1、医院感染环境监测微生物标本采集检验科 徐东雪环境监测 类环境：采用空气洁净技术的诊疗场所，分洁净手术部和其他洁净场所 类环境：非洁净手术部、产房、导管室、血液病病区、烧伤病房 等保护性隔离病区、重症监护病区、新生儿室等 类环境：母婴同室、消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区、血液透析室、其他普通住院病区 类环境：普通门（急）诊及其检查、治疗室、感染性疾病科门诊和病区各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准环境类别环境类别空气平均菌落数空气平均菌落数物体表面平均菌落数物体表面平均菌落数CFU/皿CFU/立方米CFU/平方厘米类环境=4.0(30min)=150=5.0类环境=4.0(15m
2、in)=5.0类环境=4.0(5min)=10.0类环境=4.0(5min)=10.0CFU/皿为平板暴露法，CFU/立方米为空气采样器法。平板暴露法检测时的平板暴露时间。卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应=10CFU/平方厘米外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应=5CFU/平方厘米环境监测的采样方法 空气采样时间：在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样方法：、类环境采用平板暴露法室内面积30平方米,设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m处采样高度为距地面0.8m-1.5m，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（类环境15min）后盖上平皿盖及时送检 送检平皿置于恒
3、温箱中培养48h，计数菌落数 采样后应尽快对标本进行相应指标的检测，送检时间不得超过4h，若标本保存于0-4度时，送检时间不得超过24h环境监测的采样方法 表面采样时间：潜在污染区或者污染区，消毒后采样面积：被采表面100平方厘米,取100平方厘米方法：用5cm*5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪掉手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面。环境监测的采样方法 医务人员手采样时间：采取手卫生以后，在接触病人或从事医疗活动前采样方法
4、：将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30平方厘米），并随之转动采样棉拭子，减去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。医院感染医院感染：是指住院病人在医院内获得的感染，包括在住院期内发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染，但不包括入院前已开始或入院时已存在的感染。医院工作人员在医院内获得的感染也属于医院感染。下列情况属于医院感染1、无明确潜伏期的感染，规定入院48小时后发生的感染为医院感染，有明显潜伏期的感染，自入院时起超过平均潜伏期后发生的感染为医院感染。2、本次感染直接与上次住院有关。3、在原有感染基础上出现其他部
5、位新的感染（除外脓毒血症迁徙灶），或在原感染已知病原体基础上又分离出新的病原体（排除污染和原来的混合感染）的感染。4、新生儿在分娩过程中和产后获得的感染。5、由于诊疗措施激活的潜在性感染，如疱疹病毒、结核杆菌等的感染。6、医务人员在医院工作期间获得的感染。几点说明1、医院感染的诊断并不全部都依赖实验室的诊断，如肺部感染。血培养是菌血症确诊依据，但不一定都能获得阳性培养，尤其在大量使用抗菌药物后，故可诊断为临床菌血症。2、医院感染检测中以显性感染为主，但有流行病学意义的多重耐药菌株的携带者可包括在内。3、痰、尿（接尿者）、烧伤创面可以存有多种细菌，因此连续几天几次的培养有不同的细菌生长只算1次感
6、染。4、病人发生急性多发性创伤、烧伤和急性脑卒中，几小时内即入院，病前健康无感染。这类病人发生感染即使发生在48小时以内也列入医院感染，因为免疫功能低下者自身细菌短期即可感染。5、感染性疾病本身并发症不列入医院感染，如阑尾炎穿孔并腹膜炎，菌血症并肝脓肿。另外临近部位感染的自然扩散也不列入医院感染统计，如肺部感染所致脓胸。医院感染2006年卫生部颁布的医院感染管理办法中规定：医院感染暴发是指在医疗机构或其科室的患者中，短时间内发生3例以上同种同源感染病例的现象。2009年颁布的医院感染暴发报告及处置管理规范中明确：疑似院感暴发是指在医疗机构或其科室的患者中，短时间内出现3例以上临床症候群相似，怀
7、疑有共同感染源的感染病例，或者3例以上怀疑有共同感染源或感染途径的感染病例现象。医院感染 表现形式同种病原体，同一感染部位，同一医疗机构血培养临床采样指征：临床采样指征：菌血症：菌血症：患者出现发热（38）或低温（36），或寒战；白细胞计数增多（计数10.0109/L，中性粒细胞增多；或白细胞计数减少（计数38）、寒颤或低血压等全身感染表现，不能除外由血管内导管引起感染可能的，应多次进行血培养检测。血培养标本采集：标本采集：菌血症：菌血症：尽可能在患者寒战开始时，发热高峰前30-60分钟内采血。尽可能在使用抗菌药物治疗前采集血培养标本；如患者已经使用抗菌药物治疗，应在下一次用药之前采血培养。采
8、血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管常伴有定植菌存在。采血工具：真空血培养瓶，同一部位采集两瓶血培养时不建议更换针头。采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部位采集血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。对于儿童患者，应同时分别在两个部位采集血标本，分别注入儿童瓶，厌氧瓶一般不需要，除非怀疑患儿存在厌氧菌血流感染。采血量：采血量是影响血培养检出阳性率的重要因素，采血量过少会明显降低血培养阳性率。成人每次每培养瓶应采血5-10ml注入成人瓶；婴幼儿根据孩子的体重确定采血总量，每培养瓶（儿童瓶
9、）采血2-4ml。皮肤、血培养瓶消毒：为减少皮肤、培养瓶口等对血培养造成的污染，在穿刺前，应对皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥，以减少假阳性的发生机率。避免采血管内空气注入厌氧血培养瓶。避免在静脉留置导管连接处（如肝素帽处）采血标本，避免标本污染。血培养感染性心内膜炎感染性心内膜炎建议在经验用药前30分钟内 在不同部位采集2-3套外周静脉血培养标本。如果24小时内3套血培养标本均为阴性，建议再采集3套血培养标本送检。怀疑左心心内膜炎时，采集动脉血提高血培养阳性率。导管相关血流感染：导管相关血流感染：分为保留导管和不保留导管两种情况。保留导管：保留导管：分别从外周静脉和导管内各采取1套血培养标本
10、，在培养瓶上标注采集部位，送往微生物实验室，同时进行上机培养。2套血培养检出同种细菌，且来自导管的血培养标本报阳时间比来自外周的血培养标本报阳时间早2小时以上，可诊断导管相关血流感染。不保留导管：不保留导管：在外周静脉采集2套血培养标本。同时，通过无菌操作剪取已拔出的导管尖端5cm，在血平板上交叉滚动4次进行送检。或采用超声震荡法留取菌液接种。从导管尖端和外周血培养培养出同种同源细菌，且导管尖端血平皿的菌落计数超过15CFU有意义。血培养 标签和申请单：标签和申请单：每套血培养瓶上标签应有唯一标识号或条码，并注明标本采集时间和部位。如疑似感染性心内膜炎或疑似导管相关血流感染患者的标本，申请单除
11、应包括患者基本信息外，一定要注明疑似诊断。标本运输：标本运输：血液标本采集后应立即送检，最好在2小时内送达实验室。不能及时送检者，应置室温暂存。血培养瓶接种前后都禁止放冰箱。运送的装置要足够安全，避免血培养瓶的运送过程中因碰撞发和破裂。实验室拒收标准：实验室拒收标准：由于血培养标本采取不易，且血流感染患者往往病情急重，实验室应尽可能接受血培养标本，并尽快进行培养检测。除非以下几种情况：血培养瓶破裂、渗漏；血培养瓶内注入非无菌标本；呼吸道标本呼吸道标本 咽拭子标本咽拭子标本咽拭子标本仅用于诊断上呼吸道感 染，常规仅报告A群链球菌。临床采样指征：突发的咽痛、扁桃体肿大、颈部或颌下淋巴结肿痛，常伴有
12、发热，通常没有咳嗽和明显的鼻溢。Centor标准可作为A群链球菌上呼吸道感染的临床预测指标。Centor标准包括下列4项内容：扁桃体脓性渗出；颈部或颌下淋巴结肿大伴压痛；发热；无咳嗽。对符合3条或以上Centor标准的成人患者建议进行咽拭子培养。标本采集嘱病人张口发“啊”音，以暴露咽喉部，必要时用压舌板；取出咽拭子中的无菌长棉签，快速擦拭两侧腭弓和咽、扁桃体的分泌物，扁桃体有脓点时最好挤破脓点并采集脓性物，将棉签插入运送管，盖紧送检。标签和申请单申请单除应包括患者基本信息外，注明患者的临床诊断、症状、是否使用了抗菌药物、检测目的，一定要注明标本采集时间。标本盒上的标签要求有唯一标识号或条码，注
13、明标本采集时间、检测目的。标本运送 咽拭子标本的运送宜采用带保湿功能的运送培养基，避免由于送检时间过长而干燥。如未采用运送培养基，应于半小时内送检。即使采用运送培养基，室温保存也不应超过24小时。呼吸道标本呼吸道标本 痰液标本痰液标本 痰培养仅用于下呼吸道感染，主要是肺部感染的诊断。但它不是诊断肺部感染的最佳标本。血培养、肺泡灌洗液或经气管吸取物的培养结果更加准确。痰标本不能进行厌氧菌培养。痰标本采集前，要判断患者是否有能力配合完成深部咳痰。要向患者充分说明口腔清洁、深咳、避免口咽部菌群污染的意义，指导患者如何正确留取痰标本。患者应在医生或护士直视下留取痰液标本。咳嗽、脓性痰，伴有发热，影像学
14、检查出现新的或扩大的浸润影；气道开放患者，出现脓痰或血性痰；考虑下呼吸道感染患者采集痰液标本，同时送血培养标本。采集要求采集要求 由于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等苛养菌是最常见的肺部感染病原体，标本盒内细菌在室温环境下很容易自溶死亡，如不能在采集标本后2小时内接种将明显影响检出率。因此痰标本的采集时机十分关键，应严格遵循以下原则采集标本：争取首剂抗菌药物治疗使用前及更换抗菌药物前采集；标本采集后保证2小时内送达实验室并得到接种；只要有可能得到合格的痰标本，应马上采集、送检；宜在医护人员直视下留取合格痰标本；送检痰标本后三天内不主张再次送检。标本采集标本采集 采集前准备无菌杯（螺口、有
15、盖、密封）、清水。并向患者提供口头及书面采样指导，以保证患者充分理解口腔清洁、深咳、避免口咽部菌群污染的意义和方法。用清水漱口2-3次，有假牙者应先取下假牙；再用力咳嗽咳出深部痰液；将痰液咳入无菌杯内；盖好并拧紧杯盖，尽快送达实验室。标签及申请单标签及申请单 申请单除应包括患者基本信息外，注明患者的临床诊断、症状、是否使用了抗菌药物、检测目的，标识是普通培养、抗酸杆菌还是真菌培养。一定要注明标本采集时间。标本盒上的标签要求有唯一标识号或条码，注明痰标本采集时间和检测目的。痰液标本痰液标本标本运输标本运输 标本采集后需尽快送到实验室，不能超过2小时。不及时运送可导致肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等苛养
16、菌由于不适应外界环境和自溶现象而死亡；不能及时送达或待处理标本应置于4冰箱保存（疑为肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等苛养菌不在此列），以免杂菌生长。但不能超过24小时；实验室拒收标准实验室拒收标准 质量不合格标本：显微镜下细胞学检查发现标本受口咽部菌群污染。合格痰标本应鳞状上皮细胞25个/低倍视野，或白细胞:鳞状上皮细胞2.5；没有标签或标签贴错；标识信息不明，未提供采集时间及送检目的等；超过2小时送达实验室，且没有正确保存的标本；运送容器有渗漏；同一天同一项目重复送检的痰标本。支气管镜支气管镜-肺泡灌洗液（肺泡灌洗液（BAL）支气管镜支气管镜-肺泡灌洗液（肺泡灌洗液（BAL）采集肺泡灌洗液进行检测
17、，可减少口咽部菌群的污染，提高检测结果的准确性。须做定量或半定量接种培养。临床采样指征临床采样指征 对于疑似肺炎患者，如有机会进行气管镜检查，则可同时采集肺泡灌洗液进行培养。不能进行深部咳痰的患者，也可考虑通过气管镜获取标本。标本采集标本采集 患者咽喉局部麻醉后，导入纤维支气管镜。通过纤维支气管镜对病灶所在支气管以下肺段或亚肺段水平，用37或室温无菌生理盐水多次灌洗，每次注入2060ml（常规进行45次），直到总共灌洗100300ml，并充分吸引回收，从回收液中取出10ml标本，放入无菌管中，旋紧盖子，即刻送达实验室。标签及申请单标签及申请单 申请单除应包括患者基本信息外，注明患者的临床诊断、
18、症状、是否使用了抗菌药物、检测目的，标识是普通培养、抗酸杆菌还是真菌培养。一定要注明标本种类为肺泡灌洗液，以及采集时间。无菌管上的标签要求有唯一标识号或条码，注明标本采集时间、检测目的。标本运输标本运输标本采集后需尽快送到实验室；不要冷藏标本。实验室拒收标准实验室拒收标准没有标签或标签贴错；标识信息不明，未提供采集时间及送检目的等；无菌管无盖子，有污染可能；未及时送至实验室的标本；运送容器有渗漏。气道吸取标本气道吸取标本气道吸取标本气道吸取标本临床采样指征临床采样指征 有气管插管或气管切开等人工气道患者，无法自行咳痰，可通过吸痰管从气道吸取标本。标本采集标本采集 通过气管内插管将一次性无菌吸痰
19、管推进呼吸道直至遇到阻力后开始抽吸，留取标本在吸痰杯内。标签及申请单标签及申请单 每个标本都应在申请单上详细填写患者姓名、病历号、采集日期时间、诊断、检验项目等。在标本上粘贴条码，条码中应包括患者姓名、病历号、采集时间等。标本标识要求有唯一标识号或条码。标本运输标本运输标本采集后需尽快送到实验室，不能超过2小时。不及时运送可导致肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌由于不适应外界环境和自溶现象而死亡；不能及时送达或待处理标本应置于4冰箱保存（疑为肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等苛养菌不在此列），以免杂菌生长。但不能超过24小时；对可疑烈性呼吸道传染病（SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）的患者标本，在采集、运送或
20、保存过程中必须注意生物安全保护。实验室拒收标准实验室拒收标准没有标签或标签贴错；标识信息不明，未提供采集时间等；超过2小时送达实验室，且没有正确保存的标本；运送容器选择不当或有渗漏；同一天同一项目重复送检。尿液标本泌尿系统感染可分为单纯性尿路感染、复杂性尿路感染及尿脓毒血症，诊断主要通过采集尿液标本进行微生物学检测。其中90%的门诊病人和50%左右的住院病人，其病原菌是大肠埃希菌；其致病微生物还包括其它细菌、念珠菌等。泌尿系统感染微生物学检测的方法为尿培养、免疫学检测等。尿液标本通常是无菌的或有暂时性少量定植菌存在。但在标本采集过程中，应避免尿液被尿道或尿道周围的正常菌群污染。临床采样指征：临
21、床采样指征：当患者出现尿频、尿急、尿痛、血尿、肾区疼痛等症状，同时可能伴有寒战、高热、白细胞计数升高，怀疑存在泌尿系感染时；尿常规结果提示泌尿系感染时；无症状的患者不建议常规进行尿培养检测；留置导尿管患者出现发热时。尿液标本标本采集：标本采集：清洁中段尿清洁中段尿 清洁的中段尿标本，是泌尿系感染诊断的主要标本；如何避免采集过程中周围皮肤粘膜及尿道定植菌的污染，是标本采集的关键。中段尿标本的采集往往由患者独立完成，应向患者充分说明留取无污染中段尿的意义和具体采集方法。尽可能在未使用抗菌药物前送检，晨尿最佳。采集方法如下：女性：在采集标本前充分清洗或消毒尿道口部位。分开两腿；用肥皂水清洗尿道口部位
22、，或用碘酒、碘伏消毒尿道口；手持采样杯外侧，避免接触杯口边缘。先将少量尿液排入厕所，然后用采样杯采集半杯尿液；将盖子盖好、旋紧；检查杯盖是否密封，避免溢洒。男性：在采集标本前充分清洗尿道口缩回包皮（如果没有割包皮），充分暴露龟头；用肥皂清洗尿道口；手持采样杯外侧，避免接触杯口边缘。先将少量尿液排入厕所，然后用采样杯采集半杯尿液；将盖子盖好、旋紧；检查杯盖是否密封，避免溢洒。尿液标本导尿管采集尿液导尿管采集尿液因存在着极大的污染可能，禁止从集尿袋中采集标本，。可直接穿刺导尿管近端侧壁采集尿液标本。具体操作如下：夹闭导尿管不超过30分钟；用酒精棉球消毒清洁导管近端采样部位周围外壁；将注射器针头穿刺
23、进入导管腔，抽吸出尿液；收集的尿液置于无菌尿杯或试管中；检查杯盖是否密封，避免洒溢。耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺如需进行厌氧菌培养或儿童及其他无法配合获得清洁尿液标本时，应采用耻骨上膀胱穿刺；消毒脐部至尿道之间区域的皮肤；对穿刺部位进行局麻；在耻骨联合和脐部中线部位将针头插入充盈的膀胱；用无菌注射器从膀胱吸取尿液；无菌操作将尿液转入无菌螺口杯，尽快送至实验室培养。尿液标本标签及申请单标签及申请单申请单除应包括患者基本信息外，一定注明患者的临床诊断、症状、是否使用了抗菌药物、标本留取方式和采集时间。尿杯上的标签要求有唯一标识号或条码，注明标本种类和采集时间，此信息尤其重要。标本运输标本运输尿标本
24、采集后应立即送检。如不能在采集30分钟内进行培养，应放入4冰箱保存，但也不能超过24小时。实验室拒收标准实验室拒收标准标识不明，未提供采集时间及采集方法；标本类型与标签信息不符；尿标本采集后超过30分钟送达实验室，且未冷藏保存的；患者集尿袋中的尿液标本；申请做厌氧菌培养但未从耻骨弓上穿刺采集尿液。容器破损、尿液渗漏；明显污染的标本；标本量太少。脑脊液脑脊液 脑脊液是诊断中枢神经系统感染最主要的标本。临床采样指征：临床出现不明原因的头痛、发热、脑膜刺激征（颈强直、克氏征、布氏征阳性）、脑神经病理征象；脑积水；脑性低钠血症等症状，怀疑中枢神经系统感染时应送检脑脊液培养标本，并同时送检血培养标本。标
25、本采集：怀疑患者细菌性脑膜炎时，应立即采集脑脊液和血培养，应在抗菌药物使用前采集。怀疑分枝杆菌、隐球菌或慢性脑膜炎时，可能需多次采集脑脊液标本。如怀疑存在颅内压增高时，应先行检查头颅CT，必要时，可先予以脱水治疗再行穿刺。怀疑细菌性脑膜炎时，建议同时送检2-4套血培养。由临床医师采集，严格执行无菌操作。消毒采集部位皮肤，通常在第3、4腰椎或第4、5腰椎间隙插入带有管芯针的空针，进针至蛛网膜间隙，拔去管芯针，收集脑脊液5ml10ml，分别置于3支无菌试管中，第一管做化学或免疫学检查，第二管做细菌学检查，第三管做细胞学检查。细菌学检查要求适量标本：细菌1ml，真菌2ml，分枝杆菌2ml。脑脊液采集
26、量不能少于1ml。尽可能多收集脑脊液，可以提升培养的阳性检出率，尤其是针对真菌和分枝杆菌的培养。如送检T-SPOT.TB，还需注意添加肝素抗凝。标签及申请单：标本标识要求有唯一标识号或条码。血培养瓶及无菌管需清晰标注患者基本信息、标本来源、标本采集时间、送检目的、临床诊断、申请医师等。应注明是否已经使用抗菌素。特殊病原菌检查如奴卡菌、真菌、分枝杆菌应注明。脑室分流的标本应注明“脑室分流液”，而不是“脑脊液”。标本运输：标本采集后应立即送检，不超过1小时；脑脊液标本不可冷藏。实验室拒收标准样本容器上未贴标签，或标签与检验申请单不符；样本外漏、容器破损或明显受到污染；标本量少，送检延迟，未按规定保
27、存。胸水胸水胸水胸水胸水以细菌性胸膜炎最为常见，也可见于膈下炎症、肺结核、肺炎、肺结核等疾病。低蛋白或肿瘤性疾病也可以引起的胸腔积液。临床采样指征：患者听诊、影像学检查发现胸腔积液，胸腔穿刺后发现胸腔积液浑浊、乳糜性、血性或脓性，考虑感染性胸腔积液(肺结核、肺炎、胸膜炎)患者应送检，进行涂片染色、细菌培养等细菌学检测。标本采集：尽可能在抗菌药物使用前采集。由临床医师经皮穿刺或外科方式获得；严格执行无菌操作。通过影像学或叩诊定位穿刺部位，消毒穿刺部位皮肤，麻醉穿刺部位，用中空孔针穿刺至胸膜腔内，抽取胸水标本；标本采集后可注入可直接注入血培养瓶送检，或将标本收集到带螺旋帽内无菌管送检，以便微生物室
28、进行涂片检查。标本量分别为细菌培养1ml，真菌培养10ml，分枝杆菌培养10ml。不要拭子蘸取标本。如送检T-SPOT.TB，还需注意添加肝素抗凝。标签及申请单：申请单除应包括患者基本信息外，注明患者的临床诊断、症状、是否使用了抗菌药物、标本来源、检测目的，注明胸水的类型、性状，以及特殊检验需求。血培养瓶及无菌管要求有唯一标识号或条码。需标注患者基本信息、标本来源、标本采集时间、送检目的等。标本运输：标本采集后应立即送检，通常室温15分钟内应送至实验室，若不能及时送检，不可冷藏。室温保存不得超过24小时。实验室拒收标准样本容器上未贴标签，或标签与检验申请单不符；样本外漏、容器破损或明显受到污染
29、；标本量过少，或凝固；送检延迟，未按规定保存腹水腹水腹水腹水腹腔积液分为漏出液和渗出液，渗出液多由感染引起，常见细菌、结核分枝杆菌、厌氧菌感染。临床采样指征：出现但不局限于发热、腹胀、腹部疼痛、压痛、反跳痛；并经影像学检查发现腹腔内积液者。标本采集：尽可能在抗菌药物使用前采集。由临床医师经皮穿刺或外科方式获得；严格执行无菌操作。可由超声定位。消毒采集部位皮肤，麻醉穿刺部位，用中空孔针穿刺，标本采集后可注入无菌瓶或无菌试管送检。标签及申请单：申请单除应包括患者基本信息外，注明患者的临床诊断、症状、是否使用了抗菌药物、标本来源、检测目的，注明腹水的类型、性状，以及特殊检验需求。标本标识要求有唯一标
30、识号或条码。无菌管需标注患者基本信息、标本来源、标本采集时间、送检目的等。标本运输：标本采集后应立即送检，通常室温15分钟内应送至实验室，若不能及时送检，不可冷藏。室温保存不得超过24小时。实验室拒收标准样本容器上未贴标签，或标签与检验申请单不符；样本外漏、容器破损或明显受到污染；标本量过少，或凝固；送检延迟，未按规定保存皮肤、软组织标本 皮肤及软组织感染(SSTI)是致病菌侵犯表皮、真皮和皮下组织引起的炎症性疾病。皮肤及软组织感染包括烧伤创面感染、手术后切口感染、急性蜂窝织炎、外伤感染、咬伤感染及褥疮感染等。对大多数开放性损伤感染部位的取样，应在清洁创面后，在无菌条件下于深层基底或病变中心及
31、边缘取样。一、烧伤创面感染标本：一、烧伤创面感染标本：烧伤患者的创面、组织活检、血培养等的细菌学检测结果对临床医生进行烧伤感染的诊断和治疗十分重要。创面的拭子标本或组织活检标本都可以进行细菌定量培养。出现全身感染症状时，应同时采集血培养标本。在采集表面拭子或组织活检标本之前，应对创面彻底清洁，且未局部应用抗菌药物烧伤创面感染标本烧伤创面感染标本临床采样指征：临床采样指征：由于烧伤的早期创面无菌，烧伤后12小时勿采集标本。当患者出现发热、创面恶化时，考虑采样标本采集标本采集 首先应应无菌生理盐水或注射用水清洁创面表面拭子：采用无菌棉拭子用力刮取创面，置无菌试管内，封闭管口；组织细菌定量培养的标本
32、采取：在无菌条件下，切取深度烧伤痂下组织,以0.3-0.5克为宜，厌氧培养：不能用拭子，而应采用注射器抽吸的方法采集深部、创面边缘的标本。标签及申请单：标签及申请单：标本标识要求有唯一标识号或条码。标本上的标签除应包括患者姓名、病历号、诊断、检验项目等基本信息外，应标注采集部位及检测目的，必须注明采集部位是表浅还是深部，标明需氧或者厌氧培养，必要时需注明病程的阶段。标本运输：标本运输：应尽快将标本送至实验室检测如果1小时内无法将标本送达实验室，需冷藏保存。不要将用于培养的组织标本置于福尔马林中。实验室拒收标准实验室拒收标准可对标本进行革兰染色，评价标本质量：如果存在上皮细胞，说明标本存在表面污
33、染，培养结果将受影响；如果只有白细胞，说明标本质量合格。实验室出现以下情况，可执行标本拒收：样本容器上未贴标签，或标签与检验申请单不符；样本外漏、容器破损；标本明显污染；延误送检，未按规定保存。脓肿标本脓肿标本 临床采样指征：临床采样指征：皮肤或皮下脓肿受累部位出现红、肿、热、痛，需手术切开引流时；深部脓肿表现为局部疼痛和触痛并伴有全身症状，发热、乏力食欲减退等；创伤或手术部位感染。采样要求：采样要求：尽可能在抗菌药物使用前采集。厌氧培养应注意避免正常菌群污染和接触空气。开放性脓肿不能做厌氧菌培养 闭锁性脓肿或深部切口感染标本不能用拭子采集。出现发热、寒战等全身感染症状患者应同时送检血培养 采
34、集方法：采集方法：开放性脓腔：需进行清创。用无菌生理盐水清洁创面，用拭子采集深部伤口或溃疡基底部的分泌物，至少采集两个拭子（分别用于涂片和培养）；或剪取深部病损边缘的组织。封闭的脓肿：对病灶局部的皮肤或黏膜表面彻底消毒，用注射器抽取脓液，放入无菌容器内，同时送需氧及厌氧培养。或将脓肿切开引流后，取脓肿壁的一部分送检。瘘管或窦道脓液：最好在外科探查时采集最深处组织。脓肿标本脓肿标本标签及申请单：标签及申请单：标本标识要求有唯一标识号或条码。清晰标注患者基本信息、标本来源，不要仅标注为“伤口标本”。要标明来自开放性或闭合性损伤。标明需氧和或厌氧培养。标本运输：标本运输：标本采集后应立即送检，通常室温不超过1小时送至实验室若不能及时送检，需4保存不超过24小时，厌氧菌培养不可放置冰箱保存。组织应保持湿润并在30分钟内送至实验室，不可冷藏。实验室拒收标准实验室拒收标准可对标本进行革兰氏染色，评价标本质量：如果存在上皮细胞，说明标本存在表面污染，培养结果将受影响；如果只有白细胞，说明标本质量合格。实验室出现以下情况，可执行标本拒收：样本容器上未贴标签，或标签与检验申请单不符；样本外漏、容器破损或明显受到污染；标本量不足或干涸延误送检，未按规定保存，实验室应与临床联系，可作让步接收，同时在报告结果时注明情况。
