1、Acute respiratory infection(ARIs) Upper respiratory tract infection(URI) 普通感冒 流行性感冒 以咽炎为主要表现的感染 Lower respiratory tract infection(LRI) 支气管炎 肺炎 社区获得性肺炎(Community Acquired Pneumonia, CAP) 医院获得性肺炎(Hospital Acquired Pneumonia)Etiology&Epidemiology 70%80%的上呼吸道感染是由病毒引起1 90%的急性支气管炎由病毒引起，10%由细菌引起2 针对成人，1556
2、%肺炎由病毒引起，而在儿童感染中，4367%由病毒引起。其中儿童中有45%的病毒与细菌的混合感染，而成人中为15%3 1.Mkel MJ, Puhakka T, Ruuskanen O, et al. Viruses and bacteria in the etiology of the common cold. J Clin Microbiol 1998; 36:539-42. 2.Cohen, Jonathan and William Powderly. Infectious Diseases. 2nd ed. Mosby (Elsevier), 2004. Chapter 33: Bro
3、nchitis, Bronchiectasis, and Cystic Fibrosis. 3. Ruuskanen, O; Lahti, E, Jennings, LC, Murdoch, DR (2011-04-09). Viral pneumonia. Lancet 377 (9773): 126475.Damage 在2000年，1,900,000儿童死于ARIs，70%来自非洲与东南亚1 每年约有两亿人患CAP，其中儿童占1亿左右 世界卫生组织统计每年有2,000,000五岁以下的儿童死于肺炎2 肺炎仍是5岁以下婴幼儿死亡的首因，每年的死亡率占总死亡率的7% 占儿童医疗咨询的2050
4、%，占儿科住院的2040%1. Black, R. E., S. S. Morris, and J. Bryce. 2003. “Where and Why Are 10 Million Children Dying Every Year?” Lancet 361 (9376): 222634.2. Williams, B. G., E. Gouws, C. Boschi-Pinto, J. Bryce, and C. Dye. 2002.“Estimates of Worldwide Distribution of Child Deaths from AcuteRespiratory Inf
5、ections.” Lancet Infectious Diseases 2: 2532.钟南山教授提醒谨防流感 龙年春节前，深圳出现了一例禽流感死亡病例，患者是一名39岁的公交车司机。 2011年12月21日出现了感冒、发烧等症状。 后经当地医院的门诊诊断，医生认为他是普通感冒。 12月27日，病情日趋严重，最后只好插管上呼吸机。这时才确诊为“禽流感病毒阳性”。 12月31日，男子不治身亡。钟南山院士认为，这个病例给了我们很大的教训，如果这名患者早期出现发烧等“疑似症状”时就能被确诊为禽流感，那么按照目前的治疗水平，完全可以治好。年初，社会关注的河北省保定市解放军252医院收治的呼吸道感染发
6、热病人，经与有关部门核实，已排除SARS、甲流、禽流感等，确诊为腺病毒55型引起的呼吸道感染。 呼吸道病毒的介绍 呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。 在日常生活中，呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。在医院和急诊室中，这些呼吸道病毒也常常是诊断和治疗的难题。常见呼吸道病毒及其临床意义 流感病毒感染一般数日内自愈，但幼儿或年老体弱病人易继发细菌感染，如合并肺炎等，病死率高。 呼吸道合胞病毒是婴幼儿中引起严重呼吸道感染的最重要的病原体，
7、感染严重者造成死亡。 腺病毒肺炎约占儿童期肺炎的10%37%，多由腺病毒3、7型引起；婴幼儿腺病毒肺炎的病死率为8%10%。 副流感1、2型是哮喘的主要病因，以2 4岁儿童中最为严重。副流感3型，亦可引起哮喘，但主要易引起婴幼儿支气管炎、肺炎。CAP患儿的病毒诊断临床意义 为有效预防、诊治婴幼儿及儿童社区获得性肺炎（CAP），儿科感染性疾病协会（PIDS）和美国感染性疾病协会（IDSA）共同出台了其首个婴幼儿及儿童CAP诊治指南。整部指南共涉及诊断、治疗、预防等20个方面、92条推荐意见。 在这份指南中，高质量意见仅17条，而病毒诊断在其中占了2条： 使用灵敏度和特异性较高的方法对CAP感染的
8、患儿进行流感病毒等呼吸道病毒的快速检测是很有必要的，准确的诊断可以减少额外的测试和抗生素的使用。(strong recommendation; high-quality evidence) 如被确诊为流感病毒感染，如果没有细菌合并感染的迹象，患者不需要进行抗生素治疗。 (strong recommendation; high-quality evidence)美国儿科学会(AAP)及CDC推荐的流感病毒诊断方法 按照优先顺序，建议使用以下的流感测试： A. 实时荧光定量PCR（RT-PCR） B. 免疫荧光法（Immunofluorescence） C. 病毒分离培养 D. 血清学检测（抗体检
9、测）测试方法时间注释RT-PCR (常规PCR, real-time RT-PCR和 multiplex PCR)2 h高灵敏度和超高特异性免疫荧光法（直接和间接）2-4 h中高灵敏度和高特异性，推荐；可区分流感A/B和其它呼吸道病毒病毒培养Shell vial culture(SVC)48-72 h中高灵敏度和最高的特异性；这个测试对筛查试验结果的确认和公共卫生监督是很重要的，但它对及时的临床管理没有作用细胞培养分离3-10 days血清学测试（血凝抑制，ELISA，补体结合及中和实验）仅在参比实验室提供；对及时临床管理无用；只建议用于回顾性诊断，监视，或以研究为目的抗原检测 抗原检测主要分
10、为间接免疫荧光法（IFA）和直接免疫荧光法（DFA）。 DFA法较IFA法的步骤更为简便，而且减少了后一种方法中二抗的非特异性反应，从而大大地提高了诊断的特异性。抗原检测和血清学检测的本质区别 抗原检测是一种快速、简便的检测方法，能作为病毒感染的早期诊断。 而现在国内大多使用的血清学测试不能用于早期诊断： 单一血清标本的流感血清学试验数据不可信 1。 配对的急性和恢复期血清标本用于测定抗体滴度，适用于回顾性诊断和科研目的1 。 病毒的抗原和核酸检测可以用于早期诊断；抗体检测可以用于回顾性调查，但对病例的早期诊断意义不大2 。1 Harper SA, Bradley JS, Englund JA
11、, et al. Seasonal Influenza in Adults and ChildrenDiagnosis, Treatment, Chemoprophylaxis, and Institutional Outbreak Management: Clinical Practice Guidelines of the Infectious Diseases Society of America. Clin Infect Dis. 2009 Apr 15;48(8):1003-32.2 中国卫生部颁布的流行性感冒诊断与治疗指南（2011年版）为什么要早期诊断？ 1、病毒治疗针对性强病毒
12、种类病毒种类抗病毒药物抗病毒药物流感病毒金刚烷乙胺、瑞乐沙、奥司他韦（达菲）呼吸道合胞病毒利巴韦林喷雾剂副流感病毒利巴韦林腺病毒西多福韦（静脉注射） 2、病毒治疗有时效性 大部分呼吸道病毒越早治疗效果越好。比如，在出现流感症状的48小时内使用奥司他韦效果最好，过了这个时间段后疗效甚微。奥司他韦在体内的活性形式与神经氨酸（NA）的过渡态相似，能够竞争性地与流感病毒神经氨酸酶的活性位点结合，因而是一种强效的高选择性的流感病毒NA抑制剂（NAIs），它主要通过干扰病毒从被感染的宿主细胞中释放，从而减少甲型或乙型流感病毒的传播。这在2011版流感诊疗指南中也有明确提到。 3、避免抗生素的滥用 准确的诊
13、断能帮助医生确定是否使用抗生素来治疗病人。 滥用抗生素危害很多，最主要的是细菌耐药性问题。世界上已出现多种超级细菌，它们对许多抗生素耐药。同时，滥用抗生素还会导致隐形伤亡，对肌体和体质造成长远损害。许多抗生素都是通过肝肾代谢的，滥用抗生素会引发药物性肝炎或导致肾功能不全。呼吸道病毒抗原检测产品介绍 Diagnostic Hybrids公司是全世界最大的细胞培养和病毒单克隆抗体生产商之一，有着近30年的细胞诊断试剂的研发和生产经验，其产品涉及呼吸道疾病、疱疹类、肠道病毒和甲状腺功能等检测。公司通过ISO13485: 2003认证。D3 Ultra DFA呼吸道病毒诊断试剂（直接免疫荧光法） 可同
14、时通过荧光检测七种病毒 可筛查或分别定性检测A、B型流感病毒，呼吸道合胞病毒，腺病毒和副流感病毒1、2和3型共七种呼吸道疾病相关病毒。阳性：呈现果绿色阴性：无绿色，只呈现背景色 快速、灵敏地检测 采用一步染色法，孵育15分钟后可观察结果 经过严格筛选的、FITC标记的、用于检测7种病毒的单克隆抗体D3 Ultra DFA试剂的优势 检测抗原：用于病毒感染早期诊断 七项联检：产品几乎覆盖了所有常见呼吸道病毒的诊断 准确诊断：对症用药，避免了抗生素的滥用 品质优异：提高实验成功率，减少重复实验，销售至今没有一起退货事件。 强大的科研团队：不断研制和改进单克隆抗体DFA试剂规格 7项呼吸道病毒鉴定试
15、剂 规格：2 mL X 7 对7种病毒分别检测，可作为病毒确诊实验筛查+鉴定试剂操作流程简要操作流程 1. 取样及样本预处理 2. 样本固定及染色 3. 荧光显微镜下观察结果阳性：呈现果绿色 阴性：无绿色，只呈现背景色备注：阴性细胞被染成红色项目开展给医院带来的价值分析 1. 医院可以借此建立一个免疫荧光的技术平台 免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）又称荧光抗体技术，其应用范围极其广泛，可以测定内分泌激素、蛋白质、多肽、核酸、神经递质、受体、细胞因子、细胞表面抗原、肿瘤标志物、血药浓度等各种生物活性物质等。 2. 此项目可用于呼吸道病原学的研究 已有大约十
16、几篇使用D3 Ultra DFA试剂的呼吸道病原学研究发表在国内核心期刊上。 3. 提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平 目前，国内大多数医院还在使用血清学方法对呼吸道病毒进行诊断。而使用D3 Ultra DFA试剂不仅能给临床用药提供相关依据，而且还避免了抗生素的滥用。项目的社会效益分析 本项目的开展可以很好地避免抗生素的滥用，同时也是顺应了卫生部2012年抗生素滥用专项整治活动的要求。准确的诊断能帮助医生确定是否使用抗生素来治疗病人。同时也减少患者看病负担，合理准确的用药能帮助患者更快地痊愈，减少因无效治疗带来的经济负担。 本项目的开展还有助于监控疾病的大规模传染，呼吸道病毒相对其它病原体更容易
17、在人群中大规模传播。因此，对于危害性较大、传播速度快、范围广的呼吸道病毒有必要进行监控，从而防止疾病扩散和减少损失。呼吸道病毒的疫情有效监控也是对社会安定的重要保证。遏制抗生素滥用 20世纪5060年代，儿童每年因肺炎死亡约700万；1999年，这个数字增长到2000万，主要原因是细菌耐药。 2011年4月7日世界卫生日主题抵御耐药性今天不采取行动，明天就无药可用 中国人平均每人每年要挂8瓶水，远高于国际2.53.3瓶。世卫组织多次警告，如果中国不控制抗生素滥用，将害了全世界。 2012年5月8日，卫生部发布第84号部长令“抗菌药物临床应用管理办法”于8月1号正式实施，标志着我国抗菌药物临床应用管理迈入法制化、制度化。 遏制抗生素滥用势在必行总结 病毒虽然可怕，但是如果能够早发现早治疗，病情是能够得到缓解和控制的。目前国内的呼吸道病毒诊断试剂大多采用抗体检测的方法，不能对患者进行早期诊断，少数采用荧光定量PCR方法的试剂只是针对流感病毒的，无法一次鉴定多种病毒，且成本较高。 美国D3 Ultra DFA试剂很好地弥补了国内市场的空白，其凭借着直接免疫荧光法快速、早期诊断的优势，能够为患者提供优质、高效的诊断结果，同时提高了医院的诊断水平并带来一定的经济效益。相信在不久的将来，类似D3 Ultra DFA试剂能够在呼吸道病毒检测的产品市场中占有重要的一席之地。
