1、第十八章 立克次体及衣原体 第一节 立克次体 第二节 衣原体第十八章 立克次体及衣原体概述n专性细胞内寄生的原核微生物。n结构及繁殖方式与细菌类似，生长要求类似病毒。n立克次体主要寄生于节肢动物。n衣原体具有独特的发育周期。第一节 立克次体 rickettsia严格细胞内寄生与节肢动物关系密切引起人畜共患病原核细胞型微生物介于细菌与病毒之间n定名:1916年，巴西学者Du Rocha Liman人的流行性斑疹伤寒病原体(Recketts Prowazek)n1906-1909年，美国学者Recketts研究洛基山斑点热，在病人的血液中发现了一种极小的病原体，可引起实验动物感染。n1910年 墨
2、西哥 因感染而死于斑疹伤寒。一、立克次体的研究历史n1914年 Prowazek与Lima 感染， 残废 康复n Lima证实了斑疹伤寒立克次体是细胞内寄生，经虱子传播，能在虱子肠上皮细胞内寄生。我国除斑疹伤寒、恙虫病和Q热外，已证明有斑点热疫源地存在。同时立克次体也是侵略者制造生物战剂的一种病原体。我国学者魏曦在立克次体的培养和流行病学研究中也作出了突出贡献。二、分类分类（2科） n立克次体科 （3属） 立克次体属：斑疹伤寒群 斑点热群 洛基山斑点热 东方体属：恙虫病立克次体 鱼立克体属 ：n乏质体科斑疹伤寒立克次体普氏立克次体二、分类 n乏质体科 柯克斯体属 Q热 乏质体属 新立克次体属
3、可厥体属 艾立希体属 沃巴克体属 埃及小体属三、立克次体 1. 概述 比细菌小,一般不能通过滤器（贝氏柯克斯体除外） 以节肢动物为媒介宿主或贮存宿主 专性细胞内寄生(胞浆内) 有两种核酸，二分裂繁殖 多数人畜共患，引起发热出疹性疾病 对抗生素敏感 通过节肢动物的叮咬进入人体，立克次体首先侵入局部淋巴组织小血管内皮细胞内。2. 生物学特性形态: 主要球杆状,多形性 (球形、哑铃形、长杆状或丝状等)大小: (0.3m-0.6m)(0.8m -2.0m)染色: Giemsa染色法: 紫色或蓝色 马基维洛染色法：红色培养: 专性细胞内寄生培养方法: 鸡胚卵黄囊接种 组织细胞培养 动物接种 三、立克次体
4、抵抗力: n热 、 消 毒 剂 : 较 弱 ( 5 6 , 数 分钟,0.5%石碳酸、0.5%来苏儿,75%酒精中数分钟)n抗生素: 对氯霉素和四环素敏感 对磺胺类不敏感n低温、干燥: 较强(-20或冷冻干燥半年以上)三、立克次体抗原构造：n群特异性抗原：脂多糖（可溶性，耐热）n脂多糖与变形杆菌某些菌株有共同抗原（魏-斐二氏反应） n种特异性抗原：外膜蛋白（不耐热） 三、立克次体魏-斐二氏反应（Weil-Felix reaction）n斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X菌株有共同的耐热多糖类抗原。利用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原，进行定量非特异凝集反应（交叉凝集反应），以检测人或动物血清中
5、的相应抗体。n立克次体病的辅助诊断：协助诊断斑疹伤寒,恙虫病,滴度超过1:160有意义。3. 感染途径与致病性n节肢动物如人虱、鼠蚤、蜱或螨的叮咬而传播。n贝氏柯克斯体的传播可经接触、呼吸道或消化道途径感染人类。三、立克次体所致疾病n立克次体病斑疹伤寒洛基山斑点热Q热恙虫病主要病原性立克次体 种类 传染源 媒介昆虫 主要临床表现 免疫力 普氏立克次体 人 人体虱 发热、头痛、皮疹 持久（流行性斑疹伤寒） 神经系统、心血管系统损伤斑疹伤寒立克次体 鼠等 鼠蚤 发热、头痛、皮疹 持久（地方性斑疹伤寒） 鼠虱 恙虫病立克次体 鼠等 恙螨 局部黑色结痂 持久（恙虫病） 发热、头痛、皮疹 内脏损害贝氏柯
6、克斯体 家畜 蜱 发热、头痛 一定程度 （动物间） 心内膜炎 普氏立克次体（R. prowazekii ）传染源：病人传播媒介：体虱人虱 人 人人虱流行性斑疹伤寒传播方式n1903年，夏尔尼科勒 法国巴斯德研究所主任，他证实了这种疾病是由体虱传播的。 n我国金代张戴人著儒家亲事初次提出“斑疹伤寒”病名，并能与伤寒鉴别，直到1850年上海流行时才有了准确记载。 n斑疹伤寒病人的高热可持续两周，并伴有皮疹和出血点。斑疹伤寒立克次体 （R. typhi) 地方性斑疹伤寒n临床特征与流行性斑疹伤寒相似n传播媒介主要是鼠蚤，在鼠群间传播，又称鼠型斑疹伤寒。 鼠鼠蚤 鼠虱 鼠蚤 人 鼠 地方性斑疹伤寒传播
7、方式斑疹伤寒立克次体 （R. typhi)恙虫病主要流行于东南亚、 西南太平洋岛屿，故又称东方立克次体。主要在啮齿动物之间流行恙虫病立克次体寄居于恙螨，并可经卵传代。恙虫病立克次体 (Orientia tsutsugamushi) 卵 成虫 稚虫 鼠等 幼虫 幼虫(第二代) 人等 稚虫 成虫 卵恙虫病传播方式恙虫病立克次体 (Orientia tsutsugamushi)Q热贝氏柯克斯体通过蜱传播给野生啮齿动物和家畜，再经受染动物的粪便、尿污染环境，由接触或呼吸道（气溶胶）感染人。 贝氏柯克斯体 (Coxiella burnetii)生物学特点1具有滤过性；2专性寄生，多在宿主细胞吞噬溶酶体内
8、繁殖；3不含有与变形杆菌X株起交叉反应的X凝集原；4对实验动物一般不引起急性中毒性反应；5对理化因素抵抗力强。 耐热：100 10分钟， 耐干燥：在干燥沙土中46可存活79个月贝氏柯克斯体 (Coxiella burnetii)致病性 Q热n1937年 Derrick 澳大利亚Queensland。n临床症状主要有发热、头痛、肌肉酸痛为主要症状，并常伴有肺炎、肝炎等，n无皮疹及外斐氏反应阴性（与其他立克次体病的不同之处）。n与其他热性传染病难以鉴别，误诊率特别高。部分重症病例可并发心内膜炎。贝氏柯克斯体 (Coxiella burnetii)n50年代初期，人们已经很清楚Q热是一种分布十分广泛
9、的疾病，全世界大部分国家和地区均有Q热存在。n多见于男性青壮年。n我国吉林、四川、云南、新疆、西藏、广西、福建、贵州等十几个省市、自治区均有本病流行。贝氏柯克斯体 (Coxiella burnetii)n感染Q热的家畜有黄牛、水牛、牦牛、绵羊、山羊、马、螺、驴、骆驼、狗、猪和兔。n禽类中的鸡也有Q热感染。n在四川寄生于狗体外的铃头血蜱、新疆的亚洲璃眼蜱、内蒙古的亚东璃眼蜱、福建的毒刺历螨中均可分离出Q热立克次体。贝氏柯克斯体 (Coxiella burnetii)n2003年2月 洪涛院士 可能是衣原体？n疑问：服用红霉素等普通药物即有特效；衣原体肺炎一般呈散发性；衣原体肺炎的死亡率也不高。
10、n3月25日，美国CDC和香港大学微生物系宣布，非典病原体是来自猪的“冠状病毒”。n4月16日，WHO宣布，正式确认冠状病毒的一个变种是非典病原体。SARS病原衣原体与冠状病毒之争第二节 衣原体（Chlamydia）n衣原体是一类能通过细菌滤器，严格真核细胞内寄生，并有独特发育周期，以二等分裂繁殖和形成包涵体的革兰氏阴性原核细胞型微生物。n介于立克次体和病毒之间一、主要特点G-，圆形或椭圆形含有DNA、RNA两种核酸，核糖体细胞壁组成与G-相似必须在真核细胞内繁殖有独特发育周期，二分裂法繁殖对某些抗生素敏感 (四环素和红霉素) 二、分类二、分类衣原体目衣原体科副衣原体科西氏衣原体科衣原体属亲衣
11、原体属 副衣原体属西氏衣原体属Chlamydia Chlamydophilia重要的衣原体：n沙眼衣原体（C. trachomatis） n鹦鹉热亲衣原体（Cp. psittaci） n肺炎亲衣原体（Cp. Pneumoniae） n牛羊亲衣原体(Cp. pecorum）psittacine二、衣原体的分类沙眼衣原体（C. trachomatis） （1）沙眼生物变种 14个血清型（人） （2）性病淋巴肉芽肿变种 4个血清型（人） （3）鼠生物变种 我国科学家汤飞凡等于1956年应用鸡胚卵黄囊接种技术，在世界上率先分离出了沙眼衣原体，为人类衣原体病的诊断及防治作出了巨大贡献。二、衣原体的分类四
12、种衣原体的部分性状比较特性 沙眼衣原体 鹦鹉热亲衣原体肺炎亲衣原体牛羊亲衣原体自然宿主人小鼠鸟类 人哺乳动物人牛、羊、猪所致疾病沙眼、性传播疾病、泌尿生殖道疾病畜禽肺炎、流产、关节炎、人肺炎肺炎散发性肺炎、关节炎、腹泻四种衣原体的部分性状比较特性沙眼衣原体鹦鹉热亲衣原体肺炎亲衣原体牛羊亲衣原体原体形态圆形圆形梨形圆形包涵体形态与组成卵圆形，有空泡，含糖原多形态，致密，不含糖原卵圆形，致密，不含糖原多形态，致密，不含糖原对磺胺敏感性敏感抵抗抵抗抵抗原体（elementary body，EB） ：n较小，呈球状，椭圆形或梨形，直径约0.2-0.4um，电子密度大，有感染性。网状体（reticula
13、te body，RB），始体（initial body）n较大，直径0.7-1.5um，圆形或椭圆形，电子密度小，无感染性。三、形态结构有致密的类核结构，有细胞壁，发育成熟电子致密度较低，无细胞壁原体网状体 小 大Giemsa 紫色Macchiavello 红色Giemsa 蓝色Macchiavello 蓝色 有感染性无感染性无繁殖能力二分裂方式繁殖胞外稳定性强胞外稳定性弱原体 网状体肺炎亲衣原体原体呈梨形，有较大的外周胞质空间及圆形电子密集球。 1、原体的侵入 原体是在细胞外生存具有感染性的非分裂型的有细胞壁的致密颗粒。形体小，被易感细胞摄入，体积增大，演变成网状体。 2、网状体分裂 包涵体
14、：衣原体在细胞空泡内繁殖过程中所形成的集落形态；内含大小两种颗粒。3、原体释放 四、发育周期 专性活细胞内寄生n鸡（鸭）胚培养:卵黄囊 （5-7日龄鸡胚8-10日龄鸭胚） 镜检观察：包涵体、原体和网状体颗粒n动物接种:3-4周龄小鼠n细胞培养:HeLa、Vero、BHK21、cCoy细胞等五、培养特性n与一般细菌类似n对煤酚类化合物及石炭酸有抵抗力n对链霉素、庆大霉素、卡那霉素有抵抗力n除沙眼衣原体对黄胺药敏感外，其余均能抵抗六、抵抗力 七、抗原结构 1属特异性抗原 成分：脂多糖2种特异性抗原 成分：主要外膜蛋白（MOMP）3型特异性抗原 分子基础：MOMP中氨基酸可变区的顺序变化, 可区分种
15、内的血清型或生物型。 如沙眼衣原体沙眼生物变种: 14个血清型(A-K、Ba、Da,Ia）（一）致病机制衣原体吸附于易感细胞表面，是感染的首要步骤；侵入宿主细胞其外膜蛋白阻止吞噬体与溶酶体的融合，利于衣原体在细胞内繁殖；衣原体的脂多糖的内毒素作用，也是产生炎症反应，引起组织损伤的重要物质。 八、病原性与免疫性 1、沙眼衣原体 ( C. trachomatis)沙眼生物变种：1956年汤非凡首次分离成功。 眼部： A、B、Ba、C型引起沙眼，重者致盲。 DK型引起包涵体性结膜炎。 性接触：泌尿生殖道感染。 性病淋巴肉芽肿亚种：性病淋巴肉芽肿。（二）主要致病性衣原体人类沙眼衣原体病：u沙眼u包涵体
16、性结膜炎u新生儿结膜炎及通过母亲传染而得的肺炎u男性非淋菌性尿道炎u女性衣原体性宫颈炎u性病淋巴肉芽肿u Reiter氏综合征u沙眼衣原体是美国性传播疾病最常见病原体。1989年Grayston等新种第一个代表菌株TW-183株（1965）1983年又自美国西点城一位急性呼吸道感染病人的咽部分离出一株衣原体，命名为AR-39。后来发现为同一菌株，乃取名TWAR株。个血清型，人是唯一的宿主，主要引起急性呼吸道疾病。2、肺炎亲衣原体 (Cp. pneumoniae) 3、鹦鹉热亲衣原体(Cp. psittaci)感染多种畜禽（牛、羊、猪、豚鼠、鹦鹉、鸡、鸽、鸭）牛、羊：流产、早产、死产及肺炎鹦鹉类禽：鹦鹉热其他禽：鸟疫人：饲鸟病(吸入病禽鸟的含菌分泌物而感染)4、牛羊亲衣原体(Cp. pecorum)1992年Fanushi 和Hirai新种牛和绵羊的多发性关节炎、脑脊髓炎和腹泻。 （三）免疫性 n细胞免疫（主要），体液免疫n自然感染后可产生一定的免疫n用感染衣原体的卵黄囊制成灭活疫苗九、微生物学检查法n直接涂片镜检：采用Giemsa、碘液或荧光抗体染色镜检，检查上皮细胞内有无包涵体。n分离培养： 接种鸡胚卵黄囊或传代细胞。n核酸检测： 核酸探针或PCR技术 复习思考题P256：1，2，5，6
