1、选修实验复习备考选修实验复习备考一、考纲解读实验实验要求要求选修三选修三 基因工程基因工程（1 1）能独立完成所列的生物实验，包括）能独立完成所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。涉及的方法和技能进行综合运用。（2 2）具备验证简单生物学事实的能力，）具备验证简单生物学事实的能力，并对实验现象和结果进行解释、分析和并对实验现象和结果进行解释、分析和处理。处理。（3 3）具有对一些生物学问题进行初步探）具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括
2、运用观察、实验与调查、究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究的方法。研究的方法。（4 4）能对一些简单的实验方案做出恰当）能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。的评价和修订。DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定选修一选修一 微生物的利用微生物的利用（1 1）微生物的分离和培养）微生物的分离和培养（2 2）某种微生物数量的测定）某种微生物数量的测定（3 3）培养基对微生物的选择作用）培养基对微生物的选择作用（4 4）利用微生物发酵来生产特定的产物）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用以及微生物在其
3、他方面的应用酶的应用酶的应用（1 1）酶活力测定的一般原理和方法）酶活力测定的一般原理和方法（2 2）酶在食品制造和洗涤等方面的应用）酶在食品制造和洗涤等方面的应用生物技术在食品加工及其他方面的应用生物技术在食品加工及其他方面的应用（1 1）植物的组织培养）植物的组织培养（2 2）蛋白质的提取和分离）蛋白质的提取和分离（3 3）PCRPCR技术的基本操作和应用技术的基本操作和应用二、本部分内容在2010-2011高考中的部分情况分析高考时间高考时间考查内容考查内容分值分值2011广东理综第广东理综第5题题28题（题（4）猪血红蛋白提纯猪血红蛋白提纯培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作
4、用4分分2分分2011全国课程标准卷全国课程标准卷微生物培养微生物培养15分分2011全国卷全国卷酶活性测定酶活性测定4分分2011重庆卷重庆卷微生物培养微生物培养6分分2011江苏卷江苏卷酶酶DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定20.52010广东理综广东理综传统发酵技术传统发酵技术6分分2010全国卷全国卷1微生物培养微生物培养12分分2010山东卷山东卷微生物培养微生物培养5分分2010江苏卷江苏卷DNA粗提取与鉴定粗提取与鉴定7分分三、复习策略1 1、关注重点考查内容、关注重点考查内容微生物培养、微生物培养、DNADNA粗提取与鉴定、植物的组织培养粗提取与鉴定、植物的组织培养2 2、复习
5、过程重点突出、复习过程重点突出（1 1）关注每个实验的原理、步骤和结果）关注每个实验的原理、步骤和结果以微生物的培养为例：以微生物的培养为例：（20112011全国新课标）全国新课标）3939【选修选修1 1：生物技术实践：生物技术实践】（1515分）有些分）有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答：欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答：（1 1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源
6、为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于 培养基。培养基。（2 2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即即 和和 。（3 3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力解圈大说明该菌株的降解能力 。（4 4）通常情况下，在微生物的培养过程中，实验室常用的灭菌方）通常情况下，在微生物的培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、法有灼烧灭菌、和和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯。无菌技
7、术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以免周围环境中微生物的污染。附近进行，以免周围环境中微生物的污染。理解培养基的种类及应用按物理状态不同划分按物理状态不同划分固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基按化学组成不同划分：合成培养基按化学组成不同划分：合成培养基/天然培养基天然培养基按用途不同划分按用途不同划分鉴别培养基鉴别培养基选择培养基选择培养基加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基 分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌只有尿素作为惟一氮源的培养基只有尿素作为惟一氮源的培养基 分离
8、出分解尿素分离出分解尿素 的细菌的细菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌分离固氮菌只有纤维只有纤维素素作为惟一碳源的培养基作为惟一碳源的培养基 分离分解纤维素的细菌分离分解纤维素的细菌加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞分离导入了目的基因的受体细胞选择培养基做一些适当的补充（二二）无菌技术无菌技术 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法技术。所有防止杂菌污染的方法技术。获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术就是防止杂菌污染的操
9、作技术。无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。灭菌方法灭菌方法适用对象适用对象所需条件所需条件灭菌时间灭菌时间灼烧灭菌灼烧灭菌接种金属用具、试接种金属用具、试管口、瓶口管口、瓶口在酒精灯火焰的在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧充分燃烧层灼烧直至烧红直至烧红干热灭菌干热灭菌能耐高温并需要保能耐高温并需要保持干燥的玻璃器皿、持干燥的玻璃器皿、金属用具等金属用具等干热灭菌箱内，干热灭菌箱内，160170OC中中12h高压蒸汽高压蒸汽灭菌灭菌培养基、实验器具培养基、实验器具等等100kPa，121OC1530min消毒消毒 无菌技术的种类无菌技术的种类灭菌灭菌 使用较为温和的方法（酒精、紫外线）来杀使用较为温
10、和的方法（酒精、紫外线）来杀死部分对人体有害的微生物。死部分对人体有害的微生物。对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁消毒；清洁消毒；将培养皿、接种用具进行灭菌；将培养皿、接种用具进行灭菌；接种的过程要在酒精灯附近进行。接种的过程要在酒精灯附近进行。使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。有微生物（包括芽孢和孢子）。基本过程：称量基本过程：称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板倒平板分离分解尿素的细菌：培养基中加入尿素为分离分解尿素的细菌：培养基中加入尿素为唯一氮源唯一氮源分离分解纤维素的微生物：培养
11、基中加入纤分离分解纤维素的微生物：培养基中加入纤维素为唯一碳源维素为唯一碳源（二二）纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌 微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。1.1.平板划线法平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面（操作如教将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面（操作如教材材1818页图示）。页图示）。在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称眼可见的子细胞群体称菌落菌落。优
12、点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离缺点：不能计数缺点：不能计数一般用于分离微生物的纯种一般用于分离微生物的纯种 2.2.稀释涂布平板法稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，即系
13、列稀释操稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，即系列稀释操作和涂布平板操作。作和涂布平板操作。优点：可以计数，可以观察菌落特征。优点：可以计数，可以观察菌落特征。缺点：吸收量较少，较麻烦，平板不干燥缺点：吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延。效果不好，容易蔓延。一般用于平板培养基的回收率计数一般用于平板培养基的回收率计数（2 2）对实验结果能进行解释分析）对实验结果能进行解释分析在进行分离分解尿素的细菌实验时，某同学从培养基上筛选出在进行分离分解尿素的细菌实验时，某同学从培养基上筛选出大约大约150150个菌落，而其他同学只选择出大约个菌落，而其他同学只选择出大约5050个菌落，该同学
14、的个菌落，该同学的实验结果产生的原因可能有实验结果产生的原因可能有_（填序号）（填序号）由于土样不同由于土样不同 由于培养基污染由于培养基污染 由于操作失误由于操作失误 没有设置对照没有设置对照 （3 3）对实验进行初步探究）对实验进行初步探究集中在微生物的分离和酶的应用实验集中在微生物的分离和酶的应用实验（0808广东生物）广东生物）苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降为了降解废水中的苯酚
15、，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，为土壤解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，为土壤样品。请回答下列问题：样品。请回答下列问题：（3 3）如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小）如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?答案：用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定答案：用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量时间后，测定培养液中苯酚含量（4 4）对简单的实验方案作出评价和修订）对简单的实验方案作出评价和修订集中在酶的活性、微生物培养的实验集中在酶的活性、微生物培养的实验【例例】假设你已经探究了果胶酶的最适温度（为假设你已
16、经探究了果胶酶的最适温度（为4545）和最适）和最适pHpH（为（为4.84.8），若还想进一步研究果胶酶的最适用量，此时，实验），若还想进一步研究果胶酶的最适用量，此时，实验的自变量是的自变量是 。合理设置果胶酶用量的梯度后，可通过。合理设置果胶酶用量的梯度后，可通过苹果泥出汁的多少来判断酶的用量是否合适。请根据所给的材料苹果泥出汁的多少来判断酶的用量是否合适。请根据所给的材料和用具完成以下探究实验。和用具完成以下探究实验。（1 1）材料用具（略）材料用具（略）（2 2）实验步骤：）实验步骤：取取6 6支试管，编号支试管，编号1-61-6，分别加入，分别加入 ，调节，调节pHpH至至4.84
17、.8。向向1-61-6号试管中分别加入号试管中分别加入 ，然后放入，然后放入4545恒温水浴装置恒温水浴装置中中 。中中 。（3 3）以上步骤设计是否有不妥？如果有，试分析原因。）以上步骤设计是否有不妥？如果有，试分析原因。3 3、注意选修实验与必修内容的联系、注意选修实验与必修内容的联系选修内容选修内容必修内容必修内容选修三选修三 基因工程基因工程DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定选修一选修一 微生物的利用微生物的利用（1 1）微生物的分离和培养）微生物的分离和培养（2 2）某种微生物数量的测定）某种微生物数量的测定（3 3）培养基对微生物的选择作用）培养基对微生物的选择作用（4 4）
18、利用微生物发酵来生产特定的产物）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用以及微生物在其他方面的应用种群密度的增长曲线种群密度的增长曲线血球计数板的血球计数板的应用应用酵母菌、醋酸菌等微生物的代谢特点酵母菌、醋酸菌等微生物的代谢特点酵母菌的呼吸类型酵母菌的呼吸类型酶的应用酶的应用（1 1）酶活力测定的一般原理和方法）酶活力测定的一般原理和方法（2 2）酶在食品制造和洗涤等方面的应用）酶在食品制造和洗涤等方面的应用酶的本质，影响酶活性的因素酶的本质，影响酶活性的因素细胞壁的成分细胞壁的成分生物技术在食品加工及其他方面的应用生物技术在食品加工及其他方面的应用（1 1）植物的组织培养）
19、植物的组织培养（2 2）蛋白质的提取和分离）蛋白质的提取和分离（3 3）PCRPCR技术的基本操作和应用技术的基本操作和应用细胞分化，细胞全能性细胞分化，细胞全能性蛋白质的特点，血红蛋白的结构等蛋白质的特点，血红蛋白的结构等DNADNA复制的条件复制的条件（1 1）微生物培养与选修三的联系）微生物培养与选修三的联系特点：结合种群密度变化曲线考查微特点：结合种群密度变化曲线考查微生物培养生物培养注意：关注影响微生物繁殖的条件，注意：关注影响微生物繁殖的条件，复习复习“S S”型、型、“J J”型曲线型曲线特点：结合微生物特点：结合微生物计数考查必修三的计数考查必修三的血球计数板的使用血球计数板的
20、使用注意：血球计数板，注意：血球计数板，掌握基本用法掌握基本用法（0808广东，广东，8 8）取）取少量酵母菌液放入少量酵母菌液放入血球计数板直接计血球计数板直接计数，测得的数目是数，测得的数目是A A、活细胞数、活细胞数B B、死细胞数、死细胞数C C、菌落数、菌落数D D、细胞总数、细胞总数（2 2）微生物发酵与必修一的联系）微生物发酵与必修一的联系特点：结合微生物特点：结合微生物发酵考查必修一的发酵考查必修一的细胞呼吸细胞呼吸注意：微生物的类注意：微生物的类型（如原核、真核型（如原核、真核细胞），呼吸类型细胞），呼吸类型等等(2010广东理综，广东理综，2）（双选）小李尝试制作果酒，）（
21、双选）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图图10），恰当的做法是（），恰当的做法是（）A加入适量的酵母菌加入适量的酵母菌 B一直打开阀一直打开阀b通气通气C一直关紧阀一直关紧阀a，偶尔打开阀，偶尔打开阀b几秒钟几秒钟D把发酵装置放到把发酵装置放到4冰箱中进行试验冰箱中进行试验（3 3）酶的应用与必修一的联系）酶的应用与必修一的联系特点：结合酶活力测特点：结合酶活力测定考查必修一有关酶定考查必修一有关酶的本质、影响酶活性的本质、影响酶活性的因素等内容的因素等内容注意：酶的本质、特注意：酶的本质、特点，实验设计的基本点，实验设
22、计的基本原则原则基础知识基础知识（一）植物组织培养的基本过程一）植物组织培养的基本过程植物的组织培养技术植物的组织培养技术 不同的植物组织不同的植物组织 同一植物的不同材料同一植物的不同材料 营养、环境条件营养、环境条件 植物激素植物激素（二）影响植物组织培养的因素（二）影响植物组织培养的因素 制备制备MS固体培养基固体培养基 1 1、配制母液、配制母液 2 2、配制培养基、配制培养基 3 3、灭菌、灭菌 外植体消毒外植体消毒 接种接种 培养培养 移栽移栽 栽培栽培实验操作实验操作（4 4）植物组织培养与必修一、三的联系）植物组织培养与必修一、三的联系特点：结合植物组织培养特点：结合植物组织培
23、养过程考查必修一的细胞全过程考查必修一的细胞全能性，必修三的植物激素能性，必修三的植物激素等内容等内容注意：复习细胞全能性的注意：复习细胞全能性的概念、细胞分化的概念，概念、细胞分化的概念，细胞分化的本质，分化与细胞分化的本质，分化与细胞全能性的比较，植物细胞全能性的比较，植物激素的作用等激素的作用等（5 5）PCRPCR技术的基本操作与应用与必修二的联系技术的基本操作与应用与必修二的联系特点：结合特点：结合PCRPCR技术技术的过程考查解旋、的过程考查解旋、TaqTaq酶等酶等策略：复习策略：复习DNADNA复制复制的有关特点，掌握的有关特点，掌握PCRPCR技术与技术与DNADNA复制的复
24、制的异同点异同点 大多数凝胶是由大多数凝胶是由多糖类化合物多糖类化合物（如（如葡聚糖或葡聚糖或琼脂糖琼脂糖）构成的）构成的多孔多孔小球体，小球体，内部有许多贯穿的内部有许多贯穿的通道通道。根据被分离的蛋白质根据被分离的蛋白质相对分子质量相对分子质量的大小，利的大小，利用具有用具有网状结构网状结构的凝胶的的凝胶的分子筛分子筛作用，来进行分离。作用，来进行分离。当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢移动速度较慢;而相对而相对分子量较大分子量较
25、大的蛋白质无法进入的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶内部的通道，只能在凝胶外部凝胶外部移动，路程移动，路程较短较短，移，移动速度动速度较快较快。相对分子质量不同相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以的蛋白质分子因此得以分离。分离。分离蛋白质分离蛋白质带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子，如多肽、许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的核酸等都具有可解离的基团，在一定的PHPH下，下，这些基团会带上正电或负电。这些基团会带上正电或负电。在电场的作用在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的下，这些带电
26、分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分电泳利用了待分离样品中各种分子子带电性质带电性质的差异以及的差异以及分子本身的大小，形状分子本身的大小，形状的不同，使带电分子产生不同的的不同，使带电分子产生不同的迁移速度迁移速度，从，从而实现样品中各种分子的分离而实现样品中各种分子的分离。琼脂糖琼脂糖凝胶电泳、凝胶电泳、聚丙稀酰胺聚丙稀酰胺凝胶电泳。凝胶电泳。用用SDSSDS测定蛋白质分子量的方法测定蛋白质分子量的方法以血红蛋白的提取和分离为例：以血红蛋白的提取和分离为例：（5 5）蛋白质提取分离与必修一的联系）蛋白质提取分离与必修一的联系特点：结合蛋白质提特点：结合蛋白质提取分离的原理考查蛋取分离的原理考查蛋白质的特点、渗透作白质的特点、渗透作用原理等用原理等策略：复习渗透装置，策略：复习渗透装置，渗透作用（细胞的吸渗透作用（细胞的吸水和失水），材料的水和失水），材料的选择（如哺乳动物的选择（如哺乳动物的红细胞与鸟类红细胞红细胞与鸟类红细胞区别）区别）
