1、恶性淋巴瘤的免疫组化恶性淋巴瘤的免疫组化 一、常用抗体一、常用抗体 （一）白细胞（一）白细胞 1. CD45，CD45RB（LCA） ?出现于白细胞表面的四、五种高分子量出现于白细胞表面的四、五种高分子量糖蛋白家族（糖蛋白家族（180，190，205，220kD） ? DAKO产抗体由二种单抗组成：产抗体由二种单抗组成： 2B11(180，190，205，220kD)-CD45抗体抗体 PD7/26( 190，205，220kD)-CD45RB抗体抗体 ?正常组织：正常组织： 标记淋巴细胞。细胞膜表面阳性最强，胞浆标记淋巴细胞。细胞膜表面阳性最强，胞浆内弱阳性也可见。内弱阳性也可见。 巨噬细胞
2、和组织细胞不同程度表达。巨噬细胞和组织细胞不同程度表达。 多核白细胞弱阳性多核白细胞弱阳性 浆细胞阴性浆细胞阴性 非造血细胞阴性非造血细胞阴性 ?肿瘤：肿瘤： 大部分淋巴瘤（大部分淋巴瘤（ B和和T）阳性）阳性 浆细胞及大细胞淋巴瘤常阴性浆细胞及大细胞淋巴瘤常阴性 毛细胞阳性毛细胞阳性 粒细胞性或红细胞源性肿瘤细胞阴性粒细胞性或红细胞源性肿瘤细胞阴性 非造血组织肿瘤，如癌，恶性黑色素瘤，尤非造血组织肿瘤，如癌，恶性黑色素瘤，尤文氏肉瘤阴性文氏肉瘤阴性 ? 可用于脱钙骨髓活检组织，鉴别骨肿瘤可用于脱钙骨髓活检组织，鉴别骨肿瘤 2. CD11A/18（LFA- 1 和和） ?表达于大部分淋巴瘤和白
3、血病表达于大部分淋巴瘤和白血病 ? 很多中等和高度恶性很多中等和高度恶性B细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤LFA-1的的和和/或或 链可缺失。链可缺失。 3. TdT ?属核酶，参与属核酶，参与T细胞受体产生和抗体分化细胞受体产生和抗体分化过程。过程。 ? 正常组织：正常组织： 见于小群成人骨髓淋巴细胞和大部分皮质胸见于小群成人骨髓淋巴细胞和大部分皮质胸腺细胞。腺细胞。 偶见于反应性淋巴结和脾偶见于反应性淋巴结和脾 髓质胸腺细胞和正常外周血细胞不表达髓质胸腺细胞和正常外周血细胞不表达 ?肿瘤：表达于非成熟淋巴细胞来源肿瘤。肿瘤：表达于非成熟淋巴细胞来源肿瘤。 高高TdT活性见于活性见于: 淋巴母细胞性淋巴
4、瘤淋巴母细胞性淋巴瘤 慢性粒细胞性白血病淋巴母细胞危象慢性粒细胞性白血病淋巴母细胞危象 大部分急性淋巴母细胞性白血病大部分急性淋巴母细胞性白血病 4. CD30 ? 120kD跨膜糖蛋白跨膜糖蛋白 ? CD30基因位于第基因位于第1号染色体短臂号染色体短臂36区，区，早先称为早先称为Ki-1，又名，又名Ber-H2 ?冰冻切片：冰冻切片： 霍奇金细胞（单核）和霍奇金细胞（单核）和R-S细胞（多核）细胞（多核） 结节型淋巴细胞为主型：弱阳性或阴性结节型淋巴细胞为主型：弱阳性或阴性 其它其它HL：强阳性：强阳性 大部分间变性大细胞淋巴瘤和所有的淋巴样大部分间变性大细胞淋巴瘤和所有的淋巴样丘疹强阳性
5、丘疹强阳性 一些外周多形一些外周多形T细胞淋巴瘤（细胞淋巴瘤（HTLV-1+/-），），包括血管免疫母细胞型，包括血管免疫母细胞型，Lennert型和极少型和极少数数B免疫母细胞淋巴瘤阳性。其他淋巴瘤阴免疫母细胞淋巴瘤阳性。其他淋巴瘤阴性。性。 正常淋巴组织中，小群位于正常淋巴组织中，小群位于B细胞滤泡和生细胞滤泡和生发中心边缘的大细胞阳性发中心边缘的大细胞阳性 正常淋巴细胞经菜豆凝集素，正常淋巴细胞经菜豆凝集素，HTLV-I/II或或EB病毒刺激后，可与病毒刺激后，可与CD30抗体反应。抗体反应。 淋巴组织外，胰腺腺泡细胞（淋巴组织外，胰腺腺泡细胞（+），胰腺癌偶），胰腺癌偶（+）。胚胎型癌
6、（）。胚胎型癌（+）。）。 其他类型或其他部位的癌，恶性黑色素瘤，其他类型或其他部位的癌，恶性黑色素瘤，横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤，尤文氏肉瘤（）横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤，尤文氏肉瘤（） ? 石蜡切片：石蜡切片： 与冰冻切片不同，浆细胞（与冰冻切片不同，浆细胞（+） 余同冰冻切片余同冰冻切片 （二）（二）B细胞细胞 1. 免疫球蛋白（免疫球蛋白（Ig） （1） 免疫球蛋白免疫球蛋白轻链轻链 （2） 免疫球蛋白免疫球蛋白轻链轻链 2. 全全B抗原抗原 （1）CD20（L26） ? 33kD非糖基化蛋白非糖基化蛋白 ?外周血和淋巴组织中大多数外周血和淋巴组织中大多数B细胞阳性细胞阳性 ?在淋巴组织，生发
7、中心母细胞和在淋巴组织，生发中心母细胞和B免疫母免疫母细胞强阳性。细胞强阳性。 ?其他造血细胞阴性。其他造血细胞阴性。 ?非淋巴组织阴性。非淋巴组织阴性。 大多数大多数B细胞淋巴瘤阳性细胞淋巴瘤阳性 极少数极少数T细胞淋巴瘤阳性细胞淋巴瘤阳性 结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤的的R-S细胞可阳性。细胞可阳性。 （2）CD19 ? 95kD多肽多肽 ? B细胞阳性。表达于细胞阳性。表达于B细胞成熟早期，可细胞成熟早期，可能早于前能早于前B细胞期，持续见于整个细胞期，持续见于整个B细胞细胞成熟期，直至终末浆细胞期前不久消失。成熟期，直至终末浆细胞期前不久消失。 ?其
8、他造血细胞和非造血细胞阴性。其他造血细胞和非造血细胞阴性。 ? 只能用于冰冻切片。只能用于冰冻切片。 （3）CD22 ? B细胞分化早期表达于胞浆，后与细胞分化早期表达于胞浆，后与Ig几乎几乎同时到达细胞表面同时到达细胞表面 ? B细胞淋巴瘤和白血病阳性细胞淋巴瘤和白血病阳性 ? 大多数浆细胞肿瘤阴性大多数浆细胞肿瘤阴性 （4）CDW75（LN-1） ?正常细胞：正常细胞： 表达于表达于SIg B细胞细胞 淋巴结和脾白髓的生发中心淋巴结和脾白髓的生发中心B细胞强（细胞强（+） 套区套区B细胞，巨噬细胞，脾红髓红细胞阳性细胞，巨噬细胞，脾红髓红细胞阳性更弱更弱 滤泡外滤泡外B细胞散在阳性细胞散在
9、阳性 浆细胞阴性浆细胞阴性 外周血外周血B淋巴细胞阳性淋巴细胞阳性 阳性上皮细胞：腺上皮（子宫内膜、前列腺、阳性上皮细胞：腺上皮（子宫内膜、前列腺、胃），乳腺导管上皮，肾远曲小管，胰腺导胃），乳腺导管上皮，肾远曲小管，胰腺导管，结肠表面上皮，支气管呼吸道纤毛柱状管，结肠表面上皮，支气管呼吸道纤毛柱状上皮上皮 肝细胞，甲状腺滤泡，平滑肌和唾腺腺泡细肝细胞，甲状腺滤泡，平滑肌和唾腺腺泡细胞弱阳性。胞弱阳性。 ? 肿瘤细胞：肿瘤细胞： B细胞性白血病（细胞性白血病（+）：）：B细胞慢性淋巴细胞细胞慢性淋巴细胞性白血病，毛细胞白血病性白血病，毛细胞白血病 B细胞淋巴瘤：细胞淋巴瘤： ?滤泡中心细胞淋巴
10、瘤，特别是大裂和大无裂强（滤泡中心细胞淋巴瘤，特别是大裂和大无裂强（+） ?免疫母细胞型也（免疫母细胞型也（+） T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） 上皮性肿瘤：上皮性肿瘤： ?乳腺、卵巢和结肠腺癌（乳腺、卵巢和结肠腺癌（+） ?喉鳞癌和睾丸生殖细胞癌局灶（喉鳞癌和睾丸生殖细胞癌局灶（+） ?膀胱移行细胞癌和胃腺癌弱（膀胱移行细胞癌和胃腺癌弱（+） 间叶性肿瘤：间叶性肿瘤： ?粘液脂肪肉瘤（粘液脂肪肉瘤（+） ?未分化肉瘤（未分化肉瘤（+） （5）CD79(mb-1) ?与与CD79(B29)共同组成共同组成B细胞抗原受体细胞抗原受体 ?出现于出现于B细胞成熟早期，从前细胞成熟早期，从前B细胞期到
11、细胞期到浆细胞期，为细胞间成分。浆细胞期，为细胞间成分。 ?用于识别用于识别B细胞种系。细胞种系。 ?前前B细胞性急性白血病，细胞性急性白血病，B细胞株，细胞株，B细细胞淋巴瘤以及一些骨髓瘤阳性。胞淋巴瘤以及一些骨髓瘤阳性。 ?粒细胞或粒细胞或T细胞株以及细胞株以及T细胞瘤阴性。细胞瘤阴性。 （6）BLA36 ? 36kD糖蛋白糖蛋白 ? 正常细胞：正常细胞： 见于早期和活化见于早期和活化B细胞，但静止和周围细胞，但静止和周围B细胞细胞阴性。阴性。 大多数小无裂和大无裂细胞及免疫母细胞膜大多数小无裂和大无裂细胞及免疫母细胞膜强阳性。强阳性。 少数小裂细胞阳性，少数小裂细胞阳性， 巨噬细胞阴性。
12、巨噬细胞阴性。 30%套区淋巴细胞膜弱阳性。套区淋巴细胞膜弱阳性。 滤泡间区散在中等到大淋巴细胞和免疫母细滤泡间区散在中等到大淋巴细胞和免疫母细胞膜强阳性。胞膜强阳性。 T细胞、粒细胞和巨噬细胞阴性，但正常肝细胞、粒细胞和巨噬细胞阴性，但正常肝的枯否氏细胞不同程度阳性。的枯否氏细胞不同程度阳性。 ? 肿瘤细胞：肿瘤细胞： 霍奇金淋巴瘤的霍奇金淋巴瘤的R-S细胞和霍奇金细胞阳性。细胞和霍奇金细胞阳性。 一些反应性和恶性一些反应性和恶性B淋巴细胞阳性。淋巴细胞阳性。 3. B细胞亚型抗原细胞亚型抗原 （1）CD10（CALLA，急性淋巴，急性淋巴母细胞性白血病共同抗原）母细胞性白血病共同抗原） ?
13、 100kD糖蛋白糖蛋白 ?主要用于儿童白血病和主要用于儿童白血病和B细胞淋巴瘤：细胞淋巴瘤： 表达于淋巴母细胞性，表达于淋巴母细胞性，Burkitt和滤泡型淋巴和滤泡型淋巴瘤及慢性粒细胞型白血病瘤及慢性粒细胞型白血病 ? 也见于肾小球上皮细胞、近端肾小管刷也见于肾小球上皮细胞、近端肾小管刷状缘、乳腺肌上皮细胞、胆小管、中性状缘、乳腺肌上皮细胞、胆小管、中性粒细胞、小群骨髓细胞、胚胎小肠上皮粒细胞、小群骨髓细胞、胚胎小肠上皮和正常纤维母细胞。和正常纤维母细胞。 （2）CD21 ? C3d受体，受体，145kD糖蛋白糖蛋白 ?也具有也具有Epstein-Barr病毒受体的功能病毒受体的功能 ?冰
14、冻切片：冰冻切片： B细胞中等（）细胞中等（） 滤泡树突状细胞（滤泡树突状细胞（FDC）强（）强（） ?石蜡切片：石蜡切片： B细胞弱（）细胞弱（）（）（） FDC强（）强（） ?正常和增生淋巴结及扁桃体：正常和增生淋巴结及扁桃体： 滤泡套区滤泡套区FDC 网状结构疏松，不清晰。网状结构疏松，不清晰。 生发中心可见生发中心可见FDC 网状结构，致密，清晰。网状结构，致密，清晰。 ?非霍奇金淋巴瘤：非霍奇金淋巴瘤： 滤泡型淋巴瘤（滤泡型淋巴瘤（cb/cc淋巴瘤）：淋巴瘤）： FDC网状网状结构呈结节型，致密，清晰。结构呈结节型，致密，清晰。 一些弥漫型淋巴瘤（中心细胞性淋巴瘤）：一些弥漫型淋巴瘤
15、（中心细胞性淋巴瘤）： FDC网状结构大小不一，疏松，不清晰。网状结构大小不一，疏松，不清晰。 前前B细胞淋巴瘤（淋巴母细胞淋巴瘤（淋巴母 细胞性淋巴瘤），细胞性淋巴瘤），Burkitt淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞白血病淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞白血病FDC。 T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤FDC 限于外周限于外周T细胞淋巴瘤的细胞淋巴瘤的血管免疫母细胞性淋巴结病（血管免疫母细胞性淋巴结病（AILD）型和）型和一些多形一些多形T细胞淋巴瘤。与细胞淋巴瘤。与B细胞淋巴瘤不细胞淋巴瘤不同，同， T细胞淋巴瘤和细胞淋巴瘤和AILD的的FDC网仅含少网仅含少量量B细胞。细胞。 T淋巴母细胞性淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴
16、瘤、T-CLL和蕈样霉菌和蕈样霉菌病病FDC。 霍奇金淋巴瘤：仅结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤：仅结节型淋巴细胞为主型FDC 。 FDC网状结构致密，清晰，几乎网状结构致密，清晰，几乎占据整个增大的滤泡。占据整个增大的滤泡。 （3）CD23 ?正常细胞：正常细胞： 套区套区B细胞（）细胞（） 滤泡树突状细胞亚型（）滤泡树突状细胞亚型（） ?肿瘤：肿瘤： 小淋巴细胞性淋巴瘤小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病（）白血病（） 套细胞淋巴瘤（）套细胞淋巴瘤（） （4）CD35 ? C3b受体，单链糖蛋白，受体，单链糖蛋白，220kD ?正常组织：正常组织： 冰冻切片：冰冻切片： 人人B细胞滤泡中大部分强阳性
17、细胞为滤泡树细胞滤泡中大部分强阳性细胞为滤泡树突状细胞（突状细胞（FDC），套细胞阳性较弱。），套细胞阳性较弱。 肾小球上皮细胞肾小球上皮细胞C3b受体强阳性受体强阳性 巨噬细胞和组织细胞不同程度阳性巨噬细胞和组织细胞不同程度阳性 ?石蜡切片（蛋白酶消化后）：石蜡切片（蛋白酶消化后）： FDC强阳性，滤泡中心和套区的强阳性，滤泡中心和套区的FDC网状结网状结构明显，前者致密，清晰；后者疏松，不清构明显，前者致密，清晰；后者疏松，不清晰。晰。 ? 肿瘤细胞：肿瘤细胞： 滤泡型淋巴瘤（滤泡型淋巴瘤（cb/cc）：）：FDC网状结构呈网状结构呈结节状，致密，清晰结节状，致密，清晰 弥漫型淋巴瘤（多数
18、为弥漫型淋巴瘤（多数为cc）：）：FDC网状结网状结构疏松，不清晰构疏松，不清晰 前前B细胞淋巴瘤（淋母），细胞淋巴瘤（淋母），Burkitt淋巴瘤，淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞性白血病浆细胞瘤和毛细胞性白血病FDC 非霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，FDC主要限于血管免疫母主要限于血管免疫母细胞性淋巴结病型细胞性淋巴结病型T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤 （5）CD38 ? 45kD糖蛋白糖蛋白 ?正常细胞：正常细胞： 浆细胞、单核细胞、早期淋巴样细胞、浆细胞、单核细胞、早期淋巴样细胞、和活化的和活化的T细胞（）细胞（） 。 ?肿瘤：肿瘤： 浆细胞肿瘤（）浆细胞肿瘤（） 有些有些B和和T细胞淋巴瘤（）细胞淋
19、巴瘤（） ，特别前驱，特别前驱细胞来源者。细胞来源者。 （6）VS38c（浆细胞单抗）（浆细胞单抗） ? 64kD胞浆内抗原。胞浆内抗原。 ?表达于正常和肿瘤性浆细胞。表达于正常和肿瘤性浆细胞。 ?上皮细胞（尤其鳞状上皮）弱阳性上皮细胞（尤其鳞状上皮）弱阳性 （三）（三）T细胞细胞 1. 全全T抗原抗原 （1）CD2 ?正常细胞：正常细胞： T细胞（）细胞（） NK细胞（）细胞（） ?肿瘤：肿瘤： 大多数大多数 T细胞淋巴瘤和白血病（）细胞淋巴瘤和白血病（） 少数粒细胞白血病（）少数粒细胞白血病（） （2）CD3 ? 16-28kD, 5条多肽链组成条多肽链组成 ?抗体与抗体与T细胞表达的细胞
20、表达的CD3抗原的胞浆内部抗原的胞浆内部分反应。分反应。 ?最早见于早期胸腺细胞最早见于早期胸腺细胞 在皮质胸腺细胞明显存在于胞浆在皮质胸腺细胞明显存在于胞浆 至髓质胸腺细胞出现于至髓质胸腺细胞出现于T细胞表面细胞表面 ?为高度特异为高度特异T细胞标记，除细胞标记，除T细胞外，仅细胞外，仅表达于小脑蒲肯野细胞。表达于小脑蒲肯野细胞。 ?正常组织：正常组织： 表达于胸腺皮质、髓质和周围淋巴组织的表达于胸腺皮质、髓质和周围淋巴组织的T细胞。细胞。 ?肿瘤：肿瘤： 表达于大多数表达于大多数T细胞肿瘤，但高度恶性细胞肿瘤，但高度恶性T细细胞淋巴瘤，如大细胞间变性淋巴瘤偶见胞淋巴瘤，如大细胞间变性淋巴瘤
21、偶见（）。（）。 部分恶性组织细胞增生症阳性部分恶性组织细胞增生症阳性 有些霍奇金淋巴瘤阳性有些霍奇金淋巴瘤阳性 （3）CD5 ?表达于多数表达于多数T细胞淋巴瘤和白血病。细胞淋巴瘤和白血病。 ? 也可表达于一些肿瘤性也可表达于一些肿瘤性B细胞，如细胞，如B-CLL，B-小淋巴细胞性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。小淋巴细胞性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。 ?粒细胞和单核细胞阴性。粒细胞和单核细胞阴性。 （4）CD7 ?正常细胞：正常细胞： 大部分大部分T细胞（）细胞（） NK细胞（）细胞（） ?肿瘤：肿瘤： 很多很多T细胞淋巴瘤和白血病（）细胞淋巴瘤和白血病（） 一些粒细胞白血病（）一些粒细胞白血病（） 淋巴
22、母细胞性肿瘤最佳淋巴母细胞性肿瘤最佳T细胞标记之一细胞标记之一 胸腺后胸腺后T细胞恶性肿瘤，尤其在细胞恶性肿瘤，尤其在MF中常缺失中常缺失 （5）CD43（Leu22） ? T细胞和髓系细胞表达的膜细胞和髓系细胞表达的膜/浆抗原浆抗原 ?正常和肿瘤性正常和肿瘤性T细胞阳性细胞阳性 ? 正常扁桃体和淋巴结的滤泡间区正常扁桃体和淋巴结的滤泡间区T细胞强细胞强阳性阳性 ?少数少数B细胞白血病和淋巴瘤也可表达细胞白血病和淋巴瘤也可表达 通常为小细胞性，如中心细胞性淋巴瘤通常为小细胞性，如中心细胞性淋巴瘤 （6）OPD4 ? 200kD，表达于辅助，表达于辅助/诱导诱导T细胞细胞 ?强阳性：强阳性： 淋
23、巴结淋巴结T区淋巴细胞（膜）区淋巴细胞（膜） 扁桃体扁桃体 *分布同分布同CD4阳性细胞阳性细胞 ? 结节病和结核的类上皮细胞弱阳性结节病和结核的类上皮细胞弱阳性 ?抑制抑制/细胞毒细胞毒T细胞极少阳性细胞极少阳性 ?阴性：阴性： 非造血细胞非造血细胞 B细胞细胞 单核细胞单核细胞 粒细胞粒细胞 ?肿瘤：肿瘤： 见于见于50%T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤辅助辅助/诱导表型诱导表型的外周的外周T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤 少数少数B细胞淋巴瘤阳性细胞淋巴瘤阳性 （7）CD45RO（UCHL-1） ? 180kD，出现于，出现于T细胞分化早期。细胞分化早期。 ?正常细胞：正常细胞： 大多数胸腺细胞（）大多数胸
24、腺细胞（） 成熟活化成熟活化T细胞（）细胞（） 少量静止少量静止T细胞（细胞（CD4/CD8亚型）（）亚型）（） 粒单核细胞系，如粒细胞和单核细胞（）粒单核细胞系，如粒细胞和单核细胞（） 多数正常多数正常B细胞和细胞和NK细胞（）细胞（） ?肿瘤细胞：肿瘤细胞： T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） 极少极少B细胞淋巴瘤：部分中心母细胞性细胞淋巴瘤：部分中心母细胞性和免疫母细胞性淋巴瘤胞浆弱（）和免疫母细胞性淋巴瘤胞浆弱（） 组织细胞性淋巴瘤弱（）组织细胞性淋巴瘤弱（） ?鉴别鉴别naive T细胞和记忆细胞和记忆T细胞细胞 CD45RO：记忆：记忆T细胞细胞 CD45RA： naive T细胞细胞
25、 2. T细胞亚型抗原细胞亚型抗原 （1）CD1A ?正常细胞：正常细胞： 皮质胸腺细胞（）皮质胸腺细胞（） 郎罕氏细胞（）郎罕氏细胞（） ?肿瘤：肿瘤： 很多胸腺很多胸腺T淋巴瘤和白血病（）淋巴瘤和白血病（） 郎罕氏细胞组织细胞增生症（）郎罕氏细胞组织细胞增生症（） （2）CD4 ? 55kD，出现于大部分，出现于大部分T辅助辅助/诱导细胞。诱导细胞。 ?胸腺皮质：胸腺皮质： 胸腺细胞复合表达胸腺细胞复合表达CD4，CD8，T6 ?胸腺髓质：胸腺髓质： 胸腺细胞丢失胸腺细胞丢失T6，分别表达，分别表达CD4，CD8。 ?也见于单核也见于单核/巨噬细胞巨噬细胞 ?表达表达T4抗原的肿瘤：抗原的
26、肿瘤： 多数皮肤多数皮肤T细胞淋巴瘤，包括蕈样霉菌病细胞淋巴瘤，包括蕈样霉菌病 HTLV-I相关成人相关成人T细胞白血病细胞白血病/淋巴瘤淋巴瘤 部分部分T细胞急性淋巴母细胞性白血病细胞急性淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤淋巴瘤 *在淋巴母细胞性淋巴瘤中，在淋巴母细胞性淋巴瘤中，T8抗原也可存抗原也可存在于肿瘤细胞。在于肿瘤细胞。 （3）CD8 ? 33kD，表达于人抑制，表达于人抑制/细胞毒细胞毒T细胞细胞 ?周围淋巴组织中周围淋巴组织中CD8T细胞（滤泡间区细胞（滤泡间区域）仅占域）仅占T细胞细胞15-20% ? 骨髓和胃肠道上皮骨髓和胃肠道上皮80%T细胞是细胞是CD8? 大部分皮质胸腺细胞和
27、约大部分皮质胸腺细胞和约30%髓质胸腺髓质胸腺细胞细胞CD8 （四）（四）NK细胞细胞 1. CD56（NCAM-1） ?神经细胞粘附分子（神经细胞粘附分子（NCAM）表达于：）表达于： 大部分神经外胚层源性细胞株，组织和肿瘤大部分神经外胚层源性细胞株，组织和肿瘤（视神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形胶质（视神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形胶质细胞瘤和神经母细胞瘤）细胞瘤和神经母细胞瘤） 中胚层源性肿瘤：横纹肌肉瘤中胚层源性肿瘤：横纹肌肉瘤 NK细胞细胞 2. CD57 ? 110kD ?表达于表达于7-35%正常外周血淋巴细胞：正常外周血淋巴细胞： NK细胞细胞 CD8外周血抑制外周血抑制/细胞毒
28、细胞毒T细胞细胞 ?也表达于部分神经组织也表达于部分神经组织 ?粒细胞、血小板、红细胞和胸腺细粒细胞、血小板、红细胞和胸腺细胞阴性。胞阴性。 3. CD16（Leu-11） ?正常细胞：正常细胞： NK细胞细胞 粒细胞粒细胞 ?表达于许多表达于许多NK细胞增生性疾病细胞增生性疾病 （五）粒细胞和单核吞噬细胞（五）粒细胞和单核吞噬细胞 1. CD11c（Leu-M5） ?正常细胞：正常细胞： 表达于粒单核细胞表达于粒单核细胞 ?肿瘤：肿瘤： 毛细胞白血病（）毛细胞白血病（） 单核细胞样单核细胞样B细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） 少数少数B-SLL/CLL （）（） 少数少数T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴
29、瘤（） 一些粒细胞白血病，特别是一些粒细胞白血病，特别是M4和和M5 （）（） 郎罕氏细胞组织细胞增生症（）郎罕氏细胞组织细胞增生症（） 2. CD15 （Leu-M1） ?寡糖寡糖 ?外周血：外周血： 中性粒细胞阳性中性粒细胞阳性 单核细胞弱阳性单核细胞弱阳性 淋巴细胞和血小板阴性淋巴细胞和血小板阴性 ? 树突网状细胞阳性树突网状细胞阳性 ?单核单核/巨噬细胞阴性巨噬细胞阴性 ?霍奇金淋巴瘤霍奇金淋巴瘤R-S细胞强表达（除细胞强表达（除外淋巴细胞为主型，仅小部分阳性）外淋巴细胞为主型，仅小部分阳性） ? 大部分非霍奇金淋巴瘤阴性。大部分非霍奇金淋巴瘤阴性。 3. 1-AT， 1-ACT， l
30、ysozyme ?单核细胞单核细胞/巨噬细胞（巨噬细胞（+） ? 粒细胞（粒细胞（+） 4. CD68 ?跨膜糖蛋白，跨膜糖蛋白，110kD ?多种巨噬细胞阳性：包括枯否氏细胞，多种巨噬细胞阳性：包括枯否氏细胞，脾红髓、胃肠道固有层、肺腺泡和骨脾红髓、胃肠道固有层、肺腺泡和骨髓的巨噬细胞。髓的巨噬细胞。 ?抗原呈递细胞，如郎罕氏细胞（）抗原呈递细胞，如郎罕氏细胞（）或弱（）。或弱（）。 ?浆细胞样浆细胞样T细胞阳性（见于反应性淋巴细胞阳性（见于反应性淋巴结，被认为是单核结，被认为是单核/巨噬细胞源性）巨噬细胞源性） ?慢性和急性粒细胞性白血病：胞浆阳性。慢性和急性粒细胞性白血病：胞浆阳性。 ?
31、少数真性组织细胞性肿瘤阳性。少数真性组织细胞性肿瘤阳性。 ?正常和肿瘤性肥大细胞阳性。正常和肿瘤性肥大细胞阳性。 ?恶性黑色素瘤：不同数量细胞阳性。恶性黑色素瘤：不同数量细胞阳性。 ?淋巴细胞源性肿瘤阴性，但一些淋巴细胞源性肿瘤阴性，但一些B细胞淋细胞淋巴瘤（小淋巴细胞性淋巴瘤和毛细胞白巴瘤（小淋巴细胞性淋巴瘤和毛细胞白血病）胞浆弱阳性。血病）胞浆弱阳性。 5. S-100蛋白蛋白 ?正常细胞：正常细胞： 郎罕氏细胞（郎罕氏细胞（+） 交指（交指（IDRC）和有些滤泡树突状细胞（）和有些滤泡树突状细胞（+） ?造血组织疾病：造血组织疾病： 郎罕氏细胞组织细胞增生症（郎罕氏细胞组织细胞增生症（+
32、） IDRC肿瘤（肿瘤（+） 少数少数T细胞淋巴瘤（细胞淋巴瘤（+） 6. MAC387 ? （12kD）和）和（14kD）亚单位组成）亚单位组成 ?胞浆抗原，表达于：胞浆抗原，表达于： 粒细胞粒细胞 血单核细胞血单核细胞 各组织的组织细胞：如浸润性或反应性组织各组织的组织细胞：如浸润性或反应性组织细胞，腺泡巨噬细胞，肿瘤浸润巨噬细胞，细胞，腺泡巨噬细胞，肿瘤浸润巨噬细胞，窦组织细胞，上皮样巨细胞和组织细胞增生窦组织细胞，上皮样巨细胞和组织细胞增生症症X和皮病性淋巴结病的组织细胞。和皮病性淋巴结病的组织细胞。 ?生发中心巨噬细胞（）生发中心巨噬细胞（） ?很多皮肤和扁桃体活检的鳞状上皮很多皮肤
33、和扁桃体活检的鳞状上皮（），但其他上皮（），包括（），但其他上皮（），包括各类腺上皮。各类腺上皮。 7. MPO ? 用于鉴别淋巴细胞性和粒细胞性用于鉴别淋巴细胞性和粒细胞性白血病白血病 （六）其（六）其 他他 1. EMA ?浆细胞阳性浆细胞阳性 ? 造血组织肿瘤：表达于造血组织肿瘤：表达于 霍奇金淋巴瘤（主要为霍奇金淋巴瘤（主要为NLPHL） 浆细胞肿瘤浆细胞肿瘤 很多间变性大细胞淋巴瘤很多间变性大细胞淋巴瘤 一些其他一些其他B和和T大细胞淋巴瘤大细胞淋巴瘤 2. BNH9 ?人红细胞相关抗原人红细胞相关抗原H（1，2，4型）和型）和Y（2型）型） ? 正常组织：正常组织： 上皮组织：腺上
34、皮和鳞状上皮，包括外、中、上皮组织：腺上皮和鳞状上皮，包括外、中、内胚层来源。内胚层来源。 非上皮组织：红细胞、红母细胞、巨核细胞非上皮组织：红细胞、红母细胞、巨核细胞和内皮细胞和内皮细胞 ?肿瘤细胞：肿瘤细胞： 50%间变性大细胞淋巴瘤间变性大细胞淋巴瘤, 且多数且多数EMA(+) 5%霍奇金淋巴瘤霍奇金淋巴瘤(除外淋巴细胞为主型，除外淋巴细胞为主型，21%) 6%其他类型非霍奇金淋巴瘤（其他类型非霍奇金淋巴瘤（B、T，低度，低度和高度恶性）和高度恶性） 50%癌癌 软组织肿瘤：血管肉瘤（包括卡波西肉瘤）软组织肿瘤：血管肉瘤（包括卡波西肉瘤）和滑膜肉瘤和滑膜肉瘤 3. LMP ? 60kD膜
35、蛋白，由膜蛋白，由EBV的的BNLF1基因编码。基因编码。 ?强阳性：强阳性： EBV（+）的淋巴母细胞样细胞株）的淋巴母细胞样细胞株 传染性单核细胞增多症中传染性单核细胞增多症中EBV感染的感染的B免疫免疫母细胞母细胞 不典型淋巴细胞增生不典型淋巴细胞增生 免疫缺陷患者发生的多形性免疫缺陷患者发生的多形性B细胞感染细胞感染 ?其他阳性病变其他阳性病变 25-50?V相关的鼻咽未分化癌相关的鼻咽未分化癌 90% EBV相关的霍奇金淋巴瘤相关的霍奇金淋巴瘤 20-3030间变性大细胞淋巴瘤间变性大细胞淋巴瘤 急性传染性单核细胞增多症急性传染性单核细胞增多症 多种类型外周多种类型外周T细胞淋巴瘤细
36、胞淋巴瘤 ?阴性：阴性： EBV（+）的）的Burkitt淋巴瘤淋巴瘤 ?弱阳性弱阳性 平滑肌，包括血管平滑肌，包括血管 mic24. CD99（p30/32） ? MIC2基因产物。该基因位于染色体基因产物。该基因位于染色体X和和Y的短臂上。的短臂上。 ?正常细胞：正常细胞： 一些淋巴细胞（骨髓、淋巴结和脾）一些淋巴细胞（骨髓、淋巴结和脾） 皮质胸腺细胞皮质胸腺细胞 卵巢颗粒细胞卵巢颗粒细胞 大多数大多数Langerhan胰岛细胞胰岛细胞 CNS室管膜细胞室管膜细胞 睾丸睾丸Sertoli细胞细胞 部分血管内皮细胞部分血管内皮细胞 ? 肿瘤细胞：肿瘤细胞： 淋巴母细胞性淋巴瘤和粒细胞肉瘤（淋
37、巴母细胞性淋巴瘤和粒细胞肉瘤（+） ES/PNET瘤细胞表面强表达，用于和其他小瘤细胞表面强表达，用于和其他小圆细胞肿瘤鉴别。圆细胞肿瘤鉴别。 CNS胶质母细胞瘤和室管膜瘤阳性。胶质母细胞瘤和室管膜瘤阳性。 胰岛细胞肿瘤阳性。胰岛细胞肿瘤阳性。 5. ALK-1 ?间变性大细胞淋巴瘤可见若干种染色体易间变性大细胞淋巴瘤可见若干种染色体易位，几乎都累及定位于位，几乎都累及定位于2号染色体的一种号染色体的一种酪氨酸激酶酪氨酸激酶ALK（ALCL kinase）。）。 t(2；5)(p23；q35)易位最常见，涉及的易位最常见，涉及的partner gene为为NPM（nucleophosmin g
38、ene）。）。该易位产生融合基因该易位产生融合基因NPM-ALK。 ?正常正常ALK蛋白，表达限于中枢神经系统蛋白，表达限于中枢神经系统（散在神经元，胶质细胞和内皮细胞）；（散在神经元，胶质细胞和内皮细胞）；正常淋巴细胞不表达。正常淋巴细胞不表达。 ?单抗单抗ALK-1可识别正常可识别正常ALK蛋白蛋白 (200kD）和易位产生的不同融合蛋白，如和易位产生的不同融合蛋白，如NPM-ALK蛋白（蛋白（80kD）。由此用于诊断）。由此用于诊断ALCL。 ? 各种易位导致各种易位导致ALK阳性分布不同阳性分布不同 Partner Gene 易位易位发生率发生率 ALK阳性分布阳性分布 t(2;5)
39、t(1;2) Nucleophosmin Tropomyosin 3 75% 10-20% 胞浆胞浆/核核 胞浆胞浆 t(2;3) TRK fused gene(TRG) Inv 2 ATIC(pur H gene) 2-5% 2-5% 2-5% 胞浆胞浆 胞浆胞浆 胞浆胞浆/颗粒颗粒 t(2;22) Clathrin heavy chain ?目前目前RT-PCR法所用引物为法所用引物为NPM-ALK特特异，故不能检测其它易位。因而免疫组异，故不能检测其它易位。因而免疫组化方法检测化方法检测ALK诊断诊断ALCL更具优势。更具优势。 ? ALCL好发于儿童和青年。年长的好发于儿童和青年。年长
40、的ALCL病例病例t（2；5）和）和ALK常常阴性。常常阴性。 ? ALK阳性的阳性的ALCL，预后佳。，预后佳。 ?存在问题：存在问题： 有报道，有报道， t（2；5）NPM/ALK可能无可能无ALCL特异性，阳性可见于周围特异性，阳性可见于周围T细胞淋细胞淋巴瘤和巴瘤和T免疫母细胞性淋巴瘤（免疫母细胞性淋巴瘤（RT-PCR法）法） 15-20%T/null ALCL见见ALK阴性。有人认阴性。有人认为这些病例更宜归类为为这些病例更宜归类为“周围周围T细胞淋巴细胞淋巴瘤，非特殊性，间变变异型（瘤，非特殊性，间变变异型（anaplastic variant）” 6. TIA-1（T细胞胞内抗原
41、细胞胞内抗原-1） ? 17kD，一种胞浆颗粒相关蛋白，表达于，一种胞浆颗粒相关蛋白，表达于有溶细胞潜能的细胞（有溶细胞潜能的细胞（CTL和和NK细胞），细胞），又称又称GMP-17。 ?和和perforin、granzyme B同属细胞毒颗粒同属细胞毒颗粒蛋白。蛋白。 ?与与FAS（CD95）调节的凋亡有关）调节的凋亡有关 ?造血细胞：造血细胞： 9016，50-808，104正正常外周血淋巴细胞（常外周血淋巴细胞（+） 几乎所有单核细胞和粒细胞（几乎所有单核细胞和粒细胞（+） CD4活化活化T细胞株（）细胞株（） 活化活化NK细胞株（）细胞株（） Con A活化的胸腺细胞（）活化的胸腺细胞
42、（） B淋巴细胞和淋巴细胞和B细胞株（）细胞株（） ? 肿瘤：表达于细胞毒相关肿瘤：表达于细胞毒相关T细胞肿瘤和细胞肿瘤和NK细胞肿瘤细胞肿瘤 皮下脂膜炎样皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） 肠病型肠道肠病型肠道T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） 肝脾肝脾T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） *很多很多周围周围T细胞肿瘤和细胞肿瘤和NK细胞肿瘤都表细胞肿瘤都表达细胞毒颗粒蛋白达细胞毒颗粒蛋白TIA-1、perforin、和、和granzyme B，但肝脾，但肝脾T细胞淋巴瘤仅有细胞淋巴瘤仅有TIA-1 （）。（）。 间变性大细胞淋巴瘤（间变性大细胞淋巴瘤（ ） * 有助于同霍奇金淋巴瘤的鉴别有助
43、于同霍奇金淋巴瘤的鉴别 鼻及鼻型鼻及鼻型NK/T细胞淋巴瘤也有表达细胞淋巴瘤也有表达 7. Perforin（穿孔素）（穿孔素） ? 66kD或或70kD，产生于溶细胞性淋巴细胞，产生于溶细胞性淋巴细胞，并储存于这些细胞的胞浆颗粒中。并储存于这些细胞的胞浆颗粒中。 ?在靶细胞膜上形成跨膜孔道，导致膜完整在靶细胞膜上形成跨膜孔道，导致膜完整性丧失，细胞裂解。其释放过程和裂解功性丧失，细胞裂解。其释放过程和裂解功2能依赖能依赖Ca。 ?参与细胞毒参与细胞毒T细胞诱导凋亡机制。细胞诱导凋亡机制。 ?人和鼠人和鼠perforin基因定位于基因定位于10号染色体。号染色体。 ?表达具杀伤细胞特异性。表达
44、具杀伤细胞特异性。 大多数大多数NK细胞株，细胞株，CD8CTL株（）株（） 人人CD3，CD56的的NK细胞，细胞，CD3的大颗粒淋巴的大颗粒淋巴细胞和细胞和T细胞（）细胞（） ?肿瘤肿瘤 皮下脂膜炎样皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） 肝脾肝脾T细胞淋巴瘤（）细胞淋巴瘤（） *表明瘤细胞功能上属非成熟性表明瘤细胞功能上属非成熟性T细胞，不能诱细胞，不能诱导凋亡和坏死，不能释放细胞毒蛋白。导凋亡和坏死，不能释放细胞毒蛋白。 间变性大细胞淋巴瘤（间变性大细胞淋巴瘤（ ） *有助于同霍奇金淋巴瘤的鉴别有助于同霍奇金淋巴瘤的鉴别 鼻及鼻型鼻及鼻型NK/T细胞淋巴瘤可有表达细胞淋巴瘤可有表达
45、 8. HLA-DR ?人组织相容性复合物人组织相容性复合物ClassII基因至少有基因至少有四个区域：四个区域：HLA-DP，-DO，-DR ?一条一条链，一条链，一条链链 ?主要标记主要标记B细胞，指状突网状细胞，郎罕细胞，指状突网状细胞，郎罕氏细胞和巨噬细胞。氏细胞和巨噬细胞。 ?少数上皮细胞，活化少数上皮细胞，活化T细胞和纤维母细胞细胞和纤维母细胞样细胞（可能相当于树状突细胞）也有样细胞（可能相当于树状突细胞）也有反应。反应。 ?胸腺：整个皮质的上皮细胞网（）胸腺：整个皮质的上皮细胞网（） ? B和和T非霍奇金淋巴瘤（）非霍奇金淋巴瘤（） ?周围血：周围血： B细胞和大部分单核细胞（）
46、细胞和大部分单核细胞（） 正常正常T细胞（）细胞（） 活化活化T细胞（）细胞（） 9. bcl-2 ?正常细胞：表达于正常细胞：表达于 非生发中心非生发中心B细胞细胞 大多数大多数T细胞细胞 浆细胞浆细胞 ?肿瘤：肿瘤： 过度表达于大多数滤泡性淋巴瘤和一些过度表达于大多数滤泡性淋巴瘤和一些弥漫性大弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤 也表达于很多其他淋巴瘤和白血病也表达于很多其他淋巴瘤和白血病 10. Ki-67 ?表达于细胞周期表达于细胞周期G0期外的细胞期外的细胞 ? 与淋巴瘤分级有关与淋巴瘤分级有关 11. CyclinD1 ? 分分D1、D2和和D3亚型，有组织特异性，相亚型，有组织特异性，
47、相互间同源性达互间同源性达53.1-63.5% 编码基因编码基因 定位定位 11q13 氨基酸数氨基酸数 295 CyclinD1 CCND1 CyclinD2 CyclinD3 CCND2 CCND3 12q13 6p21 290 292 ? 绝大多数套细胞淋巴瘤发生绝大多数套细胞淋巴瘤发生t（11；14）（q13；q32）易位，导致）易位，导致CCND1（bcl-1或或PRAD1）基因过度表达，从而使）基因过度表达，从而使cyclinD1蛋白表达过度。故套细胞淋巴瘤蛋白表达过度。故套细胞淋巴瘤cyclinD1（），并可同阴性的滤泡性淋（），并可同阴性的滤泡性淋巴瘤和小淋巴细胞性淋巴瘤巴瘤和
48、小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病鉴别。白血病鉴别。 12. CD25 ? T细胞生长因子受体或细胞生长因子受体或IL-2，单多肽链，单多肽链，分子量分子量55kD，有时也称为，有时也称为Tac抗原。抗原。 ?该受体在活化的该受体在活化的T细胞，细胞，HTLV-1和和HTLV-2T细胞株强表达，活化细胞株强表达，活化B细胞弱细胞弱表达。表达。 ?周围淋巴组织周围淋巴组织T区和生发中心亮区淋巴细区和生发中心亮区淋巴细胞不同程度阳性。胞不同程度阳性。 ?生发中心巨噬细胞弱阳性，窦区巨噬细生发中心巨噬细胞弱阳性，窦区巨噬细胞强阳性。胞强阳性。 ? 胸腺：仅在髓质见散在阳性细胞，皮质胸腺：仅在髓质见散在阳性细
49、胞，皮质阴性。阴性。 ?正常周围血正常周围血CD25细胞细胞5%。 13. CD34 ?正常细胞：正常细胞： Progenitor cell 内皮细胞内皮细胞 ?肿瘤：肿瘤： 一些粒细胞白血病一些粒细胞白血病 一些淋巴母细胞性白血病一些淋巴母细胞性白血病 Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-RED 标记标记 CD8 CD15 公司公司 Dako(m) Ventana 产品名产品名 M7103 Clone C8/144B Cat#250-2604 347540 4G7 M0755 Clone L26 M0751 BerH2 GP1b nn2/174 2
50、50-2515(50) -Lambda(Poly) Z311 稀释度稀释度 1:100 预稀释预稀释 CD19 CD20 CD30 CD42b Lambda S-100 BD Dako(m) Dako(m) Novocastra(m) Ventana(R) Dako(R) 1:25 1:400 1:50 1:100 预稀释预稀释 1:2000 Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-DAB(1) 标记标记 CD1a CD3 CD4 公司公司 Immunotech Dako(R) Ventana(m) 产品名产品名 Cat#IM1590 A0452 Cat
