1、农药生物测定植物科学技术学院农药生物测定教学基本思路n一、理论课教学: 1 原则性内容 2 原理性内容n二、实验课教学: 1 技术性步骤 2 经验性关键 1 杀虫剂毒力测定n胃毒剂毒力测定n内吸剂毒力测定n触杀剂毒力测定n薰蒸剂毒力测定n忌避剂毒力测定2 杀菌剂毒力测定n不同类型杀菌剂的毒力测定n不同供试病原菌材料的毒力测定方法n抗病毒剂的毒力测定方法n盆栽植物的杀菌剂效力测定3 除草剂毒力测定n除草剂的常用生物测定方法 小麦根长法、高梁根茎法、稗草胚轴法n除草剂的生物测定技术应用 作用特性测定、作物安全性测定、 持效性测定、混用联合毒力测定4 植物生长调节剂的活性测定n 生长素或赤霉素的活性
2、测定 (如达丰素)5农药室内毒力测定结果的统计分析n毒力的表示及数据的取得和计算n毒力回归式的理解及显著性测定n农药联合毒力测定方法及毒效判定n常用统计分析软件介绍6农药田间药效试验的设计及数据处理n农药田间药效试验的基本原则n不同类别的农药田间药效试验技术 杀虫剂、杀菌剂、除草剂n不同防治对象的农药田间药效试验技术n农药田间药效试验的数据取得及计算n农药田间药效试验效果分析及评判 第一章 杀虫剂的毒力测定第一节 杀虫剂毒力测定的一般原理第二节 试虫处理第三节 常见杀虫剂的毒力测定方法 第一节 杀虫剂毒力测定 的一般原理1 杀虫剂毒力测定的基本原则2 试虫选择3 环境条件的控制4 杀虫剂的要求
3、第一节 杀虫剂毒力测定 的一般原理1 杀虫剂毒力测定的基本原则11 要尽可能选择遗传背景一致,个体 间生理状况相近的目标昆虫;12 要在相对一致的环境条件下进行;13 必须设立对照14 必须设重复第一节 杀虫剂毒力测定 的一般原理2 试虫选择 21 发育阶段不同,对药剂敏感性不同 对药剂的敏感性: 幼虫成虫蛹卵 ; 低龄幼虫高龄幼虫 22 性别与生殖状态不同,对药剂敏感性不同 对药剂的敏感性:雄性成虫雌性成虫 ; 产卵后产卵前2 试虫选择23 生理因素 对药剂敏感性:越冬期的虫态不敏感 ; 体重不一样,敏感性不一样24 种群异质性 指同一种群中的不同个体,对药剂敏感性存 在的差异。 如果差异不
4、大,一般称之异质性小, 如果差异大,一般称之异质性大 毒力测定一般以选择异质性小的种群为最好。 第一节 杀虫剂毒力测定 的一般原理3 环境条件的控制31 温度 正温度系数 、负温度系数32 湿度、水分 如粉剂 33 光照 间接的影响(增加活动和取食)34 营养与饥饿 取食不同植物的甜菜夜蛾对药剂的敏感性; 饥饿对胃毒剂的测定;35 其它环境条件 容器、溶剂、药剂含量、药剂处理部位、试验检查时间和效应标准;试虫的随机分组第一节 杀虫剂毒力测定 的一般原理4 对杀虫剂的要求 最好是化学纯的化合物; 一般不用制剂、工业品。 第二节 试虫处理 1 试虫选取原则 2 试虫移取方法 3 效果检查方法 第二
5、节 试虫处理1 试虫选取原则11 试虫群体质量均匀一致 (如龄期、体重、性别)12 病弱伤的个体淘汰 (如感病的、有机械伤残的、 自相残杀受伤者)第二节 试虫处理2 试虫移取方法21 一般移取法 用毛笔移取蚜虫、螨类;用镊子移取鳞翅目昆虫的幼虫22 趋光法 对有趋光性的成虫或幼虫可采用 2 试虫移取方法 23 麻醉法 对飞翔、活动能力强的试虫231 CO2法 用CO2或用CO2和空气按3:1的比例混合气体麻醉试虫。 方法:在一个密闭的容器里放入 CO2,然后再放入试虫,经一定时间后取出即可。23 麻醉法232 挥发蒸汽法 CCl3与C2H5OH(1:1)、CCl3与C2H4O(1:1)、C2H
6、4O与C2H5OH(1:1)或单独用C2H6O等, 方法:在一个干燥器内放入配好的麻醉剂,然后放入试虫,一定时间后将麻醉了的试虫拿出来即可。 麻醉时间依虫而定,家蝇一般为4min时间。 23 麻醉法 233 冷冻法 一般将试虫于5条件下冷冻10min,再移至0条件下冷冻2-3min 。234 乙醚低温麻醉法 用乙醚将试虫麻醉后,置于垫有冰块的器皿上,以保持试虫的冷冻状态。2 试虫移取方法 24 吸虫法 对活动能力不大易受机械损伤的目标昆虫(如杂拟谷盗、米象、蚜虫、虫卵)25 自行迁移移虫法 利用初孵幼虫趋光或吐丝下垂的习性、枯萎叶上的虫子会向新鲜叶片上迁移。 第二节 试虫处理3 效果检查方法3
7、1 以检查活虫数推知死虫数(对一些喜温试虫,为防止隐藏可采取加温的方法促其增加活动性)32 根据药剂处理死虫的特异性,对药后活虫取麻醉法将其麻醉或采取薰蒸剂其薰死的方法。 第三节 杀虫剂毒力测定方法n1 胃毒剂毒力测定方法n1.1 无限取食法n1.1.1 饲料混药法 谷盗、米蛾等仓库害虫。n1.1.2 培养基混药法 果蝇、家蝇等的冻胶混药法n1.1.3 土壤混药法 n 地下害虫n 药剂与土壤按一定比例混合装钵,再播作物种籽。每钵接入一定量的试虫。 1 胃毒剂测定方法n1.1 无限取食法n1.2 定量取食法n1.2.1 叶片荚毒法 吞食面积(mm2 ) x 药量(ul/mm2 ) n吞食药量=-
8、 昆虫体重(g)1 胃毒剂测定方法n1.2 定量取食法n1.2.1 叶片荚毒法n1.2.2 液滴饲喂法 家蝇、果蝇、蜜蜂等n将一定的药剂加入到糖浆或糖汁中,再用微量注射器形成液滴,(0.01-0.001ml)饲喂目标昆虫。或不用微量注射器,可将形成的液滴放于玻片上,称重,供舐食,完后再称重,以确定试虫的取食量。第三节 杀虫剂毒力测定方法n1 胃毒剂毒力测定方法n2 触杀剂毒力测定方法n2.1 直接施药法n2.1.1 喷粉法和喷雾法n2.1.1.1 沉降喷雾塔n2.1.1.2 P0tter喷雾塔n2.1.1.3 喷粉玻璃钟罩n2.1.1.4 真空喷粉器2 触杀剂毒力测定方法n2.1 直接施药法n
9、2.1.1 喷粉法和喷雾法n2.1.2 浸渍法 叶片浸渍、试虫浸渍、连叶带虫浸渍n2.1.3 玻片浸渍法 2 触杀剂毒力测定方法n2.1 直接施药法n2.2 局部施药法n2.2.1 药膜施药法 滤纸、容器、蜡纸粉膜n2.2.2 点滴法 微量点滴仪、微量点滴器(手持、电动) 毛细管微量点滴器第三节 杀虫剂毒力测定方法n1 胃毒剂毒力测定方法n2 触杀剂毒力测定方法n3 熏蒸剂毒力测定方法n3.1 二重皿法 (用大小两个皿)n3.2 广口瓶法 (用两个广口瓶以细管对接,一力虫,一边药)n3.3 药纸熏蒸法n 药剂滴于小滤纸片上,用大头针固定,另一头插入三角瓶的软木赛上悬掉于三角瓶的1/3处,试虫置
10、于三角瓶内,一定时间后取出。 3 熏蒸剂毒力测定方法n3.1 二重皿法n3.2 广口瓶法n3.3 药纸熏蒸法n3.4 三角瓶法( 罩熏蒸法、干燥瓶熏蒸)n药是置于瓶底,试虫装于小容器中悬掉于软木塞上第三节 杀虫剂毒力测定方法n1 胃毒剂毒力测定方法n2 触杀剂毒力测定方法n3 熏蒸剂毒力测定方法n4 内吸剂毒力测定方法n 凡是可以通过植物根、茎、叶以及种子等部位渗入植物内部组织,随着植株体液传导至整个植株,不妨碍植物的生长发育,而对害虫具有很高毒效的化学物质,即称为内吸性杀虫剂。4 内吸剂毒力测定方法n4.1 直接测定法 4.2 简接测定法n4.1.1 根系内吸法n 将药剂混于土壤或营养液中,
11、由植物的根系吸取收。n 即可连续使根系吸药,也可让根系吸收一定时间后,取出置于无药剂的营养液内观查。4 内吸剂毒力测定方法n4.1 直接测定法 4.2 简接测定法n4.1.1 根系内吸法n4.1.2 叶部内吸法n 叶部内吸法主要用来测定药剂在植株体内的横向传导作用。n 叶片全面施药、叶片局部施药、叶柄施药4 内吸剂毒力测定方法n4.1 直接测定法 4.2 简接测定法n4.1.1 根系内吸法n4.1.2 叶部内吸法n4.1.3 茎部内吸法n 药剂涂于植株茎部,以观查植株上部枝叶上的杀虫毒效。 用毛笔涂茎、给树木包裹。4 内吸剂毒力测定方法n4.1 直接测定法 4.2 简接测定法n4. 1. 1
12、根系内吸法n4. 1. 2 叶部内吸法n4. 1. 3 茎部内吸法n4. 1. 4 种子内吸法n 通过浸种或拌种,使药剂随种子吸收水份进入种子内部,待种子发芽随后行长内渗至组织内部而发挥毒杀效力。4.1 直接测定法n4. 1. 4 种子内吸法n药液量为种子量的2倍浸种 取出洗净表面药液 立即播种 幼苗长出真叶后接种一定数量的试虫 24h或48h观查试虫死亡情况。4 内吸剂毒力测定方法n4.1 直接测定法 n4.2 简接测定法n 微量药剂内吸并不一定会引起昆虫死亡,即使有内吸作用,可能也测不出毒效,因此,采取简接测定法就比较合适。n 将药剂处理后的植物,研磨成水悬液加在水中,再接入蚊子幼虫,根据
13、蚊子幼虫的死亡情况测定其内吸毒效。4.2 简接测定法n简接测定内吸作用的方法: n 将植物根系插入药液中 一定时间后剪下植株定量叶片加以研磨(20g叶用400ml水) 加入水中(计算加入水中的不同浓度药液) 再接入蚊子幼虫 一定时间后观查试虫死亡情况。第三节 杀虫剂毒力测定方法n1 胃毒剂毒力测定方法n2 触杀剂毒力测定方法n3 熏蒸剂毒力测定方法n4 内吸剂毒力测定方法n5 忌避剂毒力测定方法n 忌避剂的测定方法可以根据不同的目标昆虫采用不同的施方法,如浸渍法、喷雾法、喷粉法均可。5 忌避剂毒力测定方法n基本原理:n 将定量的药剂均匀施于植株叶片上,再接入一定量的目标昆虫,置于正常环境中,定期观查目标昆虫的取食情况,用坐标纸法测量被目标昆虫取食面积(mm2 ),然后计算忌避程度。5 忌避剂毒力测定 处理叶被食面积( mm2 ) 忌避程度=(1- -)x100% 对照叶被食面积( mm2 ) 忌避程度的值越大,其忌避程度就越高也可用拒食率来表示: 处理叶片的取食率拒食率(%) =- 处理叶片及未处理叶片的总取食率 拒食率越小,说明拒食作用越强。