1、DNA的粗提取和鉴定2022-5-211目的要求目的要求 1 1、了解从细胞中提取、了解从细胞中提取DNADNA的基本的基本原理原理 2 2、初步掌握、初步掌握DNADNA的粗提取和鉴定的粗提取和鉴定的方法的方法 3 3、观察提取出来的、观察提取出来的DNADNA2022-5-212实验思路实验思路 1 1、DNADNA从哪提取?从哪提取? 2 2、怎样将、怎样将DNADNA与细胞中的其他物质分与细胞中的其他物质分离?离? 3 3、怎样鉴定我们提取的、怎样鉴定我们提取的DNADNA?2022-5-213实验原理实验原理 1. DNA1. DNA在在NaClNaCl溶液中的溶解度,是随着溶液中的
2、溶解度,是随着NaClNaCl的浓度的浓度的变化而改变的。当的变化而改变的。当NaClNaCl的物质的量浓度为的物质的量浓度为0.14 0.14 molmolL L时时,DNA,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在使溶解在NaClNaCl溶液中的溶液中的DNADNA析出。析出。 2.DNA2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的含杂质较少的DNADNA。 3.DNA3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝
3、色,因此,二苯遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定胺可以作为鉴定DNADNA的试剂的试剂2022-5-2142022-5-215实验材料和用具实验材料:1、鸡血细胞液(510ml);2、体积分数为95%的冷酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24h);3、蒸馏水;4、质量浓度为0g/ml的柠檬酸钠溶液; (抗凝剂)5、物质的量浓度分别为2mol/L和0015mol/L的NaCl溶液;6、二苯胺试剂。2022-5-216实验用具:实验用具:铁架台;铁环;镊子;三角铁架台;铁环;镊子;三角架;酒精灯;石棉网;载玻片;玻璃棒;架;酒精灯;石棉网;载玻片;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒(滤纸;滴
4、管;量筒(100ml100ml,一个);烧,一个);烧杯;(杯;(100ml100ml,一个,一个,50ml50ml、500ml500ml各二各二个);试管(个);试管(20ml20ml,二个);漏斗;试管,二个);漏斗;试管夹;纱布。夹;纱布。 2022-5-217本实验中,要往鸡血中加入抗凝剂2022-5-218(1)先将新鲜的鸡血离心,获得鸡血细胞(2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可2022-5-2192022-5-21102022-5-21112022-5-21122022-5-21132022-5-21142022-5-21152022-5-21
5、162022-5-21172022-5-21182022-5-21192022-5-21202022-5-21212022-5-21222022-5-21232022-5-21242022-5-21252022-5-21262022-5-21272022-5-21282022-5-21292022-5-21302022-5-21312022-5-21322022-5-21332022-5-21342022-5-21352022-5-21365分鐘內做出自己的DNA 材料: 萃取出DNA的材料(人) 含有SDS的清潔劑(幾乎大部分都有) 食鹽 水 嫩精(木瓜酵素papain) 筷子 吸管 透明杯子 95%酒精 2022-5-21375分鐘內做出自己的DNA 方法: 1. 95%酒精放在冰箱備用。 2. 緩衝液:120ml的水+1又1/4茶匙的鹽+一點點洗髮精+一點點嫩精,輕輕攪拌後放在冰箱備用。 3. 準備萃取DNA的材料:取10ml的水漱口1分鐘,吐在杯子裡,加入20ml的緩衝液,以筷子輕輕攪拌2分鐘。 4. 用吸管吸取95%的酒精從杯壁慢慢加入杯中。酒精會浮在上層,接著就會出現絲狀物,那就是你的DNA。 準備小罐子裡頭加上70%的酒精,再把DNA放進去,你就會擁有特別的禮物囉!拿自己的DNA送人,不錯喔!(情人節送雙套,不要送單套)2022-5-21382022-5-2139