1、试管婴儿与生殖工程试管婴儿与生殖工程上海医学院 细胞与遗传医学系左 伋第1页，共40页。INFERTILITYw Infertility is defined as no ongoing pregnancy after 9-12 months of sexual activity without contraception.There is no distinction between not using contraception and trying to conceive.第2页，共40页。STATISTICSwIn 1995,15%of women of childbearing ag
2、e had ever sought infertility advice,that includes medical advice,tests,drugs surgery or assisted reproductive technologies(ART).第3页，共40页。Infertility among Married Women,by Education Levelw 8.5%of women without high school or equivalentw 8.1%of women with just high school or the equivalentw 6.6%of t
3、hose who have some college,but no bachelorsw 5.6%of women with bachelors or higher第4页，共40页。Infertile Couplesw 7.1%or about 2.1 million of married couples were infertile in 1995.w 2.3 million were infertile in 1988,and 2.4 in 1982.第5页，共40页。w 6.1 million or 10%of married couples in 1995 had impaired f
4、ecundity(either infertile or had problems conceiving or carrying a child to term.)第6页，共40页。Infertility by Racew 7%of Hispanic women are infertilew 6.4%of white women are infertilew 10.5%of black women are infertilew 13.6%of other groups are infertile第7页，共40页。The causes of infertilityw Male Factor:Sp
5、erm production and sperm quality.w Ovulation:Egg production,egg quality and preparation of the uterine lining for implantation.w Passage:The joining of sperm and egg in the Fallopian tubes and transport of the fertilized egg into the uterus.第8页，共40页。w Factors causing infertilityTubal factor:31%Endom
6、etriosis:14%Uterine Factor:1%Male Factor:18%Other factors:18%Unexplained:15%第9页，共40页。The National Institutes of Health found that from 1938 to 1996,sperm counts in the United States have fallen annually about 1.5%.European countries have fallen at twice that rate.第10页，共40页。Female Age and Fertility T
7、he loss of female fertility is due to the loss of high quality eggs.The receptiveness of the uterus is not decreased.This loss of fertility magnifies the impact of any other fertility factors present.第11页，共40页。w In 1995,there were 59,142 cycles of ART.11,315 women had a live birth delivery through A
8、RT.第12页，共40页。Type of ART proceduresw 90%in vitro fertilization(IVF)w 8%gamete intrafallopian transfer(GIFT)w 2%zygote intrafallopian transfer(ZIFT)w 11%of ART procedures involved intracytoplasmic sperm injection to fertilize eggs(ICSI).第13页，共40页。w One cycle of IVF costs an average of$7,800.(Includes
9、 everything from consultation to transfer)第14页，共40页。1995 ART Success RatesCYCLES using fresh embryos from non-donor eggs:Live births per stimulation:19.6%Live births per retrieval:22.8%Live births per transfer:25.1%Multiple births per transfer:9.1%CYCLES using frozen embryos from nondonor eggs:Live
10、births per transfer:15.1%CYCLES using donor eggs:Live births per transfer:5.5%第15页，共40页。Singletons vs.Multiple Births in ARTw 49.8%singletonsw 23.8%twinsw 4.5%triplets or higher第16页，共40页。辅助生殖技术w 超排卵治疗的内分泌监测 w 体外受精和胚胎培养基w 人类移植胚胎的评估和选择 w 人类胚胎辅助孵化技术 w 人类胚胎和卵子的冷冻保存 w 人类胚胎活检和着床前遗传学诊断w 卵子胞浆内精子注射 第17页，共40页
11、。一、人类体外受精和胚胎培养基培养基的主要类型 简单盐溶液能量 复合性组织培养基（HamsF-10）培养基的基本成分和作用 水、无机离子、气体 能量物质 （早期丙酮酸、乳酸，后期葡萄糖）氨基酸、维生素、核酸前体、蛋白质、激素、生长因子、缓冲系统 第18页，共40页。二、人类胚胎共培养系统 w 早期胚胎在体内和体外的发育 50以上胚胎发育至48细胞期（体外培养第3天）发生阻断现象第19页，共40页。二、人类胚胎共培养系统w 共培养系统对胚胎发育的影响 被动条件：降低O2代谢水平 减少次黄嘌呤含量 控制代谢物的变化（葡萄糖、乳酸）稳定pH和O2，O2/C O2主动条件：分泌抗氧化剂牛磺酸 释放低分
12、子量组份 分泌多种生长因子 各种糖蛋白第20页，共40页。二、人类胚胎共培养系统w 共培养系统辅助细胞的建立 异体细胞：人输卵管上皮细胞 牛输卵管上皮细胞 人子宫内膜细胞 胎牛子宫细胞自体细胞：人颗粒细胞 人卵丘细胞 人子宫内膜细胞第21页，共40页。二、人类胚胎共培养系统w 共培养系统在IVF中的应用 增加受精率和提高胚胎质量 胚胎活力改善 增加冷冻保存胚胎的存活率 卵细胞体外成熟和受精的改善 有助于胚胎显微操作后的修复第22页，共40页。三、人类移植胚胎的评估和选择w 胚胎活性的评估方法w 胚胎的形态特征w 卵子质量对胚胎的影响w 精子质量对胚胎的影响w 综合因素对胚胎质量的影响 第23页
13、，共40页。三、人类移植胚胎的评估和选择w 胚胎活性的评估方法 胚胎活性的直接评估（FDA）胚胎活性的间接评估第24页，共40页。三、人类移植胚胎的评估和选择w 胚胎的形态特征 28细胞的六级分级：1级最佳；6级最次第25页，共40页。第26页，共40页。三、人类移植胚胎的评估和选择w 卵子质量对胚胎的影响w 精子质量对胚胎的影响w 综合因素对胚胎质量的影响 第27页，共40页。四、人类胚胎辅助孵化技术 w 透明带对于胚胎的保护作用w 囊胚的扩张和自然孵化w 辅助孵化的基本技术w 辅助孵化的技术在IVF中的应用 第28页，共40页。四、人类胚胎辅助孵化技术辅助孵化技术 侵入性辅助孵化：机械方法
14、 化学方法 激光方法 非侵入性辅助孵化：机械方法 化学方法第29页，共40页。五、人类胚胎和卵子的冷冻保存 w 胚胎和卵子的冷冻保存的原理w 冷冻保护剂的作用机制w 胚胎和卵子冷冻保存方法w 胚胎和卵子冷冻保存的临床应用 第30页，共40页。第31页，共40页。六、人类胚胎和卵子捐献w 受卵者的指征w 受卵者的准备w 受卵者的激素替代疗法w 供卵者的来源w 供卵者的基本要求w 卵子捐献的临床应用w 胚胎捐献的临床应用 第32页，共40页。六、人类胚胎和卵子捐献w 受卵者的指征 没有自然月经周期：卵巢功能早衰 性腺发育不良 医源性卵巢衰竭 手术切除卵巢 具有自然月经周期：IVF失败 遗传缺陷第3
15、3页，共40页。六、人类胚胎和卵子捐献w 供卵者的基本要求 年龄 经产 生理特征 血型 遗传病 传染病第34页，共40页。七、人类胚胎活检和着床前遗传学诊断w 适合活检的不同发育时期w 胚胎活检的基本方法w 着床前胚胎遗传学诊断方法 第35页，共40页。七、人类胚胎活检和着床前遗传学诊断w 适合活检的不同发育时期 第一极体的活检 卵裂细胞的活检 滋养外胚层细胞的活检第36页，共40页。七、人类胚胎活检和着床前遗传学诊断w 胚胎活检的基本方法 吸出法 挤压法 机械分离法 疝形成法第37页，共40页。八、胚胎增殖和克隆的方法w 卵裂球分离技术和胚胎增殖w 供者透明带和人工透明带w 卵裂球分离技术潜在应用价值w 囊胚分割技术和胚胎增殖w 细胞核移植技术和胚胎增殖第38页，共40页。九、超排卵治疗的内分泌监测w 自然周期和治疗周期激素分泌的特征w 诱发排卵周期卵泡发育与内分泌监测w 黄体生成激素预测排卵时间第39页，共40页。十、卵子胞浆内精子注射w 辅助受精技术w PZD、SUZI、ICSI应用概况w ICSI适应症和精子来源w ICSI主要步骤和技术 第40页，共40页。
