1、节苯并二氮杂卓节苯并二氮杂卓类药物的分析类药物的分析1234567+环庚三烯环庚三烯草草卓卓NN12345671,4-二氮杂卓NN12345671,4-苯并二氮杂卓89NNNCH3OCl氯氮卓HNNClH3CO地西泮NNO2NOH硝西泮硝西泮NNO2NOClH氯硝西泮氯硝西泮奥沙西泮奥沙西泮HNNOClOHNNOClOHFCH2CH2N(CH2CH3)22HCl盐酸氟西泮盐酸氟西泮NNNNCl艾司唑仑艾司唑仑NNNNClH3C阿普唑仑阿普唑仑一、结构与性质一、结构与性质 . 苯并二氮杂卓母核苯并二氮杂卓母核 弱碱性，弱碱性，. 结构中的环一般比较稳定，但结构中的环一般比较稳定，但在酸性溶液中可
2、水解，形成相应在酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。的二苯甲酮衍生物。 （芳伯氨基）二苯甲酮氯氨基氯氮卓、 52OHH2NH2ClC OH+NNClONHCH3二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）化学鉴别（一）化学鉴别 . 沉淀反应沉淀反应氯氮卓或阿普唑仑的盐酸溶液遇氯氮卓或阿普唑仑的盐酸溶液遇碘化铋钾成色。碘化铋钾成色。 橙红色氯氮卓、地西泮HCl4KBiI氯氮卓氯氮卓 （）（）【鉴别】（）取本品约【鉴别】（）取本品约 ，加盐酸溶，加盐酸溶液（液（） 溶解后，加碘化铋钾试液溶解后，加碘化铋钾试液 滴，即生成橙红色沉淀。滴，即生成橙红色沉淀。阿普唑仑阿普唑仑 （）（） 鉴别鉴别 （）取本品
3、约（）取本品约 ，加盐酸溶，加盐酸溶液（液（） 溶解后，分为两份：一份溶解后，分为两份：一份加硅钨酸试液加硅钨酸试液 滴，即生成白色沉滴，即生成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液淀；另一份加碘化铋钾试液 滴，滴，即生成橙红色沉淀。即生成橙红色沉淀。白色硅钨酸阿普唑仑HCl. . 水解后重氮化水解后重氮化偶合反应偶合反应水解后成芳伯胺的反应水解后成芳伯胺的反应 氯氮卓、艾司唑仑、氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮奥沙西泮氯氮卓氯氮卓 （）（） 鉴别鉴别 （）取本品约（）取本品约 ，加盐酸溶液（，加盐酸溶液（），），缓缓煮沸缓缓煮沸 分钟，放冷，加亚硝酸钠和碱性分钟，放冷，加亚硝酸钠和碱性奈酚。溶液显芳香第一
4、胺类（芳伯胺）的奈酚。溶液显芳香第一胺类（芳伯胺）的鉴别反应，成橙红色沉淀。（附录鉴别反应，成橙红色沉淀。（附录）。）。. . 硫酸硫酸荧光反应荧光反应 地西泮地西泮 （）（） 鉴别鉴别 （）取本品约（）取本品约 ，加硫酸，振摇，加硫酸，振摇使溶解，在紫外灯（）下检视，显黄绿使溶解，在紫外灯（）下检视，显黄绿色荧光。色荧光。 氯氮卓氯氮卓黄色黄色艾司唑仑艾司唑仑亮绿色亮绿色硝西泮硝西泮淡蓝色淡蓝色. . 分解产物的反应分解产物的反应 氯氯地西泮与三唑仑地西泮与三唑仑 （）（） 鉴别鉴别 （）取本品（）取本品 ，用氧瓶燃烧法，用氧瓶燃烧法（附录（附录 ）进行有机破坏，以）进行有机破坏，以 氢氢氧
5、化钠溶液氧化钠溶液 为吸收液，燃烧完全后，为吸收液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸 分钟，分钟，溶液显氯化物的鉴别反应（附录溶液显氯化物的鉴别反应（附录 ）。）。（二）（二） 和和 （三）（三） 药物发展快，品种不断增多，药物发展快，品种不断增多， 方法方法比较适合。比较适合。 常用种，稀硫酸喷雾，紫外灯检视常用种，稀硫酸喷雾，紫外灯检视荧光。荧光。 酸水解产物的法酸水解产物的法 此类药物有的经酸水解可产生二此类药物有的经酸水解可产生二苯甲酮衍生物。有的不产生，可鉴别。苯甲酮衍生物。有的不产生，可鉴别。 二苯甲酮衍生物对照品的制备：二苯甲酮衍生物对照品的制备：取本
6、类药物取本类药物 ，溶于盐酸，置沸水中，溶于盐酸，置沸水中，用氢氧化钠调，氯仿提。水洗，无水用氢氧化钠调，氯仿提。水洗，无水硫酸钠干燥，蒸去溶剂。硫酸钠干燥，蒸去溶剂。法法此类药物溶于甲醇，点样，加点硫此类药物溶于甲醇，点样，加点硫酸液。盖上玻璃烘（水解）。滴加酸液。盖上玻璃烘（水解）。滴加氨水，空气吹干。紫外光检测。氨水，空气吹干。紫外光检测。三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 （一）（一） 有关物质的检查有关物质的检查 . . 地西泮中有关物质的检查地西泮中有关物质的检查 地西泮的原料及片剂中可能引入去甲地西泮的原料及片剂中可能引入去甲基苯甲二氮卓。基苯甲二氮卓。 高低浓度对比法高低浓度
7、对比法 供试品溶液：取本品，加供试品溶液：取本品，加丙酮溶液，对照品：丙酮溶液，对照品： . . 乙酸乙乙酸乙酯：己烷展开。供试品的杂质斑酯：己烷展开。供试品的杂质斑点与主斑点比较不得更深。点与主斑点比较不得更深。. . 氯氮卓中有关物质的检查（）氯氮卓中有关物质的检查（） 杂质对照杂质对照品法；品法； 高低浓度对比法高低浓度对比法分解产物分解产物 氨基物（氨基氯二苯甲酮）（结构氨基物（氨基氯二苯甲酮）（结构式参考图）含量不得超过，中间体式参考图）含量不得超过，中间体 氧化物氧化物（ 氯，二氢苯基，苯并二氮卓酮氧化物）氯，二氢苯基，苯并二氮卓酮氧化物） （结构式参考图）含量不得超过（结构式参考
8、图）含量不得超过. . 。 检查方法：检查方法： 加丙酮振摇，取上清，加丙酮振摇，取上清，与对照品比对，斑点不得更大与对照品比对，斑点不得更大更深。更深。. . 氯氮卓中有关物质的反相高氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法效液相色谱法（二）降解产物的检查（二）降解产物的检查 地西泮注射液地西泮注射液 分解产生甲氨基氯二苯甲酮分解产生甲氨基氯二苯甲酮 主成分自身对照法主成分自身对照法 第六节、含量测定第六节、含量测定 一一 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 特别是对特别是对弱碱性药物及其盐的含量测定。弱碱性药物及其盐的含量测定。由于多为弱减，在水溶液中用由于多为弱减，在水溶液中用标准酸直接滴定没有明
9、显的突标准酸直接滴定没有明显的突跃。而冰醋酸可以使碱性增强。跃。而冰醋酸可以使碱性增强。使滴定顺利进行。使滴定顺利进行。应用实力之一应用实力之一硫酸盐类药物测定（）硫酸盐类药物测定（）二元酸，再水溶液中完成二次解离，二元酸，再水溶液中完成二次解离，但在非水溶液中只作一次解离。在但在非水溶液中只作一次解离。在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定只到硫冰醋酸溶液中用高氯酸滴定只到硫酸氢盐为止。酸氢盐为止。硫酸阿托品的测定（只举一个例子）硫酸阿托品的测定（只举一个例子）阿托品是碱性较强的一元碱。阿托品是碱性较强的一元碱。测定方法：，称定，加冰醋酸与醋酐测定方法：，称定，加冰醋酸与醋酐各溶解，加结晶紫滴，用高氯酸
10、滴定各溶解，加结晶紫滴，用高氯酸滴定液（）至溶液显纯蓝。空白校正。相液（）至溶液显纯蓝。空白校正。相当于的硫酸阿托品。当于的硫酸阿托品。 二二 铈量法铈量法 是常用的氧化还原的方法之一，是常用的氧化还原的方法之一，硝苯地平和吩噻嗪类可采用。利用硝苯地平和吩噻嗪类可采用。利用这些药物的还原性，在酸性介质中这些药物的还原性，在酸性介质中用硫酸铈滴定。硝苯地平用邻二氮用硫酸铈滴定。硝苯地平用邻二氮菲指示终点，吩噻嗪类用药物的自菲指示终点，吩噻嗪类用药物的自身变化指示终点。身变化指示终点。红色消褪红色 e2,)Ce(SOe,)Ce(SOsolHS2424 自身指示终点或电位法、永停法指示终点 （一）（
11、一） 硝苯地平的测定硝苯地平的测定方法：取本品方法：取本品 ，称定，加无水，称定，加无水乙醇，微热溶解。加高氯酸溶液，乙醇，微热溶解。加高氯酸溶液，邻二氮菲指示液滴。用硫酸铈滴邻二氮菲指示液滴。用硫酸铈滴定。至橙红色消失。每硫酸铈相定。至橙红色消失。每硫酸铈相当于的硝苯地平。当于的硝苯地平。（二）（二） 吩噻嗪类药物的测定吩噻嗪类药物的测定 原理：滴定开始，先失去一原理：滴定开始，先失去一个电子形成红色自由离子，达到个电子形成红色自由离子，达到化学计量点时，再失去一个，红化学计量点时，再失去一个，红色消退。色消退。方法：取本品方法：取本品 ，称定，加水，称定，加水与稀硫酸与稀硫酸 溶解，用硫酸
12、铈滴定。溶解，用硫酸铈滴定。至红色消失。每硫酸铈相当于。至红色消失。每硫酸铈相当于。方法：盐酸氯丙嗪片的测定方法：盐酸氯丙嗪片的测定 取本品片，称定，严细，取本品片，称定，严细，称出适量（相当于盐酸氯丙称出适量（相当于盐酸氯丙嗪），加水与稀硫酸嗪），加水与稀硫酸 溶解，按溶解，按上述方法测定。上述方法测定。优点：优点： 硫酸铈作滴定剂具有高的氧硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位，且为一价还原；不存在化电位，且为一价还原；不存在对环取代基的副反应，专属性高。对环取代基的副反应，专属性高。 本法既可用于原料，亦可用本法既可用于原料，亦可用于片剂的测定。于片剂的测定。 （二）（二） 钯离子比色法钯离子比
13、色法，对照法定量处测定在红色络合物吩噻嗪类药物A nm500 Pdmaxmax0.1pH22反应在反应在 的缓冲液中进行的缓冲液中进行测定方法：测定方法：盐酸氯丙嗪含量测定：盐酸氯丙嗪含量测定：取氯化钯溶液，光比色。取氯化钯溶液，光比色。优点：优点： 钯离子比色法可选择性钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定。的测定。 四四 紫外分光光度法紫外分光光度法 （一）直接分光光度法（一）直接分光光度法 不需提取分离，不需提取分离，溶于适当溶剂中即可测定。溶于适当溶剂中即可测定。 奥沙西泮测定奥沙西泮测定 取本品取本品 ，精，精 密密称定，置量瓶中，加乙醇溶
14、后（温称定，置量瓶中，加乙醇溶后（温热），定溶。取，稀释至，测。另热），定溶。取，稀释至，测。另取对照品，测定，计算。取对照品，测定，计算。2 2 盐酸异丙嗪片剂测定盐酸异丙嗪片剂测定 盐酸异丙嗪片剂盐酸异丙嗪片剂1010片。去糖衣，称片。去糖衣，称定严细。称取适量（相当于盐酸异丙嗪定严细。称取适量（相当于盐酸异丙嗪12.5g12.5g），在），在200ml200ml量瓶中。加盐酸适量，量瓶中。加盐酸适量，溶解后至刻度。片剂测定波长为溶解后至刻度。片剂测定波长为249nm249nm，吸收系数为吸收系数为910910。1%1cmE盐酸异丙嗪注射液测定盐酸异丙嗪注射液测定（）测定波长选择（）测定波
15、长选择 为了消除抗氧剂为了消除抗氧剂维生素（维生素（ ）对测定的干扰，测定）对测定的干扰，测定波长由改为吸收系数为）。波长由改为吸收系数为）。 同理，盐酸氯丙嗪片剂同理，盐酸氯丙嗪片剂测定波长为，吸收系数为；测定波长为，吸收系数为；注射液测定波长改为，吸收注射液测定波长改为，吸收系数为。系数为。 （）测定方法：取本品，容量瓶稀（）测定方法：取本品，容量瓶稀释，精取，释，精取， 容量瓶稀释。下测。按容量瓶稀释。下测。按标准吸收系数为计算。标准吸收系数为计算。 （二）（二） 萃取后分光光度法萃取后分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液的含量测盐酸氯丙嗪注射液的含量测定，除上述采用选择波长，直接定，除上述采用
16、选择波长，直接法消除处方中维生素的干扰外，法消除处方中维生素的干扰外，还可用萃取后测定法。还可用萃取后测定法。（）测定方法：取本品适量，相当（）测定方法：取本品适量，相当于盐酸氯丙嗪，盐酸稀释至，加氨于盐酸氯丙嗪，盐酸稀释至，加氨水，用乙醚提取。再用盐酸液提乙水，用乙醚提取。再用盐酸液提乙醚，并测定。，按标准吸收系数为醚，并测定。，按标准吸收系数为计算。计算。 计算。为以，测定盐酸氯丙嗪乙醚层氯丙嗪盐酸氯丙嗪盐酸萃取乙醚提取氨水碱化 915 E 1254 1%1cmmaxAnm（三）（三） 萃取萃取双波长分光光度法双波长分光光度法（）原理（）原理 在待测组分（）的最大吸在待测组分（）的最大吸收
17、波长（测定波长，收波长（测定波长，）处测定待测组）处测定待测组分和干扰组分。（）吸收度的总和；另分和干扰组分。（）吸收度的总和；另选一适当波长（参比波长，选一适当波长（参比波长，）测定吸）测定吸收度，并使干扰组分在测定波长和参比收度，并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相等，即波长处的吸收度相等，即 ，而，而待测组分在这两个波长处吸收度的差值待测组分在这两个波长处吸收度的差值足够大。足够大。bbAA21（）定量依据（）定量依据 样品在二波长下样品在二波长下吸收度差值（吸收度差值（）：）： abbaaababababaCAAAlCAAAAAAAAA )()()(212121221121即，
18、吸收度差值（即，吸收度差值（）仅与待测）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。无关，干扰组分的干扰被消除。 （）必要条件（）必要条件 干扰组分在两个波长处吸收干扰组分在两个波长处吸收度相等度相等 待测组分在两个波长处吸收待测组分在两个波长处吸收度相差足够大度相差足够大 （）应用（）应用 萃取萃取 除去抗氧剂的干扰除去抗氧剂的干扰氧化产物盐酸盐盐酸氯丙嗪乙醚层氧化产物氯丙嗪盐酸氯丙嗪注射液盐酸萃取乙醚提取浓氨碱化 双波长分光光度法测定双波长分光光度法测定 排除氧化产物的干扰排除氧化产物的干扰 测定波长测定波长 参比波长参比波长 对照法定量对照
19、法定量（）测定方法：取本品适量，相当（）测定方法：取本品适量，相当于盐酸氯丙嗪，盐酸稀释至，加氨于盐酸氯丙嗪，盐酸稀释至，加氨水，用乙醚提取。再用盐酸液提乙水，用乙醚提取。再用盐酸液提乙醚，并测定。，按标准吸收系数为醚，并测定。，按标准吸收系数为计算。计算。 （四）（四）. . 二阶导数分光光度法二阶导数分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液 抗氧剂维生素的二阶导数光谱抗氧剂维生素的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线，不近似为接近基线的一条直线，不干扰盐酸氯丙嗪的测定。干扰盐酸氯丙嗪的测定。 因此盐酸氯丙嗪可从其二阶因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰谷距离，标准导数光谱量取峰谷距离
20、，标准曲线法定量曲线法定量五五 气相色谱法气相色谱法六六 液相色谱法（）液相色谱法（） . 地西泮注射液的地西泮注射液的 法法 内标法加校正因子定量内标法加校正因子定量 . 三唑仑的三唑仑的 法法 内标法加校正因子定量内标法加校正因子定量复习题复习题盐酸氯丙嗪的含量测定方法有盐酸氯丙嗪的含量测定方法有. 中和法中和法. 非水滴定法非水滴定法. 紫外法紫外法 . 旋光法旋光法. 铈量法铈量法 中国药典（年版）对盐酸异丙嗪注射液中国药典（年版）对盐酸异丙嗪注射液的含量测定，选用波长处测定，其原因的含量测定，选用波长处测定，其原因是是 . 处是它的最大吸收波长处是它的最大吸收波长 . 为了排除其氧化
21、产物的干扰为了排除其氧化产物的干扰 . 为了排除抗氧剂的干扰为了排除抗氧剂的干扰 在处，它的吸收系数最大在处，它的吸收系数最大 . 在其他波长处，因其无明显吸收在其他波长处，因其无明显吸收 有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物的鉴别或含量测定方法为的鉴别或含量测定方法为. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法. 紫外分光光度法紫外分光光度法. 荧光分光光度法荧光分光光度法. 钯离子比色法钯离子比色法. 指示剂吸收度比值法指示剂吸收度比值法 中国药典中国药典(年版年版)中地西泮原料药中甲氨中地西泮原料药中甲氨基氯二苯酮的检查法为基氯二苯酮的检查法为. . . . 沉淀法沉淀法.
22、显色法显色法 检查盐酸氯丙嗪中检查盐酸氯丙嗪中“有关物质有关物质”时，采用的对照溶液为时，采用的对照溶液为. 杂质的标准溶液杂质的标准溶液. 标准标准“有关物质有关物质”溶液溶液. 供试品溶液供试品溶液. 供试液的稀释溶液供试液的稀释溶液. 对照溶液对照溶液 某药物于酸性溶液中，加硫酸铈试液则产某药物于酸性溶液中，加硫酸铈试液则产生红色，继续滴加硫酸铈试液，红色由浅生红色，继续滴加硫酸铈试液，红色由浅变深，继由深又变浅直至红色消失，该药变深，继由深又变浅直至红色消失，该药物应为物应为. 雌二醇雌二醇. 氯丙嗪氯丙嗪. 诺氟沙星诺氟沙星. 硫酸镁硫酸镁. 苯巴比妥钠苯巴比妥钠 吩噻嗪类药物与钯离
23、子反应，需在吩噻嗪类药物与钯离子反应，需在以下哪种酸性条件下进行以下哪种酸性条件下进行. . . . . A. A. 氯氮卓（利眠宁）氯氮卓（利眠宁）B B地西泮（安定）地西泮（安定） C C两者均能两者均能 D. D. 两者均不能两者均不能分子母核属于苯并二氮杂卓分子母核属于苯并二氮杂卓用氧瓶燃烧法破坏后，显氯化物反应用氧瓶燃烧法破坏后，显氯化物反应水解后呈芳伯胺反应水解后呈芳伯胺反应与三氯化锑反应生成紫红色与三氯化锑反应生成紫红色溶于硫酸后，在紫外光下显黄绿色荧光溶于硫酸后，在紫外光下显黄绿色荧光(C)（C）（A）（D）（）硫酸硫酸荧光反应为地西泮的特征鉴别荧光反应为地西泮的特征鉴别反应之
24、一。地西泮加硫酸溶解后，在反应之一。地西泮加硫酸溶解后，在紫外光下显紫外光下显A. 红色荧光红色荧光 B. 橙色荧光橙色荧光C. 黄绿色荧光黄绿色荧光 D. 淡蓝色荧光淡蓝色荧光E. 紫色荧色紫色荧色 某药物经酸水解后呈茚三酮反应，溶某药物经酸水解后呈茚三酮反应，溶液显紫色，该药为液显紫色，该药为. . 氯氮卓氯氮卓. . 地西泮地西泮. . 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因. . 阿司匹林阿司匹林. . 尼可刹米尼可刹米 某药物经酸水解后可用重氮化某药物经酸水解后可用重氮化偶合偶合反应鉴别，此药物是反应鉴别，此药物是. . 盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪. . 氯氮卓氯氮卓. . 地西泮地西泮. . 醋酸氢化
25、可的松醋酸氢化可的松. . 维生素维生素 能和硫酸铜及硫氰酸铵反应，生成能和硫酸铜及硫氰酸铵反应，生成草绿色沉淀的药物为草绿色沉淀的药物为. 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚. 异烟肼异烟肼. 尼可刹米尼可刹米. 地西泮地西泮. 维生素维生素 经高锰酸钾或溴水氧化后，可发生经高锰酸钾或溴水氧化后，可发生开环形成戊烯二醛反应的药物为开环形成戊烯二醛反应的药物为. 葡萄糖葡萄糖. 皮质酮皮质酮. 维生素维生素. 土酶素土酶素. 异烟肼异烟肼 溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是 . 属于氧化还原滴定法属于氧化还原滴定法 . 溴酸钾相当于的异烟肼溴酸钾相当于的异烟肼 . 采用永停滴定
26、法指示终点采用永停滴定法指示终点 . 在酸性条件下进行滴定在酸性条件下进行滴定 . 还可以用于异烟肼制剂的含量测定还可以用于异烟肼制剂的含量测定 异烟肼可由原料反应不完全或贮异烟肼可由原料反应不完全或贮藏中的降解反应而引入哪种杂质藏中的降解反应而引入哪种杂质. 间氨基酚间氨基酚. 水杨酸水杨酸. 对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸. 游离肼游离肼. 其他甾体其他甾体 可用于异烟肼鉴别的反应有可用于异烟肼鉴别的反应有. 与氨制硝酸银的反应与氨制硝酸银的反应. 戊烯二醛反应戊烯二醛反应. 坂口反应坂口反应. 硫色素反应硫色素反应. 二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应 下列药物中，哪一个药物加氨下列药物中，哪一个药
27、物加氨制硝酸银能产生银镜反应制硝酸银能产生银镜反应. 地西泮地西泮. 阿司匹林阿司匹林. 异烟肼异烟肼. 苯佐卡因苯佐卡因. 苯巴比妥苯巴比妥 用于吡啶类药物鉴别的开环反应用于吡啶类药物鉴别的开环反应有有. . 茚三酮反应茚三酮反应戊烯二醛反应戊烯二醛反应坂口反应坂口反应. . 硫色素反应硫色素反应二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应 （）异烟肼的测定方法为（）异烟肼的测定方法为. 溴酸钾滴定法溴酸钾滴定法. 溴量法溴量法. . . 比色法比色法 能和一二硝基氯苯发生呈色能和一二硝基氯苯发生呈色反应的药物是反应的药物是. 异烟腙异烟腙. 硫酸奎宁硫酸奎宁. 阿莫西林阿莫西林. 四环素四环素. 炔孕酮炔
28、孕酮 参考素材参考素材比色法比色法（一）（一） 酸性染料比色法酸性染料比色法（三）比色法（三）比色法 . . 地西泮经水解后氯仿提取地西泮经水解后氯仿提取液的比色测定法液的比色测定法量对照法或吸收曲线法定，处测定黄色溶液，二苯甲酮氯甲氨基地西泮氯仿Anm 41052maxH . 地西泮水解产物甘氨酸与茚三酮反应后比色测定法A nm570maxH处测定紫色，茚三酮甘氨酸地西泮 . 氯氮卓经酸水解后的重氮化偶合比色测定法（）弱酸性（）弱酸性 非水酸量法非水酸量法鉴别或氧化还原滴定法含量测定鉴别或氧化还原滴定法含量测定鉴别或比色法含量测定鉴别或比色法含量测定 酰胺键易水解引入特殊杂质游酰胺键易水解引
29、入特殊杂质游离肼，可用于吡啶类药物的鉴别离肼，可用于吡啶类药物的鉴别（）丙硫异烟胺（）丙硫异烟胺 位上硫代位上硫代甲酰胺基甲酰胺基 易水解，加酸水解后，易水解，加酸水解后，释放出硫化氢，能使湿润的醋释放出硫化氢，能使湿润的醋酸铅试纸显黑色，故可以此进酸铅试纸显黑色，故可以此进行鉴别。行鉴别。. . 和和 . . 峰面积归一化法峰面积归一化法 取一定量供试品溶液进样，测取一定量供试品溶液进样，测定各杂质及药物的峰面积，计算各定各杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率，不能超过限量。注意溶剂百分率，不能超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰面积内。
30、峰不应计算在总峰面积内。 优点：不需杂质对照品，简便易优点：不需杂质对照品，简便易行。行。 缺点：检测波长处，各杂质缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，和药物的吸收强度可能有差异，控制杂质峰面积百分率不一定就控制杂质峰面积百分率不一定就是杂质限量，准确度差。是杂质限量，准确度差。 . 主成分自身对照法主成分自身对照法 杂质峰面积与主成分峰面积相杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用。差悬殊时应用。 方法方法 对照溶液一定量供试品溶液供试品溶液稀释溶剂溶解 S 分别进样，测定供试品溶液分别进样，测定供试品溶液中各杂质峰面积及其总和，与对中各杂质峰面积及其总和，与对照溶液主成分峰面
31、积比较，控制照溶液主成分峰面积比较，控制供试品中杂质的量。供试品中杂质的量。 缺点：检测波长处，各杂质和药缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，准确度差物的吸收强度可能有差异，准确度差 优点：不需杂质对照品，可优点：不需杂质对照品，可同时控制各个杂质及其总量限度同时控制各个杂质及其总量限度 . . 内标法测定供试品中杂质的总量内标法测定供试品中杂质的总量限度限度方法方法 供试品供试品供试品溶液供试品溶液 图图供试品内标供试品内标供试品溶液供试品溶液 图图 判断判断 若图无与内标峰保留时间相若图无与内标峰保留时间相同的杂质峰，则图中各杂质峰面同的杂质峰，则图中各杂质峰面积之和应小于
32、内标物质峰面积积之和应小于内标物质峰面积（溶剂峰不计在内）（溶剂峰不计在内） 若图有与内标峰保留时间相同的若图有与内标峰保留时间相同的杂质峰，则将图上的内标峰面积减去杂质峰，则将图上的内标峰面积减去图中此杂质峰面积，得内标物质峰的图中此杂质峰面积，得内标物质峰的校正面积；图中各杂质峰面积加上图校正面积；图中各杂质峰面积加上图此杂质峰面积，得各杂质峰的校正总此杂质峰面积，得各杂质峰的校正总面积；各杂质峰校正总面积应小于内面积；各杂质峰校正总面积应小于内标物质峰的校正面积。标物质峰的校正面积。 . 内标法加校正因子测定供试品中某内标法加校正因子测定供试品中某个杂质的含量个杂质的含量 准确测定杂质含
33、量准确测定杂质含量 方法方法 内标杂质对照品内标杂质对照品溶液，进样，溶液，进样，测定，计算校正因子测定，计算校正因子 rrssmAmAf ）校正因子（ 供试品内标供试品内标供试品溶液，进样，供试品溶液，进样，测定杂质和内标峰面积或峰高，计测定杂质和内标峰面积或峰高，计算杂质量算杂质量ssxxmAAfm）杂质量（ . 外标法测定供试品中某个杂质的量外标法测定供试品中某个杂质的量供试品供试品供试品溶液供试品溶液 杂质对照品杂质对照品对照品溶液进样，测对照品溶液进样，测定，计算杂质的含量定，计算杂质的含量 rxxAAfm）杂质量（ 缺点：不易准确控制进样量，宜缺点：不易准确控制进样量，宜用定量环进
34、样用定量环进样 . . 水解后呈茚三酮反应水解后呈茚三酮反应 地西泮地西泮. . 丙硫异烟胺丙硫异烟胺 （）（） 【鉴别】（）取本品约【鉴别】（）取本品约 ，加盐，加盐酸溶液（酸溶液（） ，缓缓加热，发，缓缓加热，发生的气体可使湿润的醋酸铅试纸生的气体可使湿润的醋酸铅试纸显黑色。显黑色。（黑色）丙硫异烟胺PbSPb(Ac)SHSHHCl222四、含量测定四、含量测定 （一）异烟肼的含量测定（一）异烟肼的含量测定 . . 氧化还原滴定法氧化还原滴定法（）溴酸钾法（）溴酸钾法 （）原料及制剂（）原料及制剂NCONHNH23+2KBrO3HClNCOOH3+3 N2 +3H2O +2 KBr反应摩尔
35、比反应摩尔比 mlmg429. 33214.13701667. 0ncMT 取本品约取本品约 ，精密称定，置，精密称定，置 量瓶量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀；精中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取，加水、盐酸与甲基橙指示剂滴，密量取，加水、盐酸与甲基橙指示剂滴，用溴酸钾滴定液（）缓缓滴定（温度保持用溴酸钾滴定液（）缓缓滴定（温度保持在在）至粉红色消失。每的溴酸钾滴定）至粉红色消失。每的溴酸钾滴定液（）相当于的。液（）相当于的。 （）溴量法（）溴量法 反应摩尔比反应摩尔比 mlmg429. 3414.1371 . 0ncMTNCONHNH2+2 Br2+H2OHClNCOOH+N2
36、 +4HBr（）剩余碘量法（）剩余碘量法 反应摩尔比反应摩尔比 NCONHNH2+2 +NCOOH+N2 +4NaI+5I25NaHCO3CO2+4H2O. . 非水溶液滴定法非水溶液滴定法（）非水酸量法（）非水酸量法（）非水碱量法（）非水碱量法（二）尼可刹米的含量测定（二）尼可刹米的含量测定 . 非水溶液滴定法 （）原料 . 紫外分光光度法 （）注射液 内容量移液管 用内容量移液管精密量取本品用内容量移液管精密量取本品1m11m1，置置 100ml 100ml 量瓶中，用量瓶中，用 0.50.5 硫酸溶液分硫酸溶液分次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加0.
37、50.5硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，加量取适量，加0.50.5硫酸溶液稀释成每硫酸溶液稀释成每1ml1ml中约含尼可刹米中约含尼可刹米2020g g的溶液，在的溶液，在263nm263nm的的波长处测定吸收度，按波长处测定吸收度，按C C1010H H1414N N2 2O O的吸收系的吸收系数（数（ ）为）为292292计算，即得。计算，即得。1%1cmE（三）异烟腙的含量测定（三）异烟腙的含量测定 非水溶液滴定法 电位法指示终点 （）原料及片剂（四）丙硫异烟胺的含量测定（四）丙硫异烟胺的含量测定 . 非水溶液滴定法 （）原料 . 银量法 （）片剂
38、取本品片，精密称定，研细，精密取本品片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙硫异烟胺）置具塞称取适量（约相当于丙硫异烟胺）置具塞锥形瓶中，加丙酮使丙硫异烟胺溶解，精锥形瓶中，加丙酮使丙硫异烟胺溶解，精密加入硝酸银滴定液（），摇匀，放置，密加入硝酸银滴定液（），摇匀，放置，加水、硝酸、硝基苯与硫酸铁铵指示液，加水、硝酸、硝基苯与硫酸铁铵指示液，用硫氰酸铵滴定液（）滴定，并将滴定的用硫氰酸铵滴定液（）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每的硝酸银滴定液结果用空白试验校正。每的硝酸银滴定液（）相当于（）相当于的。的。四、含量测定四、含量测定 （一）（一） 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 原料药原料药 在冰醋酸溶液中，具强氧化性，在冰醋酸溶液中，具强氧化性，可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化物，干扰指示剂终点的观察。排除方物，干扰指示剂终点的观察。排除方法：法： （）改用中性溶剂（）改用中性溶剂（）加抗坏血酸（）加抗坏血酸（）电位法指示终点（）电位法指示终点 XXC氧瓶燃烧法破坏3. 3. 含卤素含卤素
