1、药物眼刺激性指导原则及试验设计考虑要点药物眼刺激性指导原则及试验设计考虑要点靳洪涛靳洪涛中国医学科学院中国协和医科大学新药安全评价研究中心中国医学科学院中国协和医科大学新药安全评价研究中心北京协和建昊医药技术开发有限责任公司北京协和建昊医药技术开发有限责任公司眼的结构眼的结构眼的结构眼的结构眼球的组成. 包括眼球壁、眼内腔和内容物、神经、血管等组织包括眼球壁、眼内腔和内容物、神经、血管等组织1.眼球壁主要分为外、中、内三层眼球壁主要分为外、中、内三层内层为视网膜，是一层透明的膜，也是视觉形成的神经信息传递的第内层为视网膜，是一层透明的膜，也是视觉形成的神经信息传递的第一站。具有很精细的网络结构
2、及丰富的代谢和生理功能。视网膜的视轴一站。具有很精细的网络结构及丰富的代谢和生理功能。视网膜的视轴正对终点为黄斑中心凹。黄斑区是视网膜上视觉最敏锐的特殊区域，直正对终点为黄斑中心凹。黄斑区是视网膜上视觉最敏锐的特殊区域，直径约径约1-3mm，其中央为一小凹，即中心凹。黄斑鼻侧约其中央为一小凹，即中心凹。黄斑鼻侧约3mm处有一直径处有一直径为为1.5mm的淡红色区，为视盘，亦称视乳头，是视网膜上视觉纤维汇集的淡红色区，为视盘，亦称视乳头，是视网膜上视觉纤维汇集向视觉中枢传递的出眼球部位，无感光细胞，故视野上呈现为固有的暗向视觉中枢传递的出眼球部位，无感光细胞，故视野上呈现为固有的暗区，称生理盲点
3、。区，称生理盲点。中层又称葡萄膜，色素膜，具有丰富的色素和血管，包括虹膜、睫状中层又称葡萄膜，色素膜，具有丰富的色素和血管，包括虹膜、睫状体和脉络膜三部分。体和脉络膜三部分。虹膜：呈环圆形，在葡萄膜的最前部分，位于晶体前，有辐射状皱褶虹膜：呈环圆形，在葡萄膜的最前部分，位于晶体前，有辐射状皱褶称纹理，表面含不平的隐窝。不同种族人的虹膜颜色不同。中央有一称纹理，表面含不平的隐窝。不同种族人的虹膜颜色不同。中央有一2.5-4mm的圆孔，称瞳孔。的圆孔，称瞳孔。睫状体前接虹膜根部，后接脉络膜，外侧为巩膜，睫状体前接虹膜根部，后接脉络膜，外侧为巩膜，内侧则通过悬韧带与晶体赤道部相连。内侧则通过悬韧带与
4、晶体赤道部相连。脉络膜位于巩膜和视网膜之间。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其脉络膜位于巩膜和视网膜之间。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。含有的丰富色素起遮光暗房作用。外层由角膜、巩膜组成。外层由角膜、巩膜组成。前前1/6为透明的角膜，其余为透明的角膜，其余5/6为白为白色的巩膜，俗称色的巩膜，俗称“眼白眼白”。眼球外层起维持眼球形状和保护眼内。眼球外层起维持眼球形状和保护眼内组织的作用。角膜是接受信息的最前哨入口。角膜是眼球前部的组织的作用。角膜是接受信息的最前哨入口。角膜是眼球前部的透明部分，光线经此射入眼球。角膜稍呈椭圆形，略向前突。横透明部分，光线经此射入眼
5、球。角膜稍呈椭圆形，略向前突。横径为径为11.5-12mm，垂直径约垂直径约10.5-11mm。周边厚约周边厚约1mm，中央为中央为0.6mm。角膜前的一层泪液膜有防止角膜干燥、保持角膜平滑和角膜前的一层泪液膜有防止角膜干燥、保持角膜平滑和光学特性的作用。光学特性的作用。角膜含丰富的神经，感觉敏锐。因此角膜除角膜含丰富的神经，感觉敏锐。因此角膜除了是光线进入眼内和折射成像的主要结构外，也起保护作用，并了是光线进入眼内和折射成像的主要结构外，也起保护作用，并是测定人体知觉的重要部位。是测定人体知觉的重要部位。2.眼内腔和内容物眼内腔和内容物眼内腔包括前房、后房和玻璃体腔。眼内腔包括前房、后房和玻
6、璃体腔。三者均透三者均透明，与角膜一起共称为屈光介质。明，与角膜一起共称为屈光介质。 房水由睫状突产生，有营养角膜、晶房水由睫状突产生，有营养角膜、晶体及玻璃体，维持眼压的作用。体及玻璃体，维持眼压的作用。 晶体为富有弹性的透明体，形如双凸透晶体为富有弹性的透明体，形如双凸透镜，位于虹膜、瞳孔之后、玻璃体之前。镜，位于虹膜、瞳孔之后、玻璃体之前。 玻璃体为透明的胶质体，充满玻璃体为透明的胶质体，充满眼球后眼球后4/54/5的空腔内。主要成分为水。玻璃体有屈光作用，也起支撑视网的空腔内。主要成分为水。玻璃体有屈光作用，也起支撑视网膜的作用。膜的作用。3 .3 . 视 神 经 、 视 路视 神 经
7、 、 视 路 视 神 经 是 中 枢 神 经 系 统 的 一 部 分视 神 经 是 中 枢 神 经 系 统 的 一 部 分 视网膜所得到的视觉信息，经视神经传送到大脑。视网膜所得到的视觉信息，经视神经传送到大脑。 视路是指从视路是指从视网膜接受视信息到大脑视皮层形成视觉的整个神经冲动传递的径路。视网膜接受视信息到大脑视皮层形成视觉的整个神经冲动传递的径路。4. 4. 眼附属器眼附属器 眼附属器包括眼睑、结膜、泪器、眼外肌和眼眶眼附属器包括眼睑、结膜、泪器、眼外肌和眼眶刺激性试验 定义刺激性是指非口服给药制剂给药后对给药部位产生的可逆性炎症反应，若给药部位产生了不可逆性的组织损伤则称为腐蚀性。刺
8、激性试验是观察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜等部位接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出、变性或坏死等局部反应。 刺激性试验设计中应考虑的问题刺激性试验设计中应考虑的问题 1 1 实验动物的选择实验动物的选择 依据拟采用的试验模型和观察指标选择试验动物，一般每个试验选择依据拟采用的试验模型和观察指标选择试验动物，一般每个试验选择一种动物进行评价。一种动物进行评价。 2 2 给药的频率与期限给药的频率与期限 给药频率和期限应依据拟定临床应用的情况来决定。重复给药的制剂，给药频率和期限应依据拟定临床应用的情况来决定。重复给药的制剂，一般每天给药一次，给药期限最长不超过一般每天给药一次，给药期限最长不超
9、过4 4周。单次给药的制剂可用单次周。单次给药的制剂可用单次给药的方法进行试验。给药的方法进行试验。 3 3 可逆性观察可逆性观察 为明确毒性反应的性质，建议进行停药后恢复期的观察。局部毒性反为明确毒性反应的性质，建议进行停药后恢复期的观察。局部毒性反应的可逆性评价应包括局部及相关部位的反应。应的可逆性评价应包括局部及相关部位的反应。 4 4 受试物受试物 受试物应与临床应用制剂一致。受试物应与临床应用制剂一致。 刺激性试验设计中应考虑的问题刺激性试验设计中应考虑的问题 5 5 对照组对照组 以溶媒和以溶媒和/ /或赋形剂作为阴性对照。必要时采用已上市制剂作对或赋形剂作为阴性对照。必要时采用已
10、上市制剂作对照。照。 6 6 剂量剂量 剂量设计主要应该考虑受试物浓度和总剂量。一般采用与临床制剂量设计主要应该考虑受试物浓度和总剂量。一般采用与临床制剂相同浓度，设一个剂量组，可以通过改变给药频率进行剂量的剂相同浓度，设一个剂量组，可以通过改变给药频率进行剂量的调整，必要时应该进行不同浓度的刺激性试验。对于皮肤刺激性调整，必要时应该进行不同浓度的刺激性试验。对于皮肤刺激性试验，在给药面积不变的情况下，不应通过增加厚度来满足增加试验，在给药面积不变的情况下，不应通过增加厚度来满足增加给药量的目的。给药量的目的。 7 7 给药方案给药方案 给药方案原则上应与临床用药方案一致，但设计给药容积、速率
11、给药方案原则上应与临床用药方案一致，但设计给药容积、速率和频率时，应考虑所选用动物模型给药部位的解剖和生理特点。和频率时，应考虑所选用动物模型给药部位的解剖和生理特点。 8 8 统计处理统计处理 根据实验模型和试验方法选择合适的统计方法。根据实验模型和试验方法选择合适的统计方法。 眼刺激性试验眼刺激性试验 眼用药物及可能接触眼睛的受试物均应考虑进行眼刺激性试验。眼用药物及可能接触眼睛的受试物均应考虑进行眼刺激性试验。 在急性毒性试验、长期毒性试验中已经评价过眼刺激性，其受试物与拟在急性毒性试验、长期毒性试验中已经评价过眼刺激性，其受试物与拟进行临床研究的制剂相同或具有可比性，可不必进行单独的眼
12、刺激性试进行临床研究的制剂相同或具有可比性，可不必进行单独的眼刺激性试验。验。 眼刺激性试验方法 实验动物实验动物首选家兔，每组动物数不少于首选家兔，每组动物数不少于3只。应设置生理盐水对照组，可采用只。应设置生理盐水对照组，可采用同体左右侧自身对比法。试验前同体左右侧自身对比法。试验前24小时内对每只动物的双眼进行检查小时内对每只动物的双眼进行检查（包括使用荧光素钠检查）。有眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损伤（包括使用荧光素钠检查）。有眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损伤的动物不能用于试验。的动物不能用于试验。给药方法给药方法每只眼睛滴入每只眼睛滴入0.05-0.1ml或涂敷或涂敷0.1g受试物，
13、然后轻合眼睑约受试物，然后轻合眼睑约10秒。一秒。一般不需冲洗眼睛。给药期限应根据受试物拟用于临床的情况来决定，般不需冲洗眼睛。给药期限应根据受试物拟用于临床的情况来决定，多次给药时每天给受试物的次数应与临床用药频率相同，连续给受试多次给药时每天给受试物的次数应与临床用药频率相同，连续给受试物物2-4周，一般不超过周，一般不超过4周。周。结果观察结果观察 应根据受试物的特点和刺激性反应情况来选择适当的观察时间。通常单次给应根据受试物的特点和刺激性反应情况来选择适当的观察时间。通常单次给药眼刺激试验，在给药后药眼刺激试验，在给药后1 1、2 2、4 4、2424、4848和和7272小时对眼部进
14、行检查，也可小时对眼部进行检查，也可根据受试物的特点适当调整观察时间；多次给药眼刺激试验，每天给药前以根据受试物的特点适当调整观察时间；多次给药眼刺激试验，每天给药前以及最后一次给药后及最后一次给药后1 1、2 2、4 4、2424、4848和和7272小时对眼部进行检查，也可根据受小时对眼部进行检查，也可根据受试物的特点适当调整观察时间。如果在试物的特点适当调整观察时间。如果在7272小时未见任何刺激症状，试验则可小时未见任何刺激症状，试验则可结束。如存在持久性损伤，有必要延长观察期限，但一般不超过结束。如存在持久性损伤，有必要延长观察期限，但一般不超过2121天。天。仪器仪器 一般采用裂隙
15、灯（或手持裂隙灯）进行眼刺激反应检查，也可根据刺激性反一般采用裂隙灯（或手持裂隙灯）进行眼刺激反应检查，也可根据刺激性反应情况采用其他的合适器械（如放大镜、生物显微镜等）。在整个观察过程应情况采用其他的合适器械（如放大镜、生物显微镜等）。在整个观察过程中应进行荧光素染色检查。每次检查，都应记录眼部反应的分值（见表中应进行荧光素染色检查。每次检查，都应记录眼部反应的分值（见表3 3）。）。除了观察所列出的结膜、角膜和虹膜损伤外，其他所观察到的损伤也应记录除了观察所列出的结膜、角膜和虹膜损伤外，其他所观察到的损伤也应记录和报告。和报告。 结果统计与分析结果统计与分析按表要求，将每只动物的眼角膜、虹
16、膜和结膜的刺激反应的分值相按表要求，将每只动物的眼角膜、虹膜和结膜的刺激反应的分值相加，即是一只受试动物眼刺激反应的总积分。把每只动物的刺激反应加，即是一只受试动物眼刺激反应的总积分。把每只动物的刺激反应积分总和除以动物数，就是药物对眼刺激性的最后分值。按表积分总和除以动物数，就是药物对眼刺激性的最后分值。按表2标准，标准，判定药物对眼的刺激程度。判定药物对眼的刺激程度。眼附属器检查眼附属器检查 （一）一）眼睑眼睑 观察有无红、肿、瘀血、气肿、疤痕或肿物；有无内翻或外翻；观察有无红、肿、瘀血、气肿、疤痕或肿物；有无内翻或外翻；两侧睑裂是否对称，上睑提起及眼睑闭合功能是否正常。睫毛是否整齐、方向
17、两侧睑裂是否对称，上睑提起及眼睑闭合功能是否正常。睫毛是否整齐、方向是否正常、有无变色、脱落，根部有无充血、鳞屑、脓痂或溃疡。是否正常、有无变色、脱落，根部有无充血、鳞屑、脓痂或溃疡。（二）（二）泪器泪器 注意泪点有无外翻或闭塞。泪囊区有无红肿压痛或瘘管，在无红注意泪点有无外翻或闭塞。泪囊区有无红肿压痛或瘘管，在无红肿时压挤泪囊看有无分泌物自泪点溢出。肿时压挤泪囊看有无分泌物自泪点溢出。（三）（三）结膜结膜 将眼睑向上下翻转检查结膜及穹隆部结膜，注意其颜色，以及是将眼睑向上下翻转检查结膜及穹隆部结膜，注意其颜色，以及是否透明光滑，有无充血、水肿、乳头肥大、滤泡增生、疤痕、溃疡、睑球粘连，否透明
18、光滑，有无充血、水肿、乳头肥大、滤泡增生、疤痕、溃疡、睑球粘连，有无异物或分泌物堵集。有无异物或分泌物堵集。（四）（四）眼眶眼眶 观察两侧眼眶是否对称，眼缘触诊有无缺损、压痛或肿物。观察两侧眼眶是否对称，眼缘触诊有无缺损、压痛或肿物。眼球前段检查眼球前段检查（一）（一）角膜角膜 注意角膜的大小、弯曲度、透明度及表面是否光滑。有无注意角膜的大小、弯曲度、透明度及表面是否光滑。有无异物、新生血管及混浊（瘢痕或炎症）。感觉如何。角膜后有无沉着物。异物、新生血管及混浊（瘢痕或炎症）。感觉如何。角膜后有无沉着物。（二）（二）巩膜巩膜 注意巩膜有无黄染、充血、结节及压痛。注意巩膜有无黄染、充血、结节及压痛
19、。（三）（三）前房前房 将手电灯光在外眦处照向内眦，如鼻侧虹膜全被照亮，为将手电灯光在外眦处照向内眦，如鼻侧虹膜全被照亮，为深前房；如鼻部虹膜仅被照亮深前房；如鼻部虹膜仅被照亮1 1mmmm或更少，则为浅前方，有潜在的发生闭角或更少，则为浅前方，有潜在的发生闭角性青光眼的危险。注意房水有无混浊、积血、积脓。性青光眼的危险。注意房水有无混浊、积血、积脓。（四）（四）虹膜虹膜 两侧瞳孔是否等大，形圆，位置是否居中，边缘是否整齐。两侧瞳孔是否等大，形圆，位置是否居中，边缘是否整齐。（五）（五）晶状体晶状体 观察晶状体有无混浊，有无脱位。观察晶状体有无混浊，有无脱位。瞳孔检查瞳孔检查在动物房正常光照下
20、用肉眼观察其自然状态。在动物房正常光照下用肉眼观察其自然状态。观察两眼瞳孔大小，正常情况下应为圆形、等大。观察两眼瞳孔大小，正常情况下应为圆形、等大。检查瞳孔对光反应：将动物移至在光线较暗的地方，另一人用电筒照射眼睛，检查瞳孔对光反应：将动物移至在光线较暗的地方，另一人用电筒照射眼睛，观察动物的瞳孔反应及灵敏度（参照观察动物的瞳孔反应及灵敏度（参照SOPT226SOPT226）。）。按照角膜给药的按照角膜给药的SOPSOP给予散瞳剂，使瞳孔散大。给予散瞳剂，使瞳孔散大。5-155-15分钟后用直接或间接检眼分钟后用直接或间接检眼镜检查。镜检查。晶体检查：是否透明，有无混蚀物。晶体检查：是否透明
21、，有无混蚀物。玻璃体检查：将检眼镜转盘调为玻璃体检查：将检眼镜转盘调为+8-+10+8-+10屈光度，将光线射入瞳孔区，可见眼屈光度，将光线射入瞳孔区，可见眼底淡绿色或褐色反光，观察此背景下有无混浊物。底淡绿色或褐色反光，观察此背景下有无混浊物。眼底检查，观察视网膜颜色，视神经乳头形态、色泽是否正常、边界是否清晰，眼底检查，观察视网膜颜色，视神经乳头形态、色泽是否正常、边界是否清晰，血管走向和动静脉管径的比例是否正常，观察有无水肿、渗出、出血、脱离、血管走向和动静脉管径的比例是否正常，观察有无水肿、渗出、出血、脱离、色素沉着等。色素沉着等。检眼镜检查（一）正常视乳头略呈圆形，淡红色，边界清楚。
22、中央有凹陷，色泽稍淡，）正常视乳头略呈圆形，淡红色，边界清楚。中央有凹陷，色泽稍淡，。若视乳头边界模糊、隆起，应考虑为颅内压增高所致视乳头水肿或视神经。若视乳头边界模糊、隆起，应考虑为颅内压增高所致视乳头水肿或视神经炎，如色泽苍白为视神经萎缩。炎，如色泽苍白为视神经萎缩。（二）视网膜中央动脉色鲜红，静脉色暗红，动静脉管径之比（二）视网膜中央动脉色鲜红，静脉色暗红，动静脉管径之比2：3，如动脉，如动脉变细、或动脉交叉处静脉中断或尖削，则表明有小动脉痉挛或硬化。变细、或动脉交叉处静脉中断或尖削，则表明有小动脉痉挛或硬化。（三）视网膜正常时透明，可透见下方之色素上皮及脉络膜，故呈均匀深橘（三）视网膜
23、正常时透明，可透见下方之色素上皮及脉络膜，故呈均匀深橘红色或豹纹状，许多眼病或全身疾病都可使视网膜出现水肿、出血、渗出、红色或豹纹状，许多眼病或全身疾病都可使视网膜出现水肿、出血、渗出、坏死或色素异常。坏死或色素异常。（四）黄斑部位于视乳头颞侧距（四）黄斑部位于视乳头颞侧距2PD（视乳头直径）稍偏下处，呈暗红色、视乳头直径）稍偏下处，呈暗红色、无血管、其中心有一针尖样反光点，称为中心凹光反射无血管、其中心有一针尖样反光点，称为中心凹光反射裂隙灯显微镜检查裂隙灯显微镜检查 眼各部检查法：眼各部检查法：结膜：将光线直接聚在结膜上，即可反映各种病变现象，如结膜上皮改变，新生物结膜：将光线直接聚在结膜
24、上，即可反映各种病变现象，如结膜上皮改变，新生物，色素沉着，异物，结膜血管形态，并可通过透明眼球结膜观察巩膜组织的某些改，色素沉着，异物，结膜血管形态，并可通过透明眼球结膜观察巩膜组织的某些改变。变。角膜：可用直接焦点法和间接照射法，直接法更常用。裂隙光通过角膜形成一半透角膜：可用直接焦点法和间接照射法，直接法更常用。裂隙光通过角膜形成一半透明灰白色光带，前表面呈凸弧形，后表面凹弧形，弧度均匀一致。显出角膜上皮，明灰白色光带，前表面呈凸弧形，后表面凹弧形，弧度均匀一致。显出角膜上皮，基质及内皮。角膜病变时，病区厚度有改变，如溃疡则表层缺损。角膜后沉淀物（基质及内皮。角膜病变时，病区厚度有改变，
25、如溃疡则表层缺损。角膜后沉淀物（K，P），），可在角膜内皮层看到。间接照射法是利用虹膜，晶状体反光看清角膜新生血可在角膜内皮层看到。间接照射法是利用虹膜，晶状体反光看清角膜新生血管异物等。管异物等。前房：对准角膜光带与虹膜，晶状体光带中间的透明空间。如有混浊可出现了道氏前房：对准角膜光带与虹膜，晶状体光带中间的透明空间。如有混浊可出现了道氏现象，即出现灰白色半透明反光带和飘浮游动的细小颗粒。现象，即出现灰白色半透明反光带和飘浮游动的细小颗粒。虹膜：常用宽光带，直接焦点法，观察虹膜色泽，纹理及对光反射。病变时出现的虹膜：常用宽光带，直接焦点法，观察虹膜色泽，纹理及对光反射。病变时出现的新生血管，
26、粘连，充血水肿等可看清。新生血管，粘连，充血水肿等可看清。晶状体：在裂隙光束下形成一光学切面，可分出囊膜，皮质和核。准确地确定混浊晶状体：在裂隙光束下形成一光学切面，可分出囊膜，皮质和核。准确地确定混浊部位与范围。部位与范围。玻璃体：焦点移到后囊的后方，可见青灰色膜样或纤维样结构，形如下垂窗帘，随玻璃体：焦点移到后囊的后方，可见青灰色膜样或纤维样结构，形如下垂窗帘，随眼球转动而移动。如葡萄膜炎症可见灰白色渗出，出血时可见棕红色漂浮状血细胞眼球转动而移动。如葡萄膜炎症可见灰白色渗出，出血时可见棕红色漂浮状血细胞，变性时可见不同形状的混浊物。，变性时可见不同形状的混浊物。眼用制剂眼用制剂系指直接用
27、于眼部发挥治疗作用的制剂系指直接用于眼部发挥治疗作用的制剂眼部制剂可分为眼用液体制剂（滴眼剂、洗眼剂、眼内注射溶剂）、眼眼部制剂可分为眼用液体制剂（滴眼剂、洗眼剂、眼内注射溶剂）、眼用半固体制剂（眼膏剂、眼用乳膏剂、眼用凝胶剂）、眼用固体制剂（用半固体制剂（眼膏剂、眼用乳膏剂、眼用凝胶剂）、眼用固体制剂（眼膜剂、眼丸剂、眼内插入剂）等。也可以固态形式包装，另备溶剂，眼膜剂、眼丸剂、眼内插入剂）等。也可以固态形式包装，另备溶剂，在临用前配成溶液或混悬剂。在临用前配成溶液或混悬剂。在在2005年版药典中明确指出各类眼用制剂均应为无菌制剂。无疑这一规年版药典中明确指出各类眼用制剂均应为无菌制剂。无疑
28、这一规定明确了眼用制剂是按照无菌工艺生产的，且终产品应为无菌产品，因定明确了眼用制剂是按照无菌工艺生产的，且终产品应为无菌产品，因此加强眼用制剂的无菌要求是合理、必要的，同时也是可行的。此加强眼用制剂的无菌要求是合理、必要的，同时也是可行的。眼用制剂必须考虑无菌性眼用制剂的稳定性研究资料中，大多说申报单位未将无菌或微生物限度检查眼用制剂的稳定性研究资料中，大多说申报单位未将无菌或微生物限度检查作为考察指标。无菌是眼用制剂重要的质量要求，尽管眼用制剂在使用时，作为考察指标。无菌是眼用制剂重要的质量要求，尽管眼用制剂在使用时，特别是多次使用时，由于使用不当会造成污染，但这不能成为对终产品使用特别是
29、多次使用时，由于使用不当会造成污染，但这不能成为对终产品使用前降低检验标准的原因。前降低检验标准的原因。因此申报单位在进行稳定性研究时，应在长期留样考察中增加无菌指标，最因此申报单位在进行稳定性研究时，应在长期留样考察中增加无菌指标，最低限度应提供长期留样实验末期的无菌检查结果；以确定眼用制剂合理的有低限度应提供长期留样实验末期的无菌检查结果；以确定眼用制剂合理的有效期。效期。另外对于处方中不含有抑菌剂且为多包装的眼用制剂，为保证临床用药安全另外对于处方中不含有抑菌剂且为多包装的眼用制剂，为保证临床用药安全性和保证产品质量，申报单位应对产品在临床使用条件下是否保证无菌进行性和保证产品质量，申报
30、单位应对产品在临床使用条件下是否保证无菌进行研究，通过考察多次使用后的无菌检查结果，并结合产品的适应症，对产品研究，通过考察多次使用后的无菌检查结果，并结合产品的适应症，对产品不使用抑菌剂的可行进行评价。不使用抑菌剂的可行进行评价。研究方案设计的一般考虑 与一般药物的临床前评价安全性评价原则相同，眼用药物临床前评价的与一般药物的临床前评价安全性评价原则相同，眼用药物临床前评价的重点也在于安全性。只是这种安全性的考虑即要体现在系统性上，又要结重点也在于安全性。只是这种安全性的考虑即要体现在系统性上，又要结合眼科用药的特点和化合合眼科用药的特点和化合物本身情况进行综合分析。改剂型的眼用药物临物本身
31、情况进行综合分析。改剂型的眼用药物临床前安全性评价的一般考虑为：床前安全性评价的一般考虑为：（一）全身毒性：（一）全身毒性：眼部用药的给药剂量甚微，据测定人结膜囊内的最大液体容量为眼部用药的给药剂量甚微，据测定人结膜囊内的最大液体容量为2030ul，除去除去10ul的正常泪液，最多只能容纳的正常泪液，最多只能容纳20ul药液。眼部给药后药物进入药液。眼部给药后药物进入体循环的量非常体循环的量非常少，一般不产生具有临床意义的全身药理作用。通常下列少，一般不产生具有临床意义的全身药理作用。通常下列情况下无需进行进一步的全身毒性研究：情况下无需进行进一步的全身毒性研究：1已证明药物眼部吸收缓慢，可明
32、确排除该药物眼部给药的全身作已证明药物眼部吸收缓慢，可明确排除该药物眼部给药的全身作用。用。2药物可被吸收，但以前已进行了充分的全身毒性研究（包括急性药物可被吸收，但以前已进行了充分的全身毒性研究（包括急性毒性、长期毒性、生殖毒性、致突变、致癌试验等）。毒性、长期毒性、生殖毒性、致突变、致癌试验等）。眼部耐受性： 眼部刺激性试验：眼用药物的临床前安全性首先需评价眼部刺激性，这项试眼部刺激性试验：眼用药物的临床前安全性首先需评价眼部刺激性，这项试验对于各种类型眼用药物的研发均必不可少。验对于各种类型眼用药物的研发均必不可少。11试验的意义：药物直接接触角膜后会引起刺激作用，表现为炎症反应。试验的
33、意义：药物直接接触角膜后会引起刺激作用，表现为炎症反应。短期内接触刺激性较强的药物可产生灼痛、流泪、畏光等症状以及结膜充血、短期内接触刺激性较强的药物可产生灼痛、流泪、畏光等症状以及结膜充血、水肿等体征。长时间接触刺激性较弱的药物可引起慢性结膜炎或睑缘炎，表水肿等体征。长时间接触刺激性较弱的药物可引起慢性结膜炎或睑缘炎，表现为充血、分泌物增多。现为充血、分泌物增多。兔眼与人眼结构相似，故可采用兔眼进行眼部刺激性试验以提供初步的兔眼与人眼结构相似，故可采用兔眼进行眼部刺激性试验以提供初步的眼部用药安全性信息，保证受试药物用于人眼时无明显的刺激性。眼部用药安全性信息，保证受试药物用于人眼时无明显的
34、刺激性。12试验目的：观察动物眼睛接触受试物后所产生的刺激反应情况。试验目的：观察动物眼睛接触受试物后所产生的刺激反应情况。1.3试验类型：分为单次给药的眼刺激试验和重复给药的眼刺激试验。试验类型：分为单次给药的眼刺激试验和重复给药的眼刺激试验。通常均需进行单次给药的眼刺激试验。通常均需进行单次给药的眼刺激试验。结合单次给药的眼部刺激试验结果考虑是否进行重复给药的眼刺激试验。通结合单次给药的眼部刺激试验结果考虑是否进行重复给药的眼刺激试验。通常临床用药超过常临床用药超过1周的药物需考虑进行重复给药眼刺激试验。周的药物需考虑进行重复给药眼刺激试验。 若在若在72小时内出现刺激症状，应进行眼部清洗
35、试验：试验设小时内出现刺激症状，应进行眼部清洗试验：试验设3组，每组组，每组3只动物，受试药物的给药方法同上。第只动物，受试药物的给药方法同上。第1组不予清洗，第组不予清洗，第2组在眼部给受组在眼部给受试药试药2秒钟后用秒钟后用20ml温水或生理盐水清洗受试眼，第温水或生理盐水清洗受试眼，第3组在给受试药组在给受试药4秒钟秒钟后用后用20ml温水或生理盐水清洗受试眼。观察滴眼后温水或生理盐水清洗受试眼。观察滴眼后24、48、72小时，小时，4天，天，7天的眼部反应情况，直至眼部恢复正常。天的眼部反应情况，直至眼部恢复正常。（该试验的意义在于评价温水或生理盐水清洗可否改善药物所致的眼部刺（该试验
36、的意义在于评价温水或生理盐水清洗可否改善药物所致的眼部刺激，亦即反映该受试药物的眼部刺激性是否可逆。）激，亦即反映该受试药物的眼部刺激性是否可逆。）重复给药：连续给药重复给药：连续给药1周以上后，继续观察周以上后，继续观察714天。观察时尚应用荧光素天。观察时尚应用荧光素钠检查角膜损害，用裂隙灯检查角膜透明度和虹膜纹理改变钠检查角膜损害，用裂隙灯检查角膜透明度和虹膜纹理改变眼部长期给药的眼毒性试验眼部长期给药的眼毒性试验受试药应与拟临床用药的制剂基本相同，即应使用制剂的溶剂或受试药应与拟临床用药的制剂基本相同，即应使用制剂的溶剂或赋形剂稀释药物，给药途径尽量模拟临床给药途径以保证药物与眼部赋形
37、剂稀释药物，给药途径尽量模拟临床给药途径以保证药物与眼部的接触。每次用药保留时间尽量模拟临床，通常每日给药共的接触。每次用药保留时间尽量模拟临床，通常每日给药共4周。除周。除观察全身指标外，还应重点观察给药局部和可能累及的周围组织（包观察全身指标外，还应重点观察给药局部和可能累及的周围组织（包括角膜、虹膜、结膜、晶状体、视网膜、脉络膜）的反应和病理改变。括角膜、虹膜、结膜、晶状体、视网膜、脉络膜）的反应和病理改变。3.试验的注意事项试验的注意事项从保护动物的角度，在已经观察到严重不良反应且继续进行试验预期从保护动物的角度，在已经观察到严重不良反应且继续进行试验预期不能提供本质的风险评价结果时，
38、应终止试验，以期使刺激对受试动不能提供本质的风险评价结果时，应终止试验，以期使刺激对受试动物所致的疼痛降至最小。物所致的疼痛降至最小。4.说明 相关说明眼部重复给药试验与眼部长期给药的毒性试验的意义各有侧重，二眼部重复给药试验与眼部长期给药的毒性试验的意义各有侧重，二者不能相互替代；但如可能，可同时观察给药局部的刺激性：者不能相互替代；但如可能，可同时观察给药局部的刺激性：前者在于观察和评价受试药物对眼前段（包括角膜、虹膜、结膜）前者在于观察和评价受试药物对眼前段（包括角膜、虹膜、结膜）的刺激性，后者在于观察和评价受试药物对眼本身的刺激性，后者在于观察和评价受试药物对眼本身即眼前段即眼前段（包
39、括角膜、虹膜、结膜）和眼后段（晶状体、视网膜、脉络膜）（包括角膜、虹膜、结膜）和眼后段（晶状体、视网膜、脉络膜）的毒性。的毒性。前者主要通过荧光素钠和裂隙灯进行检查，后者主要进行组织病理前者主要通过荧光素钠和裂隙灯进行检查，后者主要进行组织病理学检查。学检查。前者的试验时间较短（前者的试验时间较短（714天），后者的试验时间稍长（天），后者的试验时间稍长（4周）。周）。Draize眼部刺激试验可得到的信息：眼部刺激试验可得到的信息：通过判断标准可得到的信息通过判断标准可得到的信息角膜混浊角膜混浊膜实质（胶原）自身变性膜实质（胶原）自身变性胶原浸润（依赖于上皮或间质的损害程度）胶原浸润（依赖于上
40、皮或间质的损害程度）上皮细胞剥离（由细胞毒性产生）上皮细胞剥离（由细胞毒性产生）虹膜虹膜角膜吸收程度与虹膜的损伤程度角膜吸收程度与虹膜的损伤程度对光反射性对光反射性结膜结膜充血提示炎症性血管扩张充血提示炎症性血管扩张水肿提示炎症性水肿水肿提示炎症性水肿分泌物提示泪液分泌过多及炎症性浸润反应分泌物提示泪液分泌过多及炎症性浸润反应通过不同观察时间得到的信息通过不同观察时间得到的信息速发性反应速发性反应迟发性反应迟发性反应组织恢复性组织恢复性其它其它角膜溃疡、上皮损伤、缺失脱落角膜溃疡、上皮损伤、缺失脱落角膜表面凹凸不平、干燥性角膜表面凹凸不平、干燥性清洗使损伤减轻或恶化清洗使损伤减轻或恶化受试物与
41、泪液的相容性受试物与泪液的相容性由动物的行为判断有无疼痛由动物的行为判断有无疼痛由物理刺激监测损伤由物理刺激监测损伤其他相关试验其他相关试验致敏性致敏性用豚鼠皮肤过敏试验来反映药物眼部给药时有无致敏性。用豚鼠皮肤过敏试验来反映药物眼部给药时有无致敏性。其它试验其它试验如有必要，尚无进行眼部给药后对瞳孔大小的影响以及对角膜敏感性影响的试验。如有必要，尚无进行眼部给药后对瞳孔大小的影响以及对角膜敏感性影响的试验。动物药代动力学动物药代动力学评价临床前安全性需结合动物药代动力学研究资料。眼用药物的动物药代动力学研究评价临床前安全性需结合动物药代动力学研究资料。眼用药物的动物药代动力学研究包括两方面的
42、试验：眼部给药全身吸收试验和眼部给药局部包括两方面的试验：眼部给药全身吸收试验和眼部给药局部PK试验。试验。1.眼部给药全身吸收试验：眼部给药全身吸收试验：2.眼部给药局部眼部给药局部PK试验：试验：眼部眼部PK试验的意义在于明确药物在眼部吸收、分布、代谢、消除的特点，了解眼部试验的意义在于明确药物在眼部吸收、分布、代谢、消除的特点，了解眼部给药的毒性靶器官，为综合评价临床前安全性（也包括初步的有效性）提供依据。给药的毒性靶器官，为综合评价临床前安全性（也包括初步的有效性）提供依据。人体可进行眼部给药的全身吸收试验（取血浆标本即可），而由于伦理的原因人的人体可进行眼部给药的全身吸收试验（取血浆
43、标本即可），而由于伦理的原因人的泪膜泪膜/泪液泪液/角膜角膜/房水通常均难以获得，故对于眼用药物而言，动物眼部房水通常均难以获得，故对于眼用药物而言，动物眼部PK试验是获得药试验是获得药物眼部物眼部PK参数的重要方法。参数的重要方法。申报类型的评价要点 （一）改变给药途径的改剂型品种，如抗病毒类药物新开发为滴眼液。（一）改变给药途径的改剂型品种，如抗病毒类药物新开发为滴眼液。（二）采用了新辅料的改剂型品种（二）采用了新辅料的改剂型品种对于处方中含有国内外尚未使用过的新辅料的改剂型品种眼部用药时，对于处方中含有国内外尚未使用过的新辅料的改剂型品种眼部用药时，为明确新辅料是否具有全身毒性，应进行新
44、辅料的急性毒性、长期毒性、致为明确新辅料是否具有全身毒性，应进行新辅料的急性毒性、长期毒性、致突变、致癌、生殖毒性试验。突变、致癌、生殖毒性试验。为明确新辅料是否具有眼部刺激性和长期用药的眼部毒性，需进行新辅料的为明确新辅料是否具有眼部刺激性和长期用药的眼部毒性，需进行新辅料的眼部刺激性试验和眼部长期给药的眼毒性试验。为明确新辅料的眼部刺激性试验和眼部长期给药的眼毒性试验。为明确新辅料的PK，需进需进行动物眼部给药全身吸收试验和行动物眼部给药全身吸收试验和眼部眼部PK试验。试验。此外，还需进行含有新辅料制剂的眼部刺激性试验、眼部长期给药的眼此外，还需进行含有新辅料制剂的眼部刺激性试验、眼部长期
45、给药的眼毒性试验和动物毒性试验和动物PK试验，以了解新辅料是否与主药发生相互作用。试验，以了解新辅料是否与主药发生相互作用。如果所申报的品种属于变更辅料的品种，要根据变化的性质进行相应的如果所申报的品种属于变更辅料的品种，要根据变化的性质进行相应的研究。研究。（三）具有缓释特性的改剂型品种，如脂质体滴眼液、眼用凝胶等。（三）具有缓释特性的改剂型品种，如脂质体滴眼液、眼用凝胶等。因这类品种明显改变了原剂型制剂的眼部因这类品种明显改变了原剂型制剂的眼部PK，故需要提供动物的眼部故需要提供动物的眼部PK。这是评价此类品种立题和临床前安全性的基础。这是评价此类品种立题和临床前安全性的基础。应提供新剂型
46、制剂的眼部刺激性试验。应提供新剂型制剂的眼部刺激性试验。根据动物眼部根据动物眼部PK数据，结合主药已有的人体数据，结合主药已有的人体PK资料，综合分析是否需要资料，综合分析是否需要进行眼部长期给药的眼毒性试验（是否有新的安全性担忧）。进行眼部长期给药的眼毒性试验（是否有新的安全性担忧）。 注意事项 1.给药方案与临床用药应一致给药方案与临床用药应一致2.与上市药物的对比研究与上市药物的对比研究进行刺激性试验时，一般不需要与上市药物对比进行研究。但在一些上市药物的进行刺激性试验时，一般不需要与上市药物对比进行研究。但在一些上市药物的说明书不良反应项有刺激性反应的，对这一类仿制或改剂型的药物，在进
47、行刺激性说明书不良反应项有刺激性反应的，对这一类仿制或改剂型的药物，在进行刺激性试验时，建议选用已上市制剂作为阳性对照药，判断受试物与上市制剂刺激性的差试验时，建议选用已上市制剂作为阳性对照药，判断受试物与上市制剂刺激性的差异，以分析产生刺激性的原因是药物本身引起、还是辅料、工艺等原因所致，利于异，以分析产生刺激性的原因是药物本身引起、还是辅料、工艺等原因所致，利于评价药物的质量。此种情况在眼科制剂也常见。评价药物的质量。此种情况在眼科制剂也常见。3.结果的评价结果的评价局部用药，出现刺激性试验并不少见。动物刺激性试验结果有分级判断标准，局部用药，出现刺激性试验并不少见。动物刺激性试验结果有分
48、级判断标准，只要刺激性试验结果是在可接受的范围内，此药物就可以用于临床，但在说明书只要刺激性试验结果是在可接受的范围内，此药物就可以用于临床，但在说明书中要进行说明。对于出现刺激性的症状，不能只简单的进行肉眼观察，建议进行中要进行说明。对于出现刺激性的症状，不能只简单的进行肉眼观察，建议进行病理组织学检查，分析刺激的程度。出现了刺激性，要做恢复性观察，判断药物病理组织学检查，分析刺激的程度。出现了刺激性，要做恢复性观察，判断药物刺激性是否可逆。试验结果要客观、真实，为临床应用提供参考。刺激性是否可逆。试验结果要客观、真实，为临床应用提供参考。4.保证受试药品浓度同申报浓度一致保证受试药品浓度同
49、申报浓度一致用于眼刺激性试验的受试药品应该在规格、浓度等方面同申报品种保持一致性，用于眼刺激性试验的受试药品应该在规格、浓度等方面同申报品种保持一致性，否则试验的结果并不能真正反映申报品种的眼刺激性。否则试验的结果并不能真正反映申报品种的眼刺激性。5.适当的观察方法和观察指标适当的观察方法和观察指标一般采用裂隙灯（或手持裂隙灯）进行眼刺激反应检查，也可根据刺激一般采用裂隙灯（或手持裂隙灯）进行眼刺激反应检查，也可根据刺激性反应情况采用其他的合适器械（如放大镜、生物显微镜等），不能只有性反应情况采用其他的合适器械（如放大镜、生物显微镜等），不能只有肉眼观察的结果。在整个观察过程中应进行荧光素染色
50、检查。每次检查，肉眼观察的结果。在整个观察过程中应进行荧光素染色检查。每次检查，都应记录眼部反应的分。除了观察所列出的结膜、角膜和虹膜损伤外，其都应记录眼部反应的分。除了观察所列出的结膜、角膜和虹膜损伤外，其他所观察到的损伤也应记录和报告。他所观察到的损伤也应记录和报告。6.应设置对照组应设置对照组刺激性试验设置对照，可以更好地评价、分析受试品的眼刺激性情况。刺激性试验设置对照，可以更好地评价、分析受试品的眼刺激性情况。眼刺激性试验一般应以溶媒或赋形剂作为阴性对照，当出现阳性结果的时眼刺激性试验一般应以溶媒或赋形剂作为阴性对照，当出现阳性结果的时候，可帮助判断刺激性来源于制剂中的主药亦或是辅料
