1、实实 验验 室室生物安全操作及管理生物安全操作及管理一、定义和概念一、定义和概念1. 生物因子生物因子 biological agents 微生物和生物活性物质。微生物和生物活性物质。2.危险危险 hazard 可能导致死亡、伤害或疾病、财产损失、工作环境破坏或这可能导致死亡、伤害或疾病、财产损失、工作环境破坏或这些情况组合些情况组合的根源或状态。的根源或状态。3.危险识别危险识别 hazard identification 识别存在的危险并确定其特性的过程。识别存在的危险并确定其特性的过程。4.风险风险 risk 危险发生的概率及其后果严重性的综合。危险发生的概率及其后果严重性的综合。5.气
2、溶胶气溶胶 Aerosol 悬浮于气体介质中粒径一般为悬浮于气体介质中粒径一般为 0.001-100m的固态或液态的固态或液态微小粒子形成的稳定的分散体系。微小粒子形成的稳定的分散体系。6.微生物危害评估微生物危害评估Hazard Assessment for Microbes 对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估。评估。7.污染污染 contamination 物质或事物由外来的物质或因子而造成的不希望的影响。物质或事物由外来的物质或因子而造成的不希望的影响。8.去除污染去除污染 decontamination 为了安全，去
3、除或减少污染物（原）或其影响的过程或方法。为了安全，去除或减少污染物（原）或其影响的过程或方法。9.传染控制传染控制 control of infection plan 在实验室建立的限制感染扩散的程序。在实验室建立的限制感染扩散的程序。 10消毒消毒 disinfection 减少细菌芽胞除外的微生物的数量，不需杀灭或清除减少细菌芽胞除外的微生物的数量，不需杀灭或清除全部的微生物。全部的微生物。11.灭菌灭菌 sterilization 有效致使目的物没有微生物的过程。有效致使目的物没有微生物的过程。12.消毒剂消毒剂 disinfectant13.净化净化 clean 去除生物和非生物的所
4、有类型污染的过程。去除生物和非生物的所有类型污染的过程。14. 高效空气过滤器高效空气过滤器 HEPA High Efficiency Particulate Air Filter 通常以通常以0.3m 微粒为测试物，在规定的条件下滤除效率微粒为测试物，在规定的条件下滤除效率高于高于99.97%的空气过滤器。的空气过滤器。15.实验室生物安全实验室生物安全laboratory biosafety 实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害，符验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害
5、，符合相关法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。合相关法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。16. 物理防护设备物理防护设备Containment Device 用物理或机械方法防止病原体逸出的设备。用物理或机械方法防止病原体逸出的设备。 17. 排风罩（烟罩）排风罩（烟罩） extraction hood（fume hood） 实验室设备上面的排除空气或烟雾的箱体或罩体，避实验室设备上面的排除空气或烟雾的箱体或罩体，避免其在室内循环。免其在室内循环。18. 安全罩安全罩 safety hood 覆盖在生物医学实验室工作台或仪器设备上的相抵于覆盖在生物医学实验室工作台或仪器设备上的相抵于环
6、境为负压的排风罩，以减少实验室工作者的危险。环境为负压的排风罩，以减少实验室工作者的危险。19.生物安全柜生物安全柜biological safety cabinet，BSC 具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜，可有效具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜，可有效降低实验过程中产生的有害降低实验过程中产生的有害气溶胶对操作者和环境的危害。气溶胶对操作者和环境的危害。20.个人防护装备个人防护装备 personal protective equipment 用于防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的器材用于防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的器材和装备，包括衣服。和装备，包括衣服。21.生
7、物医学实验室生物医学实验室 biological and medical laboratory 为人类健康和社会生产的发展提供科学依据，进行人体为人类健康和社会生产的发展提供科学依据，进行人体和动、植物科学观察和试验的实验室。和动、植物科学观察和试验的实验室。22.生物安全防护实验室生物安全防护实验室 Biosafety containment for Laboratories 通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个人防通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个人防护装备的使用，严格遵从标准化的工作操作程序和管理规程护装备的使用，严格遵从标准化的工作操作程序和管理规程等，确保操作生物危
8、险因子的工作人员不受实验对象的伤害，等，确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害，确保周围环境不受其污染确保周围环境不受其污染,确保实验因子保持原有本性所采确保实验因子保持原有本性所采取综合措施的实验室。取综合措施的实验室。23.兽医实验室兽医实验室 veterinary laboratory 一切从事兽医病原微生物、寄生虫研究与使用，以及一切从事兽医病原微生物、寄生虫研究与使用，以及临床诊疗、检疫、监测的实验室。临床诊疗、检疫、监测的实验室。24.人畜共患病人畜共患病 zoonosis 人和动物间相互传播的传染病。人和动物间相互传播的传染病。25.外来病外来病 exotic dise
9、ase 国外存在和流行的，但国内尚未证实存在或已被消灭国外存在和流行的，但国内尚未证实存在或已被消灭的传染病。的传染病。26.压力梯度压力梯度 Relative Pressure 两个压力测量点间气压的差值。两个压力测量点间气压的差值。27.实验室分区实验室分区 classification of laboratory area 在生物安全实验室中按照实验因子污染的概率分区。在生物安全实验室中按照实验因子污染的概率分区。27.1. 清洁区清洁区 在正常工作中没有实验因子污染的可能。在正常工作中没有实验因子污染的可能。27.2.半污染区半污染区 在正常工作中没有污染，只是存有潜在轻微污染的可能。
10、在正常工作中没有污染，只是存有潜在轻微污染的可能。27.3.污染区污染区 在正常工作中一般没有污染，但有一定的较大和较严重的在正常工作中一般没有污染，但有一定的较大和较严重的污染机会。污染机会。28.气气锁锁air lock 具备机械送排风系统、整体消毒灭菌条件、化学喷淋（适具备机械送排风系统、整体消毒灭菌条件、化学喷淋（适用时）和压力可监控的气密室，其门具有互锁功能，不能同用时）和压力可监控的气密室，其门具有互锁功能，不能同时处于开启状态。时处于开启状态。29. 单向锁定单向锁定 unilateralism lock 一个门锁定后，另一个门才能开启一个门锁定后，另一个门才能开启30. 安全资
11、料数据单安全资料数据单 material safety data sheets (MSDS) 详细提供的危险因素及预防信息的技术报告。详细提供的危险因素及预防信息的技术报告。 P3和和BSL-3的不同的不同31、P：physical containment level（lab.)的字头的字头,即即（物理物理屏障水平（实验室）屏障水平（实验室）32、BSL：biosafety level（或或BL）即：生物安全水平即：生物安全水平 P只强调只强调物理屏障的作用，物理屏障的作用， BSL则反映必须采取综合措施才能达到生物安全的本则反映必须采取综合措施才能达到生物安全的本质特点。质特点。二、实验室生
12、物安全防护水平分级二、实验室生物安全防护水平分级 根据对所操作生物因子采取的防护措施，将实验室生物根据对所操作生物因子采取的防护措施，将实验室生物安全防护水平分为安全防护水平分为4级：级： 1.安全防护水平安全防护水平I级级 生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物；况下不会引起人类或者动物疾病的微生物； 2.安全防护水平安全防护水平级级 生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构人类或者动物疾病，
13、但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物 3.安全防护水平安全防护水平III级级 生物安全防护水平为三级的实验室适用于操作生物安全防护水平为三级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物微生物 4.安全防护水平安全防护水平级级 生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作
14、生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。三、生物危险评价三、生物危险评价评价内容评价内容 1. 微生物的传染性和致病性微生物的传染性和致病性 2.传播途径传播途径 3.微生物的稳定性微生物的稳定性 4.感染剂量感染剂量 5.微生物浓度微生物浓度 6.来源来源 7.动物研究数据的可用性动物研究数据的可用性 8.预防和治疗预防和治疗微生物的危险评价常常是涉及以下范畴：微生物的危险评价常常是涉及以下范畴： 1.已知的传染微生物已知的传
15、染微生物 2.未知传染微生物未知传染微生物 3.基因修饰微生物基因修饰微生物 4未知是否有未知传染性的生物材料未知是否有未知传染性的生物材料 5.动物实验动物实验美国美国CDC/NIH对微生物指导性分类对微生物指导性分类 第一类，不引起健康成年人疾病第一类，不引起健康成年人疾病 第二类，可通过破损皮肤、消化道及粘膜暴露等方式引起人第二类，可通过破损皮肤、消化道及粘膜暴露等方式引起人 类疾病类疾病 第三类，本土或外来的微生物，通过吸入途径暴露时可以造第三类，本土或外来的微生物，通过吸入途径暴露时可以造 成严重或潜在致死性疾病成严重或潜在致死性疾病 第四类，可以引起严重且威胁生命的人类疾病，可通过
16、气溶第四类，可以引起严重且威胁生命的人类疾病，可通过气溶 胶传播，或相关的传播危险性不明的微生物胶传播，或相关的传播危险性不明的微生物 生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。为四个生物安全防护级别。 当建设、使用传染性或有潜在传染性材料当建设、使用传染性或有潜在传染性材料的实验室前，必须进行微生物危害评估。的实验室前，必须进行微生物危害评估。 通过微生物危害评估确定对象微生物应在通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作。根哪一级的生物安全防护实验室中进行操作。根据危害评估结果，制定相应
17、的操作规程、实验据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书必须形成书面文件并严格遵守执行。面文件并严格遵守执行。四、生物安全四、生物安全（一）生物安全水平（一）生物安全水平1.生物安全水平分级生物安全水平分级1.1.生物安全水平（生物安全水平（biosafetybiosafety level level，BSLBSL） 以以BSL-1BSL-1、BSL-2BSL-2、BSL-3BSL-3、BSL-4BSL-4（bio-safety levelbio-safety level，BSLBSL）表示仅从事体外操作的实验室的相应生物安
18、全防护水）表示仅从事体外操作的实验室的相应生物安全防护水平平 以以ABSL-1ABSL-1、ABSL-2ABSL-2、ABSL-3ABSL-3、ABSL-4ABSL-4（animal bio-animal bio-safety levelsafety level，ABSLABSL）表示包括从事动物活体操作的实验室）表示包括从事动物活体操作的实验室的相应生物安全防护水平。的相应生物安全防护水平。2.生物安全的重要性生物安全的重要性（1 1） 反生物恐怖的需要反生物恐怖的需要 （2 2） 应对紧急卫生事件的需要应对紧急卫生事件的需要（3 3） 防止外来生物危险因子侵入的需要防止外来生物危险因子侵入
19、的需要（4 4） 实验室工作的需要实验室工作的需要 （5 5） 防止医院感染的需要防止医院感染的需要（6 6） 防止人畜共患病的需要防止人畜共患病的需要3.生物安全的由来生物安全的由来 生物恐怖生物恐怖 医院感染医院感染 实验室感染实验室感染 动物实验室感染动物实验室感染动物实验中的安全动物实验中的安全（1 1）带进实验室的动物应进行检查处理）带进实验室的动物应进行检查处理, ,勿使带有体外寄生虫勿使带有体外寄生虫和传染病。和传染病。（2 2）已接种动物不得与健康动物混合饲养。要单独饲养在相）已接种动物不得与健康动物混合饲养。要单独饲养在相应安全级别的隔离室内。应安全级别的隔离室内。（3 3）
20、接触动物时）接触动物时, ,特别是猴、狗等大动物特别是猴、狗等大动物, ,要戴防护手套和穿要戴防护手套和穿防护靴。要针对各种动物行为特点防护靴。要针对各种动物行为特点, ,采取相应措施防止被其采取相应措施防止被其抓咬。抓咬。 实验室内任何死亡动物必须经技术人员鉴定后才可处理，实验室内任何死亡动物必须经技术人员鉴定后才可处理，一般都应予以焚烧。实验动物尸体焚烧前应装于密封塑料袋一般都应予以焚烧。实验动物尸体焚烧前应装于密封塑料袋内以防扩大污染内以防扩大污染 要强调的是，动物感染微生物时，安全防护的级别要比要强调的是，动物感染微生物时，安全防护的级别要比感染微生物原有危险级别提高一级。感染微生物原
21、有危险级别提高一级。能够产生微生物气溶胶的活动能够产生微生物气溶胶的活动接种环操作，吸管操作，针头和注射器操作：接种环操作，吸管操作，针头和注射器操作： 培养和划线培养，混合微生物悬液培养和划线培养，混合微生物悬液; ;吸管操作液体溢出在固吸管操作液体溢出在固体表面，排除注射器中的空气体表面，排除注射器中的空气; ;从塞子中拔出针头从塞子中拔出针头; ;接种动物接种动物; ;针头从注射器上脱落喷出毒液针头从注射器上脱落喷出毒液; ;离心离心; ;使用搅拌机、混合器、使用搅拌机、混合器、超声波仪和混合用的仪器超声波仪和混合用的仪器; ;打开培养容器；感染性材料的溢打开培养容器；感染性材料的溢出；
22、在真空中冻干和过滤；接种鸡胚和培养物的收取。出；在真空中冻干和过滤；接种鸡胚和培养物的收取。4.生物威胁的来源生物威胁的来源生物安全与生物威胁是双胞胎：生物安全与生物威胁是双胞胎： 首先，各种致病微生物的威胁首先，各种致病微生物的威胁, , 其次，是外来生物入侵。据其次，是外来生物入侵。据19991999年康乃尔大学公布的研年康乃尔大学公布的研究结果说明，美国外来生物入侵所造成的直接经济损失每年究结果说明，美国外来生物入侵所造成的直接经济损失每年都达都达12261226亿美元。亿美元。 再次，随着现代科学技术的发展，世界上出现了越来越再次，随着现代科学技术的发展，世界上出现了越来越多的转基因生
23、物，转基因生物存在着一定风险。体健康。多的转基因生物，转基因生物存在着一定风险。体健康。 第四第四, , 生物恐怖事件生物恐怖事件5.5.保障生物安全的主要措施保障生物安全的主要措施A.A.区域划分，围场操作，避免逃逸。区域划分，围场操作，避免逃逸。B.B.负压过滤，通风，高空排放。负压过滤，通风，高空排放。C.C.灭菌消毒灭菌消毒D.D.初级防护初级防护 E. E. 次级防护次级防护（二）生物安全条件（二）生物安全条件1.1.国际常见市售生物安全柜及其型号国际常见市售生物安全柜及其型号 BSC BSC BSC-1 BSC-1 BSC-2 BSC-2 IIB-1 IIB-1 IIB-2 IIB
24、-2 IIB-3 IIB-3 BSC-3 BSC-32.II级生物安全柜的安装级生物安全柜的安装(1)(1)生物安全柜在安装搬运过程中，严禁将其侧倒放置和拆生物安全柜在安装搬运过程中，严禁将其侧倒放置和拆卸，到搬入安装现场后拆开包装。卸，到搬入安装现场后拆开包装。(2)(2)生物安全柜安装位置在设计未指明时应避开人流频繁处，生物安全柜安装位置在设计未指明时应避开人流频繁处，并应避免房间气流对操作口空气幕的干扰。并应避免房间气流对操作口空气幕的干扰。(3) (3) 如果实验室有窗户，应始终保持关闭。安全柜不能安装如果实验室有窗户，应始终保持关闭。安全柜不能安装在房间通风系统的进口，以免气流直接吹
25、到安全柜正面的在房间通风系统的进口，以免气流直接吹到安全柜正面的操作口和排风滤器上。操作口和排风滤器上。(4) (4) 安全柜的周围应留出安全柜的周围应留出1212英寸英寸(304.8 mm)(304.8 mm)的空间，以便于的空间，以便于清除赃物。如果由于空间限制，至少应在两边留出清除赃物。如果由于空间限制，至少应在两边留出3 3英寸英寸(76.2 mm)(76.2 mm)，背面留出，背面留出1.51.5英寸英寸(38.0 mm)(38.0 mm)。应在安全柜的。应在安全柜的电源处留出足够的空间，以便于在不移动安全柜的情况下，电源处留出足够的空间，以便于在不移动安全柜的情况下，就可以进行维修
26、。就可以进行维修。(5)(5)安装的生物安全柜的背面、侧面离墙壁距离应保持在安装的生物安全柜的背面、侧面离墙壁距离应保持在8080300mm300mm之间。底面和底边紧贴地面的安全柜，所有沿之间。底面和底边紧贴地面的安全柜，所有沿地边的缝隙应加以密封。地边的缝隙应加以密封。(6)(6)生物安全柜的排风管道的连接方式，必须以更换排风过生物安全柜的排风管道的连接方式，必须以更换排风过滤器方便来确定。滤器方便来确定。3.II级生物安全柜的检测试验级生物安全柜的检测试验下列情况之一时，必须对下列情况之一时，必须对IIII级生物安全柜进行现场检测：级生物安全柜进行现场检测：（1 1）实验室施工时，在）实
27、验室施工时，在IIII级生物安全柜搬到指定位置后。级生物安全柜搬到指定位置后。（2 2）IIII级生物安全柜移动位置时。级生物安全柜移动位置时。（3 3）对）对IIII级生物安全柜进行检修后。级生物安全柜进行检修后。（4 4）IIII级生物安全柜更换过滤器后。级生物安全柜更换过滤器后。（5 5）IIII级生物安全柜的一年一度的常规检测。级生物安全柜的一年一度的常规检测。4.现场检测的必测项目现场检测的必测项目垂直气流速度断面测定。所用仪器方法是：垂直气流速度断面测定。所用仪器方法是：（1 1）仪器：准确度为读数）仪器：准确度为读数3%3%的热球风速仪。的热球风速仪。（2 2）方法：测点为柜内送
28、风口下方）方法：测点为柜内送风口下方0.15m0.15m处，为均匀测点。测处，为均匀测点。测点间距不大于点间距不大于0.12m.0.12m.测点布置不少于测点布置不少于3 3行，靠内壁的行距内行，靠内壁的行距内壁壁0.15m,0.15m,每行不少于每行不少于7 7个测点。个测点。（3 3）判定：垂直气流均匀区所测平均风速与生产厂家给定值）判定：垂直气流均匀区所测平均风速与生产厂家给定值之差之差0.025m/s,0.025m/s,且单点风速与所测平均风速之差不大于且单点风速与所测平均风速之差不大于20%20%为合格。为合格。5.工作窗口进风风速测定工作窗口进风风速测定（1 1）方法：采用）方法：
29、采用JGJ-90JGJ-90洁净室施工及验收规范中所规定方法洁净室施工及验收规范中所规定方法 测定生物安全柜对应工作窗口进风风量的排风风量（见下测定生物安全柜对应工作窗口进风风量的排风风量（见下注），再除以生物安全柜工作窗口面积注），再除以生物安全柜工作窗口面积, , 便可计算出进风风便可计算出进风风速。速。 注：某些型号的生物安全柜除从工作窗口进风以外，还注：某些型号的生物安全柜除从工作窗口进风以外，还有另外的进风口。从排风管的总排风量扣除进风口进风量即有另外的进风口。从排风管的总排风量扣除进风口进风量即为对应工作窗口进风风量的排风风量。为对应工作窗口进风风量的排风风量。（2 2）判定：所测
30、进风风速与生产厂家给定值之差小于）判定：所测进风风速与生产厂家给定值之差小于0.025m/s0.025m/s为合格。为合格。6.烟雾试验：用发烟物作直观判断烟雾试验：用发烟物作直观判断(1)(1)在工作表面中线上方高于工作窗口上沿在工作表面中线上方高于工作窗口上沿0.15m0.15m处处, , 从侧壁的从侧壁的一端到另一端一端到另一端, ,边发烟边移动，烟雾运动应为垂直流线，不边发烟边移动，烟雾运动应为垂直流线，不得有死角和回流。得有死角和回流。(2)(2)距观察窗内表面距观察窗内表面0.15m0.15m处从一端到另一端发烟，应为垂直流处从一端到另一端发烟，应为垂直流线，不得有死角和回流，也无
31、烟雾从安全柜溢出。线，不得有死角和回流，也无烟雾从安全柜溢出。(3)(3)距工作窗口外沿距工作窗口外沿0.04m,0.04m,沿窗口发烟，吸入的烟无溢出，工沿窗口发烟，吸入的烟无溢出，工作表面无烟雾。作表面无烟雾。(4) (4) 如为推拉式工作窗口，应检查边沿密封情况。如为推拉式工作窗口，应检查边沿密封情况。7.安全泄漏试验安全泄漏试验（1 1）压力试验）压力试验: :试验前使生物安全柜处于全关闭状态，即将风试验前使生物安全柜处于全关闭状态，即将风管和工作窗口关闭（可用密封胶带密封）。断电时对生物安管和工作窗口关闭（可用密封胶带密封）。断电时对生物安全柜内部充气加压至全柜内部充气加压至500P
32、a500Pa后停止加压，观察压力保持情况。后停止加压，观察压力保持情况。压力压力3030分钟下降小于分钟下降小于10%10%为合格。为合格。 （2 2）压力渗漏试验：应确认所有接缝的气密性及整个设备没）压力渗漏试验：应确认所有接缝的气密性及整个设备没有漏气。有漏气。（3 3）其他检测）其他检测8.生物安全柜的操作生物安全柜的操作 1 1、一切操作动作都不能破坏安全柜的定向气流。、一切操作动作都不能破坏安全柜的定向气流。 2 2、操作人员在安全柜前的走动速度不可过快，如果安全柜、操作人员在安全柜前的走动速度不可过快，如果安全柜附近放置有电扇、加热器、空调器或空气净化器等设备，也附近放置有电扇、加
33、热器、空调器或空气净化器等设备，也会影响安全柜的气流方向。会影响安全柜的气流方向。 3 3、正常使用过程中也要每、正常使用过程中也要每6 6个月或每年检测一次。个月或每年检测一次。 4 4、安全柜必须进行标准所规定的各项检测内容，必须进行、安全柜必须进行标准所规定的各项检测内容，必须进行满足生物性能、使用时间、可靠性、安全性以及操作维护和满足生物性能、使用时间、可靠性、安全性以及操作维护和洁净度要求的各项测试。洁净度要求的各项测试。五、实验室生物安全管理制度五、实验室生物安全管理制度（一）实验室内设置和准入（一）实验室内设置和准入 在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区在主实验室内应合
34、理设置清洁区、半污染区和污染区 非实验有关人员和物品不得进入实验室非实验有关人员和物品不得进入实验室 实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准（二）实验室工作人员资格和培训（二）实验室工作人员资格和培训 实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立工作前须在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到工作前须在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作合格标准，方可开始工作 实
35、验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接收实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接收实验室安全教育，自愿从事实验室工作实验室安全教育，自愿从事实验室工作 实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程规程 三级和四级生物安全防护实验室的工作人员留本底血清进行三级和四级生物安全防护实验室的工作人员留本底血清进行相关检测，以后定期复检。相关检测，以后定期复检。（三）实验室特殊管理（三）实验室特殊管理 对可能的危险因素，制定保证安全的工作程序对可能的危险因素，制定保证安全的工作程序 事前进行有效的培训和模拟训练事前进行有
36、效的培训和模拟训练 对于意外事故要能够提供包括紧急救助或专业性保健治疗的对于意外事故要能够提供包括紧急救助或专业性保健治疗的措施，足以应付紧急情况措施，足以应付紧急情况 实验室事故处理及上报实验室事故处理及上报六、不同实验室的要求六、不同实验室的要求 一级生物安全实验室一级生物安全实验室 BSL-1BSL-1 二级生物安全实验室二级生物安全实验室 BSL-2BSL-2 三级生物安全实验室三级生物安全实验室 BSL-3BSL-3 四级生物安全实验室四级生物安全实验室 BSL-4BSL-4（一）一级生物安全防护实验室（一）一级生物安全防护实验室 1 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于操
37、作在实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物；通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物； 包含微生物举例包含微生物举例 大肠杆菌大肠杆菌 格鲁伯耐格里原虫格鲁伯耐格里原虫 感染性犬肝炎病毒感染性犬肝炎病毒 枯草杆菌枯草杆菌一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室 2实验室设施和设备要求：实验室设施和设备要求： 实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。妨碍室内人员逃生。 应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口处。应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口处。 在实
38、验室门口处应设存衣或挂衣装置，可将个人服装与实验在实验室门口处应设存衣或挂衣装置，可将个人服装与实验室工作服分开放置。室工作服分开放置。 实验室的墙壁、天花板和地面应易清洁、不渗水、耐化学品实验室的墙壁、天花板和地面应易清洁、不渗水、耐化学品和消毒灭菌剂的腐蚀。地面应平整、防滑，不应铺设地毯。和消毒灭菌剂的腐蚀。地面应平整、防滑，不应铺设地毯。 实验室台柜和座椅等应稳固，边角应圆滑。实验室台柜和座椅等应稳固，边角应圆滑。 实验室台柜等和其摆放应便于清洁，实验台面应防水、耐腐实验室台柜等和其摆放应便于清洁，实验台面应防水、耐腐蚀、耐热和坚固。蚀、耐热和坚固。 实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验
39、室设备和物品。实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设备和物品。一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室 3 应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品等，应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并应不妨碍逃生和急救。避免相互干扰、交叉污染，并应不妨碍逃生和急救。 实验室可以利用自然通风。如果采用机械通风，应避免交叉实验室可以利用自然通风。如果采用机械通风，应避免交叉污染。污染。 如果有可开启的窗户，应安装可防蚊虫的纱窗。如果有可开启的窗户，应安装可防蚊虫的纱窗。 实验室内应避免不必要的反光和强光。实验室内应避免不必要的反光和强光。 若操作刺激
40、或腐蚀性物质，应在若操作刺激或腐蚀性物质，应在30 m 内设洗眼装置，必要内设洗眼装置，必要时应设紧急喷淋装置。时应设紧急喷淋装置。 若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应在风险评估的基若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应在风险评估的基础上，配备适当的负压排风柜。础上，配备适当的负压排风柜。 若使用高毒性、放射性等物质，应配备相应的安全设施、设若使用高毒性、放射性等物质，应配备相应的安全设施、设备和个体防护装备，应符合国家、地方的相关规定和要求。备和个体防护装备，应符合国家、地方的相关规定和要求。一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室 4 若使用高压气体和可燃气体，应有安全措施，应符合
41、国家、若使用高压气体和可燃气体，应有安全措施，应符合国家、地方的相关规定和要求。地方的相关规定和要求。 应设应急照明装置。应设应急照明装置。 应有足够的电力供应。应有足够的电力供应。 应有足够的固定电源插座，避免多台设备使用共同的电源插应有足够的固定电源插座，避免多台设备使用共同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在关键节点安装漏电保护装置座。应有可靠的接地系统，应在关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。或监测报警装置。 供水和排水管道系统应不渗漏，下水应有防回流设计。供水和排水管道系统应不渗漏，下水应有防回流设计。 应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、应配备适用的应急器材，如
42、消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。急救器材等。 应配备适用的通讯设备。应配备适用的通讯设备。 必要时，应配备适当的消毒灭菌设备。必要时，应配备适当的消毒灭菌设备。（二）二级生物安全防护实验室（二）二级生物安全防护实验室 1 生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物并且具备有效治疗和预防措
43、施的微生物 涉及到的微生物举例：涉及到的微生物举例： 沙门氏菌沙门氏菌 、志贺氏菌、志贺氏菌、 弓形体、衣原体弓形体、衣原体 乙型肝炎病毒、麻疹病毒、乙型肝炎病毒、麻疹病毒、 二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 2实验室设施和设备要求：实验室设施和设备要求： 适用时，应符合适用时，应符合 BSL-1实验室的要求。实验室的要求。 实验室主入口的门、放置生物安全柜实验间的门应可自动关实验室主入口的门、放置生物安全柜实验间的门应可自动关闭；实验室主入口的门应有进入控制措施。闭；实验室主入口的门应有进入控制措施。 实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。实验室工作区域外应有存放备用物品的条件
44、。 应在实验室工作区配备洗眼装置。应在实验室工作区配备洗眼装置。 应在实验室或其所在的建筑内配备高压蒸汽灭菌器或其他适应在实验室或其所在的建筑内配备高压蒸汽灭菌器或其他适当的消毒灭菌设备，所配备的消毒灭菌设备应以风险评估为当的消毒灭菌设备，所配备的消毒灭菌设备应以风险评估为依据。依据。 应在操作病原微生物样本的实验间内配备生物安全柜。应在操作病原微生物样本的实验间内配备生物安全柜。 应按产品的设计要求安装和使用生物安全柜。如果生物安全应按产品的设计要求安装和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排风在室内循环，室内应具备通风换气的条件；如果使柜的排风在室内循环，室内应具备通风换气的条件；如果使用需要
45、管道排风的生物安全柜，应通过独立电力供应。必要用需要管道排风的生物安全柜，应通过独立电力供应。必要时，重要设备（如：培养箱、生物安全柜、冰箱等）时，重要设备（如：培养箱、生物安全柜、冰箱等） 应配置备用电源。应配置备用电源。二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 3 特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程满足一级实验室满足一级实验室 ( (标准微生物操作规程标准微生物操作规程) ) 各款要求，各款要求，在此基础上特别注意：在此基础上特别注意： 制定出入制度制定出入制度 实验室人口贴上生物危险标志实验室人口贴上生物危险标志 制定实验室特定的生物安全操作规则制定实验室特定的生物安全操作规则 每
46、年一次最新培训制度每年一次最新培训制度二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 4特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程 针具针具 & & 利器使用注意事项：利器使用注意事项： 禁止用手处理破碎的玻璃器具禁止用手处理破碎的玻璃器具 用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止用手用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止用手直接从注射器取下。直接从注射器取下。 用过的针头必须直接放入防穿透的容料中。用过的针头必须直接放入防穿透的容料中。 非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒最好进行高压消毒二级生物安全防
47、护实验室二级生物安全防护实验室 5 特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程 培养基、组织、体液及其它具有潜在危险性的废弃物须放在培养基、组织、体液及其它具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌。防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌。二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 6特殊微生物操作规程：特殊微生物操作规程： 工作人员应接受必要的免疫接种和检测工作人员应接受必要的免疫接种和检测( (如乙型肝炎疫苗，如乙型肝炎疫苗，卡介苗等卡介苗等) ) 必要时收集从事危险性工作人员的本底血清必要时收集从事危险性工作人员的本底血清 实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒实验设备在运出
48、修理或维护前必须进行消毒 人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案录事故经过和处理方案 禁止将无关动物带入实验室禁止将无关动物带入实验室二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 7安全设施和个体防护安全设施和个体防护 在一级生物安全基础上，处理以下致病微生物时应在生物安在一级生物安全基础上，处理以下致病微生物时应在生物安全柜全柜 ( (级级) ) 中进行中进行 ，包括，包括: : 高浓度高浓度 大容量大容量 有喷溅有喷溅可能性可能性 上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离心杯，上述材料的离心操作如
49、使用密封的离心机转子或安全离心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行。且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行。 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使用面部当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使用面部保护装置保护装置二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 8安全设施和个体防护安全设施和个体防护 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着外出。在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。 当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如可能发当手可能接触
50、感染材料、污染的设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不离开实验室，工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。得清洗和再次使用。二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 9负责人：负责人： 应为更具责任感、能力的专家应为更具责任感、能力的专家 限制免疫耐受者进入实验室限制免疫耐受者进入实验室 限制正在接受免疫抑制剂者进入实验室限制正在接受免疫抑制剂者进入实验室工作人员：工作人员： 认识到工作中可能存在的危险认识到工作中可能存在的危险 操
