1、引言引言v一、微生物学及其发展史一、微生物学及其发展史v二、微生物定义及特性二、微生物定义及特性v三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v四、微生物的种类四、微生物的种类v五、微生物的形态五、微生物的形态v六、微生物的结构六、微生物的结构v七、微生物的污染七、微生物的污染v八、微生物的控制八、微生物的控制v九、生产环境的空气洁净度监测九、生产环境的空气洁净度监测一、微生物学及其发展史一、微生物学及其发展史v微生物学（微生物学（mocrobiology）就是研究那些小）就是研究那些小得必须借助显微镜才能看见的活生物体。得必须借助显微镜才能看见的活生物体。v我们研究微生物的生命活动，达到控制腐败
2、我们研究微生物的生命活动，达到控制腐败微生物和病原微生物的活动，以防止食品、微生物和病原微生物的活动，以防止食品、药品变质和杜绝因其引起的病害。药品变质和杜绝因其引起的病害。一、微生物学及其发展史一、微生物学及其发展史v1、公元前二千多年夏禹时代，就有酿酒的记、公元前二千多年夏禹时代，就有酿酒的记载，酿酒的记载，酿酒就必须有酵母菌参与。载，酿酒的记载，酿酒就必须有酵母菌参与。v2、十七世纪荷兰人吕文虎克，用自制显微镜、十七世纪荷兰人吕文虎克，用自制显微镜首先观察到微生物（细菌）。首先观察到微生物（细菌）。v3、十九世纪，法国科学家斯德，发现发酵和、十九世纪，法国科学家斯德，发现发酵和腐败是微生
3、物的作用结果，为了防止酒类变腐败是微生物的作用结果，为了防止酒类变质，他创造加温处理方法质，他创造加温处理方法“巴氏消毒法巴氏消毒法”。二、微生物定义二、微生物定义 v微生物微生物(microorganism) 是指存在于自然界的一大群形体微小、结构是指存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、进化低级、肉眼直接看不见，必须借简单、进化低级、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。二、微生物的特征二、微生物的特征v小（形体微小）：小（形体微小）：m（微米）级在光学
4、显微（微米）级在光学显微镜下可见、镜下可见、nm（纳米）级在电子显微镜下可（纳米）级在电子显微镜下可见见v简（结构简单）：单细胞、简单的多细胞、简（结构简单）：单细胞、简单的多细胞、非细胞非细胞v低（进化低级）：原核类、真核类、非细胞低（进化低级）：原核类、真核类、非细胞类类三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v1、体积小，面积大、体积小，面积大 为五大共性的基础。小体积大面积系统必然有一个为五大共性的基础。小体积大面积系统必然有一个巨大的营养物吸收面、代谢废物的排泄面、环境信巨大的营养物吸收面、代谢废物的排泄面、环境信息的接收面。息的接收面。v2、吸收多，转化快、吸收多，转化快 为其高速
5、生长繁殖和产生大量代谢产物提供了充分为其高速生长繁殖和产生大量代谢产物提供了充分的物质基础。的物质基础。v3、生长旺，繁殖快、生长旺，繁殖快 微生物具有极高的生长和繁殖速度。微生物具有极高的生长和繁殖速度。三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v4、适应强，易变异、适应强，易变异 微生物对环境条件尤其是恶劣的微生物对环境条件尤其是恶劣的“极端环境极端环境”有惊人的适应能力有惊人的适应能力 ，堪称生物界之最。，堪称生物界之最。 微生物的个体一般都是单细胞、简单多细胞微生物的个体一般都是单细胞、简单多细胞或非细胞，通常都是单倍体，繁殖快与外界或非细胞，通常都是单倍体，繁殖快与外界环境直接接触，即
6、使变异的频率特别低，也环境直接接触，即使变异的频率特别低，也可在短时间内产生大量变异的后代。最常见可在短时间内产生大量变异的后代。最常见的变异形式是基因突变。的变异形式是基因突变。三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v5、分布广，种类多、分布广，种类多 地球上除了火山的中心区域外，从土壤圈、地球上除了火山的中心区域外，从土壤圈、水圈、大气圈直至岩石圈，到处都有微生物水圈、大气圈直至岩石圈，到处都有微生物的踪迹。的踪迹。 地球上有地球上有200万种生物，其中微生物有万种生物，其中微生物有20万万种之多。种之多。 四、微生物的种类四、微生物的种类v微生物根据其不同的进化水平和性状上的明微生物根
7、据其不同的进化水平和性状上的明显差别可分为原核微生物、真核微生物和非显差别可分为原核微生物、真核微生物和非细胞微生物三大类群。细胞微生物三大类群。v原核微生物：细菌、放线菌、蓝细菌、立克原核微生物：细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、支原体、衣原体、螺旋体、蛭弧菌次氏体、支原体、衣原体、螺旋体、蛭弧菌等。等。v真核微生物：霉菌、酵母菌等真核微生物：霉菌、酵母菌等v非细胞类微生物：病毒非细胞类微生物：病毒(个体微小，可通过细个体微小，可通过细菌滤器菌滤器) 等等五、微生物的形态五、微生物的形态v细菌的形态：球状、杆状、螺旋状细菌的形态：球状、杆状、螺旋状v酵母菌的形态：球状、卵圆状、椭圆状、柱酵母
8、菌的形态：球状、卵圆状、椭圆状、柱状或香肠状等状或香肠状等v霉菌的形态：丝状霉菌的形态：丝状v病毒的形态：球状、卵圆形、砖形、杆状、病毒的形态：球状、卵圆形、砖形、杆状、丝状、蝌蚪状等丝状、蝌蚪状等放线杆菌放线杆菌弧状菌弧状菌酵母菌酵母菌 葡萄球菌葡萄球菌 沙门氏菌沙门氏菌乳酸杆菌乳酸杆菌 梭状芽孢杆菌梭状芽孢杆菌 黑曲霉黑曲霉六、微生物的结构六、微生物的结构细菌的结构：细菌的结构：v基本结构：细基本结构：细胞壁、细胞膜、胞壁、细胞膜、细胞质、细胞细胞质、细胞核核v特殊结构：荚特殊结构：荚膜、芽孢等膜、芽孢等细菌的结构：细菌的结构：v细胞壁：位于细胞表面，是一层较为坚韧、略具弹细胞壁：位于细胞
9、表面，是一层较为坚韧、略具弹性的结构。其功能是可以保护细胞免受机械或渗透性的结构。其功能是可以保护细胞免受机械或渗透压的破坏，维持细胞的外形。细胞壁是多孔性的，压的破坏，维持细胞的外形。细胞壁是多孔性的，具有一定的屏障作用，水和某些化学物质可以通过，具有一定的屏障作用，水和某些化学物质可以通过，但对大分子物质有阻拦作用。但对大分子物质有阻拦作用。v细胞膜：是外侧紧贴于细胞壁而内侧包围细胞质的细胞膜：是外侧紧贴于细胞壁而内侧包围细胞质的一层柔软而富有弹性的半透性薄膜。它是一个重要一层柔软而富有弹性的半透性薄膜。它是一个重要的代谢活动中心，具有多种新陈代谢所需的酶。的代谢活动中心，具有多种新陈代谢
10、所需的酶。细菌的结构：细菌的结构：v细胞质：无色透明，呈粘液状。其内含有某细胞质：无色透明，呈粘液状。其内含有某些结构和内含物。些结构和内含物。v细胞核：细菌的核位于细胞质内，没有核膜、细胞核：细菌的核位于细胞质内，没有核膜、核仁，没有固定形态，结构也很简单，因而核仁，没有固定形态，结构也很简单，因而称之为原核。称之为原核。v荚膜：有些细菌在一定营养条件下，可向细荚膜：有些细菌在一定营养条件下，可向细胞壁表面分泌一层松散透明、粘度极大、粘胞壁表面分泌一层松散透明、粘度极大、粘液状或胶质状的物质称为荚膜。液状或胶质状的物质称为荚膜。细菌的结构：细菌的结构：v芽孢：细菌在一定环境条件下或处在一定的
11、芽孢：细菌在一定环境条件下或处在一定的生活阶段，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成生活阶段，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个折光性圆形或椭圆形的个体。其对热力、一个折光性圆形或椭圆形的个体。其对热力、干燥、辐射、化学消毒等理化因素有强大的干燥、辐射、化学消毒等理化因素有强大的抵抗力。抵抗力。炭疽杆菌（芽孢形成炭疽杆菌（芽孢形成 ）七、微生物污染七、微生物污染v 为什么要对为什么要对食品食品生产进行微生物控制生产进行微生物控制？1、致病：引起人及动植物病害。致病：引起人及动植物病害。 我们不我们不能让我们的顾客有感染致病微生物的潜能让我们的顾客有感染致病微生物的潜在危险。在危险。2、致腐、致霉：致腐、
12、致霉：导致产品变质导致产品变质v污染就是指当某物与不洁污染就是指当某物与不洁净的或腐坏物接触或混合净的或腐坏物接触或混合在一起使该物变的不纯净在一起使该物变的不纯净或不适用时，即受污染。或不适用时，即受污染。v简单的说当一个产品中存简单的说当一个产品中存在不需要的物质时，他即在不需要的物质时，他即受到了污染受到了污染污染的形式和载体污染的形式和载体:污染的形式污染的形式:v 尘埃粒子尘埃粒子v 微生物微生物污染的载体污染的载体:空气、水、表面、人。空气、水、表面、人。微生物的污染途径微生物的污染途径v 自身污染：由于患者和员工自身携带微生自身污染：由于患者和员工自身携带微生 物而污染。物而污染
13、。v 接触污染：由于和非无菌的用具、器械或接触污染：由于和非无菌的用具、器械或 人的接触而污染。人的接触而污染。v 空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、 附着或被吸入而污染。附着或被吸入而污染。v 其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。控制微生物的污染途径控制微生物的污染途径v 有效地阻止室外的污染侵入室内。有效地阻止室外的污染侵入室内。v 迅速有效地排除室内已发生的污染。迅速有效地排除室内已发生的污染。v 控制污染源，减少污染发生量。控制污染源，减少污染发生量。防止交叉污染防止交叉污染 ？v有需要有需要时时要洗
14、手及消毒要洗手及消毒v尽量减少尽量减少直接以直接以双手接触原辅料双手接触原辅料v接触原辅料接触原辅料的表面及用具的表面及用具 用用后后清洗清洗 转换产品时转换产品时清洗清洗 手的卫生手的卫生v每只手可携带每只手可携带40万个细菌；刚洗万个细菌；刚洗过的手，每平方厘米也可检验出过的手，每平方厘米也可检验出3200个细菌个细菌 。v110万个细菌万个细菌/1cm2 皮肤表面皮肤表面!洗手的重要性洗手的重要性:v用流水（如自来水）洗手，能使手上的用流水（如自来水）洗手，能使手上的致病微生物减少致病微生物减少80%；v用皂液充分洗手，再用自来水冲洗能使用皂液充分洗手，再用自来水冲洗能使致病微生物减少致
15、病微生物减少95%。v洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物减少减少99%。洗手的正确方法洗手的正确方法正正确确洗洗手手的的步步骤骤更衣更衣更衣更衣标准更衣程序：标准更衣程序： 一更：脱衣一更：脱衣换鞋换鞋洗手洗手二更：穿洁净服二更：穿洁净服/戴帽子戴帽子/戴口罩戴口罩缓冲：消毒双手缓冲：消毒双手 洁净区洁净区.更衣更衣着衣种类着衣种类 测定日期测定日期 细菌数细菌数/100CM/100CM上衣内侧上衣内侧 使用五日后使用五日后 300300 外侧外侧 使用五日后使用五日后 200200裤子内侧裤子内侧 使用五日后使用五日后 450450 外侧外侧 使用五日后使用
16、五日后 7070帽子内侧帽子内侧 使用五日后使用五日后 100100 外侧外侧 使用五日后使用五日后 150150口罩内侧口罩内侧 使用一日后使用一日后 2200022000 外侧外侧 使用使用一日后一日后 100100袜子内侧袜子内侧 使用一日后使用一日后 3000030000 外侧外侧 使用一日后使用一日后 28002800更衣的目的：更衣的目的：想混进去，没门想混进去，没门！主要的微生物污染源主要的微生物污染源v 空气空气v 水水v 设备设备v 原辅料原辅料v 人员人员主要的微生物污染源主要的微生物污染源-空气空气v灰尘灰尘“微生物的飞行器微生物的飞行器”。v进入洁净室（区）的空气要经过
17、空气净进入洁净室（区）的空气要经过空气净化系统的处理。化系统的处理。v洁净室（区）要定期消毒。使用的消毒洁净室（区）要定期消毒。使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。剂不得对设备、物料和成品产生污染。消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。菌株。 主要的微生物污染源主要的微生物污染源-水水v水体是微生物广泛分布的第二个天然环境。水体是微生物广泛分布的第二个天然环境。 v水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排泄水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。物及垃圾等。 v药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范第四章第四章设备设备第第三十四条中明确规
18、定：纯化水、注射用水的制三十四条中明确规定：纯化水、注射用水的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生和污染。备、储存和分配应能防止微生物的滋生和污染。储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀。管储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀。管道的设计和安装应避免死角、盲管。储罐和管道的设计和安装应避免死角、盲管。储罐和管道要规定清洗、灭菌周期。道要规定清洗、灭菌周期。 主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 设备设备v几乎没有细菌不几乎没有细菌不“吃吃”的东西的东西v设备和器具与设备和器具与食食品直接接触品直接接触 设备和器具的清洗设备和器具的清洗v清洁程序必须经过验证清洁程序必须经过验证v按清洗周期清洗按
19、清洗周期清洗v清洗和存放设备、器具处应与生产区域洁净等级清洗和存放设备、器具处应与生产区域洁净等级相同相同主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 原辅料原辅料 包括厡辅料、内包装材料。包括厡辅料、内包装材料。 - 厡辅料微生物的限度标准？厡辅料微生物的限度标准？ - 内包装材料微生物的限度标准？内包装材料微生物的限度标准？ 符合药典或行业标准符合药典或行业标准 厡辅料、内包装材料的贮存：厡辅料、内包装材料的贮存： - 包装严密，不得破损，污染。包装严密，不得破损，污染。 - 清洁贮存。清洁贮存。主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 人员人员人体内外微生物的分布人体内外微生物的分布 1、皮肤、
20、皮肤 2、口腔、口腔 3、上呼吸道、上呼吸道 4、下呼吸道、下呼吸道 5、胃肠道、胃肠道 6、泌尿生殖道、泌尿生殖道v人是洁净室中最大的污染源人是洁净室中最大的污染源 1、人在代谢过程中会释放和分泌污染物。、人在代谢过程中会释放和分泌污染物。 2、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。3、人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。、人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。主要的微生物污染源主要的微生物污染源- 人员人员 NoYes人体散发的尘粒数人体散发的尘粒数: （万个（万个/ /每分钟）每分钟） 10 50 100-250人员不良行为所产生的污染人员不
21、良行为所产生的污染:当有如下行为时将相应增加微粒的产生量当有如下行为时将相应增加微粒的产生量:- 吸烟者的呼吸吸烟者的呼吸 500%-喷嚏喷嚏 2000%-搓手搓手 200%-行走行走 200%-跺脚跺脚 5000%极端环境下的微生物极端环境下的微生物v在自然界中，存在着一些可在绝大多数微生在自然界中，存在着一些可在绝大多数微生物所不能生长的高温、低温、高酸、高碱、物所不能生长的高温、低温、高酸、高碱、高盐、高压和高辐射强度等极端环境下生活高盐、高压和高辐射强度等极端环境下生活的微生物，如嗜热菌、嗜冷菌、嗜酸菌、嗜的微生物，如嗜热菌、嗜冷菌、嗜酸菌、嗜碱菌、嗜盐菌、嗜压菌、耐辐射菌等，它们碱菌
22、、嗜盐菌、嗜压菌、耐辐射菌等，它们被称为极端环境微生物。被称为极端环境微生物。八、微生物的控制八、微生物的控制v（一）（一）5个基本概念个基本概念v（二）消毒剂的种类（二）消毒剂的种类v（三）常用的消毒剂（三）常用的消毒剂v（四）四种灭菌的方法（四）四种灭菌的方法（一）（一）5个基本概念个基本概念v 抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。v 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。使用同一种化学药品法。细菌一般不死亡。使用同一种化学药品在低浓度时为防腐剂，在高浓度时为消毒剂。在低浓度时为防腐剂，在高浓度时为消
23、毒剂。（一）（一）5个基本概念个基本概念v 消毒：杀灭物体上病原微生物的方法。并消毒：杀灭物体上病原微生物的方法。并不一定杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。不一定杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。用来消毒的药品叫消毒剂。一般消毒剂在常用来消毒的药品叫消毒剂。一般消毒剂在常用浓度下只对细菌的繁殖体有效，对其芽孢用浓度下只对细菌的繁殖体有效，对其芽孢则需提高消毒剂的浓度和延长作用时间。则需提高消毒剂的浓度和延长作用时间。（一）（一）5个基本概念个基本概念v 无菌：不存在活菌。无菌：不存在活菌。v 灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。比灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。比消毒要求高，它杀灭了包括细菌芽孢在
24、内的消毒要求高，它杀灭了包括细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。全部病原微生物和非病原微生物。（一）（一）5个基本概念个基本概念v灭菌和消毒的比较：灭菌和消毒的比较：共性：杀灭微生物以控制其污染和防止传染。共性：杀灭微生物以控制其污染和防止传染。区别：区别：1、杀灭微生物完全性的差异。灭菌要求完全杀灭微生、杀灭微生物完全性的差异。灭菌要求完全杀灭微生物，灭菌后的药品不应含有活的微生物。而消毒不完物，灭菌后的药品不应含有活的微生物。而消毒不完全杀灭微生物，只能杀灭一部分微生物即病原微生物。全杀灭微生物，只能杀灭一部分微生物即病原微生物。这是相对的。因为强效消毒剂在适宜条件下可能达到这是相
25、对的。因为强效消毒剂在适宜条件下可能达到灭菌效果；在不适宜条件下灭菌，有不完全杀灭微生灭菌效果；在不适宜条件下灭菌，有不完全杀灭微生物的可能。物的可能。2、方法上的差异：灭菌方法具有多样性，消毒常借助、方法上的差异：灭菌方法具有多样性，消毒常借助化学物质。化学物质。3、效果检查的差异：灭菌效果用无菌检查法检测，而、效果检查的差异：灭菌效果用无菌检查法检测，而消毒效果以消毒剂的效价来评定。消毒效果以消毒剂的效价来评定。（二）消毒剂的种类（二）消毒剂的种类v1、重金属及其化合物、重金属及其化合物v2、有机化合物、有机化合物v3、卤族元素及其化合物、卤族元素及其化合物v4、表面活性剂、表面活性剂v5
26、、染料、染料（三）常用的消毒剂（三）常用的消毒剂v洁净室（区）常用的消毒剂洁净室（区）常用的消毒剂v甲醛薰蒸（作用机制：阻抑菌细胞核蛋白质合成甲醛薰蒸（作用机制：阻抑菌细胞核蛋白质合成) 甲醛有挥发性，对眼睛、皮肤有刺激性，引起皮肤甲醛有挥发性，对眼睛、皮肤有刺激性，引起皮肤硬化或皱褶，不宜做皮肤消毒用。）硬化或皱褶，不宜做皮肤消毒用。）v 0.1%新洁尔灭溶液新洁尔灭溶液(作用机制：使蛋白质变性，破作用机制：使蛋白质变性，破坏细胞膜。坏细胞膜。)v75%酒精溶液（常用于皮肤消毒。能迅速杀死细菌酒精溶液（常用于皮肤消毒。能迅速杀死细菌繁殖体，对一般病毒有一定的消毒作用。）繁殖体，对一般病毒有一
27、定的消毒作用。） v5%来苏水来苏水(甲酚皂甲酚皂)溶液（溶液（作用机制：损伤细胞膜作用机制：损伤细胞膜 ）（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v1、热力灭菌、热力灭菌v2、气体灭菌、气体灭菌v3、辐射灭菌、辐射灭菌v4、过滤灭菌、过滤灭菌（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v1、热力灭菌：、热力灭菌： 主要是利用高温的致死作用，使微生物的蛋主要是利用高温的致死作用，使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏，而导致细胞死亡。坏，而导致细胞死亡。 分为干热灭菌与湿热灭菌分为干热灭菌与湿热灭菌（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法(1)干热灭菌：灼烧与火焰灭菌干
28、热灭菌：灼烧与火焰灭菌 、干烤灭菌、干烤灭菌v灼烧主要用于接种工具灭菌，如接种针、接种环、灼烧主要用于接种工具灭菌，如接种针、接种环、刀、剪等在火焰上烧灼即可达到彻底灭菌。刀、剪等在火焰上烧灼即可达到彻底灭菌。v火焰灭菌是在无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、火焰灭菌是在无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口等进行灭菌，防止管口污染，作为无菌操作过程中等进行灭菌，防止管口污染，作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。的辅助灭菌手段。 v干烤灭菌是利用热辐射及干热空气进行灭菌。干烤灭菌是利用热辐射及干热空气进行灭菌。（四）灭
29、菌的方法（四）灭菌的方法(2)湿热灭菌法：通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性湿热灭菌法：通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性而杀灭微生物的方法。而杀灭微生物的方法。包括：煮沸灭菌、流通蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌包括：煮沸灭菌、流通蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌v煮沸灭菌：加热使水至沸而杀灭细菌的方法。凡不煮沸灭菌：加热使水至沸而杀灭细菌的方法。凡不适于高压蒸汽灭菌的物品可常压下在水中煮沸一段适于高压蒸汽灭菌的物品可常压下在水中煮沸一段时间达到灭菌目的。时间达到灭菌目的。v流通蒸汽灭菌：常压下，用蒸笼、蒸锅等在流通蒸汽灭菌：常压下，用蒸笼、蒸锅等在100灭菌。仅可杀死细菌繁殖体，不能完全杀灭芽孢。灭菌。仅可杀死细
30、菌繁殖体，不能完全杀灭芽孢。（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v高压蒸汽灭菌：通过加压提高蒸汽温度，穿透高压蒸汽灭菌：通过加压提高蒸汽温度，穿透力强、温度高、灭菌效果最好。是最可靠最适力强、温度高、灭菌效果最好。是最可靠最适用最广泛的灭菌方法，凡耐高温和潮湿的物品用最广泛的灭菌方法，凡耐高温和潮湿的物品可应用本法灭菌。可应用本法灭菌。v注意事项：完全排出高压灭菌器内的冷空气。注意事项：完全排出高压灭菌器内的冷空气。（冷空气存在时，同一表压下所达到的温度值（冷空气存在时，同一表压下所达到的温度值偏低，不符合规定的要求，灭菌就不彻底。偏低，不符合规定的要求，灭菌就不彻底。（四）灭菌的方法（四）灭菌的
31、方法v2、气体灭菌：利用化学消毒剂形成的气体来杀灭、气体灭菌：利用化学消毒剂形成的气体来杀灭微生物。微生物。v臭氧杀菌消毒臭氧杀菌消毒v广泛存在于自然界中，雷雨过后的空气有一种清广泛存在于自然界中，雷雨过后的空气有一种清新的感觉，是因为空中放电产生臭氧，消灭了空新的感觉，是因为空中放电产生臭氧，消灭了空气中的微生物，净化了空气。气中的微生物，净化了空气。v臭氧具有强烈的杀菌消毒作用。其杀菌消毒原理臭氧具有强烈的杀菌消毒作用。其杀菌消毒原理是：臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快是：臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧和单个氧分子，后者具有很强的活自行分解成氧和单个氧分子，后者具
32、有很强的活性，对细菌具有很强的氧化作用，臭氧氧化性，对细菌具有很强的氧化作用，臭氧氧化 （四）灭菌的方法（四）灭菌的方法 分解了细菌内氧化葡萄糖所必需的酶，从而分解了细菌内氧化葡萄糖所必需的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为普通氧分子，不存在任会自行重新结合成为普通氧分子，不存在任何有毒残留物，故称为无污染消毒剂。不但何有毒残留物，故称为无污染消毒剂。不但对各种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿对各种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，且对脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，且对杀死霉菌也很有效。杀死
33、霉菌也很有效。 （四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v3、辐射灭菌、辐射灭菌 （1）电离辐射）电离辐射:用引起电离的用引起电离的X射线、射线、射线灭菌。射线灭菌。 电离辐射对微生物的致死作用，主要是细胞内生物电离辐射对微生物的致死作用，主要是细胞内生物化学的变化所致。化学的变化所致。 辐射的药品、食品的安全问题：辐射灭菌用于药品辐射的药品、食品的安全问题：辐射灭菌用于药品或食品都应经过安全试验，完全有必要进行科学全或食品都应经过安全试验，完全有必要进行科学全面的评价，高剂量的辐射更应慎重。面的评价，高剂量的辐射更应慎重。（2）电磁波辐射（包括紫外线）电磁波辐射（包括紫外线波长波长190350nm、
34、红外线红外线波长波长0.771000m、微波、微波波长波长11000mm）。）。（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v紫外线灭菌紫外线灭菌1、 紫外线辐射的穿透力很弱，因此主要用于无菌室、紫外线辐射的穿透力很弱，因此主要用于无菌室、某些工作区的空气灭菌、物体表面灭菌。某些工作区的空气灭菌、物体表面灭菌。2、实践工作中在无菌室无菌柜净化工作台工作室及、实践工作中在无菌室无菌柜净化工作台工作室及车间安装紫外灯，一般仅起杀死空气中部分微生物车间安装紫外灯，一般仅起杀死空气中部分微生物的作用，而不能起到完全灭菌的作用。的作用，而不能起到完全灭菌的作用。3、紫外线消毒方法验证中紫外灯需确认的参数主要、紫外线
35、消毒方法验证中紫外灯需确认的参数主要有紫外线的波长、紫外线强度、灯管的寿命。有紫外线的波长、紫外线强度、灯管的寿命。4、紫外灯消毒的效果与紫外线强度、照射时间、温、紫外灯消毒的效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关，还需通过验证来确定。度与湿度等因素有关，还需通过验证来确定。5、注意事项：紫外线直射对眼、皮肤有损害。紫外、注意事项：紫外线直射对眼、皮肤有损害。紫外线照射过程中产生臭氧，臭氧过多对眼及鼻腔有刺线照射过程中产生臭氧，臭氧过多对眼及鼻腔有刺激，产生头晕、胸闷、血压降低，所以无菌室及净激，产生头晕、胸闷、血压降低，所以无菌室及净化工作台紫外线照射停止后，请稍等片刻，让臭氧化工
36、作台紫外线照射停止后，请稍等片刻，让臭氧消散，方可进行实验操作。消散，方可进行实验操作。（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v4、过滤灭菌：以物理的方法除去介质中的微、过滤灭菌：以物理的方法除去介质中的微生物。常将空气或液体中的微生物及杂质用生物。常将空气或液体中的微生物及杂质用不同材料制成的薄膜滤器过滤得到无菌、无不同材料制成的薄膜滤器过滤得到无菌、无杂质的空气或液体。杂质的空气或液体。v滤过病毒的滤膜孔径为滤过病毒的滤膜孔径为25 100nm；滤过细滤过细菌的滤膜孔径为菌的滤膜孔径为0.220.45m。九、生产环境的空气洁净度监测九、生产环境的空气洁净度监测 根据根据GMP的有的有关规定，洁净
37、关规定，洁净室分为四个等室分为四个等级，即级，即100级、级、10，000级区、级区、100，000级和级和300，000级，级，各级别的要求各级别的要求如下：如下：洁净度洁净度级别级别尘粒最大允许数尘粒最大允许数/立方米立方米微生物最大允许数微生物最大允许数0.5m5m浮游菌浮游菌/立立方米方米沉降菌沉降菌/皿皿100级级3,50005110,000级级350,0002,0001003100,000级级3,500,00020,00050010300,000级级10,500,00060,0001,00015九、生产环境的空气洁净度监测九、生产环境的空气洁净度监测v浮游菌和沉降菌测试浮游菌和沉降
38、菌测试 我国对医药工业洁净室和控制区的浮游菌和我国对医药工业洁净室和控制区的浮游菌和沉降菌的测试，国家标准有明确规定。沉降菌的测试，国家标准有明确规定。九、生产环境的空气洁净度监测九、生产环境的空气洁净度监测v浮游菌测试：浮游菌测试： 采用浮游细菌采样器采用浮游细菌采样器v原理：根据颗粒撞击原理，在抽气泵作用下，把采样空气中的原理：根据颗粒撞击原理，在抽气泵作用下，把采样空气中的细菌分离出来。空气中细菌一般在细菌分离出来。空气中细菌一般在1m左右，不同粒径的颗粒左右，不同粒径的颗粒有不同的冲击惯性。当空气通过狭缝加速后，气流速度大，有不同的冲击惯性。当空气通过狭缝加速后，气流速度大，0.5m以
39、上的粒子，由于惯性冲击到培养皿里的培养基上被粘以上的粒子，由于惯性冲击到培养皿里的培养基上被粘附，同时细菌被收集在培养基上，经培养后可成为肉眼可数的附，同时细菌被收集在培养基上，经培养后可成为肉眼可数的细菌菌落。细菌菌落。v采样流量：采样流量：50L/min 十万级区、化妆品控制区采样量为十万级区、化妆品控制区采样量为250L;万级区采样量为万级区采样量为500L；百级区采样量为百级区采样量为1000L.v计算及结果评定：平均浓度（个计算及结果评定：平均浓度（个/m3）=菌落数菌落数/采样量采样量 对照洁净级别中每对照洁净级别中每m3的浮游菌最大允许数来判定所测区域的的浮游菌最大允许数来判定所
40、测区域的洁净级别是否符合规定。洁净级别是否符合规定。九、生产环境的空气洁净度监测九、生产环境的空气洁净度监测v沉降菌测试：沉降菌测试： 通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，计算形成的菌落数。菌落进行计数，计算形成的菌落数。v计算及结果判定：计算及结果判定： 平均菌落数平均菌落数=各培养皿中的菌落总数各培养皿中的菌落总数/培养皿的个数培养皿的个数 对照洁净级别中每皿沉降菌的最大允许数来判定所测对照洁净级别中每皿沉降菌的最大允许数来判定所
41、测区域的洁净级别是否符合规定。区域的洁净级别是否符合规定。九、生产环境的空气洁净度监测九、生产环境的空气洁净度监测v尘粒数测定：尘粒数测定： 尘埃粒子计数器：根据微粒的光散射原理设尘埃粒子计数器：根据微粒的光散射原理设计而成；能够测出尘埃粒子的个数并能够区计而成；能够测出尘埃粒子的个数并能够区分颗粒的大小，从而计量出净化级别。分颗粒的大小，从而计量出净化级别。v根据仪器上显示的每立方米空气中的颗粒数根据仪器上显示的每立方米空气中的颗粒数对照洁净度级别中每对照洁净度级别中每m3的尘粒最大允许数来的尘粒最大允许数来判定所测区域的洁净级别是否符合规定。判定所测区域的洁净级别是否符合规定。问题问题 1
42、：每一次污染都能被发现吗？每一次污染都能被发现吗？v 能。做一次最终检查。能。做一次最终检查。v 不能。不能。问题问题 1：答案答案不能。不能。随机取样不可能检测全部产品；随机取样不可能检测全部产品；最终检查也可能出错。最终检查也可能出错。问题问题 2： 有一批产品被微生物污染，这有一批产品被微生物污染，这 能否被发现？能否被发现？v 能。提供这批产品的样品也被污染了。能。提供这批产品的样品也被污染了。v 可能。但不确定。可能。但不确定。v 肯定不能。因为这是不可见的污染。肯定不能。因为这是不可见的污染。问题问题 2：答案答案可能。但不确定。可能。但不确定。潜在的不可见的污染是可以通过检测到潜在的不可见的污染是可以通过检测到的，但不能确认污染肯定会被发现。因的，但不能确认污染肯定会被发现。因为，我们不能肯定在样品中会被检测到为，我们不能肯定在样品中会被检测到细菌是否存在。细菌是否存在。谢谢大家！谢谢大家！
