1、犬细小病犬细小病一、病因一、病因 犬细小病毒(CPV)入侵所致。 CPV结构特点: 犬细小病毒属细小病毒科,细小病毒属。 为负链单股DNA病毒,病毒粒子小,直径2022nm,无囊膜,病毒粒子呈二十面体立体对称,有3种衣壳蛋白VP1、VP2、VP3,其中VP2为主要成分。 右侧两图分别为犬细小病毒模式图和电镜扫描图。 CPV性质: 对外界理化因素的抵抗力非常强,能耐受6530min加热而不灭活,低温长期存放对其感染性并无明显影响,对氯仿、乙醚、醇类均有抵抗力,对其有效的消毒剂有福尔马林、次氯酸和氧化剂,此外紫外线也能使其丧失活性。二、传染源二、传染源 病犬和康复带毒犬。三、传播途径三、传播途径
2、一般认为该病的传染途径是消化道。 病犬和带毒犬通过粪便、尿液、唾液向外排毒,健康犬和患犬直接接触或摄入被病毒污染的食物、饮水后经消化道感染。四、发病特点四、发病特点 犬细小病毒感染发病急,病程短,对6月龄以下幼犬危害更大。国内报道死亡率40-70%,国内报道发病率90%,死亡率为50.7-66.7%,本病主要发生在6月龄以下的幼犬,冬季发病较多,其次为初春或深秋,夏季发病较少。 右图为六个月松狮犬的图片。五、致病机理五、致病机理 健康犬经消化道感染病毒后,病毒主要攻击两种细胞,一种是肠上皮细胞,一种是心肌细胞,分别表现胃肠道症状和心肌炎症状,心肌炎以幼犬多见。肠炎型表现往往为急性型急性型,病程
3、很短,甚至于早晨看到病犬依然精神良好精神良好,而到晚上则出现心律不齐,心力心律不齐,心力衰竭,呼吸困难而死去衰竭,呼吸困难而死去。六、常见症状六、常见症状以肠道出血肠道出血为主要特征,一般病初1-2d体温升高体温升高到40-41,呕吐物初为食物,后为粘液。体温后随病情发展而恢复正常,但其他症状加剧精神沉郁,食欲废绝,频繁呕吐,饮欲增强,频繁呕吐,饮欲增强,大量饮水后立即呕吐,贫血及严重脱大量饮水后立即呕吐,贫血及严重脱水水。绝大部分病犬肠道出血,排泄物犬肠道出血,排泄物有特殊的腥臭味有特殊的腥臭味,腹泻或者出血性腹腹泻或者出血性腹泻(番茄汁样)泻(番茄汁样)。患犬眼球凹陷,皮眼球凹陷,皮肤弹性
4、减退肤弹性减退,软弱无力,卧倒昏睡,多在一周内死亡。心肌炎型得犬细小病的犬的图片排出番茄酱色的血便昏睡犬细小病毒感染犬细小病毒感染犬细小病毒性肠炎感染犬常见症状番茄汁样血便排出后颜色变深空肠、回肠的出血性炎症空肠、回肠的出血性炎症【防治措施】1、病初尽快应用犬细小病毒单克隆抗体、高免血清肌肉注射。同时在5%葡萄糖(+Vc)中加入适量的病毒唑(利巴韦林)、病毒灵,头孢菌素(头孢唑林钠)、甲氧氯普胺(胃复安)地塞米松等抗病毒药物,或者可用庆大霉素或恩诺沙星注射液,静脉滴注。2、止泻:双八面体蒙脱石(思密达),维迪康3、呕吐:爱茂尔、硫酸阿托品等,一天内可用药多次以加强止吐效果,止血可用止血敏,维生
5、素k3或(立芷雪)等。4、补水:林格液或复方乳酸林格液与5%葡萄糖、ATP、辅酶A、Vc。预防和纠正机体水、电解质平衡紊乱十分重要,应根据病情科学地调整输液的成分与比例,并对患犬严格禁水、禁食。接种免疫效果可靠的疫苗是预防本病的有效措施。 犬细小病毒感染 预防本病主要依靠注射疫苗和严格犬的检疫制度。目前经常使用弱毒疫苗和灭活疫苗。 并多使用联合疫苗,如三联苗 (犬瘟热、犬细小病毒感染和犬传染性肝炎)和五联苗(犬瘟热、犬细小病毒感染、犬传染性肝炎、狂犬病和犬副流感),均能取得良好的预防效果。一般幼犬于7 78 8周龄,10101111周龄进行两次免疫,妊娠母犬在产前20d20d免疫一次,成年犬每
6、年接种二次。中药白乌汤:方剂白头翁15克,乌梅15克、黄连5克、黄柏5克、郁金10克,诃子10克。四黄郁金散:黄连30g,黄芩30g,黄柏30g,大黄30g,栀子30g,郁金30g,白头翁30g,地榆30g,猪苓30g,泽泻30g,白芍30g【治疗注意事项】临床表现出血性腹泻的患犬并非都是犬细小病毒感染,应根据流行病学特点,症状和采用CPV快速诊断试剂板等进行鉴别诊断。有效地止吐,止泻和止血,纠正脱水和贫血,能明显提高治愈率。胃复安是临床常用的止吐药,但不宜用于本病止吐,其促进胃肠正向蠕动的药理效应往往造成肠道大量出血。在患犬康复期避免饲喂肉类食物,如饲喂宠物肠道处方粮或低脂消化处方食品2-3
7、周,有利于肠黏膜再生和促进消化机能恢复。体外诊断试剂盒体外诊断试剂盒 1、ELISA试剂盒检测 2、CPV试剂盒快速诊断: 大致操作如下:取病犬粪便约1g盛入加有稀释液的试管中,充分振动静置5min,用吸管吸取犬细小稀释液后滴入一两滴于点样孔,若在对照区和检测区均出现红色带,则结果为阳性;若仅在对照区有红线,则结果为阴性。上为强阳性,下为阴性七、诊断方法七、诊断方法初步诊断细菌学检查血液学检查电镜检查血凝和血凝抑制试验体外诊断试剂盒PCR检测【诊断要点】以及典型的流行病学特点和临床症状,应当怀疑本病。CPV快速诊断试剂板是诊断本病的良好方法,取患犬粪便少量稀释后检测,可在5-10分钟内得出结果
8、。对死亡患犬剖检,主要表现小肠中后段出血性炎症。防止本病发生的最好措施,就是按要求进行预防接种。加强饲养管理和兽医卫生。幼犬平时饲养要加强饲管和护理,健康犬要严禁和病犬及其排泄物污染物接触。发现本病后,要及时采取综合性防疫措施,及时隔离病犬,对病犬的分泌物、排泄物及病死犬的尸体和环境进行严格消毒,对犬舍及用具等用2-4%火碱水或10-20%漂白粉液或杜邦消毒液反复消毒。治疗原则为应用抗体,抗菌抗病毒,消炎止血止吐;清理胃肠,调解胃肠功能,对症治疗。临床上主要是对症治疗配合高免血清和单克隆抗体治疗。成犬治愈率高,幼犬预后谨慎。八、预防与治疗八、预防与治疗九、检测原理九、检测原理 (一)双抗体夹心
9、法检测犬细小病毒抗原 (Au-Ab1)(Ab2)(IgG)CPV (二)双抗原夹心法检测犬细小病毒抗体 (Au-Ab)(Ag)(IgG)CPV抗体初步诊断初步诊断 通过问诊,确定病犬是否接触过患有犬细小病的病犬。根据临床症状,像频繁呕吐、剧烈腹泻、排出腥臭味的暗红色或番茄汁样的血便,进行初步诊断。细菌学检查细菌学检查 将典型病犬的心血、肝、脾等27份样品,接种于普通培养基和血液琼脂培养基,置37培养箱内培养13天,无致病性细菌生长。血液学检查血液学检查 1、肠炎型主要表现白细胞减少,发病35天的犬白细胞总数可降至降至3006000个/mm3,嗜中性白细胞减少,淋巴细胞相对增多。因胃肠道粘膜受损
10、,蛋白质缺失,造成低蛋白症,尤其是低蛋白症。心肌炎型病犬表现天门冬氨酸、转氨酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性增高。 2、病犬红细胞减至500万个/mm3以下,严重的不足100万个/mm3,血红蛋白降至8g/100ml以下,严重的仅有23g/100ml。电镜检查电镜检查 粪便用氯仿处理后以5000转/分分离10min,取上层液,滴于铜网上,用磷钨酸染色后于电镜下观察。病初可见到大小均一、散在的病毒粒子,感染期后,由于肠道出现粘膜分泌性抗体,是病毒呈聚集状态。血凝和血凝抑制试验血凝和血凝抑制试验1、血凝试验(HA):根据CPV对猪红细胞具有凝集的特性,检测粪样中CPV的存在
11、和凝集价。先将被检粪便做10倍稀释,加1/10氯仿,振摇处理12min,经3000r/min离心20min,取上清液用PBS做对倍稀释后,用平板法直接进行血细胞凝集试验。以出现50%红细胞凝集为终点,HA效价以出现终点凝集的样品最高稀释倍数表示,在抗体对照孔和稀释液对照孔均不凝集的前提下,测定排的HA效价比抑制排高2孔以上,说明该样品所引起的凝集是特异的,表示其中含有犬细小病毒,因而判定为犬细小病。2、血凝抑制试验(HI):去血清、腹水或乳汁样品加新洗的50%血细胞悬液后,混匀,于室温吸收1h,离心取上清液用PBS作对倍稀释后,用平板法直接进行试验。以完全不凝集为抑制终点,样品的HI效价以出现
12、终点抑制的最高稀释倍数表示,血清样品的HI效价表示对犬细小病毒的免疫水平,可作为该流行病学调查和免疫效果的重要指标。PCR检测检测 最新研究成果显示:建立可检测CPV病原的巢式PCR诊断技术,可不与犬流感病毒、狂犬病病毒、犬瘟热病毒、犬腺病毒发生交叉反应,能检测到10-9的CPV总RNA量,具有特异性强、灵敏度高、稳定性好的特性,但需要昂贵的仪器和试剂,操作繁琐,检测成本高,临床应用较少。诊断诊断病原学诊断病原学诊断 (1 1)犬瘟热:发病早期采淋巴组织,急性病例取胸腺、脾、肺、肝、淋巴结;呈脑炎症状者采小脑等病料,制成10%10%乳剂,经无菌处理后接种于犬肾原代细胞、鸡胚成纤维细胞或仔犬肺胞
13、巨噬细胞,进行分离病毒。用已知抗血清做病毒中和试验鉴定分离毒。也可用PCRPCR方法检查病原体。 (2 2)犬细小病毒感染:采粪便病料可先离心,再加入高浓度抗生素或过滤除菌,接种于原代或次代犬胎肾或猫胎肾细胞培养物或它们的细胞系进行培养。最简便的病毒鉴定方法是接种3 35d5d后用荧光抗体检测细胞中的病毒,用已知抗血清做HIHI试验鉴定分离的病毒。 (3 3)犬传染性肝炎:生前取发热初期的血液、扁桃体和尿液,死亡动物取肝、脾等病料,经无菌处理后,接种于犬肾原代细胞或传代细胞分离病毒。用已知抗血清做HIHI鉴定分离毒。血清学诊断血清学诊断 (1 1)犬瘟热:用已知抗原做病毒中和试验、琼脂扩散试验
14、和ELISAELISA等,检测血清中的抗体,以进行追溯性诊断。用已知荧光抗体鉴定分离的病毒。 (2 2)犬细小病毒感染:用已知抗原做血凝(HAHA)和血凝抑制(HIHI)试验、ELISAELISA,检测血清中的抗体,以进行追溯性诊断。 (3 3)犬传染性肝炎:用已知抗原做病毒中和试验、凝集抑制试验、补体结合试验,检测血清抗体,以进行追溯性诊断。 治疗治疗 1. 1. 犬瘟热 发热初期,给予大剂量高免血清,可收到较好的治疗效果。本病常继发细菌感染,因此,使用抗生素或磺胺类药物,可减少死亡,缓解病情。 2. 2. 犬细小病毒感染 多采用对症和支持疗法。最好选用犬细小病毒单克隆抗体和抗细小病毒高免血
15、清(2ml/kg2ml/kg),每48h48h肌肉注射1 1次,连用2 23 3次。同时应用病毒唑、病毒灵等抗病毒药物,效果更好。 3. 3. 犬传染性肝炎 早期用抗血清或康复犬的全血、血清或球蛋白进行治疗。作为支持疗法,每天用250250500ml500ml含5%5%水解乳蛋白的5%5%葡萄糖盐水输液,纠正水及电解质紊乱可静脉点滴糖盐水或林格尔氏液等。腹腔穿刺进行排液,口服利尿剂。防疫措施防疫措施 1. 1. 犬瘟热 平时加强兽医卫生防疫措施。坚持平时预防接种。疫苗种类: :单苗有犬瘟热鸡胚弱毒苗和三联苗( (犬瘟热、犬传染性肝炎和犬细小病毒) )。首免时间应测母源抗体( (病毒中和试验)
16、)滴度1:1001:100以下是首免的指示滴度。如果没有条件检测,则9 9周龄首免为宜。二免时间为1515周龄,以后每年免疫1 1次。用人的麻疹疫苗给幼犬接种效果较好。 2 2犬细小病毒感染 预防本病主要依靠注射疫苗和严格犬的检疫制度。目前经常使用弱毒疫苗和灭活疫苗。并多使用联合疫苗,如三联苗 (犬瘟热、犬细小病毒感染和犬传染性肝炎)和五联苗(犬瘟热、犬细小病毒感染、犬传染性肝炎、狂犬病和犬副流感),均能取得良好的预防效果。一般幼犬于7 78 8周龄,10101111周龄进行两次免疫,妊娠母犬在产前20d20d免疫一次,成年犬每年接种二次。 3. 3. 犬传染性肝炎 平时加强兽医卫生防疫措施。
17、预防接种用疫苗有弱毒苗和灭活苗两种。弱毒苗的首免时间为9 9周龄,二免时间为1515周龄,以后每半年免疫1 1次。免疫后1 111d11d出现轻度角膜混浊。另外,用人腺病毒IIII型弱毒苗免疫,免疫犬可获得较高的免疫保护力。提问与解答环节Questions And Answers谢谢聆听 学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折Learning Is To Achieve A Certain Goal And Work Hard, Is A Process To Overcome Various Difficulties For A Goal