1、合格的血涂片镜检可为疾病提供明确的诊断方向血涂片制备 制备厚薄适宜,分布均匀,头体尾分明血涂片的关键是:依据血常规中有核细胞数量的多少 ,来调节推片角度,有核细胞数量越多,角度变小,推出来的片子就薄,细胞就容易分散,反之有核细胞数量少就要推厚一点。涂片染色原理 目前血细胞染色一般是用瑞氏-姬姆萨染色。瑞氏染粉中的酸性染料( 曙红 )和细胞中的碱性物质结合并染成红色;其中的碱性染料(亚甲蓝)和细胞中酸性物质结合染成蓝色;姬姆萨染粉加强了天青的作用,对细胞核和寄生虫着色较好。染色不理想见于以下几种情况 染色时间不当:太长,甚至干了,才去冲洗,导致片子上有大块染料沉渣,有的覆盖到细胞上;同时染色时间
2、太长会导致核染色质收缩,舒展不开,细胞核颜色染得太深,染色质和副染色质区分不开,胞浆颗粒也染得太深,与中毒颗粒不易区分;染色时间太短,细胞未完全着色,模糊不清。染色液和缓冲液比例不当:染色液多,缓冲液少,亦可核染色质收缩,同时片子也比较容易干(原因是甲醇比水蒸发快);反之细胞未完全着色。 染色液和缓冲液之间时间掌握不当:太短,对核影响大,核染色质着色不均,有成块的突起;太长,会有染料沉渣,核染色质收缩变形。 冲洗环节看来很简单,有的人把染液倒掉后,再慢腾腾地冲洗,这样染色液表面漂浮的染料就会附着在玻片上,留下染料沉渣。 不根据涂片厚薄,来调整染色时间。 怎样才能染出合格的片子呢? 不能照搬参考
3、书、说明书操作,要根据有核细胞数量的多少、血涂片的厚薄来分配染色液和缓冲液比例及染色时间要点一定要根据骨髓中有核细胞数量的多数,来决定每一步的染色时间 。让染色液与细胞有充分的时间接触,再加缓冲液。染色液着色时间不能太长,因为甲醇挥发比水快,时间太长甲醇挥发,有染料沉渣。甲醇的作用 甲醇是染料的溶剂。 对细胞起到固定作用镜检 初步判断血细胞数量多少 观察血细胞形态弥补血细胞计数仪不准确 血小板计数减少- EDTA依赖性血小板减少 白细胞计数不准确-新生儿高胆红素血症验证网织红细胞计数 嗜多色成熟红细胞数量与网织红细胞有正相关性,血涂片染色是否理想直接影响嗜多色成熟红细胞的辨认可以为疾病的诊断提供依据 原幼细胞-白血病 异型淋巴细胞-病毒感染 嗜多色成熟红细胞-再障、溶贫 寄生虫-疟原虫 红细胞形态-骨纤、地中海贫血、缺铁性贫血 缗钱状红细胞出现-免疫球蛋白增多病例