1、需氧菌阴道炎需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合测定技术细菌性阴道病五项联合测定技术 简介、简介、sop操作与注意事项操作与注意事项 中国科学院生物物理研究所中国科学院生物物理研究所 一、技术简介一、技术简介 1 1、技术名称、技术名称 2 2、科技技术、科技技术 3 3、技术特点、技术特点 4 4、技术原理、技术原理 5 5、技术配置组成、技术配置组成二、适宜人群二、适宜人群三、使用注意事项三、使用注意事项四、四、样品采集和处理样品采集和处理五、五、操作步骤操作步骤六、检验结果的解释六、检验结果的解释七、产品技术参数七、产品技术参数一、技术简介一、技术简介1、技术名称、技术名称名名称：需氧菌阴
2、道炎称：需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合测定试剂盒细菌性阴道病五项联合测定试剂盒商品名：爱必维商品名：爱必维简简称：称：ABV构架完善的阴道菌群构架完善的阴道菌群结构分析结构分析白带常规检测白带常规检测分泌物的清洁度、滴虫、假丝酵母菌分泌物的清洁度、滴虫、假丝酵母菌爱必维检测爱必维检测阴道微生态、阴道微生态、BVBV、AVAV、炎症、炎症 爱必维（爱必维（ABVABV） “ “爱必维爱必维”是全国领先、独家的阴道微生态检测项目，够检测出目前国内、外是全国领先、独家的阴道微生态检测项目，够检测出目前国内、外的体外诊断技术无法检测的的体外诊断技术无法检测的需氧菌阴道炎和各种混合型阴道炎。需氧菌阴
3、道炎和各种混合型阴道炎。有效提高妇科感染有效提高妇科感染诊断率，将给现有的阴道炎的诊断带来革命性的进步。诊断率，将给现有的阴道炎的诊断带来革命性的进步。需氧菌需氧菌AVAV、厌氧菌、厌氧菌BVBV、真菌、真菌VVCVVC、滴虫、滴虫TVTV、胞溶性、胞溶性CVCV等，等， 且混合感染高达且混合感染高达50%50%！SebastianFaro,阴道炎的鉴别诊断和管理阴道炎的鉴别诊断和管理“爱必维爱必维”（ABVABV），不仅明显提高医生对目前临床上较难诊断），不仅明显提高医生对目前临床上较难诊断的混合性阴道感染的诊断率，同时能了解病患阴道内乳酸杆菌的生态的混合性阴道感染的诊断率，同时能了解病患阴
4、道内乳酸杆菌的生态状况，分析阴道微生态是否正常，为临床重建阴道微生态平衡提供实状况，分析阴道微生态是否正常，为临床重建阴道微生态平衡提供实验室指标。验室指标。 “ “爱必维爱必维”（ABVABV），与临床白带常规检查联合使用，），与临床白带常规检查联合使用，构建和完构建和完善女性阴道分泌物检测系统。善女性阴道分泌物检测系统。不仅在全国多个省市的三甲医院及妇产不仅在全国多个省市的三甲医院及妇产医院广泛应用，同时多次在全国性的妇产科学术会上得到介绍和推荐医院广泛应用，同时多次在全国性的妇产科学术会上得到介绍和推荐。 2 2、科技技术、科技技术1 1、“爱必维爱必维”是国家是国家“十一五科技支撑计划
5、十一五科技支撑计划” “ “农村与城市社区适宜技术的研究农村与城市社区适宜技术的研究”转化转化 成果。成果。2 2、国家科技型中小企业技术创新基金项目。、国家科技型中小企业技术创新基金项目。3 3、“爱必维爱必维” ABV ABV五联检测试剂盒及其制备五联检测试剂盒及其制备 方法已获得国家发明专利。方法已获得国家发明专利。ABVABV五联检测中五联检测中 的的-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶测定为国家葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶测定为国家 发明专利。发明专利。4 4、11.511.5攻关成果：卫生部、科技部、计生委、攻关成果：卫生部、科技部、计生委、 中医药管理局联合推广项目。中医药管理局联合推广项目。3
6、3、技术特点、技术特点“爱必维爱必维”五联酶谱分析一次呈现：五联酶谱分析一次呈现：白细胞酯酶（LE）-葡萄糖醛酸苷酶（GUS）唾液酸苷酶（SNa）凝固酶（GADP）过氧化氢（H2O2）爱必维检测项目包括五联酶谱分析：检测项目包括五联酶谱分析：1)1)过氧化氢过氧化氢 反映正常阴道菌群生态状况反映正常阴道菌群生态状况2)2)唾液酸苷酶唾液酸苷酶 反映反映BVBV致病菌进居状态致病菌进居状态3)3)白细胞酯酶白细胞酯酶 反映阴道炎症的状况反映阴道炎症的状况4) -4) -葡萄糖醛酸苷酶葡萄糖醛酸苷酶 反映反映AVAV致病菌进居状态致病菌进居状态5)5)凝固酶凝固酶 反映反映AVAV致病菌进居状态致
7、病菌进居状态 五项指标同时进行测定联合白带常规检查，可构建新型阴道疾病评价系统。五项指标同时进行测定联合白带常规检查，可构建新型阴道疾病评价系统。 全国妇产科感染协作组推荐诊断方案全国妇产科感染协作组推荐诊断方案- 形态学（白带常规）形态学（白带常规）+ +功能学检查（爱必维）功能学检查（爱必维） “ “爱必维爱必维”五联酶谱分析一次呈现，不仅快速筛查、诊断需氧菌阴道炎、细五联酶谱分析一次呈现，不仅快速筛查、诊断需氧菌阴道炎、细菌性阴道病、混合感染和其它阴道疾病，也可从女性阴道微生态、清洁度角度菌性阴道病、混合感染和其它阴道疾病，也可从女性阴道微生态、清洁度角度评价阴道炎是否治愈，提高合理用药
8、的程度，降低复发率。评价阴道炎是否治愈，提高合理用药的程度，降低复发率。临床意义分析组合-形态学/功能学检查全国妇产科感染协作组推荐诊断方案全国妇产科感染协作组推荐诊断方案形态学检查预成酶检查+=微生态微生态病原体病原体4 4、技术原理、技术原理 本品检测包括五项指标。本品检测包括五项指标。 过氧化氢过氧化氢H2O2 H2O2 阴道乳酸杆菌的标志物阴道乳酸杆菌的标志物 唾液酸苷酶唾液酸苷酶 加德纳菌、游动弯曲杆菌等加德纳菌、游动弯曲杆菌等BVBV致病菌的标志物致病菌的标志物 白细胞酯酶白细胞酯酶 炎性细胞的标志物炎性细胞的标志物 -葡萄糖醛酸苷酶葡萄糖醛酸苷酶大肠埃希菌、大肠埃希菌、B B族链
9、球菌等族链球菌等AVAV致病菌的标志物致病菌的标志物 凝固酶凝固酶 金黄色葡萄球菌、粪肠球菌和大肠埃希菌等金黄色葡萄球菌、粪肠球菌和大肠埃希菌等 AV AV致病菌的标志物致病菌的标志物 5 5、技术配置组成、技术配置组成 AV/BV SetAV/BV Set反应装置反应装置（含保护贴条和包装袋）：由塑料基板和反（含保护贴条和包装袋）：由塑料基板和反应垫组成，塑料基板上设有过氧化氢孔、唾液酸苷酶孔、白细胞酯酶应垫组成，塑料基板上设有过氧化氢孔、唾液酸苷酶孔、白细胞酯酶孔、孔、-葡萄糖醛酸苷酶孔和凝固酶孔，规格为葡萄糖醛酸苷酶孔和凝固酶孔，规格为2020人份人份/ /盒。盒。 配配 置置反应装置反
10、应装置2020人份人份/ /盒盒稀释液稀释液 1 1瓶，瓶， 8ml/8ml/瓶瓶显色液显色液A 1A 1瓶，瓶， 1ml/1ml/瓶瓶显色液显色液B 1B 1瓶，瓶， 1ml/1ml/瓶瓶无菌棉签无菌棉签 2020支（物理消毒）支（物理消毒）软塑料试管软塑料试管 2020个个使用说明书使用说明书 1 1份份套孔比色板套孔比色板 1 1份份 二、适宜人群二、适宜人群什么情况下该做此项检查？什么情况下该做此项检查？ 1 1、有阴道感染症状的患者、有阴道感染症状的患者 所有的阴道感染都伴有不同程度的阴道微生态破坏，在治疗中所有的阴道感染都伴有不同程度的阴道微生态破坏，在治疗中使用抗生素、消炎药和阴
11、道冲洗等都可加重微生态失衡，而阴道炎的使用抗生素、消炎药和阴道冲洗等都可加重微生态失衡，而阴道炎的程度与阴道微生态破坏的程度密切相关，因此，程度与阴道微生态破坏的程度密切相关，因此，阴道微生态状况与阴阴道微生态状况与阴道炎的治疗方案和疗程、疗效有密切关系，道炎的治疗方案和疗程、疗效有密切关系， 在阴道分泌物常规检查中增加爱必维检查，在阴道分泌物常规检查中增加爱必维检查，有利于选择适宜的治有利于选择适宜的治疗方案，缩短疗程、提高阴道炎的疗效疗方案，缩短疗程、提高阴道炎的疗效。 2 2、经常规治疗方案治疗后的各类阴道炎患者、经常规治疗方案治疗后的各类阴道炎患者 在我国，目前判断阴道炎是否治愈主要根
12、据三项指标，即：在我国，目前判断阴道炎是否治愈主要根据三项指标，即：症状症状消失、体征消失、病原体消失消失、体征消失、病原体消失，在基层则主要是根据症状和体征是否，在基层则主要是根据症状和体征是否消失作为阴道炎是否治愈的指标。消失作为阴道炎是否治愈的指标。 如果阴道微生态没有恢复正常，即使上述三项指标都已恢复正常如果阴道微生态没有恢复正常，即使上述三项指标都已恢复正常的病例在半年内的的病例在半年内的复发率可达复发率可达60%60%。 造成阴道炎复发率高的重要原因是现有阴道炎的疗效评价标准不造成阴道炎复发率高的重要原因是现有阴道炎的疗效评价标准不适宜。适宜。 上世纪上世纪9090年代初，国外已将
13、阴道微生态评价列为阴道炎诊年代初，国外已将阴道微生态评价列为阴道炎诊断的常规手段，断的常规手段，被列为阴道炎诊疗方面的一次革命性进展。被列为阴道炎诊疗方面的一次革命性进展。 对经常规治疗方案治疗后的各类阴道炎患者做对经常规治疗方案治疗后的各类阴道炎患者做“爱必维爱必维”检查并配合阴道分泌物常规检查，检查并配合阴道分泌物常规检查，可了解阴道生态恢复情况，确可了解阴道生态恢复情况，确定是否对患者做生态治疗，达到提高阴道炎的诊疗效率、降低阴定是否对患者做生态治疗，达到提高阴道炎的诊疗效率、降低阴道炎复发率的目的。道炎复发率的目的。 3 3、产后何时恢复性生活评价、产后何时恢复性生活评价 分娩、消毒、
14、冲洗、使用抗生素、激素等原因使阴道乳酸杆菌数量分娩、消毒、冲洗、使用抗生素、激素等原因使阴道乳酸杆菌数量急剧减少，导致菌群失调，性生活可加重这种失调，易造成阴道感染。急剧减少，导致菌群失调，性生活可加重这种失调，易造成阴道感染。 北京大学廖秦平等教授研究发现：微生态不正常患病治愈后的复北京大学廖秦平等教授研究发现：微生态不正常患病治愈后的复发率为发率为 43.6%43.6%，而微生态正常者仅为，而微生态正常者仅为 10.0%10.0%。 对产妇做爱必维检查并配合阴道分泌物常规检查，可了解阴道生对产妇做爱必维检查并配合阴道分泌物常规检查，可了解阴道生态恢复情况，确定是否恢复性生活，避免造成产后阴
15、道感染。态恢复情况，确定是否恢复性生活，避免造成产后阴道感染。4 4、妊娠期无症状体征者、妊娠期无症状体征者妊娠期阴道生态失调状态可引起不良妊娠结局。妊娠期感染可直妊娠期阴道生态失调状态可引起不良妊娠结局。妊娠期感染可直接导致包括自然流产、早产、足月前胎膜早破、羊水感染、产后子宫接导致包括自然流产、早产、足月前胎膜早破、羊水感染、产后子宫内膜炎和剖宫产后切口感染和围产儿并发症。内膜炎和剖宫产后切口感染和围产儿并发症。 在妊娠期无阴道炎的症状和体征者中，有在妊娠期无阴道炎的症状和体征者中，有36.7%36.7%已处于微生态失已处于微生态失调状态。调状态。 定期对孕妇进行阴道微生态评价，可保证孕妇
16、与胎儿的健康，提定期对孕妇进行阴道微生态评价，可保证孕妇与胎儿的健康，提高生殖健康水平。高生殖健康水平。 三、使用注意事项三、使用注意事项注意把握四个环节注意把握四个环节 1 1）正确取样，部位、量、方法）正确取样，部位、量、方法 2 2）样品处理（充分混匀、防止过度稀释）样品处理（充分混匀、防止过度稀释） 3 3）显色时间、温度（推荐使用干浴器、）显色时间、温度（推荐使用干浴器、4848、13min13min） 4 4）结果判读）结果判读 四、四、样品采集和处理样品采集和处理 样品采集和处理样品采集和处理11 、受检者的准备、受检者的准备 取样品前取样品前2424小时应禁止性交、盆浴、阴道灌
17、洗及局部上药等，以免影响小时应禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部上药等，以免影响检查结果。经期样品会对结果判读有影响，所以不宜做该项检测。检查结果。经期样品会对结果判读有影响，所以不宜做该项检测。22 、样品的采集、样品的采集 受检者取妇科检查常规体位，使用专用棉签于阴道后穹窿处旋转受检者取妇科检查常规体位，使用专用棉签于阴道后穹窿处旋转10-2010-20秒秒，以清晰见到棉签上有分泌物附着为准。如果使用的棉签太短或棉球太小都不，以清晰见到棉签上有分泌物附着为准。如果使用的棉签太短或棉球太小都不能保证取得适宜的样品，这些都会影响到检测结果。能保证取得适宜的样品，这些都会影响到检测结果。 应使用厂商
18、配送的棉签，取样前棉签不得做任何处理，包括使用消毒剂及应使用厂商配送的棉签，取样前棉签不得做任何处理，包括使用消毒剂及任何液体任何液体, ,如生理盐水等。不要取脓性、血性样品如生理盐水等。不要取脓性、血性样品。 如不使用厂商配送的棉签，则必须保证棉签长度、棉球大小与厂商赠送的如不使用厂商配送的棉签，则必须保证棉签长度、棉球大小与厂商赠送的尽可能相同；应保证棉签是经过高温消毒的，尽可能相同；应保证棉签是经过高温消毒的，不能用环氧乙烷消毒不能用环氧乙烷消毒，后者影响，后者影响结果。结果。33 、样品的处理、样品的处理将带有样品的棉签放入厂商赠送的软塑料试管中，加入将带有样品的棉签放入厂商赠送的软塑
19、料试管中，加入400l400l稀释液（或用稀释液滴瓶），垂直滴加稀释液（或用稀释液滴瓶），垂直滴加1515滴，反复挤压棉签，使分泌滴，反复挤压棉签，使分泌物溢出。样品应及时检测，不能及时检测的样品应保存在物溢出。样品应及时检测，不能及时检测的样品应保存在2-82-8，但，但应在应在8 8小时内完成检测。小时内完成检测。 脓性、血性样品如何判读结果？脓性、血性样品如何判读结果？ 在反应孔中滴加两滴蒸溜水，轻轻晃动反应板，在反应孔中滴加两滴蒸溜水，轻轻晃动反应板， 用吸管吸去孔中的液体，观察反应垫的颜色。用吸管吸去孔中的液体，观察反应垫的颜色。 有关仪器、设备的说明有关仪器、设备的说明 1 1、
20、微量移液器（微量移液器（100l100l、1000l1000l） 2 2、 应使用恒温干浴器。应使用恒温干浴器。 使用干浴器则严格按如下要求操作：使用干浴器则严格按如下要求操作：l使用的环境温度：使用的环境温度： 18-2518-25l设定温度设定温度4848l开机预热不少于开机预热不少于1010分钟分钟l反应时间反应时间1313分钟分钟 五、五、操作步骤操作步骤123 将试剂盒从将试剂盒从2-82-8取出，平衡到室温取出，平衡到室温，取出反应装置取出反应装置开始使用开始使用. . 撕开铝箔包装，取出反应装置，轻撕开铝箔包装，取出反应装置，轻轻揭掉反应孔上的铝箔条。轻揭掉反应孔上的铝箔条。 在
21、反应装置的五个孔中每孔滴加一滴处在反应装置的五个孔中每孔滴加一滴处理过的样品，约理过的样品，约35l，以没过反应孔，以没过反应孔1/2为宜，为宜，之后在之后在“唾液酸苷酶唾液酸苷酶”反应孔中滴加一滴反应孔中滴加一滴“显色液显色液A”。 将反应装置放在将反应装置放在37水浴箱或恒温干浴水浴箱或恒温干浴器（器（48）中显）中显10分钟后在分钟后在“凝固酶凝固酶”反孔反孔加加滴加一滴滴加一滴“显色液显色液B”，继续反应，继续反应3分钟后判分钟后判读读结果。结果。SOP操作：步骤注：注： 开封后的反应装置，须避光放置，并在当天使用完毕。开封后的反应装置，须避光放置，并在当天使用完毕。六、检验结果的解释
22、六、检验结果的解释 检验结果的解释检验结果的解释1. 1. 过氧化氢（反映装置第一个反应孔）：过氧化氢浓度过氧化氢（反映装置第一个反应孔）：过氧化氢浓度2mol/L2mol/L，显红色、显红色、紫色紫色 或蓝紫色为阴性，过氧化氢浓度或蓝紫色为阴性，过氧化氢浓度2mol/L2mol/L，显蓝色为阳性。显蓝色为阳性。如显灰色或灰蓝色，则如显灰色或灰蓝色，则为样品稀释过度，建议重新采样或判读为正常。为样品稀释过度，建议重新采样或判读为正常。2.2. 唾液酸苷酶（反应装置第二个反应孔）：唾液酸苷酶（反应装置第二个反应孔）：不显色或黄色为阴性，显棕黄色为脓性不显色或黄色为阴性，显棕黄色为脓性、血性样品以
23、及脓稠分泌物所致，应判读为唾液酸苷酶阴性；显、血性样品以及脓稠分泌物所致，应判读为唾液酸苷酶阴性；显红、紫色红、紫色或或蓝色蓝色为阳为阳性，显性，显蓝色蓝色表示唾液酸苷酶活性浓度很高。表示唾液酸苷酶活性浓度很高。3.3. 白细胞酯酶（反应装置第三个反应孔）：不显色为阴性；白细胞酯酶（反应装置第三个反应孔）：不显色为阴性；显蓝色或显蓝色或绿色绿色为阳性。为阳性。参参照标准比色板。照标准比色板。“-”和和“”表示白细胞酯酶阴性，表示白细胞酯酶阴性，“+”、“+”、“+”表示白细胞酯酶阳性。表示白细胞酯酶阳性。4.4. - -葡萄糖醛酸苷酶（反应装置第四个反应孔）：不显色为阴性，葡萄糖醛酸苷酶（反应
24、装置第四个反应孔）：不显色为阴性，显蓝色显蓝色或或绿色绿色为阳为阳性。性。5.5. 凝固酶（反应装置第五个反应孔）：不显色或黄色为阴性，凝固酶（反应装置第五个反应孔）：不显色或黄色为阴性，紫红色紫红色为阳性。为阳性。 注意：反应结束后，应立即判读结果，时间在注意：反应结束后，应立即判读结果，时间在15-2015-20分钟内。分钟内。SOP操作：结果判读过氧化氢反映乳杆菌的功能 4050%唾液酸苷酶反映厌氧菌的功能15%白细胞酯酶反映白细胞功能30%-葡萄糖醛酸苷酶反映需氧菌功能1-3%凝固酶 反映需氧菌功能 15%指标指标正常值正常值异常值异常值阳性结果临床意义阳性结果临床意义过氧化氢（H2O
25、2）(2mol/L)(2mol/L)阴道微生态被破坏，或感染治疗后尚未完全恢复，生理期或阴道冲洗后唾液酸苷酶(SNa)(-)(+)致病菌厌氧菌增加（BV)白细胞酯酶(LE)(- 、)(+，+，+)阴道粘膜炎症。如是脓性分泌物可做衣原体感染筛查-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)(-)(+)致病需氧菌增加，主要为大肠埃希菌和B族链球菌(AV)凝固酶(GADP)(-)(+)致病需氧菌增加，主要为金葡菌，粪肠球菌，大肠埃希菌等(AV)结果判读临床常见检测结果类型及建议：临床常见检测结果类型及建议：1.SNa + H2O2阳性阳性：，阴道微生态失衡、BV（厌氧菌感染）2.GADP或或GUS阳性阳性+白细胞酯酶白
26、细胞酯酶(LE)阳性阳性 + H2O2阳性阳性：阴道微生态失衡，AV(需氧菌感染)。3.全部指标异常：全部指标异常：考虑混合性阴道炎.4.单纯单纯H2O2异常：异常：阴道微生态失衡，存在阴道感染的高危因素，或阴道感染治疗后阴道菌群尚未恢复，建议使用微生态制剂治疗，并定期复查。如出现外阴瘙痒等临床症状需及时就诊。七、产品技术参数七、产品技术参数产品技术参数产品技术参数 1 1、重复性：、重复性： a a）批内重复性：）批内重复性：90%90%； b b）批间重复性：）批间重复性：90%90%； 2 2、阴性参考品符合率、阴性参考品符合率90%90%； 3 3、阳性参考品符合率、阳性参考品符合率9
27、0%90%； 有质控品，是国内唯一获得批件的。有质控品，是国内唯一获得批件的。最低检出量最低检出量过氧化氢过氧化氢2mol/L2mol/L、唾液酸苷酶、唾液酸苷酶7 U/L7 U/L、白细胞酯酶、白细胞酯酶9 U/L9 U/L、-葡萄糖葡萄糖醛酸苷酶醛酸苷酶15U/L15U/L、凝固酶、凝固酶20U/L20U/L检出符合率检出符合率阳性参考品符合率阳性参考品符合率过氧化氢过氧化氢2mol/L2mol/L 符合率符合率90%90%唾液酸苷酶唾液酸苷酶7 U/L 7 U/L 符合率符合率90%90%白细胞酯酶白细胞酯酶9 U/L 9 U/L 符合率符合率90%90%-葡萄糖醛酸苷酶葡萄糖醛酸苷酶1
28、5U/L 15U/L 符合率符合率90%90%凝固酶凝固酶20U/L 20U/L 符合率符合率90%90%阴性参考品符合率阴性参考品符合率过氧化氢过氧化氢2mol/L 2mol/L 符合率符合率90%90%唾液酸苷酶唾液酸苷酶7 U/L 7 U/L 符合率符合率90%90%白细胞酯酶白细胞酯酶9 U/L 9 U/L 符合率符合率90%90%-葡萄糖醛酸苷酶葡萄糖醛酸苷酶15U/L 15U/L 符合率符合率90%90%凝固酶凝固酶20U/L 20U/L 符合率符合率90%90%阴道分泌物测定的质量控制阴道分泌物测定的质量控制技术标准产品注册证京药监械（准）字2010第2400485号（需氧菌阴道
29、炎细菌性阴道病五项联合测定试剂盒，商品名：爱必维）“一种检测阴道分泌物中需氧菌群的试剂盒及其制备方法”专利号：2009102442674和200910244266.X。企业标准第四部分发明专利建立“需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合测定试剂盒”的企业标准，编号为YZB/京0057-2010配套仪器妇科感染、微生态评价系统 预计近期上市显微图像分析系统阴道分泌物结果分析终端阴道分泌物生化分析仪 结束语结束语 女性生殖健康关乎你我，我们有责任和义务对该女性生殖健康关乎你我，我们有责任和义务对该 病检查、防治做出努力。病检查、防治做出努力。 “爱必维爱必维”对目前国内外妇科最热点的对目前国内外妇科最热点的AV（需氧菌（需氧菌 阴道炎）、女性微生态环境等课题提供了标准、专阴道炎）、女性微生态环境等课题提供了标准、专 业、全面、准确的检查技术。业、全面、准确的检查技术。 操作简单、准确度高。操作简单、准确度高。 为女性乃至人类健康事业，我们会不断努力。为女性乃至人类健康事业，我们会不断努力。
