1、1微生物实验课注意事项微生物实验课注意事项 禁止禁止不穿白大衣进入实验室； 禁止禁止在实验室内吃东西、吸烟；不得高声喧哗，随 处走动； 严禁严禁用酒精灯点燃酒精灯； 严禁严禁把实验室内任何物品带出室外； 病原材料病原材料污染桌面、地板等或误吸入口，应立即报告教师进行处理； 爱护实验仪器设备，损坏仪器要赔偿损坏仪器要赔偿； 实验完毕，废弃物放入指定地点，桌面理清洁，洗手后方可离室。值日同学负责打扫实验室值日同学负责打扫实验室，并关好水电、门窗方可离开。2022-5-1312实验一 革兰染色法2022-5-1323细菌染色的方法细菌染色的方法 单染法单染法: :采用一种染料染色采用一种染料染色,
2、,只能观察细菌的形态和只能观察细菌的形态和排列特征，不能观察细菌的染色特性和进行鉴别。排列特征，不能观察细菌的染色特性和进行鉴别。 复染法（鉴别染色）复染法（鉴别染色）: :采用两种或两种以上的不同采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色，使染料进行先后染色，使不同种类不同种类的细菌、同种细的细菌、同种细菌的菌的不同结构不同结构，分别，分别染上不同染上不同的颜色，以便鉴别的颜色，以便鉴别细菌。细菌。2022-5-1334革兰染色法革兰染色法2022-5-1345革兰染色法的原理革兰染色法的原理2022-5-1356实验材料与方法实验材料与方法2022-5-13672022-5-1378初染初染
3、1min1min结晶紫结晶紫媒染媒染1min1min碘液碘液脱色脱色15-20s15-20s复染复染1min1min复红复红/ /苯酚苯酚95%95%乙醇乙醇G+G-革兰氏染色步骤与现象革兰氏染色步骤与现象注意：每一步染色后水冲，甩干水每一步染色后水冲，甩干水2022-5-1389P3P32022-5-13910酒精脱色。酒精脱色。 过度过度， 过短过短，。 染色过程中勿使染色液稀释染色过程中勿使染色液稀释。选用幼龄的细菌。选用幼龄的细菌。2022-5-131011a. a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。b. b.用擦镜纸沾少许二甲苯（用擦镜纸沾少许二甲苯（ ）将
4、镜头擦将镜头擦2-32-3次。次。c. c.再用干净的擦镜纸将镜头擦再用干净的擦镜纸将镜头擦2-32-3次。次。2022-5-131112金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(10100)大肠杆菌大肠杆菌(10100)染色结果染色结果2022-5-131213染色结果螺形菌Spiral bacterium2022-5-131314革兰染色意义革兰染色意义鉴别细菌鉴别细菌选择抗菌药物选择抗菌药物研究细菌的研究细菌的致病性致病性2022-5-131415选择抗菌药物选择抗菌药物 常见的革兰氏阳性菌常见的革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球金黄色葡萄球菌菌、表皮葡萄球菌等）、链球
5、菌属（、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（肺炎链球菌肺炎链球菌、草绿色、草绿色链球菌、链球菌、肠球菌肠球菌等）、白喉杆菌、等）、白喉杆菌、炭疽杆菌炭疽杆菌、破伤风杆菌破伤风杆菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要等病原菌床重要等病原菌 革兰氏阳性菌通常对革兰氏阳性菌通常对青霉素类、第一（或第二）代头孢菌青霉素类、第一（或第二）代头孢菌素素等高度敏感等高度敏感 ，青霉素可为化脓性细菌感染可首选药物，青霉素可为化脓性细菌感染可首选药物 。2022-5-131516选择抗菌药物选择抗菌药物 常见的革兰氏阴性菌常见的革兰氏阴性菌：沙门氏
6、菌属、志贺氏菌属（：沙门氏菌属、志贺氏菌属（痢疾痢疾杆菌杆菌等）、嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆等）、嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、菌等）、霍乱弧菌霍乱弧菌等。革兰氏阴性菌在院内感染中的细等。革兰氏阴性菌在院内感染中的细菌感染中占了大约菌感染中占了大约65%65%，且大多菌株容易对抗菌药物耐，且大多菌株容易对抗菌药物耐药药 革兰氏阴性菌对革兰氏阴性菌对第三代头第三代头孢、孢、氨基糖苷类、抗假单胞菌氨基糖苷类、抗假单胞菌属的青霉素类、多粘菌素属的青霉素类、多粘菌素等高度敏感，对头霉素类和第等高度敏感，对头霉素类和第二代头孢菌素也较敏感。例如氟哌酸对革兰染色阴性杆二代头孢菌
7、素也较敏感。例如氟哌酸对革兰染色阴性杆菌有效，如肠道病、腹泻为常用药菌有效，如肠道病、腹泻为常用药 。 2022-5-131617研究细菌的致病性研究细菌的致病性 革兰阳性菌可产生革兰阳性菌可产生外毒素外毒素使人使人致病。致病。 革兰阴性菌主要以革兰阴性菌主要以内毒素内毒素使人使人致病致病。（。（ LPSLPS作为作为G-G-菌内毒菌内毒素致病素致病 ）2022-5-131718实验实验步骤步骤 观看鞭毛、荚膜、芽孢的示范片观看鞭毛、荚膜、芽孢的示范片 绘图、写实验报告绘图、写实验报告2022-5-131819 芽胞芽胞(nuclear material ornucleoid)(nuclear
8、 material ornucleoid)枯草杆菌芽孢的观察枯草杆菌芽孢的观察芽孢：休眠体，不利环境下产生，耐受各种极端环境。芽孢：休眠体，不利环境下产生，耐受各种极端环境。2022-5-131920 荚膜（荚膜（capsule)capsule)荚膜：多糖，包裹在菌体外围，保护菌体荚膜：多糖，包裹在菌体外围，保护菌体2022-5-132021细菌鞭毛的观察细菌鞭毛的观察鞭毛：运动，菌落形态。鞭毛：运动，菌落形态。2022-5-132122本次实验课结束本次实验课结束请确保油镜头擦拭干净请确保油镜头擦拭干净交作业，值日同学留下交作业，值日同学留下下周实验课（细菌的人工培养）下周实验课（细菌的人工培养）再见！再见！2022-5-1322
