1、眼镜蛇长链和短链神经毒素眼镜蛇长链和短链神经毒素(科博肽）新药开发的基础科博肽）新药开发的基础1.蛇毒研究概述蛇毒研究概述 蛇毒是蛇的毒腺分泌的多种组分构成的复蛇毒是蛇的毒腺分泌的多种组分构成的复杂的混合物。含有多种蛋白质、多肽、酶杂的混合物。含有多种蛋白质、多肽、酶类和其它小分子物质，具有广泛的生物学类和其它小分子物质，具有广泛的生物学活性。活性。按其生理活性可分为神经毒素，细胞毒素，按其生理活性可分为神经毒素，细胞毒素，神经生长因子和类凝血酶等。神经生长因子和类凝血酶等。美国制成美国制成cobroxin和和nyloxin两种制两种制剂，用于治疗顽固性疼痛、恶性肿瘤剂，用于治疗顽固性疼痛、恶
2、性肿瘤疼痛和关节痛。疼痛和关节痛。我国有科博肽注射液用于治疗疼痛，但我国有科博肽注射液用于治疗疼痛，但由于纯度不高（由于纯度不高（92%），注射部位产生），注射部位产生硬结，销售量不大。硬结，销售量不大。蛇毒镇痛药物开发 神经毒素（科博肽）：从眼镜蛇蛇毒中提神经毒素（科博肽）：从眼镜蛇蛇毒中提纯的一种多肽（纯的一种多肽（7171或或6262个氨基酸，有个氨基酸，有4-54-5个个二硫键）。二硫键）。是是nAChRnAChR特别是特别是11、44、77受体亚型的高亲受体亚型的高亲和配体，和配体，与与7-nAChR7-nAChR受体形成复合物。受体形成复合物。CTXCTX的的Trp-25,Asp-
3、27,Phe-29,Arg-33,Trp-25,Asp-27,Phe-29,Arg-33,Arg-36 and Phe-65Arg-36 and Phe-65能和能和7-7-以及肌肉型以及肌肉型nAChRnAChR结合。结合。长链神经毒素（长链神经毒素（CTXCTX）：）：腹腔内注射：腹腔内注射：30,45,68 g/kg)30,45,68 g/kg)脑室脑室(CTX(CTX：4.5 g/kg)4.5 g/kg)中脑导水管周围灰质中脑导水管周围灰质(CTX(CTX：4.5 g/kg)4.5 g/kg)三种给药方式以热板致痛实验模型，和醋酸致小三种给药方式以热板致痛实验模型，和醋酸致小鼠扭体实验
4、模型，考察鼠扭体实验模型，考察CTXCTX的镇痛作用和部位。的镇痛作用和部位。一、眼镜蛇神经毒素镇痛作用研究一、眼镜蛇神经毒素镇痛作用研究 在热板实验和小鼠扭体实验在热板实验和小鼠扭体实验中，中，CTX(30,45,68 gCTX(30,45,68 g/kg/kg，i.p)i.p)能分别剂量依赖性地提能分别剂量依赖性地提高小鼠痛阈和降低小鼠扭体高小鼠痛阈和降低小鼠扭体次数。镇痛作用在给药后次数。镇痛作用在给药后3 3小小时达到顶峰。脑室内和腹膜时达到顶峰。脑室内和腹膜内注射也能产生镇痛作用。内注射也能产生镇痛作用。提示提示CTXCTX可能通过中枢起镇痛可能通过中枢起镇痛作用。作用。Icv 4.
5、5 ugPAG 4.5 ug采用采用5%5%福尔马林足皮下注射的方式造成大福尔马林足皮下注射的方式造成大鼠炎性疼痛模型，鼠炎性疼痛模型，CTXCTX（34,45ugkg-1,34,45ugkg-1,i.pi.p.）降低大鼠痛级均数）降低大鼠痛级均数.0100200300400500600B*Phase 2Phase 1Time spent on licking(s)Saline CTX 20 g/kg CTX 34 g/kg CTX 45 g/kg眼镜蛇短链神经毒素眼镜蛇短链神经毒素(Cobrotoxin(Cobrotoxin)：含含64-8364-83个氨基酸，其分子量为个氨基酸，其分子量为
6、69466946左左右。右。序列：序列：mktllltllv vtivcldlgy tlechnqqss mktllltllv vtivcldlgy tlechnqqss qtptttgcsg getncykkrw rdhrgyrter qtptttgcsg getncykkrw rdhrgyrter gcgcpsvkng ieinccttdr cnngcgcpsvkng ieinccttdr cnn，短链神经毒素的镇痛作用短链神经毒素的镇痛作用Icv 2.4 ugPAG 1.2 ug眼镜蛇神经毒素镇痛作用强，起效慢，持眼镜蛇神经毒素镇痛作用强，起效慢，持续时间长。续时间长。其镇痛部位可能在中
7、枢及外周，对多种疼其镇痛部位可能在中枢及外周，对多种疼痛模型均有效痛模型均有效 无依赖性及快速耐受性，与阿片系统无关。无依赖性及快速耐受性，与阿片系统无关。镇痛作用特点镇痛作用特点二、蛇毒和科博肽的抗炎免疫调节作用口服蛇毒抑制注射福尔马林引起的炎症反应口服蛇毒抑制注射福尔马林引起的炎症反应口服蛇毒抑制注射鸡蛋清引起的炎症反应口服蛇毒抑制注射鸡蛋清引起的炎症反应口服蛇毒抑制注射福尔马林引起的炎症反应口服蛇毒抑制注射福尔马林引起的炎症反应眼镜蛇毒提高天然免疫力眼镜蛇毒提高天然免疫力眼镜蛇毒增强体液免疫眼镜蛇毒抑制T细胞眼镜蛇毒翻转激素诱导的免疫低下口服科博肽延长同种异体皮片存活时间口服科博肽降低血
8、清白介素2水平口服科博肽抑制T细胞增殖口服科博肽CD4/CD8细胞比值三、蛇毒和科博肽治疗自身免疫性疾病研究CTX抗炎镇痛作用抗炎镇痛作用及机制研究及机制研究药效研究药效研究机制研究机制研究AA大鼠足肿胀测定大鼠足肿胀测定继发性继发性AA大鼠大鼠MWT测定测定继发性继发性AA大鼠冷刺激反应大鼠冷刺激反应AA大鼠滑膜形态学观察大鼠滑膜形态学观察相关受体相关受体细胞因子细胞因子非特异性免疫疼痛信号分子表达阿片受体阿片受体M-AchR 42,7-nAChR 致炎因子抑炎因子抑炎因子免疫器官测定免疫器官测定碳粒廓清实验碳粒廓清实验c-Fos表达表达c-Jun表达表达对佐剂关节炎大鼠药效和机制研究对佐剂
9、关节炎大鼠药效和机制研究 类风湿性关节炎是类风湿性关节炎是一种进行性、系统一种进行性、系统性，以侵犯骨、关性，以侵犯骨、关节为主的自身免疫节为主的自身免疫性疾病，性疾病，发病率：发病率：1 12 2。RA定义定义发病机发病机理理细胞因细胞因子子滑膜病滑膜病变变滑膜水肿、肥滑膜水肿、肥厚、增生，血厚、增生，血管增生，纤维管增生，纤维蛋白原沉淀，蛋白原沉淀，炎症细胞浸润炎症细胞浸润免疫功能异常免疫功能异常溶体酶释放溶体酶释放关节软骨和骨关节软骨和骨破坏破坏致炎因子：致炎因子：IL-1,TNF-，IL-2,PGE2,IL-6 抗炎因子：抗炎因子：IL-4,IL-10,IL-1R类风湿性关节炎研究概况
10、类风湿性关节炎研究概况治疗类风湿性关节炎药物研究现状治疗类风湿性关节炎药物研究现状甾体抗炎免疫药甾体抗炎免疫药 改善病情抗风湿药物改善病情抗风湿药物 非甾体抗炎药非甾体抗炎药 抑制抑制PGE2水杨酸类、吲哚类、水杨酸类、吲哚类、丙酸类、苯乙酸类及丙酸类、苯乙酸类及噻嗪类噻嗪类 引起胃肠道不良反应引起胃肠道不良反应，凝血障碍，而且不，凝血障碍，而且不能改变疾病进程或关能改变疾病进程或关节破坏节破坏 抑制炎性因子的释放抑制炎性因子的释放，并抑制，并抑制T、B淋巴细淋巴细胞的增殖和分化胞的增殖和分化糖皮质激素类药物糖皮质激素类药物严重的激素样副作用严重的激素样副作用影响其临床应用影响其临床应用 改善
11、病情并延缓骨关改善病情并延缓骨关节破坏节破坏抗疟药抗疟药(如氯喹、羟如氯喹、羟氯喹氯喹)、金制剂、青、金制剂、青霉胺、柳氮磺胺吡啶霉胺、柳氮磺胺吡啶、雷公藤及免疫抑制、雷公藤及免疫抑制剂剂.药物发挥作用慢，临药物发挥作用慢，临床症状明显改善需床症状明显改善需16个月个月 长链神经毒素（长链神经毒素（CTXCTX）对原发性佐剂关节炎（）对原发性佐剂关节炎（AA）大鼠踝关节肿胀的影响大鼠踝关节肿胀的影响（腹腔注射）（腹腔注射）0.00.20.40.60.81.0 *Tim e after adm inistration of C FA (h)change in knee circnmference
12、(cm)6h 18h 42h N orm al C ontrol Saline C TX 17.0g/kg C TX 8.5g/kg*p0.05 vs saline,p0.001 vs normal controlCTXCTX对继发性佐剂关节炎大鼠踝关节肿胀的影响对继发性佐剂关节炎大鼠踝关节肿胀的影响（腹腔注射）（腹腔注射）1357911131517190.00.10.20.30.40.50.60.70.80.91.0*N orm al C ontrol Saline C TX 17.0g/kg C TX 8.5g/kgchange in knee circnmference(cm)Tim e
13、 after adm inistration of C FA(date)*p0.05,*p0.01,*p0.001 vs saline group.CTXCTX对继发性对继发性AAAA大鼠机械缩腿阈大鼠机械缩腿阈(MWT)的影响的影响 （腹腔注射）（腹腔注射）-2-101234567890510152025303540*Normal Control Saline CTX 17g/kgMWT(g)Time after intraperitoneal CTX(date)p0.01 vs normal control,*p0.05 vs saline group,*p0.01 vs saline g
14、roupCTXCTX对继发性对继发性AAAA大鼠冷刺激反应的影响大鼠冷刺激反应的影响 （腹腔注射）（腹腔注射）12345678920406080100120140160180200220*Normal Control Saline CTX 17g/kg Paw withdrawal latency(s)Time after intraperitoneal CTX(date)p0.05,p0.01 vs normal control,*p0.01,*p0.001 vs saline group 继发性继发性AAAA大鼠滑膜组织大鼠滑膜组织HEHE染色染色 （腹腔注射）（腹腔注射）ABCDEFA:
15、Normal ContromA:Normal ContromB:SalineB:SalineC:CTXC:CTXD:AtropineD:AtropineE:CTX+Atro(0.25mg/kg)E:CTX+Atro(0.25mg/kg)F:CTX+Atro(5mg/kg)F:CTX+Atro(5mg/kg)继发性继发性AAAA大鼠滑膜组织大鼠滑膜组织VGVG染色染色 （腹腔注射）（腹腔注射）ABCDEFA:Normal ContromB:SalineC:CTXD:AtropineE:CTX+Atro(0.25mg/kg)F:CTX+Atro(5mg/kg)短链神经毒素灌胃或经皮肤给药对弗氏完全
16、佐剂致大鼠原发短链神经毒素灌胃或经皮肤给药对弗氏完全佐剂致大鼠原发性关节炎踝关节周长的影响性关节炎踝关节周长的影响*P0.05，与空白对照组相比，与空白对照组相比;#P0.01,与正常对照组相比与正常对照组相比 短链神经毒素灌胃或经皮肤给药短链神经毒素灌胃或经皮肤给药对弗氏完全佐剂对弗氏完全佐剂致大鼠继发性关节炎踝关节周长的影响致大鼠继发性关节炎踝关节周长的影响*P0.05，与空白对照组相比，与空白对照组相比;#P0.01,#P0.001,与正常对照组相比与正常对照组相比短链神经毒素注射给药对弗氏完全佐剂致大鼠原短链神经毒素注射给药对弗氏完全佐剂致大鼠原发性关节炎踝关节周长的影响发性关节炎踝关
17、节周长的影响*P0.05，*P0.001，与空白对照组相比，与空白对照组相比 短链神经毒素注射给药短链神经毒素注射给药对弗氏完全佐剂对弗氏完全佐剂致大鼠原发性关节炎机械痛阈的影响致大鼠原发性关节炎机械痛阈的影响*P0.05,*P0.001，与空白对照组相比，与空白对照组相比镇痛效果强于阿司匹林镇痛效果强于阿司匹林短链神经毒素注射给药弗氏完全佐剂短链神经毒素注射给药弗氏完全佐剂致大鼠继发性关节炎踝关节周长的影响致大鼠继发性关节炎踝关节周长的影响短链神经毒素注射给药对弗氏完全佐剂短链神经毒素注射给药对弗氏完全佐剂致大鼠继发性关节炎机械痛阈的影响致大鼠继发性关节炎机械痛阈的影响*P0.05,*P0.
18、001，与空白对照组相比，与空白对照组相比，#P0.05，#P0.01，与正常对照组相比，与正常对照组相比 小小 结结 1.CTX1.CTX减少福尔马林致痛大鼠减少福尔马林致痛大鼠相和相和相的舔足时间相的舔足时间,减减轻大鼠的疼痛反应。轻大鼠的疼痛反应。2.CTX2.CTX抑制原发性和继发性抑制原发性和继发性AAAA大鼠的踝关节肿胀，具有大鼠的踝关节肿胀，具有显著的抗炎作用。显著的抗炎作用。3.CTX3.CTX能提高继发性能提高继发性AAAA大鼠的机械缩腿阈，并延长其对大鼠的机械缩腿阈，并延长其对冷刺激潜伏期，提示冷刺激潜伏期，提示CTXCTX有镇痛作用。有镇痛作用。5.CTX5.CTX减少减
19、少AAAA大鼠滑膜、血管、胶原蛋白增生，炎症细大鼠滑膜、血管、胶原蛋白增生，炎症细胞浸润，从而达到改善滑模病变。胞浸润，从而达到改善滑模病变。眼镜蛇短链神经毒素对风湿眼镜蛇短链神经毒素对风湿性关节炎有明显的治疗作用，性关节炎有明显的治疗作用，能减轻关节肿大，疼痛等症能减轻关节肿大，疼痛等症状，改善关节病理改变，具状，改善关节病理改变，具有用量小、安全、可口服、有用量小、安全、可口服、可注射、可透过口鼻粘膜和可注射、可透过口鼻粘膜和皮肤给药等优点。皮肤给药等优点。优优 点点口服科博肽对慢性肾病的治疗作用研究科博肽减少尿蛋白科博肽升高血浆白蛋白科博肽降低血浆球蛋白科博肽改轻肾脏病理变化作用机制研究
20、作用机制研究阿托品抑制阿托品抑制长链神经毒素的镇痛作用长链神经毒素的镇痛作用纳洛酮对纳洛酮对长链神经毒素镇痛作用没有影响长链神经毒素镇痛作用没有影响阿托品对抑制阿托品对抑制短链神经毒素的镇痛作用短链神经毒素的镇痛作用纳洛酮对纳洛酮对短链神经毒素的镇痛作用没有影响短链神经毒素的镇痛作用没有影响阿托品抑制阿托品抑制长链神经毒素长链神经毒素在福尔马林模型在福尔马林模型上的镇痛作用上的镇痛作用0100200300400500600APhase 2Phase 1Time spent on licking(s)Saline Atropine0.25mg/kg Atropine 5mg/kg01002003
21、00400500600BPhase 2Phase 1#Time spent on licking(s)CTX 34g/kg CTX 34g/kg+atropine 0.25mg/kg CTX 34g/kg+atropine 5mg/kg#p0.05 vs CTX group 阿托品部分抑制阿托品部分抑制长链神经毒素长链神经毒素抑制原发性抑制原发性AA大鼠大鼠踝关节肿胀的作用踝关节肿胀的作用0.000.050.100.150.200.250.300.350.400.450.500.550.600.650.700.75ATime after administration of CFA(h)chan
22、ge in knee circnmference(cm)6h 18h 42h Normal Control Saline Atropine 5mg/kg0.00.10.20.30.40.50.60.70.8BTime after administration of CFA(h)change in knee circnmference(cm)6h 18h 42h CTX 17g/kg CTX+Atr 17+5mg/kg CTX+Atr 17+0.25mg/kgp0.01,p0.001,vs normal control.阿托品部分取消长链神经毒素抑制继发性阿托品部分取消长链神经毒素抑制继发性AA
23、AA大鼠踝关节肿胀的作用大鼠踝关节肿胀的作用1357911131517190.250.300.350.400.450.500.550.600.650.700.750.800.850.90A*Saline Atr 5mg/kg CTX 17g/kgchange in knee circnmference(cm)Time after administration of CFA(date)024681012141618200.250.300.350.400.450.500.550.600.650.700.750.800.850.90B#CTX 17g/kg CTX+Atr 17+0.25mg/kg
24、CTX+Atr 17+5mg/kgchange in knee circnmference(cm)Time after administration of CFA(date)*p0.05 vs saline group,#p0.05 vs CTX group.阿托品部分对抗长链神经毒素提高继发性阿托品部分对抗长链神经毒素提高继发性AA大鼠机械缩腿阈的作用大鼠机械缩腿阈的作用-2-101234567890510152025303540A*Normal Control Saline Atro 5mg/kgMWT(g)Time after intraperitoneal CTX(date)-2-10
25、123456789-10-50510152025303540B#CTX CTX+Atro 0.25mg/kg CTX+Atro 5mg/kgMWT(g)Time after intraperitoneal CTX(date)p0.01 vs normal control,#p0.05 vs CTX group 阿托品部分对抗阿托品部分对抗长链神经毒素长链神经毒素延长继发性延长继发性AA大鼠大鼠冷刺激反应潜伏期的作用冷刺激反应潜伏期的作用 12345678920406080100120140160180200220A Normal Control Saline Atro 5mg/kg Paw w
26、ithdrawal latency(s)Time after intraperitoneal CTX(date)12345678920406080100120140160180200220B#CTX CTX+Atro 0.25mg/kg CTX+Atro 5mg/kg Paw withdrawal latency(s)Time after intraperitoneal CTX(date)p0.05 p0.01 vs normal control,#p0.05 vs CTX group N N受体拮抗剂甲基牛扁碱部分取消长链神经毒素抑制受体拮抗剂甲基牛扁碱部分取消长链神经毒素抑制原发性原发性A
27、AAA大鼠踝关节肿胀的作用大鼠踝关节肿胀的作用0.00.20.40.60.81.01.21.41.61.8 Time after administration of CFA(h)A Change in knee circumference(cm)6h 18h 42h Normal Control Saline+CFA-treated MLA 3.0mg/kg+CFA-treated0.00.20.40.60.81.01.21.41.61.8Time after administration of CFA(h)B#*Change in knee circumference(cm)6h 18h 4
28、2h Normal Control Saline+CFA-treated CTX(17g/kg)+CFA-treated CTX(17g/kg)+MLA 3.0mg/kg+CFA-treatedp0.001 vs normal control,*p0.05 vs saline group,#p0.05 vs CTX group.N N受体拮抗剂甲基牛扁碱部分取消受体拮抗剂甲基牛扁碱部分取消长链神经毒素长链神经毒素提高提高原发性原发性AA大鼠机械缩腿阈的作用大鼠机械缩腿阈的作用 0510152025303540Time after administration of CFA(h)AMWT(g)6
29、h 18h 42h Normal Control Saline+CFA-treated MLA 3.0mg/kg+CFA-treated0510152025303540Time after administration of CFA(h)B#*MWT(g)6h 18h 42h Normal Control Saline+CFA-treated CTX(17g/kg)CTX(17g/kg)+MLA(3.0mg/kg)p0.01 vs normal control,*p0.05 vs saline group,#p0.05#p0.01 vs CTX group.炎症因子的释放实验炎症因子的释放实验
30、 长链神经毒素长链神经毒素对继发性对继发性AA大鼠血清中大鼠血清中PGE2的影响的影响 0.00.10.20.30.40.50.6Groups*Level of PGE2(OD)Normal Control Saline CTX Atro CTX+Atro(0.25)CTX+Atro(5)p0.001 vs normal control,*p0.01*p0.001 vs saline group.长链神经毒素长链神经毒素对继发性对继发性AAAA大鼠血清大鼠血清IL-1,TNF-的测定的测定0102030405060708090100110120*Level of IL-1(pg/ml)Norm
31、 al Control Saline CTX A tro CTX+A tro(0.25)CTX+A tro(5)010203040506070*Level of TNF-(pg/ml)Norm al Control Saline CTX A tro CTX+A tro(0.25)CTX+A tro(5)p0.01 p0.001 vs normal control,*p0.05*p0.01 vs saline group.长链神经毒素长链神经毒素继发性继发性AAAA大鼠血清大鼠血清IL-2IL-2，IL-10IL-10的测定的测定 020406080100120Groups*Level of I
32、L-2(pg/ml)Normal Control Saline CTX Atro CTX+Atro(0.25)CTX+Atro(5)020406080100120Groups*Level of IL-10(pg/ml)Normal Control Saline CTX Atro CTX+Atro(0.25)CTX+Atro(5)p0.001 vs normal control,*p0.05*p0.01 vs saline group.神经电生理实验神经电生理实验Cobratoxin对对丘脑丘脑束旁核束旁核神神经元经元痛痛放电的放电的抑制及其机制的初步分析抑制及其机制的初步分析图图10 i.c.
33、v.三种剂量三种剂量Cobratoxin对对Pf神经元痛放电频率的影响神经元痛放电频率的影响 i.c.v.三种剂量三种剂量Cobratoxin对对Pf神经元痛放电持续时间的影响神经元痛放电持续时间的影响（4.5,1.12,0.56g/kg)量效关系明显量效关系明显Cobratoxin 对对Pf神经元痛放电有明显的量效关神经元痛放电有明显的量效关系，抑制时间较长，效果大于吗啡。而且随着剂系，抑制时间较长，效果大于吗啡。而且随着剂量的加大，抑制时程相应延长。量的加大，抑制时程相应延长。i.c.v.阿托品和纳洛酮对阿托品和纳洛酮对Cobratoxin抑制抑制Pf神经元痛放电的影响神经元痛放电的影响
34、pCPA预处理对预处理对Cobratoxin抑制抑制Pf神经元痛放电的影响神经元痛放电的影响抑制低电压钙通道 通过激动胆碱能M3，M4受体抑制钙内流电生理研究小结电生理研究小结侧脑室注射侧脑室注射Cobratoxin能剂量依赖性的抑能剂量依赖性的抑制丘脑束旁核神经元的痛诱发放电；制丘脑束旁核神经元的痛诱发放电；侧脑室注射阿托品能阻断该抑制效应；侧脑室注射阿托品能阻断该抑制效应；对氯苯丙氨酸预处理能部分阻断该抑制效对氯苯丙氨酸预处理能部分阻断该抑制效应。结合测痛的行为学结果提示：应。结合测痛的行为学结果提示：Cobratoxin的镇痛效应是通过中枢的镇痛效应是通过中枢M型胆型胆碱受体介导的，且中
35、枢碱受体介导的，且中枢5-羟色胺能系统也羟色胺能系统也部分参与了部分参与了Cobratoxin的镇痛作用。的镇痛作用。申报重大专项的基础科博肽纯度科博肽纯度98%以上以上申报重大专项的基础口腔速溶药膜口腔速溶药膜申报重大专项的基础口腔粘膜吸收科博肽口腔粘膜吸收科博肽科博肽在胃液中稳定申报重大专项的基础 药效确切：免疫调节 抗炎 镇痛 抑制炎症因子 减轻关节损伤申报重大专项的基础 毒副作用小 急毒：蛇毒腹腔注射700 g/kg,口服102 mg/kg,科博肽腹腔注射70 g/kg，口服待测。慢毒：蛇毒12个月灌胃没有毒性反应。申报重大专项的基础 知识产权（授权发明专利）：1.眼镜蛇短链神经毒素（
36、cobrotoxin）在制备治疗关节炎药物中的用途。中国发明专利。第一发明人，专利号：200910144909.3。国际PTC专利申请中。2.眼镜蛇毒物理改性方法和在制备镇痛和免疫抑制药中的应用。中国发明专利，第一发明人，专利号:201110065634.1。3.胆碱能M3、M4受体激动剂在制备新型镇痛药物中的应用。中国发明专利，第二发明人，专利号:201110072563.8。申报重大专项的基础申报中的发明专利：1.眼睛蛇神经毒素（cobrotoxin）在制备免疫抑制药物中的用途。中国发明专利，第一发明人，申请号:20101017466.9。2.眼镜蛇短链神经毒素（cobrotoxin）在制
37、备鞘内镇痛药中的用途。中国发明专利，第一发明人，申请号:201110072186.8。3.物理改性后的眼镜蛇蛇毒在制备治疗关节炎药物中的应用。中国发明专利，第一发明人，申请号：20111036196.X。4.中华眼镜蛇毒在制备治疗糖尿病和糖尿病肾病并发症中的用途。中国发明专利，第一发明人，申请号：201210001035.8。5.物理改性后的眼镜蛇蛇毒在制备治疗肺肺纤维化药物中的用途。中国发明专利，第一发明人，申请号201110443384.0。6.眼镜蛇毒在制备治疗急慢性肾病药物中的用途。中国发明专利，第一发明人，申请号201210228609.5。7.克痛扑敏灵凝胶剂专利：中国发明专利，第一发明人，申请号201260567886.0.8.一种在口腔中快速溶解的膜剂及其制备方法。中国发明专利，第一发明人，申请号201310113501.6.9.眼镜蛇心脏毒素Cardiotoxins在制备抗炎镇痛、抗关节炎药物中的应用。中国发明专利，第一发明人，申请号：201310655867.6.10.眼镜蛇蛇毒在制备免疫调节剂中的应用。中国发明专利，第一发明人，申请号：201310699935.9。
