1、尿液化学检查尿液化学检查（尿蛋白的检验）（尿蛋白的检验）河南科技大学第二附属医院河南科技大学第二附属医院王善龙尿液化学检查 尿液化学检验包括尿液化学检验包括酸碱度、酸碱度、蛋白质、糖、蛋白质、糖、酮体、胆色素、酮体、胆色素、酶、酶、激素等检查激素等检查pHpH、PROPRO、GLUGLU、 KET KET 、BILBIL、UROURO 本节要点 了解尿液特殊化学检验的项目方法了解尿液特殊化学检验的项目方法及临床意义及临床意义 掌握尿液一般化学检验的原理掌握尿液一般化学检验的原理 重点掌握尿液一般化学检验中蛋白、重点掌握尿液一般化学检验中蛋白、糖、酮体及三胆等的注意事项及临糖、酮体及三胆等的注意
2、事项及临床意义床意义 尿液蛋白质尿液蛋白质检查健康人尿中的蛋白质含健康人尿中的蛋白质含量甚微量甚微（30130mg/24h), ), 当尿液中蛋白质当尿液中蛋白质100mgL或或150mg/24h时时, ,蛋白定蛋白定性为阳性，称为蛋白尿性为阳性，称为蛋白尿尿蛋白定性检测方法1.1.加热乙酸法加热乙酸法2.2.磺基水杨酸法磺基水杨酸法3.3.干化学试带法干化学试带法干化学法指示剂蛋白质误差指示剂蛋白质误差原理，原理，19091909年年SoerensenSoerensen发现发现成分成分1.1.主要酸碱指示剂溴酚主要酸碱指示剂溴酚蓝（阈值蓝（阈值.2.2）2.2.柠檬酸缓冲系统柠檬酸缓冲系统3
3、.3.表面活性剂表面活性剂 19711971年日本生产对白蛋年日本生产对白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白、球蛋白、本周氏蛋白均反应白均反应19931993年生产出免疫学方年生产出免疫学方法法干化学法-指示剂蛋白质误差原理 1909年Soerensen发现3，3?，5，5-四溴苯酚磺酰酞 尿蛋白试剂带组成及特性试带法检测尿蛋白的干扰因素仅作为过筛实验不同对尿蛋白的影响青霉素对蛋白质测定影响大剂量青霉素滴注后对试带法测定尿蛋白的影响h后检测尿蛋白加热醋酸法测定尿蛋白 加热可使蛋白质变性凝固，加酸加热可使蛋白质变性凝固，加酸使蛋白质接近等电点，在含有使蛋白质接近等电点，在含有适适量无机盐的情况下量无机盐的
4、情况下，蛋白沉淀，蛋白沉淀u 标本要新鲜，陈旧尿液因大量细菌生长可引起假标本要新鲜，陈旧尿液因大量细菌生长可引起假阳性阳性, ,其他分泌物也可能出现假阳性其他分泌物也可能出现假阳性u 加酸过多或过少远离蛋白质等电点加酸过多或过少远离蛋白质等电点, ,可呈假阴性可呈假阴性u 无盐或低盐饮食的病人，因尿内电解质含量少，无盐或低盐饮食的病人，因尿内电解质含量少，不利蛋白质沉淀，可致假阴性。可先加不利蛋白质沉淀，可致假阴性。可先加- -滴饱滴饱和氯化钠液后再操作和氯化钠液后再操作u 严格按照加热加酸再加热程序，否则假阴性严格按照加热加酸再加热程序，否则假阴性加热乙酸法注意事项磺基水杨酸法 试管法试管法
5、 玻片法玻片法磺基水杨酸法-干扰因素假阳性假阳性1.1. 尿液混浊尿液混浊 含有大量尿酸、尿酸盐、草酸盐含有大量尿酸、尿酸盐、草酸盐2.2. 一些药物如大剂量青霉素、含碘造影剂、一些药物如大剂量青霉素、含碘造影剂、降血糖药可呈假阳性降血糖药可呈假阳性3.3. 混入生殖系统分泌物混入生殖系统分泌物假阴性假阴性1.1. 尿液过碱（尿液过碱（PH9)PH9)或过酸（或过酸（PH3)PH3)大剂量青霉素滴注后对磺基水杨酸法测定尿蛋白的影响尿蛋白定性实验方法学评价 在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的，建议使用磺基水杨酸（加热醋酸）和双缩尿法对单纯球蛋白有特殊反应对单纯球蛋白有特殊反应尿液蛋白质的定
6、量检验 比浊法比浊法磺基水杨酸磺基水杨酸三氯乙酸三氯乙酸钨酸钨酸氯化苄甲乙氧胺氯化苄甲乙氧胺氯化苯甲烃胺氯化苯甲烃胺 双缩脲法：经典方法双缩脲法：经典方法通过加酸于尿液中使蛋白通过加酸于尿液中使蛋白质沉淀而形成一定的浊度质沉淀而形成一定的浊度碱性环境下，蛋白质与季碱性环境下，蛋白质与季胺盐结合形成不溶性沉淀胺盐结合形成不溶性沉淀染料染料结合法结合法直接法直接法考马斯亮蓝考马斯亮蓝G-250G-250邻苯三酚红邻苯三酚红染料和蛋白质结染料和蛋白质结合时，其最大吸合时，其最大吸收峰发生漂移收峰发生漂移沉淀法沉淀法丽春红丽春红S S苯胺蓝苯胺蓝蛋白质与结合的染料在TCA的作用下共沉淀。然后碱性环境使
7、沉淀复溶，测定吸光度 免疫法免疫法 电泳法电泳法尿液蛋白质定量检验方法评价临床意义 定性试验（定性试验（） 定量试验：定量试验：150mg/24h(100mg/L)150mg/24h(100mg/L)临床意义生理性蛋白尿生理性蛋白尿功能性蛋白尿功能性蛋白尿直立性蛋白尿直立性蛋白尿 摄入性蛋白尿摄入性蛋白尿 老年性蛋白尿老年性蛋白尿 妊娠性蛋白尿妊娠性蛋白尿 临床意义 病理性蛋白尿病理性蛋白尿1.1.肾前性蛋白尿肾前性蛋白尿2.2.肾性蛋白尿肾性蛋白尿肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿3.3.肾后蛋白尿肾后蛋白尿临床意义 肾前性蛋白尿肾前性蛋白尿-溢溢出性蛋白尿出性蛋白尿血
8、液中低分子量蛋白血液中低分子量蛋白质如血红蛋白、肌红质如血红蛋白、肌红蛋白、本周氏蛋白等蛋白、本周氏蛋白等增加超出肾小管重吸增加超出肾小管重吸收能力收能力临床意义 肾性蛋白尿肾性蛋白尿1.1.肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿选择性蛋白尿选择性蛋白尿非选择性蛋白尿非选择性蛋白尿2.2.肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿3.3.混合性蛋白尿混合性蛋白尿肾小球性蛋白尿选择性蛋白尿选择性蛋白尿 1.1. 4949万中分子量蛋白，以清蛋白为主万中分子量蛋白，以清蛋白为主2.2. 可见分子量接近的可见分子量接近的AT、Tf、PA ，1-AG、1-AT以及低分子量蛋白以及低分子量蛋白2-MFC片段等片段等3.3. 不
9、见分子量大的蛋白如不见分子量大的蛋白如IgG、 IgA、 IgM、C34.4. 尿免疫球蛋白清蛋白的比值尿免疫球蛋白清蛋白的比值3.5g/L5.5. 主要见于肾病综合症主要见于肾病综合症肾小球性蛋白尿非选择性蛋白尿非选择性蛋白尿1.1. 可见可见99万的蛋白如万的蛋白如IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、C3C3和中分子量以及和中分子量以及小分子量蛋白小分子量蛋白2-2-MGMG2.2. 免疫球蛋白清蛋免疫球蛋白清蛋白比值白比值0.50.53.3. 尿蛋白尿蛋白+，定，定量量0.53g/L0.53g/L4.4. 多见于多见于1.1.原发性肾小球疾原发性肾小球疾病：激进性肾炎、病：激进性肾
10、炎、慢性肾炎、膜性慢性肾炎、膜性或膜增生性肾炎或膜增生性肾炎2.2.继发性肾小球肾继发性肾小球肾炎：糖尿病、红炎：糖尿病、红斑狼疮斑狼疮提示预后差提示预后差肾小管性蛋白尿1.1. 尿中蛋白以尿中蛋白以1 1-M-M、2 2-M-M、LZMLZM、RNaseRNase增多为主，增多为主，清蛋白正常或轻度增多清蛋白正常或轻度增多2.2. 尿蛋白尿蛋白+，定量，定量22g/Lg/L3.3. 试带法可出现假阴性，试带法可出现假阴性，其他方法阳性其他方法阳性肾小管性蛋白尿1.1.肾小管间质病变肾小管间质病变a)a)间质性肾炎、肾盂间质性肾炎、肾盂肾炎、遗传性肾小肾炎、遗传性肾小管疾病、慢性失钾管疾病、慢
11、性失钾性肾病性肾病b)b)中毒性肾间质性肾中毒性肾间质性肾病病 重金属中毒重金属中毒苯、四氯化碳有苯、四氯化碳有机溶剂机溶剂抗生素抗生素中草药：马兜铃、中草药：马兜铃、木通木通c)c)器官移植器官移植马兜铃混合性蛋白尿 肾脏病变累及肾小球和肾肾脏病变累及肾小球和肾小管，由此产生的蛋白尿小管，由此产生的蛋白尿称为混合性蛋白尿称为混合性蛋白尿 标题标题1 1非选择性肾小球性蛋白尿伴游非选择性肾小球性蛋白尿伴游离轻链离轻链; ;2 2肾小管性蛋白尿伴游离轻链肾小管性蛋白尿伴游离轻链3 3生理性蛋白尿生理性蛋白尿4 4混合性蛋白尿混合性蛋白尿5 5选择性肾小球性蛋白尿选择性肾小球性蛋白尿图1 SDS-PAGE电泳图谱肾后蛋白尿1.1.组织性蛋白尿组织性蛋白尿 在尿液代谢过程中，肾小在尿液代谢过程中，肾小管代谢产生的和肾组织破管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白，以及炎症坏分解的蛋白，以及炎症或药物刺激泌尿系统分泌或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白（的蛋白（T-HT-H）2.2.偶然性蛋白尿偶然性蛋白尿 尿道炎、出血、混有阴道尿道炎、出血、混有阴道分泌物或精液分泌物或精液 想一想想一想 患者尿蛋白长期持续增高会有什么临床患者尿蛋白长期持续增高会有什么临床表现？表现？谢谢！谢谢！
