1、?“ 将知识装进大脑，将垃圾打包带走将知识装进大脑，将垃圾打包带走”组织学与胚胎学基础医学院形态学教研室程艳华Histology and Embryology第第1 1章章 绪绪 论论重点：组织学的定义人体的基本组织石蜡切片术HE染色考试模式?实验考试：20分?期中考试：20分100分?期末考试：60分第第1 1章章 绪绪 论论一、组织学研究内容组织学（histology ）：-研究机体微细结构及其相关功能的科学机体细胞、组织、器官、系统方法利用显微镜观察组织切片构成人体的基本组织有四大类上皮组织神经组织肌组织结缔组织器官是由不同的组织发育分化而成器官是由不同的组织发育分化而成上皮组织肌组织肌
2、组织结缔组织神经组织研究内容研究内容细 胞（cell）细胞间质组 织(tissue)上皮组织(epithelial tissue)结缔组织(connective tissue)肌肉组织(muscle tissue)神经组织(nerve tissue)器官、系统细胞细胞膜细胞膜细胞质细胞质细胞核线粒体内质网核糖体高尔基复合体溶酶体微体中心体细胞骨架糖元糖元脂滴色素常染色质异染色质核膜-核孔核仁核基质染色质细胞器细胞基质包涵物核被膜核被膜染色质核 仁核基质核基质细胞核核外膜核外膜核周隙核周隙核内膜核内膜核孔核孔核质侧核质侧核纤层（支架）核纤层（支架）核液核液核骨架核骨架细丝细丝颗粒颗粒相随染色质相
3、随染色质常染色质功能活跃功能活跃异染色质功能静止功能静止遗传物质遗传物质DNA和组蛋白在细胞间期的形态和组蛋白在细胞间期的形态胚胎学（ Embryology ）是研究生物个体发生、发育、发展及其机理的科学。二、组织学常用研究技术（一）一般光学显微镜技术（一）一般光学显微镜技术（简称光镜（简称光镜light microscopy, LM ）分辨率为分辨率为0.2 m可将组织放大1500倍左右。显微镜的构造目镜物镜载物台粗细调节螺旋光源聚光器镜臂镜座显微镜镜下观察组织，必须制作成组织标本载玻片组织标本盖玻片标签石蜡切片：石蜡切片：取材?固定?脱水透明?浸蜡包埋?切片?染色?封片最常用的染色方法是：
4、苏木精-伊红染色（ HE染色）?苏木精（hematoxylin) ：碱性染料，能将细胞核染成蓝紫色。?伊红(eosin) ：酸性染料，能将细胞质染成红色。组织结构的组织结构的嗜色性嗜色性嗜碱性：对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏木精染成蓝紫色。嗜酸性：对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。中性：对于两种燃料亲和力都不强的性质。都不强的性质。HE染色着色淡。HE染色其他染色：硝酸银染色：组织经硝酸银处理，呈棕黑色，主要用于神经组织和内分泌细胞研究重铬酸盐染色法异染性 ： 肥大细胞中的颗粒经甲苯胺蓝等蓝色染料染色后，呈紫红色，称为异染性。?其他常用的制片方法?冰冻切片?涂片、铺片?磨片?其
5、它光学显微镜技术:?荧光显微镜?相差显微镜?暗视野显微镜?激光扫描共聚焦显微镜（二（二）电镜技术（electron microscope EM，简称电镜 ）以电子束代替光源，以磁场代替透镜，进行聚集和放大，最后将物体的影象投射到荧光屏或照相底片上。分辨率为0.2nm可将物体放大几千到几十万倍。分辨率人眼0.2 mm普通光镜0.2 m透射电镜0.10.2 nm扫描电镜2.5 nm?透射电镜术 （transmission electron microscopy, TEM）观察组织细胞的内部结构?扫描电镜术 （scanning electron microscopy, SEM）观察组织细胞表面的立体
6、结构?冰冻蚀刻（freeze etching method ）观察细胞断裂表面的形态结构?分析电镜X-射线显微分析术（analytical electron micro-scope）研究细胞、组织内元素种类分布和含量TEM，浆细胞SEM，纤毛SEM，微绒毛1.电子密度高（electron dense）电子束投射到密度大的样品，电子散射多，投射到荧光屏上的电子少而呈暗像，电镜照片上则呈黑色，称电子密度高。2.电子密度低（electron lucent ）反之，称电子密度低。透射电子显微镜（三）、组织化学和细胞化学技术糖类显示法PAS反应：过碘酸Schiff 反应，简称PAS反应（periodic
7、 acid Schiff reaction）检测组织活细胞中有无多糖存在。原理：酶类显示法脂类显示法核酸显示法多糖醛紫红色沉淀氧化试剂PASchiffPAS 反应，小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒（四）、免疫组织化学和细胞化学技术利用抗原（antigen, Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。辣根过氧化物酶标记荧光素标记（五）、原位杂交技术（in situ hybridization）?特异性核酸组织化学术检测基因（DNA片段）的有无、及在转录水平检测基因的活性(mRNA)。?原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异
8、性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量?常用标记物有放射性核素和地高辛（六）、细胞培养（六）、细胞培养实验中的组织工程耳（七）、共焦激光扫描显微镜（八） 、放射自显影术（autoradiography）（九） 、图像分析术（image analysis）:又称体视学（十） 、组织工程术（tissue engineering）三、组织胚胎学在基础医学中的地位?组织学=显微解剖学?大体 to 微细?不同组织的功能?生理学（physiology）?正常与异常?病理学(pathology)?临床课的基础临床课的基础?For a good doctor needed in future四、组织学的学习方法1.尽可能多地观察切片、插图、图谱、网上图库等。注意观察角度、倍率、染色方法2.深入思考，注意三个关系平面与立体 多角度直观与合理想象静态与动态 随机能状态而变化结构与功能 辩证统一3.综合与比较（ 善于总结，掌握规律 ）?注意平面与立体的关系1 23 4实验报告和实验指导?“ 将知识装进大脑，将垃圾打包带走将知识装进大脑，将垃圾打包带走”
