1、动物实验基本知识和操作技术动物实验基本知识和操作技术教学目标l 熟悉操作方法，操作技能l 理论联系实际，巩固知识l 掌握科研程序，理解科研实验课要求l 预习（值日组清楚本次实验动物种类、数量）l 清点药品、器材l 正确操作，小心使用l 认真观察、记录l 遵规守矩（实验后小鼠均处死，尸体放入大鼠笼垃圾袋内，不得乱扔）l 卫生与值日l 书写报告（独立思考，独立操作，发现问题，分析问题，解决问题，科学严谨的作风）卫生与值日 每组负责 清理各自实验桌面、器材（注射器、药盘、剪刀、镊子、烧杯、鼠笼、兔箱、铁架台、加热板等） 椅子、鼠笼、兔箱等摆放整齐 值日组负责（每次2组） 实验动物的课前领取，课后归还
2、（动物尸体袋子扎紧，鼠笼扣死） 实验室公共部分打扫（扫地、拖地、倒垃圾、清理水槽台面、检查各组实验器材归还情况等） 清点器械、药品 关闭门窗、水电实验报告写作要求l 实验题目： 注明实验报告时间、室温。l 实验目的：l 实验材料：实验对象、实验药品和实验器材。l 实验方法：l 实验结果：将实验中所观察得到的结果作出详实地记录。客观的实验结果用数据来表示（要求整理全班结果，并做出统计分析）。主观的实验结果用文字来描述。l 实验讨论：根据已知的理论知识对结果进行解释和分析。l 实验结论：从实验结果和讨论中归纳出一般的、概括性的判断。结论应与该实验的目的相呼应。实验报告书写3. 实验分析要求全面阐述
3、每个实验结果的原理4. 实验结论要求用12句话概括1. 对实验的全面总结 2. 提高分析、综合、概括问题的能力实验动物定义l 实验动物（laboratory animal） 经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学研究的动物。实验动物实验动物种类蟾蜍（Toad） 蟾蜍属两栖动物，其一些基本生命活动与哺乳动物近似，其离体组织和器官所需的生理环境比较简单 （无须供氧和恒温）。 蟾蜍常用于神经生理、肌肉生理、心脏生理，微循环、水肿等实验。实验动物种类小鼠（Mouse） 小鼠被广泛的用于生物学、医学、兽医学、生理学、遗传学、药理、
4、毒理、肿瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生产和教学。实验动物种类大鼠（Rat） 大鼠应用于生理学、药理学、免疫学，内分泌学、神经生理、营养学、传染病、肿瘤和肝外科等的研究。实验动物种类豚鼠（Guinea pig） 常用于免疫学、微生物学、传染病学、听觉生理、实验性坏血症等研究。 实验动物种类家兔（Rabbit） 常用于免疫学、肿瘤、实验生理学、生殖生理、遗传性疾病等的方面的研究，制造生物制品。 实验动物种类猫（Cat） 猫的神经系统和循环系统较发达，与人很相似。常用于神经、循环和呼吸方面的实验。 实验动物种类犬（Dog） 常用于基础医学、药理、毒理学、实验外科学、行为学、肿瘤学等方面研究。
5、实验动物种类猪（Pig） 常应用于皮肤烧伤、肿瘤学、免疫学、心血管及糖尿病、遗传性和营养性疾病、移植、外科手术等方面的研究。 实验动物分类l 按遗传学特征分类 近交系 杂交一代 封闭群 突变品系 非纯系按遗传学特征分类(一)l 近交系：指采用20代以上全同胞兄弟妹妹或亲子（子女与年青的父母）进行交配，而培养出来的遗传基因纯化的品系。（F98.6%）l 杂交一代：由两个近交系杂交产生的子一代称为杂交一代。它既有近交系动物的特点，又获得了杂交优势。l 封闭群：在同一血缘品系内，不以近交方式，而进行随机交配繁衍，经五年以上育成的相对维持同一血缘关系的种群。按遗传学特征分类(二)l 突变品系：在育种过
6、程中，由于单个基因的突变，或导入某个基因，或通过多次回交“留种”，而建立一个同类突变品系，此类个体中具有同样遗传缺陷或病态。l 非纯系：即一般任意交配繁殖的杂种动物。杂种动物具有旺盛的生命力，适应性强，繁殖率高，生长快，易于饲养管理。个体差异大，反应性不规则，实验结果重复性差。但其中包含有最敏感的与最不敏感的两种极端的个体。实验动物分类l 按微生物控制分 一级，普通动物(CV)：是微生物控制要求中最低的一个级别的动物，要求不带有动物烈性传染病和人畜共患病原体 二级，清洁动物(CL)：除不带有普通动物应排除的病原体外，还不应携带对动物危害大和对科学实验干扰大的病原体。 三级，无特殊病原体动物(S
7、PF)：除不带有普通动物、清洁动物应排除的病原体外，还应排除有潜在感染或条件性致病的病原体，以及对实验干扰大的病原。 四级，无菌动物(GF)和悉生动物(GN)：无菌动物是指采用当前的技术手段无法在动物体表、体内检出一切其他生物体。常用实验器械注射器结构l针帽l针头l针筒l针栓注射器规格实验器材常用注射器规格l1mll2.5mll5mll10ml注射器连接l针头斜面与针筒刻度朝向一致l针头与针筒连接紧密注射器刻度读取l针栓第一黑圈上缘注射器使用后处理l使用后丢入垃圾箱，防止扎伤注射器的握持l平握法：腹腔注射、皮下注射、肌内注射（小鼠）l执笔法：灌胃、耳缘静脉注射、肌内注射（家兔）抽取药液l抽药液
8、时，需看到针筒刻度，控制药量l抽出的药液不得再重新注入药液瓶内注射器排空气l缓慢向上推针栓，液体需充满针头l针栓下拉，使小气泡融合成大气泡l在气泡下方轻弹针筒动物实验基本操作注意事项l 教师 动物来源规范 实验操作讲解及示教规范、仔细、耐心l 学生 认真听讲操作要领 认真观看操作示范 认真、专心操作实践 如遇实验操作任何问题，及时向老师请教，不要盲目、违规操作，如因自身违规操作所导致的一切后果，由学生自己负责实验动物编号小鼠捉拿（一 ）小鼠腹腔注射要领l 一手捉持小鼠，将腹部朝上，头部朝下l 另一手持注射器从小鼠下腹左或右侧向头端穿刺，针头与皮肤约呈30角，刺入腹腔（有落空感）l 注射完药物后
9、，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液l 注意动作需轻柔，针头不要刺入太深，太靠上，容易刺破内脏；太靠下，容易刺入膀胱小鼠捉拿要领l 一手（一般是右手）提起鼠尾，放在粗糙面（如鼠笼）上，向后轻拉其尾，使鼠身与鼠尾成一条直线，即固定小鼠于鼠笼上l 另一手（一般是左手）迅速用拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤，尤其要抓紧小鼠两耳朵，固定头部，防止伤害l 将小鼠翻转置于一手（一般为左手）手掌大鱼际，并以小指或无名指压住其尾部小鼠腹腔注射小鼠灌胃要领l 抓小鼠时，尽量抓紧其两耳及中间皮肤，使其头部充分后仰，与颈部成一条直线，利于食管拉直，方便灌胃，减少损伤l 动作轻柔，从口角进入，针头置于小鼠舌头上，逐渐
10、竖直，并尽量往咽后壁靠l 进针过程中，如遇阻力，可原地轻轻转动针头，待阻力消失后再行进针，不可强行插入，避免刺破食管或误入气管l 本实验室所用灌胃针头自小鼠口腔插入体内几乎全部深度既可推注药液，推注时动作缓慢，注意观察小鼠反应，如有窒息表现，即刻停止l 灌胃容积一般0.10.2ml/10g，最大0.35ml/10g，每只小鼠的最大灌胃容积0.8ml小鼠灌胃（一）小鼠灌胃（二）小鼠肌注要领l 操作时一人固定小鼠；另一人用一手抓住小鼠的一条后肢，另一手拿注射器l 针头与皮肤呈3045角刺入大腿外侧肌肉约1/4，将药液注入l 小鼠一侧药量0.1ml，总药量0.1ml/10g小鼠肌注（一）小鼠肌注（二
11、）小鼠皮下注射要领l 操作时一人固定小鼠；另一人用一手提起小鼠背部皮肤，另一手拿注射器l 注射针头取一钝角角度刺入皮下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻回抽，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下l 拔针时拇指、食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏l 注射量约为0.10.3ml/10g小鼠皮下注射（二人）小鼠皮下注射（一人）小鼠颈椎脱臼处死法要领l 一手抓住鼠尾根部并将其提起，放在粗糙面上（如鼠笼盖）l 另一手拇指、食指用力向下按压鼠头及颈部l 抓鼠尾的手用力将鼠尾根部向后上方拉，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离，小鼠立即死亡小鼠颈椎脱臼处死法谢谢！家兔捉拿（一）正确操作家兔捉拿要领
12、l 一手抓住家兔脊背靠颈部皮肤，轻轻把家兔提起l 迅速以另一手托其臀部，使家兔体重主要落在捉拿者的掌心上，以免损伤动物颈部l 抓家兔的耳朵、腰部或四肢易造成家兔耳、颈椎或肾脏的损害家兔捉拿（二）错误操作家兔耳缘静脉注射要领l 充分暴露耳背外缘耳缘静脉（去毛、酒精棉擦拭）l 一人用食指、中指轻夹耳根部，使静脉充盈，利于进针l 另一人一手拉紧家兔耳朵，一手持注射器从远心端以一定角度进针（几乎与皮面平行），刺入静脉后顺血管平行方向深入1cml 推注药液时，针头如插入血管，药液推进容易；如插到血管外，则有丘状突起，应拔出针头，在近心端重新注射l 推注药液时，注意将轻夹耳根部的手松开l 推注药液后，注意止血家兔耳缘静脉注射（一）家兔耳缘静脉注射（二）家兔肌注要领l 进针部位一般选择家兔后肢大腿外侧肌肉l 执笔法握持注射器l 一手使进针皮肤紧绷，利于进针；另一手将针头先轻轻抵住进针皮面，并与其呈90角，再依靠腕部力量迅速进针，针头几乎全部插没l 进针后回抽，如无回血，可缓慢地将药物注入l 推注药液时，注意注射部位周边的皮毛是否干燥。如潮湿，提示药液并未注入肌内，需拔出针头重新注射家兔肌注谢谢！
