1、病理学技术（中级）专业知识精讲班 免疫组织化学染色直接法的原理是 A.用已知的配体与荧光素或酶结合，直接与待测组织中的受体反应B.将凝集素与荧光素或酶结合，直接与组织中的抗原反应C.用已知的补体与荧光素或酶结合，直接与待测组织中的抗原反应D.用已知的特异性抗体直接与待测组织中的抗原结合E.用已知的特异性抗体与荧光素或酶结合，直接与待测组织中的抗原反应【答案】E2高频考题【解析】免疫组织化学又称免疫细胞化学。它是组织化学的分支，它是用标记的特异性抗体（或抗原）对组织内抗原（或抗体）的分布进行组织和细胞原位检测技术。免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗
2、体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在。此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质，也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可被侦测。3高频考题下列不是免疫组织化学染色失败的原因的是 A.第一抗体为多克隆抗体 B.抗体浓度过高 C.未灭活内源性酶 D.抗原没有暴露 E.洗涤不充分【答案】A4高频考题关于免疫组织化学染色PAP法的描述错误的是A第一抗体是针对待检抗原的特异性抗体B第二抗体是桥抗体，一面联结第一抗体，另一面联结PAP复合物C第三抗体是以过氧化物酶为抗原产生的抗体D第三抗体必须与第二抗体为同种动物所产生E
3、必须用过量的第二抗体【答案】D【解析】三抗与一抗为同种动物所产生。5高频考题免疫组化染色阳性细胞的特征的描述哪项不正确A.有时免疫组化阳性反应强，可呈片状分布，颜色均匀一致 B.三种类型定位：胞浆、核和膜 C.分布可分灶性和弥漫性 D.切片边缘，坏死细胞区等可呈阳性染色，不能用于判断阳性 E.背景清晰，单个明显的细胞呈强阳性，可判断为阳性【答案】A6高频考题在免疫组织化学染色中增强特异性染色的方法错误的是 A.蛋白酶消化 B.选择合适的抗体浓度 C.选择最佳温育温度和温育时间 D.在加第一抗体前用免疫血清封闭 E.多层染色【答案】D【解析】增强特异性染色的方法：抗原修复、合适的抗体稀释度、多层
4、染色法、CAS方法、显色反应的控制7高频考题8十五 免疫组织化学技术【掌握】1 上皮源性肿瘤标志：1.1 广谱上皮细胞标志、1.2 选择性上皮肿瘤标志2 间叶源性肿瘤标志：2.1 广谱间叶肿瘤标志、2.2 肌源性肿瘤标志、2.3 纤维组织细胞肿瘤标志、2.4 血管源性肿瘤标志、2.5 间皮细胞肿瘤标志、2.6 基底膜标志9十五 免疫组织化学技术【掌握】3 神经源性肿瘤标志：3.1 胶质细胞肿瘤标志；3.2 神经元肿瘤标志；3.3 神经内分泌细胞肿瘤标志4 淋巴造血肿瘤标志：4.1 B淋巴细胞标志；4.2 T淋巴细胞标志10十五 免疫组织化学技术【掌握】5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.1 小圆细胞
5、肿瘤；5.2 梭形细胞肿瘤；5.3 上皮样肿瘤；5.4 多形性肿瘤；5.5 腺泡状肿瘤；5.6 转移性肿瘤十五 免疫组织化学技术1 上皮源性肿瘤标志：1.1 广谱上皮细胞标志广泛分布于所有上皮细胞及其肿瘤中，某些向上皮细胞分化的恶性肿瘤亦可阳性表达，因此在肿瘤鉴别中应用广泛。细胞角蛋白(CK)和上皮特异抗原(ESA)：能标记全身绝大部分鳞状上皮、腺上皮、移行上皮和间皮细胞及其肿瘤。上皮细胞膜抗原(EMA)、癌胚抗原(CEA)、上皮肿瘤相关抗原(CA19-9、CA242、CA15-3)等：在多数腺癌中高度表达，而鳞状上皮、移行上皮和间皮来源肿瘤表达相对较低。十五 免疫组织化学技术1.1 广谱上皮
6、细胞标志：细胞角蛋白（CK）是上皮性肿瘤较特异的免疫组化标志物。依据分子量不同分为高分子CK（HCK）和低分子CK（LCK）两大类20余种。LCK是单层上皮的特征，向鳞状细胞分化肿瘤应首选HCK，向腺上皮分化的低分化肿瘤因选LCK效果更理想。目前多采用广谱CK作为上皮细胞肿瘤的诊断和鉴别诊断。十五 免疫组织化学技术1.1 广谱上皮细胞标志：上皮细胞膜抗原（EMA）：广泛存在于各种腺上皮细胞膜系结构中EMA阳性颗粒定位于细胞膜和细胞浆其标记谱系与CK大致相似，但角化上皮表达不如CK强，而内脏腺上皮则优于CKEMA作为上皮性肿瘤及其上皮分化肿瘤的重要标志，最好与CK或ESA、CEA联合应用，以提高
7、诊断效果。十五 免疫组织化学技术1.1 广谱上皮细胞标志：上皮特异抗原（ESA）：上皮细胞较特异性标志，其标记谱系与EMA相似，对腺上皮肿瘤非常理想，定位于胞浆和胞膜；在精原细胞瘤中较CK、EMA表达要理想。ESA应与CK或EMA合用。十五 免疫组织化学技术1.1 广谱上皮细胞标志：癌胚抗原（CEA）：抗原颗粒主要定位于细胞浆，广泛存在于各种腺上皮性肿瘤细胞中，CEA标记谱系与EMA相类似，各种腺癌呈阳性表达，其含量与肿瘤分化程度相关，分化越低抗原表达越强。在鉴别颅内转移性肿瘤和间皮肿瘤中非常有用。十五 免疫组织化学技术1.1 广谱上皮细胞标志：CA19-9：一种消化道癌的相关抗原，常定位于肿
8、瘤细胞浆和胞膜，沿腺腔缘分布。CA19-9在腺癌中高度表达，而正常腺上皮含量较低。CA15-3：乳腺癌的一种肿瘤相关抗原，乳腺癌几乎为强阳性，但非乳腺癌所特有。CA242：为细胞膜型抗原，一种肿瘤相关粘液抗原，标记各种分泌粘液的腺癌，多数腺癌呈阳性反应。可作为上皮细胞恶性增生的重要标志，常用于腺瘤性息肉和交界性肿瘤的鉴别诊断。十五 免疫组织化学技术1.1 广谱上皮细胞标志：谷胱甘肽S转移酶（GST）：阳性颗粒定位于细胞浆对上皮性肿瘤几乎均呈阳性表达，是一种较广谱的上皮细胞及其肿瘤标记，无特异性正常甲状腺、泌尿道、呼吸道、胃肠道、子宫、肝和胆管上皮阳性表达；胃癌、肠癌、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌
9、、肺癌、部分鳞状细胞癌，肺类癌等上皮源性恶性肿瘤高度表达。十五 免疫组织化学技术1 上皮源性肿瘤标志：1.2 选择性上皮肿瘤标志甲胎蛋白(AFP)：肿瘤胚胎性糖蛋白，在部分肝细胞癌、内胚窦瘤和胚胎性生殖细胞癌中可呈阳性反应，阳性反应颗粒主要位于细胞浆乳腺癌相关抗原(BRCA1)：标记乳腺癌和卵巢腺癌等结肠腺癌相关抗原：为胃肠腺瘤早期抗原，对胃肠增生性息肉，腺瘤性息肉，家族性息肉呈阳性表达。在各种腺瘤呈阳性表达，而腺癌组织则为阴性或弱阳性反应。在肠肿瘤的鉴别诊断中，最好与CA9-9 或GSM联合应用十五 免疫组织化学技术1.2 选择性上皮肿瘤标志前列腺特异抗原（PSA）：为前列腺正常上皮细胞，增
10、生上皮细胞和前列腺癌较特异性标志。为前列腺上皮细胞所特有的一种糖蛋白。该抗原为胞浆型前列腺酸性磷酸酶（PSAP）：酸性磷酸酶的一种同工酶，标记谱系与PSA大致类似，对各种类型的前列腺癌多呈阳性表达，阳性颗粒主要位于细胞浆，在原发性或转移性前列腺癌的诊断与鉴别诊断中最好与PSA联合标记十五 免疫组织化学技术1.2 选择性上皮肿瘤标志卵巢浆液腺肿瘤相关抗原（CA125）：在卵巢浆液性囊腺癌、子宫内膜样癌细胞高度表达，呈阳性反应，阳性颗粒定位于细胞膜。但不能作为卵巢组织来源的免疫组化特征性标志物。十五 免疫组织化学技术1.2 选择性上皮肿瘤标志绒毛膜促性腺激素（HCG）：正常由胎盘滋养叶合体细胞产生
11、，在正常妊娠绒毛滋养叶细胞免疫组化标记为HCG阳性表达。患滋养叶细胞恶性肿瘤，如葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮细胞癌呈强阳性表达；某些含滋养叶细胞成分的生殖细胞肿瘤，如胚胎性癌和精原细胞瘤等有时可呈HCG阳性反应；异位分泌HCG的肿瘤阳性率较高。十五 免疫组织化学技术1.2 选择性上皮肿瘤标志绒毛膜促性腺激素（HCG）：因此不能简单地将HCG阳性的肿瘤诊断为滋养叶细胞肿瘤，应结合免疫组化形态学鉴别。诊断绒毛膜上皮癌时与SP1合用以提高诊断的可靠性。十五 免疫组织化学技术1.2 选择性上皮肿瘤标志妊娠特异性-1糖蛋白（SP1）：由胎盘绒毛合体滋养叶细胞合成的一种糖蛋白。在肿瘤中的标记谱系与HCG
12、有类似之处，但与其他激素蛋白无交叉反应。它对正常滋养叶细胞和该细胞发生的良恶性肿瘤有非常高的特异性。十五 免疫组织化学技术1.2 选择性上皮肿瘤标志甲状腺球蛋白（TG）：系甲状腺滤泡上皮细胞合成的一种大分子糖蛋白，对甲状腺滤泡上皮及其来源的肿瘤有较高特异性：正常甲状腺滤泡上皮、滤泡胶质、甲状腺瘤、甲状腺癌均呈阳性表达。在恶性肿瘤中，TG表达与甲状腺癌细胞分化程度密切相关，高分化甲状腺癌可为强阳性表达，且阳性细胞较多；低分化癌相对为低表达，阳性细胞呈小灶性分布。一般情况下甲状腺髓样癌不表达TG。十五 免疫组织化学技术1.2 选择性上皮肿瘤标志甲状腺球蛋白（TG）：主要应用于：甲状腺肿瘤分类和组织
13、学发生研究；甲状腺癌与甲状腺髓样癌及甲状旁腺瘤的诊断与鉴别诊断；转移性甲状腺癌的诊断；异位甲状腺组织及其肿瘤的诊断与鉴别诊断甲状腺乳头状腺癌，应结合CEA、CA242等肿瘤标记联合应用十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：2.1 广谱间叶肿瘤标志波形蛋白（Vimentin）：最常用的广谱间叶细胞标志，它是一种中间丝，存在于全身所有间叶细胞及其肿瘤细胞。某些上皮性恶性肿瘤可发生Vimentin异常表达。Vimentin常用于癌与肉瘤鉴别诊断，因为绝大部分上皮来源的肿瘤为Vimentin阴性或弱阳性，而软组织肿瘤则为阳性表达；十五 免疫组织化学技术2.1 广谱间叶肿瘤标志：波形蛋白（Vime
14、ntin）：恶性黑色素瘤与低分化癌的鉴别，前者Vimentin阳性，CK很少表达；后者CK表达，Vimentin多呈阴性反应；未分化癌多为Vimentin阴性而CK阳性表达；淋巴瘤Vimentin和LCA阳性尤文瘤Vimentin阳性，CD99呈阳性反应；神经母细胞瘤一般Vimentin和NSE或Sy阳性。因此鉴别诊断中Vimentin应与其他标记物联合应用十五 免疫组织化学技术2.1 广谱间叶肿瘤标志：纤维连接蛋白（FN）：一种细胞外非胶原糖蛋白，广泛存在于间叶细胞浆或细胞表面，结缔组织及大部分基底膜。该蛋白主要由成纤维细胞、肝细胞和血管内皮细胞产生。在恶性肿瘤中，绝大部分间叶源性肿瘤细胞为
15、FN阳性，上皮性肿瘤细胞多为阴性。上皮细胞基底膜中FN进行性减少是提示上皮细胞恶性改变的重要特征之一，与恶性肿瘤的转移和浸润关系非常密切。十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：2.2 肌源性肿瘤标志 Desmin和Muscle-specific-actin（MSA）为广谱肌细胞标志，它们能同时标记横纹肌和平滑肌及其肿瘤细胞；横纹肌肌动蛋白（a-sr-l）、Myoglobin、Myogenin和MyoD1为横纹肌及其肿瘤标记；平滑肌肌动蛋白（SMA）、Caldesmon、Calponin和Myosin Heavy Chain（S-M）为平滑肌和肌上皮细胞及其肿瘤标志。这些标志物中，除Myo
16、genin和MyoD1为细胞核型表达外，其余主要为细胞浆表达。十五 免疫组织化学技术2.2 肌源性肿瘤标志：广谱肌源性肿瘤标志：结蛋白（Desmin）：是横纹肌和平滑肌较特异的一种中间丝蛋白，常见于多数平滑肌肿瘤、横纹肌肿瘤和部分肌上皮肿瘤。应与其他标记物(如MSA、SMA)联合标记。肌特异性肌动蛋白（MSA）：是肌细胞内具有收缩能力的微丝蛋白，它与中间丝共同构成细胞内骨架成分。广泛存在于心肌、平滑肌和横纹肌细胞及其肿瘤中。尤其在低分化肌源性肿瘤中表达高于Desmin，因此MSA的敏感性高于Desmin但特异性不如Desmin强十五 免疫组织化学技术2.2 肌源性肿瘤标志：横纹肌肿瘤标志：肌红
17、蛋白（Mg）：广泛存在于心肌和骨骼肌，对横纹肌细胞及其肿瘤有较高特异性，但敏感性较差。由于Mg为多克隆抗体，其非特异背景比较重，故应用少。横纹肌肌动蛋白（actin）：是横纹肌较特异性标志物，阳性颗粒位于细胞浆，在各种类型的横纹肌肿瘤、蝾螈瘤和恶性中胚叶瘤中横纹肌成分均可阳性表达，它的敏感性高于Mg，是目前较理想的横纹肌肿瘤标记物之一。十五 免疫组织化学技术2.2 肌源性肿瘤标志：横纹肌肿瘤标志：MyoD1和Myogenin是较新的横纹肌及其肿瘤标志物，免疫表型为细胞核型，阳性颗粒主要分布于细胞核，胞浆为阴性，偶弱阳性。它们标记横纹肌细胞、横纹肌肿瘤和多种向横纹肌分化的肿瘤如Wilms瘤和蝾螈
18、瘤等。在横纹肌肿瘤的诊断与鉴别诊断中应首选横纹肌肌动蛋白和Myogenin或横纹肌肌动蛋白和MyoD1。MyoD1：生肌决定因子1基因，属于生肌决定因子MyoD家族，是参与肌细胞生长分化的重要调控因子。Myogenin：肌细胞生成素。十五 免疫组织化学技术2.2 肌源性肿瘤标志：平滑肌肿瘤标志：平滑肌肌动蛋白（SMA）：是平滑肌及其肿瘤最常用的标记物，对平滑肌有较高特异性、敏感性，该抗原对福尔马林固定有一定耐受性。平滑肌特异性蛋白Caldesmon和Calponin对平滑肌和肌上皮有非常高的特异性，显著优于SMA；Caldesmon：钙调蛋白结合蛋白Calponin：钙调蛋白十五 免疫组织化学
19、技术2.2 肌源性肿瘤标志：平滑肌肿瘤标志：平滑肌Myosin Heavy Chain（S-M）：标记平滑肌和肌上皮细胞及其相应平滑肌肿瘤和肌上皮肿瘤，但敏感性稍低，应结合其他平滑肌标志物联合应用。Myosin Heavy Chain：肌球蛋白重链目前首选的平滑肌标志物是SMA或Caldesmon。十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：2.3 纤维组织细胞肿瘤标志 包括1-抗胰蛋白酶（A1AT），1-抗胰糜蛋白酶（A1ACT）和溶菌酶（Lysozyme）。它们共同作为纤维组织细胞标志，但无特异性，应结合其他肿瘤标志。CD68（KP1）和MAC387对巨噬细胞和组织细胞均为阳性反应，且具有
20、较高特异性。CD68是目前恶性纤维组织细胞较理想的标记物，可作为纤维组织细胞瘤首选标记物。MAC387是组织细胞特异抗原。十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：2.4 血管源性肿瘤标志血管外皮细胞和血管球细胞发生的肿瘤细胞可表达Vimentin、Actin、Myosin，但都不特异。血管内皮细胞标记物：第八因子相关抗原（F）：由血管内皮细胞产生的一种大分子糖蛋白，是血管内皮细胞及其血管内皮源性良恶性肿瘤的特异性标志物。其在血管内皮肿瘤中的表达与肿瘤细胞分化程度关系密切十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：血管内皮细胞标记物：血管内皮细胞CD31：血管内皮和血管内皮源性肿瘤较特异性的
21、标志物，但是对中、低分化肿瘤敏感性尚不如F。CD34：亦可标记血管内皮细胞，但非血管内皮细胞所特有。Endoglin：一种跨膜蛋白，血管内皮高度表达，是标记血管内皮细胞较理想的标记物。荆豆凝集素（UEA）：一种植物凝集素蛋白，常用于标记血管内皮肿瘤，但缺乏特异性，故不能单一使用。十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：血管内皮细胞标记物：良性血管内皮肿瘤和观察血管增生情况应首选CD34和CD31；恶性血管内皮瘤应首选F，并结合CD34、CD31标志。十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：2.5 间皮细胞肿瘤标志 间皮既表达CK等上皮标志，也表达Vimentin间叶标志。Calreti
22、nin是一种钙结合蛋白，间皮细胞呈强阳性表达，对间皮肿瘤较敏感，是间皮细胞及其肿瘤较理想的标志物，该标记物多为细胞浆和细胞膜阳性。在间皮肿瘤标记物中，最好采用HMBE1和Calretinin联合应用。但是它们对部分腺上皮肿瘤可呈阳性表达，故应该与CEA、CA19-9等合用，以排除低分化腺癌。十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：2.6 基底膜标志层粘蛋白（Laminin）：是基底膜中的一种糖蛋白，正常分布于基底膜和细胞外基质内。平滑肌肿瘤和神经鞘可呈阳性反应，而纤维组织细胞源性肿瘤多阴性表达，故可用Laminin鉴别。血管基底膜中含Laminin，免疫组化标记呈阳性表达，在血管肿瘤免疫组
23、化诊断中，可采用Laminin标记显示血管基底膜，以观察肿瘤细胞与基底膜之间的关系，间接区分血管内皮或外皮源性肿瘤。Laminin能显示上皮肿瘤周围基底膜，间接提示该肿瘤的分化程度和浸润情况。十五 免疫组织化学技术2 间叶源性肿瘤标志：2.6 基底膜标志胶原（Collagen）：是一种胶原蛋白，主要分布于基底膜，其标志谱系和应用与Laminin相似，两者可合用。可应用胶原或Laminin标记，以显示早期肝硬化的存在十五 免疫组织化学技术3 神经源性肿瘤标志：3.1 胶质细胞肿瘤标志胶质纤维酸性蛋白（GFAP）：星形胶质细胞特异性中间丝蛋白，其在肿瘤细胞中表达与肿瘤细胞分化密切相关。GFAP在颅
24、内肿瘤鉴别诊断中应用甚广，能证实各种类型星形胶质细胞瘤，可用于星形胶质细胞瘤与少枝胶质细胞瘤、脑膜瘤、淋巴瘤、神经母细胞瘤和某些低分化颅内转移性肿瘤的鉴别诊断。GFAP在唾液腺肌上皮及其肿瘤中含量较高，在腮腺肌上皮肿瘤中的表达强于舌下腺和颌下腺肌上皮肿瘤，其特异性优于S-100。十五 免疫组织化学技术3.1 胶质细胞肿瘤标志：S-100蛋白：从脑组织中分离出来的一种酸性蛋白，特异性不强，在肿瘤鉴别诊断中应用：在唾液腺、乳腺和汗腺肌上皮肿瘤诊断中S-100是首选的标志之一；恶性黑色素瘤和神经鞘瘤的诊断中的较常用的标记物。髓鞘碱性蛋白（MBP）：是形成和维持神经髓鞘最重要的结构蛋白之一，是中枢和周
25、围神经鞘结构、少枝胶质细胞和施万细胞及其肿瘤的特异性标志物，但敏感性并不十分高，在诊断与鉴别中应结合其他标记物如S-100、GFAP、NF等同时应用。十五 免疫组织化学技术3 神经源性肿瘤标志：3.2 神经元肿瘤标志神经元细胞产生的一种结构和功能蛋白，目前应用最多的神经元肿瘤标志物：神经细丝蛋白（NF）、神经特异性烯醇化酶（NSE）、铬粒素（Cg-A）、突触蛋白（Sy）、神经母细胞瘤（NBA）等。十五 免疫组织化学技术3.2 神经元肿瘤标志：神经细丝蛋白（NF）：神经元特异性中间丝蛋白。在神经母细胞瘤、节细胞神经瘤、副节神经瘤、小脑髓母细胞瘤、肾上腺内外嗜铬细胞瘤、恶性黑色素瘤和大部分神经内分
26、泌肿瘤呈阳性表达。十五 免疫组织化学技术3.2 神经元肿瘤标志：神经特异性烯醇化酶（NSE）：烯醇化酶5种同工酶，只有存在于神经元细胞和神经内分泌细胞，故称为神经元特异性烯醇化酶。为神经源性肿瘤和神经内分泌肿瘤较常用的标记物，但NSE阳性表达的肿瘤并非均为神经元和神经内分泌肿瘤。十五 免疫组织化学技术3.2 神经元肿瘤标志：铬粒素（CgA）：神经元性肿瘤和神经内分泌肿瘤较特异性的标记物，但敏感性不如NSE。CgA标记嗜铬细胞瘤最理想，其次为胃未分化癌阳性表达较高。突触蛋白（Sy）：是神经元突触前小泡膜糖蛋白，广泛存在于神经-肌肉突触处，所有类型的神经元细胞、肾上腺髓质和副节细胞，各种弥漫性神经
27、内分泌系统中部分细胞。作为神经元和神经内分泌肿瘤极好的广谱标记物，其标记谱与NF、NSE、CgA相似。十五 免疫组织化学技术3 神经源性肿瘤标志：3.4 神经内分泌细胞肿瘤标志垂体：正常嗜酸性细胞和肿瘤细胞产生催乳素（PRL）和生长激素（GH）正常嗜碱性细胞及其肿瘤分泌促肾上腺皮质激素（ACTH）、促甲状腺素（TSH）、促卵泡激素（FSH）、促黄体激素（LH）。利用这些激素进行免疫组化标记可证实垂体腺瘤并准确的功能分类。十五 免疫组织化学技术3.4 神经内分泌细胞肿瘤标志 胰岛细胞瘤可产生胰岛素（Insulin）、胰高血糖素(Glucagen)、生长抑素（Somatostatin）、促胃液素（
28、Gastrin）、血管活性肠肽（VIP）、胰多肽（PP）等，可利用上述标记物将胰岛细胞瘤分为胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、生长抑素瘤、VIP瘤、促胃液素瘤。甲状腺滤泡上皮来源的肿瘤多为甲状腺球蛋白（Tg）阳性表达；C细胞来源肿瘤为降钙素（hCT）阳性；十五 免疫组织化学技术3.4 神经内分泌细胞肿瘤标志 甲状旁腺肿瘤特异性标记物是甲状旁腺素；甲状腺上皮细胞源性肿瘤可选用CA19-9、CEA、CK等上皮源性标志确诊；C细胞肿瘤和甲状旁腺瘤可表达部分上皮标志，如CK、EMA。此外，NSE、NF、Sy也可作为辅助标记。恶性黑色素瘤相关抗原（HMB45）：黑色素细胞及其肿瘤较特异标记物，HMB45和S-10
29、0共同作为黑色素瘤最常用的肿瘤标记物，其特异性HMB45优于S-100。十五 免疫组织化学技术4 淋巴造血肿瘤标志：白细胞共同抗原（LCA）能标记B细胞、T细胞、组织细胞、巨噬细胞，某些粒细胞弱表达，少部分T细胞和浆细胞呈阴性表达。LCA常与CK、Vimentin、NF等合用，将淋巴瘤与上皮性肿瘤、间叶源性肿瘤及神经内分泌肿瘤相鉴别。十五 免疫组织化学技术4 淋巴造血肿瘤标志：4.1 B淋巴细胞标志CD20-cy（L26）：B细胞最常用的标记物，对正常B淋巴细胞和B细胞系恶性淋巴瘤阳性表达，该抗原定位于细胞浆和细胞膜，部分霍奇金病中霍奇金细胞亦可阳性。CD21：标记外套层和边缘带的B淋巴细胞，
30、而滤泡中心细胞可阴性，可作为B细胞恶性淋巴瘤的标记物。CD45RA（4KB5）：标记组织中和周围血中大部分B淋巴细胞，最好与其他B细胞标记物合用。十五 免疫组织化学技术4.1 B淋巴细胞标志CD74（LN2）和CD75（LN-1）：均为生发中心B细胞标记物；CD79a和CD79acy：较为理想的B细胞标记物；BLA：能标记早期B细胞和活化B细胞；轻链Kappa和Lambda由B细胞产生，结合其他B细胞标记物来确诊B细胞恶性淋巴瘤。十五 免疫组织化学技术4 淋巴造血肿瘤标志：4.2 T淋巴细胞标志CD3：主要标记正常T淋巴细胞及其肿瘤，均阳性表达，阳性颗粒定位于细胞膜，诊断中常与CD20合用来鉴
31、别肿瘤细胞属于T系或B系；CD8：为抑制/细胞毒T细胞标记；CD45RO：有两个克隆：OPD4能标记辅助/诱导T淋巴细胞及其肿瘤细胞；UCHL1能标记几乎所有的T淋巴细胞及其肿瘤；十五 免疫组织化学技术4.2 T淋巴细胞标志CD43能标多数T淋巴细胞及其肿瘤。具有较强的特异性和敏感性；ALK：为间变性大细胞淋巴瘤特异性标记物，CD56：为自然杀伤细胞标志，对自然杀伤细胞及其肿瘤呈阳性表达，此外对某些神经元性肿瘤、神经鞘瘤亦可阳性表达。十五 免疫组织化学技术5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.1 小圆细胞肿瘤此类肿瘤细胞多为圆形，体积较小，常呈片状及弥漫性分布，常规诊断非常困难。小圆细胞肿瘤鉴别涉及胚
32、胎性横纹肌肉瘤、原始神经外胚层肿瘤、淋巴瘤、尤因瘤、神经内分泌肿瘤、小细胞癌、原始间叶肿瘤等。十五 免疫组织化学技术5.1 小圆细胞肿瘤 胚胎性横纹肌肉瘤较特异性的标志物：Desmin、MSA、Myoginin、MogD1和横纹肌Actin等。诊断中首选Desmin和Myoginin或者MSA+横纹肌Actin；尤因瘤的首选标志物为：CD99，与某些上皮细胞肿瘤鉴别诊断时可同时选择Vimentin，CD99和Vimentin同时阳性可确诊。淋巴瘤，可同时选用LCA、T Cell及B Cell标志物十五 免疫组织化学技术5.1 小圆细胞肿瘤 原始神经外胚层肿瘤通常表达NSE、NF、CD99，轻度
33、表达CK，LCA不与该肿瘤发生交叉反应。神经内分泌肿瘤NSE、Sy、NF阳性；皮肤Merkel瘤可表达CK和NSE，而Vimentin常阴性。小细胞癌可用CK、EMA、CEA或ESA标记。鳞状上皮部位发生的可选P-CK和HCK，内脏上皮发生的选LCK和CEA，肺和胃肠发生的选CK、NSE、CgA、SCLC等神经元标志。十五 免疫组织化学技术5.1 小圆细胞肿瘤原始间叶源性肿瘤，有时仅Vimentin阳性，可采用排除法来判断。十五 免疫组织化学技术5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.2 梭形细胞肿瘤属于该类的肿瘤比较多：纤维源性肿瘤、平滑肌肿瘤、横纹肌肿瘤（梭形细胞型）、血管源性肿瘤、神经纤维肿瘤、间
34、皮肿瘤、恶性纤维组织细胞肿瘤、肌上皮肿瘤、黑色素瘤（梭形细胞型）、滑膜肿瘤、梭形细胞癌等。十五 免疫组织化学技术5.2 梭形细胞肿瘤纤维瘤和纤维肉瘤等纤维源性肿瘤：目前缺乏较特异的标志物，以排除法来诊断；平滑肌肿瘤：首选SMA、Calponin（CALP）、Caldesmon等；某些上皮样平滑肌肉瘤可表达少量CK；梭形细胞型横纹肌肿瘤：Myoginin、MyoD1；十五 免疫组织化学技术5.2 梭形细胞肿瘤梭形细胞型血管源性肿瘤：血管内皮肿瘤：首选F、CD34、CD31，分化低的内皮肿瘤F优于CD34和CD31。荆豆凝集素（UEA）无特异性。血管外皮肿瘤：无有效特异性标志，Vimentin和S
35、MA可阳性。血管内皮和外皮肿瘤鉴别诊断中可应用Lam（Laminin）和胶原。神经鞘瘤和神经纤维瘤：S-100、MBP、CD57，S-100和CD57敏感性较强，Lam在鞘细胞基膜亦可阳性表达。十五 免疫组织化学技术5.2 梭形细胞肿瘤间皮肿瘤和滑膜肿瘤：均有双向分化特点，同时表达CK和Vimentin。间皮细胞较特异标志HMBE1和Calretinin最常用，一般不表达CEA。滑膜肿瘤尚无特异性标记。肌上皮肿瘤：CK、Vimentin、Desmin、S-100、SMA、CALP、GFAP。唾液腺肌上皮肿瘤：S-100和GFAP；乳腺肌上皮瘤：S-100和SMA强阳性，GFAP多阴性。肌上皮瘤
36、与神经纤维源性肿瘤鉴别诊断应加CK、MBP等标记。十五 免疫组织化学技术5.2 梭形细胞肿瘤恶性纤维组织细胞瘤：A1AT、A1ACT、Lysozyme，CD68特异性较理想，非特异背景轻，为首选标志；梭形细胞恶性黑色素瘤：HMB45和S-100为首选标记物；梭形细胞癌：一种低分化上皮源性肿瘤，PCK、HCK为较理想的标记物，CEA、EMA、ESA一般不做为首选。十五 免疫组织化学技术5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.3 上皮样肿瘤常规活检中常见的上皮样肿瘤有：上皮样肉瘤、透明细胞肉瘤、癌肉瘤、上皮样间质瘤、上皮样滑膜肉瘤、上皮样平滑肌肉瘤、上皮样神经鞘瘤、上皮样血管肉瘤、肌上皮瘤、上皮样淋巴瘤等。
37、上皮样肉瘤具有上皮阳性成分，梭形细胞可以具有纤维组织细胞或肌源性细胞等免疫组化标记特征。十五 免疫组织化学技术5.3 上皮样肿瘤透明细胞肉瘤：具有黑色素瘤的免疫组化标记特点；上皮样血管肿瘤、神经鞘肿瘤和平滑肌肿瘤：共同特征为CK、EMA上皮标记阳性；淋巴肿瘤较特异性标记：LCA、L26、CD45RO、CD43、CD30（ki-1）、CD68、ALK等。十五 免疫组织化学技术5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.4 多形性肿瘤这一组肿瘤的细胞学形态和组织结构常表现为多样性，细胞大小不一，有梭形及圆形，胞浆常较丰富。恶性纤维组织细胞瘤：A1ACT、Lysozyme、CD68强阳性；多形性横纹肌肉瘤：Myo
38、globin、Myogenin、MyoD1；多形性神经鞘瘤：S-100、MBP阳性，有时表达HMB45；多形性癌：PCK、ESA、EMA；多形性恶性黑色素瘤：S-100、HMB45；多形性星形胶质细胞肉瘤：GFAP十五 免疫组织化学技术5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.5 腺泡状肿瘤是一组具有独特的腺泡状组织结构的肿瘤，常见于腺泡状软组织肉瘤、腺泡状横纹肌肉瘤、化学感受器瘤、神经内分泌肿瘤、恶性颗粒细胞瘤、腺泡状癌等。腺泡状软组织肉瘤：某些病例可表达Vimentin、desmin、Myosin、actin、MyoD1等肌细胞标志，而NSE、CgA、CK阴性；腺泡状横纹肌肉瘤：首选desmin、My
39、oginin、MyoD1、MSA；十五 免疫组织化学技术5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.5 腺泡状肿瘤化学感受器瘤和某些副神经节瘤：NSE、NF、CgA、Sy和某些神经肽类激素阳性；颗粒细胞瘤：S-100、NSE、NF；腺泡状癌（甲状腺癌、肺腺泡细胞癌、肝癌、肾癌）：表达CK、EMA、CEA等上皮细胞标志。十五 免疫组织化学技术5 肿瘤免疫组化鉴别诊断：5.6 转移性肿瘤上皮性肿瘤最常见：CK、ESA、CEA等阳性；甲状腺癌：TG；肝癌：HPC、AFP；前列腺癌：PSA、PSAP胃肠道癌和肺癌：CA19-9、CA242；乳腺癌：PR、ER、CA225、CA15-3；卵巢浆液腺癌：CA125；绒毛
40、膜上皮癌：HCG、SP1；十五 免疫组织化学技术5.6 转移性肿瘤间变性大淋巴细胞瘤：Ki-1、LCA、CD43、ALK；黑色素瘤：表达S-100、HMB45、Vimentin，不表达CK、EMA。AFP为以下哪种肿瘤的标记物A.黑色素细胞瘤B.乳腺癌C.肝细胞癌D.宫内膜癌E.鼻咽癌【答案】C【解析】AFP为肝细胞癌和内胚窦瘤的标志物；HMB45和S-100为黑色素细胞瘤的标志物；ER和PR为乳腺癌和子宫内膜癌的分化标志物。72高频考题关于小圆细胞肿瘤的描述，以下错误的是：（）A.是一类细胞形态为小圆形的细胞B.常规诊断基本可以明确诊断C.免疫组化诊断胚胎性横纹肌肉瘤首选DesminD.原始
41、间叶性肿瘤诊断困难，可采取排除法E.免疫组化诊断尤因肉瘤首选CD99【答案】B【解析】小圆细胞恶性肿瘤是病理学从镜下形态的分类，不能说明肿瘤的组织学类型，需要免疫组化进一步诊断。73高频考题下列哪种物质不是广谱上皮细胞标志物？（）A.癌胚抗原B.细胞角蛋白C.波形蛋白D.上皮特异抗原E.上皮肿瘤相关抗原【答案】C74高频考题石蜡切片中，可标记血管内皮的标志物应选（）。A.CD20B.CD68C.CD56D.CD31E.CD30【答案】D【解析】CD68为组织细胞标志物；CD56为自然杀伤细胞标志；CD20为B细胞最常用的标志物；CD30为霍奇金淋巴瘤最常用的标志物。75高频考题可鉴别平滑肌肿瘤
42、和纤维组织细胞瘤的标志物为（）。A.Calretinin B.CK C.lamininD.Vimentin E.EMA【答案】C【解析】CK和EMA均为上皮性标志物；Vimentin为间叶组织标志物；calretinin为间皮细胞肿瘤标志；laminin为基底膜标志物，在平滑肌肿瘤可呈阳性反应，在纤维组织细胞瘤多阴性表达，因此可用来鉴别平滑肌肿瘤和纤维组织细胞瘤。76高频考题嗜铬细胞瘤首选下列哪项免疫组化标记？（）A.CgA B.Calretinin C.GFAPD.HMB45 E.NBA【答案】A【解析】calretinin为间皮细胞肿瘤标志物；HMB45是黑色素瘤标志物；GFAP是星形胶质
43、细胞瘤的标志物；CgA是嗜铬细胞瘤特异的标志物；NBA是神经母细胞瘤标志物。77高频考题下列哪项可标记自然杀伤细胞？（）A.CD20 B.CD68 C.CD3D.CD56 E.CD31【答案】D【解析】CD68为组织细胞标志物，可用于与组织细胞来源相关的恶性纤维组织肿瘤的辅助诊断；CD3为T淋巴细胞标志物；CD20为B细胞的标志物；CD31为血管内皮特异性标志物。78高频考题下列哪种标记可用来鉴别上皮样淋巴瘤和上皮样肉瘤？()A.CgA B.CK C.LCAD.Calretinin E.CD68【答案】C【解析】CK为上皮性标志物；calretinin为间皮细胞肿瘤标志；CgA为神经内分泌标志
44、物；CD68为组织细胞标志物。LCA为淋巴细胞标志，因此可用来鉴别上皮样淋巴瘤和上皮样肉瘤。79高频考题下列哪种标记物有助于恶性黑色素瘤的病理诊断？（）A.GFAP和S-100 B.S-100和HMB45C.Vimentin和HMB45 D.S-100和VimentinE.GFAP和HMB45【答案】B【解析】Vimentin为间叶组织标志物；GFAP为神经组织标志物。恶性黑色素瘤有时形态学表现为多形性，S-l00和HMB45联合检测可明确诊断，所以选择B。80高频考题下列哪种物质不是腺泡状横纹肌肉瘤标志物？（）A.CgAB.desminC.MyoD1D.MyogeninE.MSA【答案】A【
45、解析】CgA是神经元肿瘤标志物。81高频考题间变性大淋巴细胞瘤的特异性标志为（）。A.BLA B.LCA C.GAA D.CD56 E.ALK【答案】E【解析】LCA为白细胞共同抗原；CD56为自然杀伤细胞标记；GAA为粒细胞相关抗原；BLA为B细胞标志。82高频考题下列哪项可以区别癌和肉瘤？（）A.EMA和CgA B.CK和EMAC.CD68和Vimentin D.CK和VimentinE.LCA和GFAP【答案】D【解析】CD68为组织细胞标志物；LCA为淋巴细胞标志物；CgA为神经内分泌标志物；GFAP为神经组织标志物。CK、EMA、CEA为上皮性标志物；Vimentin为间叶组织标志物
46、。因此CK和Vimentin可以区别癌和肉瘤，D正确。83高频考题下列免疫组化结果有助于诊断皮肤MerkelMerkel瘤的是（）。A.Vimentin（），CK（），NSE（）B.Vimentin（），CK（），NSE（）C.Vimentin（），CK（），NSE（）D.Vimentin（），CK（），NSE（）E.Vimentin（），CK（），NSE（）【答案】D【解析】皮肤Merkel瘤可同时表达CK、NSE，而Vimentin常呈阴性反应。84高频考题诊断恶性纤维组织细胞瘤应选（）。A.CgA B.CK C.LCA D.Vimentin E.CD68【答案】E【解析】CK为上皮性标志
47、物；Vimentin为间叶组织标志物；LCA标志淋巴细胞；CgA为神经内分泌标志物；CD68为组织细胞标志物，可用于与组织细胞来源相关的恶性纤维组织肿瘤的辅助诊断。85高频考题患者，男性，68岁，因食欲缺乏、消瘦3个月，发热、咳嗽2周入院。胸部X线片示：左侧胸膜肥厚、肋膈角消失、左胸壁小结节影。于CT引导下行左胸壁肿物穿刺活检术，病理报告恶性肿瘤、间皮瘤可能性大。免疫组化有助于诊断的标志物是：（）A.S-100 B.Vimentin C.Laminin D.calretinin E.CK【答案】D【解析】S-100是胶质细胞肿瘤标志物；Vimentin为间叶组织标志物；laminin为基底膜标
48、志物；CK为上皮性标志物；calretinin为间皮细胞肿瘤标志物。86高频考题患者女性，57岁；左上腹隐痛不适。B超：脾示实质不均质光团。术中发现脾脏体积增大1倍，脾后侧有直径约7cm的肿瘤与肾被膜粘连。术中切除脾脏连同粘连的后腹膜及部分肾被膜做免疫组化检查，诊断为脾脏B细胞恶性淋巴瘤，下列正确的是：（）AVimentin(+)，LCA(+)，L-26(+)，UCHL(-)BVimentin(-)，LCA(-)，L-26(+)，UCHL(-)CVimentin(+)，LCA(-)，L-26(-)，UCHL(+)DVimentin(+)，LCA(+)，L-26(-)，UCHL(+)EVimen
49、tin(-)，LCA(+)，L-26(+)，UCHL(-)87高频考题【解析】Vunentin为间叶组织标志物LCA为淋巴细胞标志L-26是B细胞最常用的标志物UCHL是标记T细胞的。因此，Vimentin常与LIEA、L26联合应用诊断B细胞恶性淋巴瘤【答案】A88高频考题（共用题干）患者，女性，52岁，出现刺激性干咳就诊，胸部X线片及CT示：两肺多发结节，最大直径15mm，考虑多发转移瘤。行开胸探查，左肺上叶舌段楔形切除术。术后病理报告：梭形细胞瘤。1、怀疑此肿瘤为间叶组织来源，以下标志物有助于诊断的是：（）A.laminin B.GFAP C.VimentinD.CK E.CD68【答案
50、】C【解析】GFAP为神经组织标志物；CD68为组织细胞标志物；89高频考题2、进一步考虑为平滑肌肉瘤，还需检测的标志物是：（）A.SMA+DesminB.ER+PRC.HMBEl+calretininD.HCG+SP1E.PSA+PSAP【答案】A90高频考题【解析】乳腺肿瘤检测ER+PR；间皮肿瘤检测HMBEl+calretinin；绒毛膜癌检测HCG+SP1；前列腺癌检测HCG+SP1；Desmin是肌肉组织广谱标志物，SMA对平滑肌有较高的特异性。91高频考题（共用备选答案）A.Calretinin B.HMB45C.GFAP D.CgA E.NBA 星形胶质细胞瘤的标志物 （C）神经
