1、第四章花卉繁殖有性繁殖有性繁殖：种子繁殖无性繁殖：营养繁殖无性繁殖：营养繁殖分生分生 扦插扦插 压条压条 嫁接嫁接 孢子繁殖孢子繁殖 组织培养组织培养 第一节有性繁殖一、种子繁殖的定义与特点一、种子繁殖的定义与特点二、种子繁殖的适用条件与对象二、种子繁殖的适用条件与对象三、花卉种实分类三、花卉种实分类四、种子的采收与贮藏四、种子的采收与贮藏五、影响种子萌发的因素五、影响种子萌发的因素六、种子繁殖的技术要领六、种子繁殖的技术要领 一、种子繁殖的定义与特点一、种子繁殖的定义与特点1 1、种子繁殖、种子繁殖 近些年来，有些科学工作者将植物的受精后所得的胚取出，进行培养成以形成新株，这种方法称为胚培养
2、。胚培养也是植物有性繁殖的一种方法。 2 2、特点、特点种子体积小，重量轻，便于贮藏和大量繁种子体积小，重量轻，便于贮藏和大量繁殖，操作简便易行，殖，操作简便易行，繁殖系数大繁殖系数大； 实生苗实生苗，生命力旺盛，对环境的，生命力旺盛，对环境的适应能力及抗性强，寿命长；适应能力及抗性强，寿命长；木本花卉及多年生草本，木本花卉及多年生草本，开花结实晚开花结实晚； 后代变异频率高后代变异频率高，不一定跟前代的观赏，不一定跟前代的观赏性状完全一样，品种易退化。性状完全一样，品种易退化。 不能用于繁殖自花不孕植物及无籽植物不能用于繁殖自花不孕植物及无籽植物，如葡萄、柑桔、香蕉及许多重瓣花卉植物。如葡萄
3、、柑桔、香蕉及许多重瓣花卉植物。二、种子繁殖的适用条件与对象二、种子繁殖的适用条件与对象 1.适用条件适用条件 1)只要是能正常开花、能产生种子、数量只要是能正常开花、能产生种子、数量多、易获得多、易获得2)种子易萌发种子易萌发3)成株年限短成株年限短4)实生苗基本保持母本特性实生苗基本保持母本特性 2. 适用对象适用对象 多数一、二年生花卉少数多多数一、二年生花卉少数多年生花卉年生花卉三、花卉种实分类三、花卉种实分类(一) 花卉种实分类目的花卉种实分类目的 1、正确实施播种繁殖 2、进行种实交换 3、正确计算千粒重及播种量 4、防止不同种类及品种种实混杂，清除杂草种子及其他杂物（二）分类法
4、1、按粒径大小分类(以长轴为准)2、按种实形状分类3、按色泽、按有没有附属物及附属物不同分类：毛、刺、钩、翅 4、按种皮厚度及坚韧度分类1 1、按粒径大小分（以长轴为准）、按粒径大小分（以长轴为准） 大粒种实：5.0 mm。荷花、牡丹等 中粒种实：2.0-5.0 mm。紫罗兰、矢车菊等 小粒种实：1.0-2.0 mm。三色堇等 微粒种实：1.0 mm。四季秋海棠、金鱼草、矮牵牛等2 2、按种实形状分类、按种实形状分类 球形（紫茉莉）、 卵形（金鱼草）、 椭圆形（秋海棠）、倒卵形（三色堇）、肾形（鸡冠花）、 扁平状（紫罗兰）、舟形（金盏菊）、 线形、披针形等。四、种子的采收与贮藏和处理四、种子的
5、采收与贮藏和处理（一）种子的采收（一）种子的采收 1、采收时间 根据开裂方式、种子着生部位及种子成熟度进行采收。 一串红、鸡冠花、矮牵牛、 万寿菊。 2、采收后处理 种子的脱粒、净种与分级、 种子的干燥。（二）影响种实寿命的因子 1、短寿命种子 寿命在1年以内的，如非洲菊只有6个月左右； 2、中寿命种子 在24年之内如菊花、天人菊； 3、长寿命种子 在5年以上 如满天星、桂竹香、荷花等。 4、一般情况下，在热带及亚热带地区，种子生命力容易丧失，在北方寒冷高燥地区，寿命较长。 （三）种子贮藏方法（三）种子贮藏方法1.1.干燥贮藏法干燥贮藏法：纸袋或纸箱中保存。2.2.干燥密闭法：干燥密闭法：把上
6、述充分干燥的种子，装入罐或瓶一类容器中，密封起来放在冷凉处保存。3.3.低温贮藏法低温贮藏法:把充分干燥的种子，置于15的低温条件下贮藏。4.4.层积贮藏法层积贮藏法：某些花卉的种实，较长期地置于干燥条件下容易丧失发芽力，可采用层积法。5.5.水藏法水藏法：某些水生花卉的种子，如睡莲、王莲等必须贮藏于水中才能保持其发芽力。 （四）花卉种子发芽条件（四）花卉种子发芽条件1.1.水分水分 刻伤和浸泡（美人蕉、牡丹、香豌豆） 去绵毛（千日红、白头翁）2.2.温度温度（1）原产热带的花卉需要温度较高，王莲 30-3521天。（2）亚热带及温带者次之。多数春播20-25，秋播15-20， 三色堇 金鱼草
7、（3）原产温带北部的花卉则需要一定的低温才易萌发。大花葱 2-7 高于10不发芽。（四）花卉种子发芽条件及处理（四）花卉种子发芽条件及处理3.3.氧气氧气4.4.光照光照 在发芽期间必须具备一定的光线才能萌发，这一类被称为好光性种子。如报春花、毛地黄、瓶子草等。 在光照下不能萌发的称为嫌光性种子，如黑种草、雁来红等。 多数种子对光无要求处理方法处理方法1、浸种（易发芽种子）剥壳 挫伤 美人蕉、松子酸碱处理 结缕草种子用苛性钠结缕草种子用苛性钠0.5%0.5%溶液处理，溶液处理，其发芽率明显提高其发芽率明显提高冷藏或低温层积处理赤霉素代替低温处理拌种、发芽实验赤霉素代替低温处理 1 1、打破上胚
8、轴休眠、打破上胚轴休眠 牡丹、芍药、天香百合等，秋播当年只长出牡丹、芍药、天香百合等，秋播当年只长出幼根，必须经过冬季的低温阶段，上胚轴才能幼根，必须经过冬季的低温阶段，上胚轴才能解除休眠解除休眠 ，在春季伸出土面。 处理：先用50温水浸种24小时，埋于湿沙中，长根后用50-100ppm赤霉素涂抹胚轴，约10-15天就可长出地上茎。2 2、完成生理后熟要求低温的种子、完成生理后熟要求低温的种子 五、播种时期及方法五、播种时期及方法( (一一) ) 播种时期播种时期1 1、草花、草花 春播春播 晚霜后晚霜后 4 4月上中旬月上中旬 露地露地 秋播秋播 8 8月底月底-9-9月初月初 露地露地 随
9、采随播随采随播 君子兰、四季海棠、杨柳等君子兰、四季海棠、杨柳等 周年播种周年播种 温室花卉温室花卉 生产中：生产中：五一花（去年五一花（去年1212月播种），十一花（五一后播月播种），十一花（五一后播种），春节花（种），春节花（8 8月中下旬播种）。月中下旬播种）。2 2、露地木本花卉、露地木本花卉 桃、梅、郁李、松柏等桃、梅、郁李、松柏等1010月上旬月上旬-11-11月月上旬播种，其他木本花卉早春播，在伏天来临时木质上旬播种，其他木本花卉早春播，在伏天来临时木质化。化。( (二二) ) 播种方法播种方法1.1.露地花卉播种繁殖露地花卉播种繁殖 播前准备：播前准备：整地作床、消毒（日光、整
10、地作床、消毒（日光、65%65%代森锰锌、氯代森锰锌、氯化苦、溴甲烷）、种子处理与消毒（福尔马林、硫酸化苦、溴甲烷）、种子处理与消毒（福尔马林、硫酸铜、福美双）。铜、福美双）。 播种播种 撒播、点播、条播。撒播、点播、条播。 覆土覆土 大粒种子（种厚大粒种子（种厚2-32-3倍）、小粒种子、微粒种子。倍）、小粒种子、微粒种子。 镇压镇压 覆盖覆盖 地膜、草苫、遮阳网。地膜、草苫、遮阳网。 浇水浇水 浇水浇水 播后管理播后管理 土壤保持湿润，种子发芽后及时除去覆盖物、土壤保持湿润，种子发芽后及时除去覆盖物、2.2.温室花卉播种繁殖温室花卉播种繁殖（1 1）盆、土和种子准备）盆、土和种子准备 浅盆
11、浅盆1010cmcm（穴盘）穴盘） 配制培养土配制培养土 土壤和种子消毒土壤和种子消毒（2 2）盖排水孔）盖排水孔- -填基质（下粗上细）填基质（下粗上细）- -播种播种- -浸水浸水- -覆盖覆盖播后管理播后管理 保持土壤湿润保持土壤湿润 及时撤除覆及时撤除覆盖物盖物 出苗后逐渐见光出苗后逐渐见光第二节分生繁殖 分生繁殖是人为地将植物体分生出来的幼植体（吸芽、珠芽、根蘖等），或者植物营养器官的一部分（变态茎等）进行分离(新的植株自然和母株分开)或分割(凡人为将其与母株割开)，脱离母体而形成若干独立植株的办法。此法繁殖的新植株，容易成活，成苗较快，繁殖简便，但繁殖系数低。一、分株法1、匍匍茎与
12、走茎 (1)、节间较短，横走地面的为匍匍茎，多见于草坪植物如狗牙根、野牛草等。（2）、节间较长不贴地面的为走茎，如虎耳草、吊兰等。 由短缩的茎部或由叶轴的基部长出长蔓，蔓上有节，节部可以生根发芽，产生幼小植株，分离栽植即可成新植株。 2、根蘖 有些植物根上产生不定芽，萌发成根蘖苗，与母株分离后可成新株。如山楂、枣、杜梨、海棠、树莓、石榴、樱桃、萱草、玉簪、蜀葵、一枝黄花等。 一般于休眠期或发芽前，将母株树冠外围部分骨干根切断或创伤，刺激产生不定芽。生长期保证肥水，使根蘖苗旺盛生长发根，秋季或来年春与母体截离。 3、吸芽 吸芽是某些植物根际或地上茎叶腋间自然发生的短缩、肥厚呈莲座状短枝。吸芽的下
13、部可自然生根，故可分离而成新株。菠萝的地上茎叶腋间能抽生吸芽；多浆植物中的芦荟、景天、石莲花等常在根际处着生吸芽。 4、珠芽及零余子 珠芽为某些植物所具有的特殊形式的芽，生于叶腋间，如卷丹。 零余子是某些植物的生于花序中的特殊形式的芽，呈鳞茎状（如观赏葱类）或块茎状（如薯蓣类）。珠芽及零余子脱离母株后自然落地即可生根。 二、分球繁殖5、鳞茎 有短缩而扁盘状的鳞茎盘，肥厚多肉的鳞叶着生在鳞茎盘上，鳞叶之间可发生腋芽，每年可从腋芽中形成1个至数个子鳞茎并从老鳞茎旁分离开。如百合、水仙、风信子、郁金香等可用此法繁殖。 6、球茎 短缩肥厚近球状的地下茎，茎上有节和节间，节上有干膜状的鳞片叶和腋芽供繁殖
14、用时，可分离新球和子球，或切块繁殖。如唐菖蒲、荸荠、慈菇可用此法。 7、根茎 在地下水平生长的圆柱形的茎，有节和节间，节上有小而退化的鳞片叶，叶腋中有腋芽，由此发育为地上枝，并产生不定根。具根茎的植物可将根茎切成数段进行繁殖。一般于春季发芽之前进行分植。莲、美人蕉、香蒲、紫苑等多用此法繁殖。 8、块茎 形状不一，多近于块状，肉质，顶端有芽眼，根系自块茎底部发生。繁殖方法有整个块茎繁殖如山药、秋海棠的小块茎，可于秋季采下，贮藏到每2年春季种植。亦可将块茎分割繁殖，如马铃薯、菊芋等，切成25-50g的种块，每块带一个或几个芽或芽眼。种块不宜过小，否则会因营养不足影响新植株的扎根和生长。9、块根 块
15、根由不定根（营养繁殖的植株）或侧根（实生繁殖植株）经过增粗生长而形成的肉质贮藏根。在块根上易发生不定芽，可以用于繁殖。既可用整个块根如大丽花的繁殖；也可将块根切块繁殖。三、分生繁应考虑的问题三、分生繁应考虑的问题1、利用什么部位进行分生繁殖才能保持母株的特性2、分生繁殖的时期。一般在花卉进入旺盛生长期之前进行，并考虑到温度和湿度等环境因子3、所用的刀具是否已消毒，分生繁殖，否则就易发生病菌感染，导致繁殖的失败。 4、切口是否已消毒或晾干。仙人掌及多肉植物在分生和扦插繁殖时，最好将切口晾干。 5、使用理化方法，在短时间内达到迅速繁殖的目的。为了促进植株多出芽，常用截茎、摘心法，打破其顶端生长优势
16、，促进侧芽萌发，也可用植物生长调节物质，如生长素，赤霉素。多效唑等。 第三节第三节 扦插繁殖扦插繁殖定义：定义： 取植物茎、叶、根的一部分，插入沙或其他基质取植物茎、叶、根的一部分，插入沙或其他基质中，使其生根或发芽成为新的植株的繁殖方法。中，使其生根或发芽成为新的植株的繁殖方法。原理：原理： 植物营养器官具有再生能力，可发生不定根和不植物营养器官具有再生能力，可发生不定根和不定芽，从而形成新植株。定芽，从而形成新植株。特点：特点： 扦插育苗周期短、成本低、繁殖材料来源广、且扦插育苗周期短、成本低、繁殖材料来源广、且多保持品种的优良特性。但无主根，根系较弱、浅，多保持品种的优良特性。但无主根，
17、根系较弱、浅，寿命短。对不易产生种子的花卉，多采用这种繁殖方寿命短。对不易产生种子的花卉，多采用这种繁殖方法。法。扦插的种类和方法扦插的种类和方法扦插生根的环境条件扦插生根的环境条件促进扦插生根的方法促进扦插生根的方法扦插后的管理扦插后的管理扦插繁殖主要内扦插繁殖主要内容容 一、扦插的种类和方法一、扦插的种类和方法扦插扦插叶插叶插茎插茎插根插根插片片叶叶插插全全叶叶插插芽芽叶叶扦扦插插嫩嫩枝枝扦扦插插硬硬枝枝扦扦插插绿绿枝枝扦扦插插 用于能自叶上发生不定芽和不定根的种用于能自叶上发生不定芽和不定根的种类。叶插的花卉，多具有粗壮的叶柄、叶脉类。叶插的花卉，多具有粗壮的叶柄、叶脉或肥厚的叶片。或肥
18、厚的叶片。（一）叶插（一）叶插1 1、全叶插、全叶插 以完整叶片为插穗。分为平直法和直插法，以完整叶片为插穗。分为平直法和直插法，适用于草本花卉，如蟆叶秋海棠。适用于草本花卉，如蟆叶秋海棠。2 2、片叶插：、片叶插： 将一个叶片分切为数块，分别进行扦插，将一个叶片分切为数块，分别进行扦插，使每块叶片上形成不定芽。适用于叶片较大，使每块叶片上形成不定芽。适用于叶片较大，主脉明显的种类。如豆瓣绿、虎尾兰等主脉明显的种类。如豆瓣绿、虎尾兰等。全叶插全叶插片叶插片叶插（二）茎插（二）茎插芽叶插芽叶插嫩枝扦插嫩枝扦插绿枝扦插绿枝扦插硬枝扦插硬枝扦插1 1、芽叶插、芽叶插 插穗仅有一叶一芽。如虎尾兰、菊花
19、、山茶。插穗仅有一叶一芽。如虎尾兰、菊花、山茶。 菊花菊花 山茶山茶2 2、嫩枝扦插、嫩枝扦插 生长期选用枝条顶端最嫩部位作插穗的生长期选用枝条顶端最嫩部位作插穗的扦插方法扦插方法。3、绿枝扦插、绿枝扦插绿枝扦插绿枝扦插绿枝扦插操作方法绿枝扦插操作方法 采集插穗：采集插穗：选取选取腋芽饱满、叶片发育正常、无病虫害的枝条。腋芽饱满、叶片发育正常、无病虫害的枝条。剪截要求：剪成具剪截要求：剪成具34个芽的小段，上剪口在芽个芽的小段，上剪口在芽上方上方1cm处，下剪口在基部芽下处，下剪口在基部芽下0.3cm处，上端处，上端保留保留12片叶。片叶。扦插基质：以珍珠岩、河沙、砻糠灰等作基质。扦插基质：以
20、珍珠岩、河沙、砻糠灰等作基质。扦插：扦插时，用粗细相当的木棒在基质中打孔，扦插：扦插时，用粗细相当的木棒在基质中打孔，以防插穗基部插入时撕裂皮层，扦插深度为插穗以防插穗基部插入时撕裂皮层，扦插深度为插穗长度的长度的1/3-1/2，插后压实喷水即可。，插后压实喷水即可。4 4、硬枝扦插、硬枝扦插短枝条短枝条长枝条长枝条 采集插穗：采集插穗：剪截要求：剪截要求：硬枝扦插操作方法硬枝扦插操作方法（三）根插（三）根插平埋法平埋法 直插法直插法大多数花卉种类扦插生根适宜的地温大多数花卉种类扦插生根适宜的地温为为15152020。春季地温稍高于气温。春季地温稍高于气温3 35 5。嫩枝扦插的温度宜在嫩枝扦
21、插的温度宜在20-2520-25之间。之间。热带植物为热带植物为25253030。地温地温15 15 以上开始发根，高于以上开始发根，高于30 30 引起高温障碍。引起高温障碍。二、扦插生根的环境条件二、扦插生根的环境条件（一）温度（一）温度土壤湿度：土壤含水量以土壤湿度：土壤含水量以50506060为宜。为宜。过湿常使插穗腐烂。扦插初期，愈伤组过湿常使插穗腐烂。扦插初期，愈伤组织形成需较多水分，以后水分应逐渐减织形成需较多水分，以后水分应逐渐减少。少。空气相对湿度：嫩枝、绿枝扦插以空气相对湿度：嫩枝、绿枝扦插以80809090为宜，以减少插穗枝叶中的水分的为宜，以减少插穗枝叶中的水分的过度蒸
22、发过度蒸发（二）湿度（二）湿度绿枝扦插带有顶芽和叶片，便于在日光下进行光合绿枝扦插带有顶芽和叶片，便于在日光下进行光合作用，从而产生生长素促进生根。但不能光照过强。作用，从而产生生长素促进生根。但不能光照过强。扦插初期应给予适度的遮荫，当根系大量生出后，扦插初期应给予适度的遮荫，当根系大量生出后，陆续增强光照。陆续增强光照。（三）光照（三）光照扦插基质中要有足够的氧气。扦插基质中要有足够的氧气。用河沙、泥炭和其他疏松土壤作扦插基质较好。用河沙、泥炭和其他疏松土壤作扦插基质较好。全光照间歇喷雾增温育苗新技术：全光照间歇喷雾增温育苗新技术：就是取带叶的插穗在自动喷雾装置的保护就是取带叶的插穗在自动
23、喷雾装置的保护下，使叶面常有一层水膜，在全光照电热温下，使叶面常有一层水膜，在全光照电热温床上进行扦插育苗的方法。成活率达床上进行扦插育苗的方法。成活率达90%以以上上 。（四）基质含氧量（四）基质含氧量(一一) 化学处理法化学处理法三、促进扦插生根的方法三、促进扦插生根的方法1 1、环剥：取插穗前，先环剥枝条，使养分积累于、环剥：取插穗前，先环剥枝条，使养分积累于插穗的上端，在再环剥处剪切插穗进行扦插，插穗的上端，在再环剥处剪切插穗进行扦插，提高扦插成活率。用于较难生根的木本植物。提高扦插成活率。用于较难生根的木本植物。2 2、软化处理、软化处理；在插穗剪切前，对剪取部分进行遮在插穗剪切前，
24、对剪取部分进行遮光处理，使之变白软化，再自遮光部分剪下枝光处理，使之变白软化，再自遮光部分剪下枝条进行扦插。用于部分木本植物条进行扦插。用于部分木本植物3 3、提高地温：春季扦插地温高气温、提高地温：春季扦插地温高气温3-53-5度，促进度，促进生根。气温低抑制枝条的生长。如电热温床等。生根。气温低抑制枝条的生长。如电热温床等。4 4、喷雾处理：如全光照自动喷雾扦插育苗技术。、喷雾处理：如全光照自动喷雾扦插育苗技术。5 5、其他方法：电流处理、超声波处理、热水处理、其他方法：电流处理、超声波处理、热水处理等等。 ( (二二) ) 物理处理法物理处理法定期消毒，搞好病虫防治定期消毒，搞好病虫防治
25、保持较高的空气湿度，需定期喷水。保持较高的空气湿度，需定期喷水。逐渐增加光照强度逐渐增加光照强度及时通风及时通风四、四、 扦插后的管理扦插后的管理思考题1、如何扦插橡皮树？第四节、嫁接繁殖思考题思考题如何嫁接碧桃？如何嫁接碧桃？一、砧木选择与培育 1、砧木选择 (山毛桃） 与接穗有良好的亲和力。 对接穗生长、结果有良好影响，如生长健壮、早结果、丰产、优质、长寿等。 对栽培地区的环境条件适应能力强，如抗寒、抗旱、抗涝、耐盐碱等。 能满足特殊要求，如矮化、乔化、抗病。 资源丰富，易于大量繁殖。 根系发达，能吸收足够的营养物质一、砧木选择与培育2、砧木培育种子采集 处理 播种 管理二、接穗的采集、贮
26、藏与运输（1）接穗的采集 母树应生长健壮，具备丰产、稳产、优质的性状，并无检疫对象，接穗本身必须生长健壮充实，芽子饱满。秋季芽接，选当年生的发育枝，采下后要立即剪除叶片，保留叶柄。剪去梢端幼嫩部分，每百枝打捆，挂标签，写明品种与采集日期 。春季嫁接，多用1年生的枝条。可结合冬季修剪工作采集。采下后要立即修整成捆，挂上标签标明品种、数量蜡封、贮藏 。 4、运输蜡封接穗，可直接运输，不必经特殊包装。未蜡封的接穗及芽接、绿枝接的接穗及常绿接穗要保湿运输。严防日晒、雨淋。三、嫁接的时期 1、枝接的时期 枝接一般在早春树液开始流动，芽尚未萌动时为宜。 常绿树在早春发芽前及每次枝梢老熟后均可进行。北方落叶
27、树在夏季也可用嫩枝进行枝接。2、芽接的时期 芽接一般以夏秋芽接为主。落叶树在7-9月份，常绿树9-11月份进行。当砧木和接穗都不离皮时采用嵌芽接法。嫁接要求快削砧木和接穗动作要快，嫁接绑缚要迅速。准接穗和砧木形成层要对齐，这是嫁接成活的关键。平削口表面要平整光滑，以利砧木与接穗密接，促进伤口尽早愈合。紧接穗与砧木要绑紧，防止透风渗水以利保温保湿。 四、嫁接苗的管理 1、检查成活、解绑及补接 芽接后715d，即可检查成活情况，芽接接芽新鲜，叶柄一触即落者为已成活；枝接后3-4周检查成活，如接穗已萌发，接穗鲜绿。 2、成活的要及时解除绑缚物，未成活的要在其上或其下补接。3、剪砧、抹芽、去萌蘖参考答
28、案碧桃芽接，因芽接容易成活。芽接可在7-9月间进行，砧木一般采用一年生毛桃实生苗，也可用杏、梅一年生实生苗。接芽要选优良品种碧桃母株健壮枝上的叶芽或复芽，不能用花芽或隐芽。芽接部位应在砧木60-80厘米高处，作“T”字形芽接。当接芽成活后，长至12-18厘米长时，要进行摘心，以促生侧芽。一般嫁接苗3年就能开花。枝接最好在3月进行，多作为芽接失败后的补接手段。第五节、压条繁殖直立压条水平压条第六节、组织繁殖一、组培的意义快速、大量繁殖优良品种快速、大量繁殖优良品种 在花卉育种上和利用在花卉育种上和利用 花卉的提纯复壮花卉的提纯复壮获得无病植株获得无病植株 种质资源的保存种质资源的保存 二、培养基
29、的成分及配制无机营养物无机营养物 13种有机物质有机物质 有机营养物质和生理活性物质有机营养物质和生理活性物质 生长调节物质生长调节物质 生长素、细胞分裂素、赤霉素生长素、细胞分裂素、赤霉素其他附加物其他附加物 琼脂琼脂活性炭活性炭 抗生素抗生素其他对生长有益的未知复合成分其他对生长有益的未知复合成分配制大量元素大量元素+微量元素微量元素+铁盐铁盐+有机物质有机物质 药剂混合液药剂混合液水+琼脂+加入糖 加入药剂混合液药剂混合液 加水定溶加水定溶 PH调整调整 三角瓶 果浆瓶 洗净 干燥 分装 封口膜封口 塑料瓶 高压蒸汽灭菌 三、植物组织培养的培养基种类三、植物组织培养的培养基种类 MS培养
30、基培养基 B5培养基培养基 White培养基培养基 N6培养基培养基 KM-80培养基培养基 四、培养条件温度温度 23-27光照光照 湿度湿度 70-80%渗透压渗透压 1-2个大气压PH值值 5.8气体气体 五、培养培养方法培养方法 固体培养法固体培养法 液体培养法液体培养法外植体褐变及其防止外植体褐变及其防止继代培养时材料的玻璃化继代培养时材料的玻璃化 无病毒苗的培育无病毒苗的培育 获得无病毒苗的技术获得无病毒苗的技术 无病毒苗的鉴定无病毒苗的鉴定继代培养时材料的玻璃化继代培养时材料的玻璃化 玻璃化当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明和水渍状，这种现象称玻
31、璃化。 呈现玻璃化的试管苗，其茎、叶表面无蜡质，体内的极性化合物水平较高，细胞持水力差，植株蒸腾作用强，无法进行正常移栽。这种情况主要是由于培养容器中空气湿度过高，透气性较差造成的 。 控制和克服玻璃化现象的措施 增加培养基中的增加培养基中的 溶质水平，以降低培养基的溶质水平，以降低培养基的水势水势 随着琼脂浓度的增加，玻璃化的比例明显减少。随着琼脂浓度的增加，玻璃化的比例明显减少。 减少培养基中含氮化合物的用量减少培养基中含氮化合物的用量 增加光照强度增加光照强度增加容器通风增加容器通风，最好进行CO2施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用； 降低培养温度降低培养温度，温度主要影响苗的
32、生长速度，降温有助于减轻试管苗玻璃化现象发生； 降低培养基中细胞分裂素含量降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸。外植体褐变外植体褐变外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。它的出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞的代谢发生变化所致。在褐变过程中，会产生醌类物质，它们多呈棕褐色，当扩散到培养基后，就会抑制其他酶的活性，从而影响 所 接 触 外 植 体 的 培 养 。褐变的主要原因褐变的主要原因 植物品种植物品种 生理状态生理状态 一般说来，处于幼龄期的植物材料褐变程度较浅，成年植株采收的外植体，由于含醌类物质较多，因此褐变较为严重。 培
33、养基成分培养基成分 浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的褐变程度增加，此外，细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而使褐变现象加深。 培养条件不当培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速被培养的外植体的褐变程度。 防止或减轻褐变现象的方法防止或减轻褐变现象的方法 选择合适的外植体选择合适的外植体 生长处于旺盛的外植体，褐变现象明显减轻。 合适的培养条件合适的培养条件 无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。 使用抗氧化剂使用抗氧化剂 使用半胱氨酸、抗坏血酸等抗氧化剂能够较为有效地避免或减
34、轻很多外植体的褐变现象。使用0.1%-0.5%的活性炭 。 连续转移连续转移 对容易褐变的材料可间隔2-24小时的培养后，再转移到新的培养基上，这样经过连续处理7-10天后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。 污染培养基及各种使用器具消毒不彻底外植体灭菌时不彻底操作人员人为因素带入 个人卫生 继代转接时瓶子外壁灰尘 操作不规范环境不清洁超净工作区域污染 定期清洗更换初过滤器 调节风速20-30m/min 操作台消毒材料死亡外植体灭菌过度 外植体太小 太嫩灭菌药剂的用量过大或时间过长污染培养基不适宜或配制有问题 培养环境恶化 改善培养环境 及时转移和分瓶 无病毒苗的培育无病毒苗的培育 通过热处理法
35、获得无病毒苗木通过热处理法获得无病毒苗木：基本原理是，在高于正常的温度下，植物组织中的很多病毒可以被部分地或完全地钝化，但很少伤害甚至不伤害寄主组织。 茎尖培养脱毒茎尖培养脱毒 代谢活性高代谢活性高 无维管组织无维管组织 高激素浓度高激素浓度茎尖大小（决定茎尖存活率和脱毒效果）选择的原则是：外植体大到足以能够脱除病毒，小到足以能发育成1个完整的植株。故一般切取0.20.5mm，带一两个叶原基的茎尖作为繁殖材料。茎尖脱毒和热处理结合使用茎尖脱毒和热处理结合使用，如大樱桃置于45的恒温培养室内，培养35d，再切取0.20.4mm的茎尖培养，平均脱毒率为98%。无病毒苗的培育无病毒苗的培育茎尖嫁接脱
36、毒茎尖嫁接脱毒：茎尖嫁接是组织培养与嫁接方法相结合，用以获得无病毒苗木的1种新技术，也有称这为微体嫁接。它是将0.10.2mm的茎尖（常经过热处理之后采集）作为接穗，在解剖镜下嫁接到试管中培养出来的无病毒实生砧木上，并移栽到有滤纸桥的液体培养基中，茎尖愈合后开始生长，然后切除砧木上发生的萌蘖。生长1个月左右，再移栽到培养土中。 珠心胚脱毒珠心胚脱毒：柑橘的珠心胚一般不带病毒，用组织培养的方法培养其珠心胚，可得到无病毒的植株。培养出来的幼苗先在温室内栽培2年，观察其形态上的变异。没有发生遗传变异的苗木可作为母本，嫁接繁殖无病毒植株。珠心胚培养无病毒苗木简单易行，其缺点是有20%30%的变异，童期
37、长，要68年才能结果。无病毒苗的培育无病毒苗的培育愈伤组织培养脱毒法愈伤组织培养脱毒法：通过植物器官或组织诱导产生愈伤组织，然后从愈伤组织再诱导分化芽，长成植株，可以获得脱毒苗，这在天竺葵、马铃薯、大蒜、草莓、枸杞等植物上已先后获得成功。机理可能有如下几种机理可能有如下几种：病毒在植株体内不同器官或组织分布不均；病毒复制能力衰退或丢失；继代培养的愈伤组织抗性变异。无病毒苗的鉴定无病毒苗的鉴定指示植物法指示植物法 用嫁接或摩擦等方法接种于敏感的指示植物上，观察是否发病，不发病者为无病毒苗。电子显微镜鉴定法电子显微镜鉴定法 酶联免疫吸附法（酶联免疫吸附法（ELISA）此法简便，不需贵重的仪器设备。
