1、乳酸菌乳酸菌LB株的特性及其株的特性及其在家禽生产中的应用在家禽生产中的应用毕英佐毕英佐 曹永长曹永长 胡文锋胡文锋华南农业大学华南农业大学益生素的概念益生素的概念活体微生物制成的生物活性制活体微生物制成的生物活性制剂，来自动物有机体共生微生剂，来自动物有机体共生微生物的培养物或其发酵产品，故物的培养物或其发酵产品，故又称活菌制剂又称活菌制剂( (biogenbiogen) )或微生或微生态制剂（态制剂（MFAMFA）。）。益生素的优点益生素的优点1 1、具有改善消化道菌群平衡，迅速提高机、具有改善消化道菌群平衡，迅速提高机体抗病力、代谢能力，以及饲料的吸收利体抗病力、代谢能力，以及饲料的吸收
2、利用能力，从而达到防治消化道疾病和促进用能力，从而达到防治消化道疾病和促进生长等多重作用的生物活性添加剂。生长等多重作用的生物活性添加剂。2 2、无毒无副作用，无残留污染、不产生抗、无毒无副作用，无残留污染、不产生抗性、成本较低、使用方便，是最理想的抗性、成本较低、使用方便，是最理想的抗生素换代产品。生素换代产品。常规益生素的缺点常规益生素的缺点 受环境条件受环境条件( (温度、水分、酸碱度等温度、水分、酸碱度等) )的影响，其活菌制剂在生产、运输中易的影响，其活菌制剂在生产、运输中易失活，从而降低使用效果；失活，从而降低使用效果； 饲料加工的高温过程使大量的活菌致饲料加工的高温过程使大量的活
3、菌致死，导致有效成份失活；死，导致有效成份失活；常规益生素的缺点常规益生素的缺点饲料中添加的或在治疗过程使用的抗饲料中添加的或在治疗过程使用的抗生素和化学合成抗菌剂，对益生菌同样生素和化学合成抗菌剂，对益生菌同样具有杀灭或抑制作用；具有杀灭或抑制作用；进入消化道后不能有效抵抗盐酸、胆进入消化道后不能有效抵抗盐酸、胆酸等的作用，来不及到达肠道或无法长酸等的作用，来不及到达肠道或无法长时间定植肠道发挥其功效时间定植肠道发挥其功效;对动物肠道疾病的治疗效果仍不尽人对动物肠道疾病的治疗效果仍不尽人意意。乳酸菌乳酸菌LB株（株（LB菌）菌）嗜酸性乳酸菌嗜酸性乳酸菌热灭活后保持完整的细胞形态热灭活后保持完
4、整的细胞形态有效成分是有效成分是LBLB菌菌体及其代谢产菌菌体及其代谢产物物能抑制或杀灭肠道致病菌、刺激能抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长有益微生物生长LB菌的特性菌的特性1 1、热灭活的、热灭活的LBLB菌及其多菌及其多肽类抗菌物质具有热稳定肽类抗菌物质具有热稳定性。性。LB菌的特性菌的特性加热加热10分钟后分钟后LB菌数量的变化菌数量的变化每100毫升 含LB菌数 （亿 ）加热温 度对照加热处 理比率（ （ %）70293010390282810011028281001302627104LB菌的特性菌的特性加热加热30分钟后分钟后LB菌数量的变化菌数量的变化每100毫升含LB菌数（
5、亿）加热温度对照热处理组比率（%）70292910090272810411028281001302828100LB菌的特性菌的特性2、热灭活热灭活LBLB菌体对抗生菌体对抗生素和化学抗菌剂具有极好素和化学抗菌剂具有极好的耐受性及稳定性的耐受性及稳定性 LB菌的特性菌的特性 LBLB菌菌体细胞在抗生素存在的环境中数量变化菌菌体细胞在抗生素存在的环境中数量变化(1)(1)每 100 毫 升 含 LB 菌 数 （ 亿 ）处 理 种 类抗 生 素浓 度 (ppm)0 小 时1 小 时3 小 时对 照293026羟 氨 苄 青 霉 素200500282730282628金 霉 素150500282830
6、282726洁 霉 素40200282927282728喹 乙 醇200500283030282927LB菌的特性菌的特性LBLB菌菌体细胞在抗生素存在的环境中数量变化菌菌体细胞在抗生素存在的环境中数量变化(2)(2)每 100 毫升含 LB 菌数（亿）处理种类抗生素浓度(ppm)0 小时1 小时3 小时对照293026磺胺甲基嘧啶100300302730282726太乐霉素100500282726292728新霉素200500283030282927维及霉素100500283027282729LB菌的特性菌的特性3、LBLB菌有效成份在酸性菌有效成份在酸性条件下仍然稳定条件下仍然稳定. .L
7、B菌的特性菌的特性(1)LB(1)LB菌菌体在酸性条件下稳定。菌菌体在酸性条件下稳定。(2)LB(2)LB菌代谢产物中的抗菌物质在酸菌代谢产物中的抗菌物质在酸 性条件下稳定；在碱性条件下部性条件下稳定；在碱性条件下部 分失活。分失活。(3)LB(3)LB菌代谢产物中的抗菌物质经胰菌代谢产物中的抗菌物质经胰 蛋白酶、蛋白酶蛋白酶、蛋白酶K K处理后，抗菌活处理后，抗菌活 性下降性下降20-40%20-40%。LB菌抑制或杀灭肠道菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理生物生长的作用机理LB菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺
8、激有益微生物生长的作用机理1、热灭活热灭活LBLB菌菌体细胞对动物肠细菌菌体细胞对动物肠细胞的高粘附性，形成一层生物膜，胞的高粘附性，形成一层生物膜，竞争性地阻隔致病菌和病毒对肠细竞争性地阻隔致病菌和病毒对肠细胞的粘附与侵入。胞的粘附与侵入。E.coliE.coli( (左左) )和和LB(LB(右右) )对对HelaHela细胞的粘附性细胞的粘附性肠肠道道粘粘附附指指数数(*)LBLB株与其他乳酸菌的粘附性比较株与其他乳酸菌的粘附性比较(1)(1)(*)每每100个个Caco-2细胞粘附的乳酸菌数细胞粘附的乳酸菌数LBLB株与其他乳酸菌的粘附性比较株与其他乳酸菌的粘附性比较(2)(2)肠肠道
9、道粘粘附附指指数数(*)(*)每每100个个Caco-2细胞粘附的乳酸菌数细胞粘附的乳酸菌数热灭活热灭活LB菌对空肠弯曲杆菌粘附结肠粘膜的影响菌对空肠弯曲杆菌粘附结肠粘膜的影响安慰剂安慰剂红霉素红霉素LB菌菌LB菌菌LB菌菌桥联蛋白桥联蛋白E.coli直接粘附直接粘附E.coli的粘附被的粘附被LB菌阻断菌阻断LB菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理2、LBLB菌代谢产物中多肽类抗菌菌代谢产物中多肽类抗菌活性物质对肠道致病菌具有抑活性物质对肠道致病菌具有抑制和杀灭作用，甚至能杀灭已制和杀灭作用，甚至能杀灭已经侵入到宿主细胞中的
10、致病菌经侵入到宿主细胞中的致病菌热灭活的热灭活的LB菌存在时（菌存在时（35亿亿/ml），），101个菌株的生长被推迟个菌株的生长被推迟外源性外源性致病菌致病菌幽门螺杆菌的电镜照片。幽门螺杆菌的电镜照片。A：对照。：对照。B：乳：乳酸处理。酸处理。C和和D：LB菌的浸提液处理。菌的浸提液处理。LB菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理3 3、富含、富含B B族维生素，刺激肠道内族维生素，刺激肠道内产酸性有益微生物菌群的生长。产酸性有益微生物菌群的生长。热灭活的热灭活的LB菌对来自肠道的菌对来自肠道的乳芽孢杆菌的生长刺激作用乳芽孢
11、杆菌的生长刺激作用2424小小时时生生长长指指数数（* *）（* *）乳酸的产量，以每升含有的克数表示）乳酸的产量，以每升含有的克数表示 对照对照3亿亿LB菌菌12亿亿LB菌菌LB菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理菌抑制或杀灭肠道致病菌、刺激有益微生物生长的作用机理4 4、LBLB菌菌体细胞对肠粘膜的非菌菌体细胞对肠粘膜的非特异性免疫刺激作用，提高动特异性免疫刺激作用，提高动物体内物体内IgAIgA水平。水平。热灭活的热灭活的LB菌的免疫刺激作用菌的免疫刺激作用LB菌菌: 50亿亿/ml溶菌液溶菌液: 71亿亿/mlLBLB菌作用机理示意图菌作用机理示意图LB菌的临床应用菌的
12、临床应用1、LB菌对蛋鸡生产性能的影响菌对蛋鸡生产性能的影响2、 LB菌对黄种鸡生产性能的影响菌对黄种鸡生产性能的影响LB菌对蛋鸡生产性能的影响：死亡率菌对蛋鸡生产性能的影响：死亡率试 验 组 ：饲 料 中 含0.01% LB(25 万 /g)对 照 组 ：常 规 料试 验 组 -对 照 组鸡 只 数38903884死 亡 数 /死 亡 率 第 1 周712 第 2 周616 第 3 周1010 第 4 周1311 第 5 周1522 第 6 周812合 计1.52%2.14%-0.62%LB菌对蛋鸡生产性能的影响：产蛋率菌对蛋鸡生产性能的影响：产蛋率/%试 验 组 ：饲 料 中 含0.01%
13、 LB(25 万 /g)对 照 组 ：常 规 料试 验 组 -对 照 组鸡 只 数38903884 第 1 周88.0787.92 第 2 周89.7689.16 第 3 周88.8288.67 第 4 周90.0088.85 第 5 周88.8187.41 第 6 周83.7281.43平 均88.5387.700.83%LB菌对蛋鸡生产性能的影响：死亡率菌对蛋鸡生产性能的影响：死亡率试 验 组 ：饲 料 中 含0 .0 2 % L B(5 0 万 /g )对 照组 ： 常规 料试 验 组 -对 照 组鸡 只 数4 1 6 94 0 3 9死 亡 数 /死 亡 率 第 1 周911 第 2
14、周91 6 第 3 周1 311 第 4 周44 第 5 周119 第 6 周71 2合 计1 .2 7 %1 .5 6 %- 0 .2 9 %LB菌对蛋鸡生产性能的影响：产蛋率菌对蛋鸡生产性能的影响：产蛋率/%试 验 组 ：饲 料 中 含0.02%LB(50 万 /g)对 照组 ： 常规 料试 验 组 -对 照 组鸡 只 数41694039 第 1 周91.8391.19 第 2 周90.7790.17 第 3 周90.0088.82 第 4 周89.7887.70 第 5 周88.9484.67 第 6 周87.5182.54平 均89.9887.912.07% 乳酸菌乳酸菌 LB 株对黄
15、种鸡生产性能的影响株对黄种鸡生产性能的影响-添加添加 0.01%LB 菌菌试验组：常规料+0.01%LB(25 万/g)对照组：常规料试验组-对照组鸡只数23562416试验时间6.16.7.23.6.16.7.23.周龄35393539死亡率1.4%1.3%0.1%产蛋率(%)67.5%65.5%2.0%受精率91.5%90.5%1.0%乳乳酸酸菌菌LB株株对对黄黄种种鸡鸡生生产产性性能能的的影影响响-添添加加0.02%LB菌菌试验组：常规料+0.02%LB(50万/g)对照组：常规料试验组-对照组鸡只数14311431试验时间6.16.7.23.6.16.7.23.周龄45494549死亡率1.4%1.5%-0.1%产蛋率(%)48.3%48.1%0.2%受精率*90.6%88.5%2.1%谢谢 谢谢! !毕英佐教授毕英佐教授华南农业大学动物科学系华南农业大学动物科学系广州广州, ,天河天河, ,五山五山 510642510642Tel: 020-87591508Tel: 020-87591508Fax: 020-87590780Fax: 020-87590780Email: Email:
