1、乳腺癌HER2基因FISH检测的意义-乳腺癌在我国的发病情况乳腺癌在我国的发病情况1HER2作为乳腺癌预后和预测的指标作为乳腺癌预后和预测的指标2HER2状态的测定状态的测定3赫赛汀的应用赫赛汀的应用4内容-我国女性的乳腺癌发病率为20.1/10万- 近数十年来，国内、外在治疗方法上虽然经过了多方面的改进，但其病死率迄今并未见明显降低，可手术患者总的10 年生存率在40% 50% 左右，若手术时已经发生淋巴转移，则降为25% 左右- 早发现、早治疗，以及采取正确、有效的检测、治疗方式是治疗乳腺癌的关键-HER2人表皮生长因子受体2细胞膜细胞膜细胞质细胞质细胞外配体结合区细胞外配体结合区(632
2、 氨基酸氨基酸)跨膜区跨膜区(22氨基酸氨基酸)细胞内区细胞内区(580氨基酸氨基酸)具有酪氨酸激酶活性具有酪氨酸激酶活性- HER2 受体跨膜二聚体的信号传导途径信号传导信号传导至细胞核至细胞核细胞核细胞核接合部接合部酪氨酸激酶酪氨酸激酶活性部分活性部分细胞浆细胞浆细胞膜细胞膜生长因子生长因子癌基因活化癌基因活化细胞分裂细胞分裂-HER2过度表达1 = 1 = 基因拷贝数基因拷贝数2 = 2 = mRNA 转录转录3 = 3 = 细胞表面受体蛋白表达细胞表面受体蛋白表达4 = 4 = 细胞外受体功能域释放细胞外受体功能域释放A = HER2 DNAB = HER2 mRNAC = HER2
3、receptor protein正常正常扩增扩增/ /过度表达过度表达细胞核细胞核细胞质细胞质细胞膜细胞膜1234CBA-HER2 状态: 预示肿瘤对治疗的反应!HER2HER2阳性状态与乳腺肿瘤的预后差相关阳性状态与乳腺肿瘤的预后差相关!HER2HER2是肿瘤复发和总生存期长短的是肿瘤复发和总生存期长短的独立独立预后因子预后因子!HER2HER2是有别于肿瘤大小、淋巴结及激素受体外的是有别于肿瘤大小、淋巴结及激素受体外的重要重要预后因子预后因子-HER2阳性状态的患者无病生存期亦缩短1.001.000.750.750.500.500.250.25 0 00 24 48 72 96 120 0
4、 24 48 72 96 120 144144无扩增无扩增扩增扩增基因扩增基因扩增: 10 : 10 拷贝数拷贝数无基因扩增无基因扩增: 3: 3拷贝数拷贝数临界值临界值: : 不包括不包括死亡时间死亡时间 ( (月数月数) )Log rank p0.001Log rank p0.001100806040200无病生存概率无病生存概率死亡时间死亡时间 ( (月数月数) )HER2 HER2 基因基因 3 3 拷贝数拷贝数HER2HER2基因基因 3 3 拷贝数拷贝数对数秩检验对数秩检验 p=0.001p=0.001淋巴结阴性淋巴结阴性淋巴结阳性淋巴结阳性- HER2检测的准确性非常重要 检测方
5、法包括：免疫组织化学（IHC）、荧光原位杂交（FISH）、酶联免疫分析（EIA）、酶联免疫吸附分析（ELISA）、聚合酶链反应（PCR）等。 在上面提到的检测方法中FISH是其中一种比较可靠的检测方法。-vHER2状态测定方法的比较方法方法IHC冰冻冰冻/新鲜新鲜 组织组织IHC石蜡包埋石蜡包埋组织组织FISHELISA(血清血清)定量定量PCR测定异常目标测定异常目标蛋白过度表达蛋白过度表达蛋白过度表达蛋白过度表达基因扩增基因扩增蛋白过度表达蛋白过度表达基因扩增基因扩增可在切片上完成可在切片上完成是是是是是是否否否否受储存影响受储存影响是是是是否否否否否否可在穿刺活检标本可在穿刺活检标本中完
6、成中完成困难困难是是是是否否是是有商业化试剂盒有商业化试剂盒尚无尚无是是是是是是否否FDA批准批准不能针对治疗不能针对治疗可针对治疗可针对治疗可针对治疗及预后可针对治疗及预后否否是是-荧光原位杂交 Fluorescence In Situ Hybridization 是一种分子细胞遗传学技术，通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交。在荧光显微镜下，与细胞和（或）组织原位观察并分析细胞核内杂交于DNA靶序列的多种猜测探针信号，以获得细胞内多条染色体（或染色体片段）或多种基因状态的信息。-运用FISH方法检测基因扩增-FISH显示乳腺癌显示乳腺癌HER2基因的扩增数（桔红色信基因的扩
7、增数（桔红色信号为号为HER2基因，绿色信号为基因，绿色信号为17号染色体的着色颗号染色体的着色颗粒）粒）-目前HER2测定中的推荐意见FISHFISH重新检测重新检测FISHFISH3+3+0/1+0/1+2+2+IHCIHCFISHFISH重新检测重新检测-+ +- -+ +肿瘤标本肿瘤标本（石蜡包埋）（石蜡包埋）赫赛汀赫赛汀治疗治疗赫赛汀赫赛汀治疗治疗赫赛汀赫赛汀治疗治疗+ +-Fish信号计数指导表-IHC/FISH检测HER2基因正常正常正常正常HER2基因低度表基因低度表达达HER2基因高度表基因高度表达达01+2+3+-赫赛汀靶向HER2的人源化单抗95% 95% 人源化人源化,
8、 5% , 5% 鼠抗，具有高度亲和性鼠抗，具有高度亲和性 (K(Kd d=0.1nM) =0.1nM) 和和特异性，显著降低免疫原性特异性，显著降低免疫原性( (HAMA)HAMA)用于治疗用于治疗HER2阳性乳腺癌阳性乳腺癌-赫赛汀作用机制HER2 HER2 过度表达细胞过度表达细胞赫赛汀赫赛汀 与与HER2HER2受体结合受体结合生长信号生长信号 被被阻断阻断抑制肿瘤抑制肿瘤 细胞生长细胞生长-赫赛汀赫赛汀 与过度与过度表达表达HER2HER2受体的受体的细胞表面结合细胞表面结合诱导诱导NKNK细胞和巨细胞和巨噬细胞攻击肿瘤噬细胞攻击肿瘤细胞细胞NKNK细胞和巨噬细胞细胞和巨噬细胞释放各种活性因子释放各种活性因子溶解肿瘤细胞溶解肿瘤细胞巨噬细胞NK细胞-赫赛汀一线联合多西紫杉醇延缓疾病进展时间生存概率生存概率赫赛汀赫赛汀 +多西紫杉醇多西紫杉醇 多西紫杉醇多西紫杉醇1.00.80.60.40.20 036912151821242730时间时间 (月月)Extra et al. Eur J Cancer. 2004:125. -
