甲醛、丁香酚、桂皮醛羌活 细辛 豆蔻 丁香 -蒎烯、-蒎烯、柠檬烯、萜品烯醇-4、甲基丁香酚、黄樟醚、细辛醚优香芹酮、-蒎烯、-蒎烯桉油精、龙脑、樟脑、草烯松油烯、蒎烯丁香酚、水杨酸甲酯、-蒎烯、-蒎烯、乙酰丁香酚第五节第五节 挥发性成分分析挥发性成分分析二、结构及理化性质O HC HC HC H O薄荷醇薄荷醇桂皮醛桂皮醛柠檬烯柠檬烯1 1、溶解性：易溶于有机溶剂、溶解性：易溶于有机溶剂2 2、显色反应：、显色反应：酚类酚类+ +三氯化铁三氯化铁蓝，蓝紫，绿蓝，蓝紫，绿羰基羰基+ +苯肼、羟胺苯肼、羟胺结晶体结晶体醛类醛类
33、+ +硝酸银胺硝酸银胺银镜银镜内酯类内酯类+ +亚硝酰铁氰化钠亚硝酰铁氰化钠+NaOH+NaOH红色并逐渐消失红色并逐渐消失第五节第五节 挥发性成分分析挥发性成分分析三、定性鉴别TLC吸附剂：硅胶、氧化铝吸附剂：硅胶、氧化铝展开剂：石油醚、正己烷（加少量乙酸乙酯或苯）展开剂：石油醚、正己烷（加少量乙酸乙酯或苯）显色剂：茴香醛显色剂：茴香醛-浓硫酸试剂（通用型），浓硫酸试剂（通用型）， 若干扰较多，选用专属性强的显色剂若干扰较多，选用专属性强的显色剂GC：对照品对照法定性：对照品对照法定性GC-MSGC-FTIR第五节第五节 挥发性成分分析挥发性成分分析四、定量分析总成分分析：蒸馏法总成分分析：
34、蒸馏法单体成分分析：单体成分分析：GC（首选）（首选）HPLCTLCSGC-MSGC-FTIR第六节第六节 木脂素成分分析木脂素成分分析一、概述木脂素是一类在生物体内由二分子苯丙素衍生物聚合而成的化合物。含木脂素类成分的常用中药：中药名称 主要成分 中药名称 主要成分 五味子牛蒡子连翘远志 五味子甲素 五味子乙素 五味子醇甲 五味子醇乙 牛蒡子苷 牛蒡子苷元 拉帕酚连翘脂素 连翘脂苷中国远志脂酚厚朴细辛杜仲黑芝麻厚朴酚 和厚朴酚细辛脂素 芝麻脂素（+）-1-羟基松脂素葡萄糖苷芝麻脂素 第六节第六节 木脂素成分分析木脂素成分分析二、结构及理化性质OH3COROOCH3OCH3OC C H H3
35、3C C H H3 3O O C CH H3 3O O C CH H3 3H H3 3C CO OH H3 3C CO OH H3 3C CO OH H3 3C CO O牛蒡子苷牛蒡子苷( (元元) )五味子甲素五味子甲素1 1、溶解性、溶解性游离游离易溶于苯、乙醚、氯仿、丙酮、乙醇等易溶于苯、乙醚、氯仿、丙酮、乙醇等成苷时成苷时可溶于甲醇、乙醇等可溶于甲醇、乙醇等第六节第六节 木脂素成分分析木脂素成分分析二、结构及理化性质2 2、紫外光谱特征、紫外光谱特征maxmax= =250-350nm250-350nm3 3、显色反应、显色反应通用型显色剂：磷钼酸乙醇、硫酸乙醇通用型显色剂：磷钼酸乙醇
36、、硫酸乙醇LabatLabat反应：反应：+ +硫酸硫酸+ +没食子酸没食子酸蓝绿蓝绿 Ecgrine Ecgrine反应：反应：+ +硫酸硫酸+ +变色酸变色酸蓝紫蓝紫第六节第六节 木脂素成分分析木脂素成分分析三、定性分析TLC吸附剂：硅胶展开剂：亲脂性溶剂（苯、氯仿，加甲醇等）显色：香草醛试液，浓硫酸试液，磷钼酸乙醇溶液、碘熏四、含量测定总成分：变色酸比色法单体成分：TLCSHPLC第六节第六节 木脂素成分分析木脂素成分分析五、常见木脂素类成分第七节第七节 其他成分分析其他成分分析一、香豆素类成分香豆素是具有苯骈吡喃酮母核的内酯类衍生物广泛存在于芸香科和伞形科的植物中。1、主要结构及理化性
37、质补骨脂素补骨脂素OOOOOCH2CCCH3茵陈内酯茵陈内酯异羟肟酸铁反应：异羟肟酸铁反应：酚羟基酚羟基- -三氯化铁显色反应：三氯化铁显色反应：紫外光谱特性：紫外光谱特性：maxmax=300nm=300nm，母核有供电子基团取代可产生荧光母核有供电子基团取代可产生荧光第七节第七节 其他成分分析其他成分分析一、香豆素类成分2、定性鉴别荧光法薄层荧光鉴别七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的鉴别七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的鉴别取本品取本品10g10g，研细，加醋酸乙酯，研细，加醋酸乙酯20ml20ml、盐酸、盐酸0.5ml0.5ml，超声处，超声处理理2020分钟，滤过，滤液挥干，残渣加
38、醋酸乙酯分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml0.5ml使溶解，使溶解，作为供试品溶液。作为供试品溶液。薄层条件：硅胶薄层条件：硅胶G G薄层板，展开剂正已烷薄层板，展开剂正已烷醋酸乙酯（醋酸乙酯（4:14:1），），显色剂为显色剂为10%10%氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯365nm365nm下检视。下检视。第七节第七节 其他成分分析其他成分分析一、香豆素类成分3、含量测定可见-紫外分光光度法：荧光光度法：专属性强TLCS：薄层荧光扫描HPLC：C18，甲醇-水，UVD or FDGC：分子量小，具有挥发性第七节第七节 其他成分分析其他成分分析一、香豆素类成分乌
39、蛇止痒丸中蛇床子素的含量测定乌蛇止痒丸中蛇床子素的含量测定色谱条件色谱条件 固定相：固定相：OV-1OV-1，2m2m3mmID3mmID玻璃柱；气体流速：玻璃柱；气体流速：N N2 2 30ml/min30ml/min，H H2 2 50ml/min50ml/min，Air 500ml/minAir 500ml/min；柱温：；柱温：200200；进样器和检测器温度：；进样器和检测器温度：260260。供试品溶液和对照品溶液的制备供试品溶液和对照品溶液的制备 精密称取内标物正廿三烷适量，加氯仿溶精密称取内标物正廿三烷适量，加氯仿溶解，制成每解，制成每1ml1ml约含约含6mg6mg的溶液，作
40、为内标溶液。取乌蛇止痒丸适量，研成细的溶液，作为内标溶液。取乌蛇止痒丸适量，研成细粉，精密称取约粉，精密称取约5g5g，置索氏提取器中，精密加入内标溶液，置索氏提取器中，精密加入内标溶液5.0ml5.0ml，加氯仿，加氯仿80ml80ml，回流至近无色。将提取液浓缩至数毫升，通过，回流至近无色。将提取液浓缩至数毫升，通过3g3g小型硅胶柱，用氯仿小型硅胶柱，用氯仿洗脱至洗脱至10ml10ml量瓶中，加氯仿至刻度，摇匀，作为供试品溶液。称取蛇床子素量瓶中，加氯仿至刻度，摇匀，作为供试品溶液。称取蛇床子素约约25mg25mg，加入内标溶液，加入内标溶液5.0ml5.0ml，振摇使溶解，摇匀，作为对
41、照品溶液。，振摇使溶解，摇匀，作为对照品溶液。校正因子的测定校正因子的测定 精密吸取对照品溶液，连续进样精密吸取对照品溶液，连续进样3 35 5次，每次次，每次2l2l，按峰，按峰面积计算校正因子。面积计算校正因子。样品测定样品测定 精密吸取供试品溶液，连续进样精密吸取供试品溶液，连续进样3 35 5次，每次次，每次2 2l l，用校正因子，用校正因子计算样品含量。计算样品含量。第七节第七节 其他成分分析其他成分分析二、有机酸类成分1、定性鉴别吸附色谱分配色谱2、含量测定酸碱滴定法总有机酸分光光度法高效液相色谱法薄层色谱法其他方法第七节第七节 其他成分分析其他成分分析三、环烯醚萜类成分特殊的单
42、萜物理性状（存在的形态；多苦味；稳定性差，易聚合）溶解性：易溶于水、甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇薄层定性鉴别吸附剂：硅胶、聚酰胺显色剂：硫酸乙醇，茴香醛试液，香草醛硫酸试液，对二甲氨基苯甲醛硫酸试液OOOOglu龙胆苦苷龙胆苦苷第七节第七节 其他成分分析其他成分分析三、环烯醚萜类成分含量测定高效液相色谱法薄层扫描法荧光分光光度法分光光度法复方栀子冲剂中栀子甙的含量测定复方栀子冲剂中栀子甙的含量测定精密称取本品精密称取本品3g，置索氏提取器内，加甲醇回流提取，置索氏提取器内，加甲醇回流提取6小时，小时，回收甲醇至干，加水回收甲醇至干，加水10ml溶解，用水饱和正丁醇提取，提取溶解，用水饱和正丁
43、醇提取，提取液蒸干，以甲醇溶解，通过已处理好的活性炭液蒸干，以甲醇溶解，通过已处理好的活性炭-中性氧化铝柱，中性氧化铝柱，用甲醇用甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用2ml甲醇溶甲醇溶解，作为供试品溶液。解，作为供试品溶液。薄层条件：硅胶薄层条件：硅胶GF254薄层板，展开剂氯仿薄层板，展开剂氯仿甲醇甲醇25%氨氨水（水（4:1:0.1），检测波长），检测波长247nm，参比波长，参比波长370nm。第七节第七节 其他成分分析其他成分分析四、单萜及二萜类成分1、含芍药甙中药制剂的分析薄层色谱高效液相色谱2、含穿心莲内酯中药制剂的分析薄层色谱回滴法比色法总内
44、酯薄层扫描或高效液相色谱法单体成分HOCH2OHCH2CH2CHOOOH穿心莲内酯穿心莲内酯第七节第七节 其他成分分析其他成分分析五、多糖1、鉴别TLC：硅胶、纤维素、硅藻土 PC：展开剂：正丁醇、水混合体系 显色剂：苯胺-邻苯二甲酸的正丁醇饱和水溶液等CE：滤纸电泳、玻璃纤维纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、凝胶电泳HPLC：氨基柱GC-MS：酸水解中和柱前衍生GC-MS 2、提取分离：水提醇沉防止水解，注意消除酶、酸、碱等的影响第七节第七节 其他成分分析其他成分分析五、多糖3、含量测定1）总多糖的测定3,5-二硝基水杨酸比色法棕红色（550nm）苯酚-硫酸法蓝绿色（480-490nm）蒽酮-硫酸法黄绿色（620nm）2）单体多糖的含量测定高效凝胶液相色谱法确定分子量高效液相色谱法确定组成色谱柱：氨基键合相硅胶柱，或普通硅胶柱检测器：示差折光检测器
