1、 病病 毒毒(virus)埃及孟非思壁画埃及孟非思壁画 病毒病毒 VirusIvanowski1892.2.12 study on study on tobacco mosaic disease Early Development of Virology 病毒病毒是一群体积是一群体积微小微小、结构、结构简单简单、只有、只有一一种核酸种核酸易感活易感活细胞内寄生细胞内寄生、以、以复制方式增殖复制方式增殖的的非细非细胞型微生物胞型微生物。主要生物学性状主要生物学性状 体积微小，可以通过滤菌器体积微小，可以通过滤菌器 结构简单，无细胞结构结构简单，无细胞结构 遗传物质为遗传物质为DNADNA或或RN
2、ARNA 专性细胞内寄生专性细胞内寄生 复制增殖复制增殖发病率高发病率高 传染性强传染性强传播迅速传播迅速 流行面广流行面广病死率高病死率高 特效药少特效药少病毒引起疾病的特点病毒引起疾病的特点病毒和其他微生物特性比较病毒和其他微生物特性比较种类种类病毒病毒细菌细菌支原体支原体立克次体立克次体衣原体衣原体真菌真菌结构结构非细胞非细胞原核细胞原核细胞原核细胞原核细胞原核细胞原核细胞原核细胞原核细胞真核细胞真核细胞大小大小最小最小(nm)0.53.0m0.20.3m0.20.5m0.30.5m最大最大细胞壁细胞壁-+-+细胞器细胞器-+完善完善核酸核酸DNA或或RNADNA+RNADNA+RNAD
3、NA+RNADNA+RNADNA+RNA繁殖方式繁殖方式复制复制二分裂二分裂二分裂二分裂二分裂二分裂二分裂二分裂无性无性+有性有性人工培养基人工培养基-+-+抗生素敏感抗生素敏感-+年份年份科学家科学家主要成就主要成就1798琴纳（琴纳（E.Jenner）接种牛痘预防天花接种牛痘预防天花1885巴斯德（巴斯德（L.Pasteur）制成狂犬疫苗制成狂犬疫苗1892伊万诺夫斯基（伊万诺夫斯基（Iwanovski）发现发现TMV病原的滤过性病原的滤过性1898贝叶林克（贝叶林克（M.W.Beijerinck）证实证实TMV的滤过性病原的滤过性病原洛夫勒（洛夫勒（F.Loeffler）.发现口蹄疫病原
4、的滤过性发现口蹄疫病原的滤过性1915图尔特（图尔特（F.W.Twort）发现噬菌体发现噬菌体迪海莱（迪海莱（F.DHerelle）发现噬菌体发现噬菌体1935斯坦利（斯坦利（W.M.Stanley）获得获得TMV结晶结晶1939考齐（考齐（G.A.Kausche）在电镜下看到在电镜下看到TMV1949恩德尔（恩德尔（J.J.Enders）等）等.利用单层细胞培养脊髓灰质炎病毒利用单层细胞培养脊髓灰质炎病毒1952赫尔希（赫尔希（A.D.Hershey）证明一种噬菌体证明一种噬菌体DNA具有感染性具有感染性杜尔贝科（杜尔贝科（Dulbecco）利用单层细胞培养进行蚀斑试验利用单层细胞培养进行蚀
5、斑试验1956弗伦克尔弗伦克尔-康拉特（康拉特（H.Fraenkel-Conrat）等）等 证明证明TMV-RNA分子具有侵染性分子具有侵染性1957伊萨克（伊萨克（Isaacs）等）等.发现干扰素发现干扰素1960次田（次田（A.Tsugita）等）等.测定了测定了TMV外壳蛋白的氨基酸序列外壳蛋白的氨基酸序列病毒学发展大事记病毒学发展大事记 1965斯皮格曼（斯皮格曼（S.Spiegelman）成功地在体外复制了成功地在体外复制了Q噬菌体噬菌体RNA1967迪纳尔（迪纳尔（T.O.Diener）等）等 阐明类病毒的本质阐明类病毒的本质1968亨雷亨雷（G.Henle）等等.EBV与传染性单
6、核细胞增多症有关与传染性单核细胞增多症有关1970特明（特明（H.M.Temin）巴尔的摩（巴尔的摩（D.Baltimore）发现逆转录酶发现逆转录酶19761977桑格（桑格（F.Sanger）等）等 埃博拉病毒的发现埃博拉病毒的发现测定了测定了X174的的DNA全序列全序列1979谷口（谷口（T.Taniguchi）人干扰素基因工程宣告成功人干扰素基因工程宣告成功1983蒙塔格尼（蒙塔格尼（Montagnier）嘎洛（嘎洛（R.C.Gallo）分离到与分离到与AIDS相关的人类逆转录病毒相关的人类逆转录病毒1985巴登巴登（H.von der Patten）利用逆转录病毒为载体将外源基因导
7、入小鼠利用逆转录病毒为载体将外源基因导入小鼠1982普什纳（普什纳（Prusiner）提出朊粒提出朊粒1984发现发现CD4+是是HIV受体受体2019发现发现HIV的协同受体的协同受体1988发现人类疱疹病毒发现人类疱疹病毒6型（型（HHV-6）1988发现戊型肝炎病毒（发现戊型肝炎病毒（HEV）1989发现丙型肝炎病毒（发现丙型肝炎病毒（HCV）1991发现发现Guanarito 病毒病毒1993发现发现Sin nomber 病毒病毒1994发现发现Sabia 病毒病毒2019发现细小病毒发现细小病毒B192019发现庚型肝炎病毒（发现庚型肝炎病毒（HGV）2019发现埃博拉病毒（发现埃博
8、拉病毒（Ebola virus）2019发现发现SARS冠状病毒（冠状病毒（SARS coronavirus）第二十三章第二十三章 病毒的基本性状病毒的基本性状第一节、病毒的大小与形态第一节、病毒的大小与形态 完整的具有感染性的成熟病毒颗粒称为完整的具有感染性的成熟病毒颗粒称为病毒体病毒体(virion)(virion)。测量病毒体大小的单位为。测量病毒体大小的单位为纳米纳米(nm)(nm)，多数，多数病毒大小介于病毒大小介于3030200 nm200 nm之间。之间。准确测量方法：电镜准确测量方法：电镜葡萄球菌葡萄球菌(1000nm(1000nm）牛痘病毒牛痘病毒300300250nm250
9、nmA AB BC CD DE EF FG G立克次体立克次体450nm450nm衣原体衣原体390nm390nmA A、大肠杆菌噬菌体、大肠杆菌噬菌体 (65(65 95nm)95nm)B B、腺病毒、腺病毒 (70nm)(70nm)C C、脊髓灰质炎病毒、脊髓灰质炎病毒 (30nm)(30nm)D D、乙脑病毒、乙脑病毒 (40nm)(40nm)E E、蛋白分子、蛋白分子 (10nm(10nm )F F、流感病毒、流感病毒 (100nm)(100nm)G G、烟草花叶病毒、烟草花叶病毒病毒形态病毒形态砖形砖形（痘病毒）（痘病毒）子弹形子弹形（狂犬病病毒）（狂犬病病毒）蝌蚪形蝌蚪形（噬菌体）
10、（噬菌体）杆状杆状（烟草花叶病毒）（烟草花叶病毒）第二节、病毒的结构和化学组成第二节、病毒的结构和化学组成 一、病毒的结构一、病毒的结构裸病毒裸病毒Naked Naked virusesviruses核心核心核酸核酸，（corecore）蛋白质蛋白质衣壳衣壳（capsidcapsid）包膜包膜-包膜病毒包膜病毒Enveloped Enveloped virusesviruses核衣壳核衣壳NeucleocapsidNeucleocapsid病毒体结构模式图病毒体结构模式图壳粒壳粒衣壳衣壳核心（核样物）核心（核样物）核衣壳核衣壳包膜包膜包膜病毒包膜病毒包膜子粒包膜子粒 衣壳是由许多亚衣壳是由许多
11、亚单位单位-壳粒壳粒（capsomercapsomer）所组成，根据壳粒可分所组成，根据壳粒可分为以下为以下3 3种对称类型：种对称类型：螺旋对称型螺旋对称型2020面体对称型面体对称型复合对称型复合对称型 包膜是病毒在释放过程中以包膜是病毒在释放过程中以出芽出芽方式向细胞外方式向细胞外释放时获得的。包膜表面的突起，称为释放时获得的。包膜表面的突起，称为刺突（刺突（spikespike）。有包膜的病毒又称为包膜病毒。有包膜的病毒又称为包膜病毒。刺刺 突突核心：核酸核心：核酸 基因组基因组genome 决定病毒遗传、变异决定病毒遗传、变异 和复制和复制壳粒壳粒capsomere 衣壳衣壳caps
12、id 保护、介导、抗原性保护、介导、抗原性包膜包膜envelope，包膜子粒，包膜子粒peplomere（刺突（刺突spike）保保 护、介导、抗原性护、介导、抗原性二、病毒的化学组成二、病毒的化学组成 1.1.病毒核酸：病毒核酸：DNADNA或或RNARNAl 多样性多样性形式形式 线状、环状线状、环状DNA dsDNADNA dsDNA ssDNA ssDNA dsRNA dsRNARNA ssRNARNA ssRNA 分节段分节段RNARNA复制方式复制方式大小悬殊大小悬殊 2.2.病毒的蛋白质病毒的蛋白质 结构蛋白和非结构蛋白结构蛋白和非结构蛋白。结构蛋白，包括衣壳蛋白、基质蛋白和包膜
13、糖蛋白。结构蛋白，包括衣壳蛋白、基质蛋白和包膜糖蛋白。主要功能：主要功能：（1 1）保护病毒核酸）保护病毒核酸 （2 2）参与感染过程）参与感染过程 （3 3）具有抗原性）具有抗原性 非结构蛋白作为酶类，参与病毒的复制，非结构蛋白作为酶类，参与病毒的复制，如逆转录酶、蛋白水解酶、如逆转录酶、蛋白水解酶、DNADNA多聚酶、胸多聚酶、胸腺嘧啶核苷激酶等。腺嘧啶核苷激酶等。3.3.脂质和糖脂质和糖主要存在于包膜中，维持病毒体结构的完整主要存在于包膜中，维持病毒体结构的完整性，与病毒的入侵相关，具有抗原性。性，与病毒的入侵相关，具有抗原性。一、病毒的复制一、病毒的复制病毒的病毒的复制周期复制周期是指
14、病毒进入敏感细胞后，以其基是指病毒进入敏感细胞后，以其基因组为模板，借助细胞中的原料、能量及场所合成因组为模板，借助细胞中的原料、能量及场所合成自己的蛋白质与核酸自己的蛋白质与核酸,组装子代病毒颗粒，最终释放组装子代病毒颗粒，最终释放出细胞。出细胞。病毒的增殖病毒的增殖自我复制自我复制，是病毒在宿主细胞中增，是病毒在宿主细胞中增殖的过程。殖的过程。第三节第三节 、病毒的增殖、病毒的增殖病病毒毒的的复复制制过过程程 通过病毒的包膜或无包膜病毒表面通过病毒的包膜或无包膜病毒表面的的配体位点配体位点与细胞表面的与细胞表面的特异受体特异受体结结合而吸附。合而吸附。吸附吸附 穿入穿入 包膜病毒包膜病毒包
15、膜与宿主细胞膜融合包膜与宿主细胞膜融合;无包膜病毒无包膜病毒胞饮方式胞饮方式 直接穿入直接穿入病毒在细胞内脱去衣壳后，多数是在细胞的病毒在细胞内脱去衣壳后，多数是在细胞的溶酶体酶溶酶体酶作用下脱壳释放出病毒基因组作用下脱壳释放出病毒基因组 脱壳脱壳 通过通过病毒基因组表达病毒基因组表达与复制来完成的，包括与复制来完成的，包括蛋白蛋白质的合成与核酸的复制，质的合成与核酸的复制，此阶段无完整病毒可见，此阶段无完整病毒可见，也不能用血清学检测出病毒的抗原。也不能用血清学检测出病毒的抗原。生物合成生物合成 dsDNA病毒复制示意图+ssRNA病毒复制示意图+ssRNA逆转录病毒复制示意图无包膜病毒装配
16、成核衣壳，以无包膜病毒装配成核衣壳，以破胞破胞方式释放方式释放包膜病毒装配成核衣壳后，以包膜病毒装配成核衣壳后，以出芽出芽方式释放方式释放装配与释放装配与释放复制周期复制周期 replication cycle二、异常增殖与干扰现象二、异常增殖与干扰现象 病毒异常增殖：不能组装成病毒异常增殖：不能组装成完整的完整的病毒体病毒体 顿挫感染顿挫感染 abortive infection(abortive infection(宿主细胞的原因宿主细胞的原因)缺陷病毒缺陷病毒 defective viruses(defective viruses(病毒本身的原因病毒本身的原因)辅助病毒辅助病毒 help
17、er viruseshelper viruses病毒的干扰现象病毒的干扰现象 当两种病毒同时感染同一细胞时，可发生当两种病毒同时感染同一细胞时，可发生一种病一种病毒的增殖抑制另一种病毒增殖的现象毒的增殖抑制另一种病毒增殖的现象第四节第四节 病毒的遗传与变异病毒的遗传与变异遗传特点遗传特点1 1、遗传方式简单、遗传方式简单2 2、受宿主细胞影响、受宿主细胞影响3 3、易发生突变、易发生突变突变株突变株 (mutant)：由基因突变产生的病毒表由基因突变产生的病毒表型性状改变的毒株。型性状改变的毒株。温度敏感突变株温度敏感突变株 28283535可以复制，可以复制，37374040不能复制不能复制
18、-脊髓灰质炎减毒活疫苗脊髓灰质炎减毒活疫苗耐药突变株耐药突变株重组重组 (recombination)几种具有亲缘关几种具有亲缘关系的病毒感染同一宿系的病毒感染同一宿主细胞时发生基因的主细胞时发生基因的交换，产生具有两个交换，产生具有两个亲代特征的子代病毒，亲代特征的子代病毒，并能增殖繁殖。并能增殖繁殖。整合整合 (integration)病毒感染宿主细胞的过程中，有时病毒基因组病毒感染宿主细胞的过程中，有时病毒基因组中中DNA片段插入到宿主染色体片段插入到宿主染色体DNA中重组过程。中重组过程。既可引起病毒基因的变异，也可引起宿主细胞既可引起病毒基因的变异，也可引起宿主细胞染色体基因的变异，
19、导致细胞转化发生肿瘤等。染色体基因的变异，导致细胞转化发生肿瘤等。表型混合表型混合 (phenotypic mixing)(phenotypic mixing)基因产物间相互作用基因产物间相互作用；装配过程发生错误形成；装配过程发生错误形成；基因未改变，生物学性状不能遗传。基因未改变，生物学性状不能遗传。第五节第五节 理化因素对病毒的影响理化因素对病毒的影响病毒受理化因素作用后，失去感染性，称为病毒受理化因素作用后，失去感染性，称为灭活灭活（inactivationinactivation）。灭活的病毒仍保留其）。灭活的病毒仍保留其抗原性抗原性、红细胞吸附、血凝和细胞融合等特性。红细胞吸附、血
20、凝和细胞融合等特性。一、物理因素一、物理因素 1.1.温度温度 2.pH 3.2.pH 3.射线射线二、化学因素二、化学因素 1.1.脂溶剂脂溶剂 2.2.化学消毒剂化学消毒剂第六节第六节 病毒的分类病毒的分类一、病毒的分类原则一、病毒的分类原则核酸核酸类型与结构类型与结构；感染感染对象对象；病毒体的病毒体的形态结构。形态结构。DNADNA病毒、病毒、RNARNA病毒病毒和和逆转录病毒逆转录病毒三大类三大类二、非寻常病毒（亚病毒）二、非寻常病毒（亚病毒）卫星病毒（卫星病毒（satellitessatellites）2.2.类病毒（类病毒（viroidsviroids）3.3.朊病毒（朊病毒（p
21、rionprion）第二十四章第二十四章 病毒的感染与免疫病毒的感染与免疫This Khmer woman This Khmer woman died died of hepatoma.of hepatoma.Source:Patricia Walker,MDPrimary Primary Hepatocellular Hepatocellular Carcinoma(PHC)Carcinoma(PHC)病毒进入机体，在细胞中增殖的过程称为病毒进入机体，在细胞中增殖的过程称为病毒感染病毒感染。病毒感染的结果取决于病毒与宿主力量的对比，发病病毒感染的结果取决于病毒与宿主力量的对比，发病取决于病毒
22、的毒力和机体抵抗力的强弱对比。两者的取决于病毒的毒力和机体抵抗力的强弱对比。两者的平衡关系被打破，则导致疾病的发生。平衡关系被打破，则导致疾病的发生。第一节第一节 病毒的致病作用病毒的致病作用 水平传播水平传播是病毒在是病毒在人群中不同个体人群中不同个体之间的之间的传播，如呼吸道、消化道、泌尿生殖道、传播，如呼吸道、消化道、泌尿生殖道、输血、注射、机械损伤和昆虫叮咬等而感输血、注射、机械损伤和昆虫叮咬等而感染机体。染机体。一、病毒感染的传播方式一、病毒感染的传播方式 垂直传播是垂直传播是存在母体的病原体通过存在母体的病原体通过胎盘或产道胎盘或产道由亲代传播给子代的方式。除此之外，还可通由亲代传
23、播给子代的方式。除此之外，还可通过过哺乳、密切接触和感染生殖细胞哺乳、密切接触和感染生殖细胞。二、病毒感染的致病机理二、病毒感染的致病机理(一一)对宿主细胞的致病作用对宿主细胞的致病作用n 杀细胞效应杀细胞效应n 稳定状态感染稳定状态感染n 包涵体形成包涵体形成n 细胞凋亡细胞凋亡n 基因整合与细胞转化基因整合与细胞转化1)杀细胞效应杀细胞效应(cytocidal effect)病毒在感染细胞内增殖，引起细胞的裂解死亡病毒在感染细胞内增殖，引起细胞的裂解死亡正常细胞正常细胞细胞病变作用细胞病变作用(CPE)2)2)稳定状态感染稳定状态感染为特异性为特异性AgAg或或CTLCTL细胞识别细胞识别
24、新抗原新抗原多核巨细胞多核巨细胞多核巨细胞多核巨细胞概念：概念：某些受某些受病毒感染的细胞内，用普通光学显微病毒感染的细胞内，用普通光学显微镜可看到有与正常细胞结构和着色不同的圆形或椭镜可看到有与正常细胞结构和着色不同的圆形或椭圆形的斑快。圆形的斑快。意义意义：病毒感染的诊断依据。病毒感染的诊断依据。3)3)包涵体包涵体 (inclusion body)(inclusion body)狂犬病毒包涵体（狂犬病毒包涵体（Negri body）4)4)细胞凋亡细胞凋亡 (apoptosis)(apoptosis)诱导因子（如病毒等）诱导因子（如病毒等）细胞细胞凋亡基因激活凋亡基因激活细胞膜鼓泡细胞膜
25、鼓泡细胞核浓缩细胞核浓缩染色体染色体DNADNA降解降解电泳时有电泳时有阶梯式条带阶梯式条带形成凋亡小体形成凋亡小体细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核5)基因整合与细胞转化基因整合与细胞转化结果：细胞转化或肿瘤形成结果：细胞转化或肿瘤形成与人类肿瘤相关的病毒与人类肿瘤相关的病毒病毒科与人类相关的肿瘤病毒嗜肝DNA病毒 肝细胞癌 HBV疱疹病毒 鼻咽癌 EBV Burkitt淋巴瘤 EBV Kaposi肉瘤 HHV-8乳多空病毒 乳头状瘤 HPV亚型 宫颈癌 HPV-16、18逆转录病毒 成人T细胞白血病 HTLV-1(二二)病毒感染的免疫病理作用病毒感染的免疫病理作用3 3、有些病毒感染后，
26、呈稳定状态感染，使、有些病毒感染后，呈稳定状态感染，使细胞失去某些功能或出现新抗原细胞失去某些功能或出现新抗原2 2、免疫复合物引起损伤、免疫复合物引起损伤1 1、抗体增强病毒感染作用、抗体增强病毒感染作用三、病毒的感染类型三、病毒的感染类型入侵部位感染，称为入侵部位感染，称为局部感染局部感染或或表面感染表面感染。根据临床症状的长短，又可分为根据临床症状的长短，又可分为急性急性与与慢性慢性感染等。感染等。不引起临床症状的称为不引起临床症状的称为隐性感染隐性感染或亚临床感染；或亚临床感染；出现临床症状称为出现临床症状称为显性感染显性感染或感染性疾病。或感染性疾病。可能与入侵机体的可能与入侵机体的
27、病毒数量少病毒数量少、毒力弱毒力弱及及机体抵抗力强机体抵抗力强有关，有关，致使病毒在体内不能大量增殖。多数人可获得对该病毒的特致使病毒在体内不能大量增殖。多数人可获得对该病毒的特异性主动免疫，病原体被清除，从而终止感染。异性主动免疫，病原体被清除，从而终止感染。隐性感染者隐性感染者 有可能排毒有可能排毒病毒携带者病毒携带者传染源传染源隐性感染隐性感染第二节第二节 抗病毒免疫抗病毒免疫一、非特异性免疫一、非特异性免疫1 1、屏障作用、屏障作用2 2、吞噬细胞的作用、吞噬细胞的作用3 3、干扰素干扰素获得性非特异性免疫获得性非特异性免疫干扰素干扰素定定 义义：由由病毒病毒或其他干扰素诱生剂刺激人或
28、动物或其他干扰素诱生剂刺激人或动物 细胞细胞所产生的一类具有抗病毒、抗肿瘤和所产生的一类具有抗病毒、抗肿瘤和 免疫调节作用的免疫调节作用的糖蛋白糖蛋白。种种 类：类：种类种类 产生细胞产生细胞 抗病毒抗病毒 抗肿瘤抗肿瘤 免疫调节免疫调节 人白细胞人白细胞 强强 弱弱 弱弱 人成纤维细胞人成纤维细胞 强强 弱弱 弱弱 T细胞细胞 弱弱 强强 强强干扰素的抗病毒作用机制：是通过受干扰素的抗病毒作用机制：是通过受感染靶细胞上感染靶细胞上的干扰素受体的干扰素受体，经信号转导机制等一系列生化反应，经信号转导机制等一系列生化反应，通过通过调控宿主细胞的基因调控宿主细胞的基因，使之合成抗病毒蛋白实，使之合
29、成抗病毒蛋白实现对病毒的抑制作用。现对病毒的抑制作用。二、特异性免疫二、特异性免疫1.1.体液免疫体液免疫 包括中和抗体和非中和抗体，对包括中和抗体和非中和抗体，对机体具有保护作用的主要是机体具有保护作用的主要是中和抗体中和抗体，中和抗体主，中和抗体主要包括三类免疫球蛋白：要包括三类免疫球蛋白：IgMIgM、IgGIgG和和IgAIgA。病毒病毒 中和抗体中和抗体 失去感染性失去感染性2.2.细胞免疫细胞免疫 进入细胞内的病毒，主要依靠进入细胞内的病毒，主要依靠杀杀伤性伤性T T细胞（细胞（CTLCTL）和辅助性）和辅助性T T细胞（细胞（ThTh）释放的细释放的细胞因子发挥抗病毒作用。细胞免
30、疫主要在病毒感胞因子发挥抗病毒作用。细胞免疫主要在病毒感染的局部发挥作用，通过免疫细胞和靶细胞的接染的局部发挥作用，通过免疫细胞和靶细胞的接触或在局部释放细胞因子清除病毒。触或在局部释放细胞因子清除病毒。第第2525章章 检查方法与防治原则检查方法与防治原则第一节第一节 病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法一、标本采集与送检一、标本采集与送检标本采集：早期；不同病变取不同标本标本采集：早期；不同病变取不同标本 标本处理：无菌操作；杂菌标本标本处理：无菌操作；杂菌标本+抗生素抗生素 冷藏速送：快速送检；冷藏（冷藏速送：快速送检；冷藏（-70-70）血清学标本：双份血清，效价升高血清学标本：双份血
31、清，效价升高4 4倍有诊断价值倍有诊断价值 光镜、电镜光镜、电镜分离培养分离培养免疫荧光免疫荧光ELISAELISA分子生物学技术分子生物学技术Southern blotSouthern blotPCRPCR病毒感染的检测方法病毒感染的检测方法二、分离与鉴定二、分离与鉴定动物接种动物接种鸡胚接种鸡胚接种组织培养组织培养器官培养器官培养移植培养移植培养细胞培养细胞培养原代细胞培养原代细胞培养二倍体细胞培养二倍体细胞培养传代细胞培养传代细胞培养培养方法培养方法病毒分离培养的方法病毒分离培养的方法1.1.动物接种：如鼠、兔、犬、牛和猴等。动物接种：如鼠、兔、犬、牛和猴等。2.2.鸡胚接种：针对有些病
32、毒，如流感病毒、痘病毒。鸡胚接种：针对有些病毒，如流感病毒、痘病毒。3.3.细胞培养：有三种类型的细胞。细胞培养：有三种类型的细胞。（1 1）细胞类型）细胞类型原代细胞原代细胞：从标本中分离病毒。：从标本中分离病毒。传代细胞传代细胞：可在体外连续传代的细胞。：可在体外连续传代的细胞。二倍体细胞二倍体细胞：体外连续传代：体外连续传代5050100100代后，仍保持代后，仍保持其二倍染色体数目的细胞。其二倍染色体数目的细胞。（2 2）病毒增殖指标）病毒增殖指标 细胞病变效应（细胞病变效应（cytopathic cytopathic effect,CPEeffect,CPE）：溶细胞型病毒：溶细胞型
33、病毒感染细胞后，可出现细胞团缩、感染细胞后，可出现细胞团缩、裂解或细胞肿大、数个细胞融裂解或细胞肿大、数个细胞融合成多核巨细胞或细胞聚集成合成多核巨细胞或细胞聚集成葡萄串状、脱落或死亡等。葡萄串状、脱落或死亡等。未接种病毒的细胞未接种病毒的细胞 CPECPE的细胞（的细胞（HelaHela细胞，细胞，柯萨奇病毒感染）柯萨奇病毒感染）血吸现象：感染细胞膜上带血吸现象：感染细胞膜上带有病毒血凝素与加入的红细胞结有病毒血凝素与加入的红细胞结合。合。干扰现象：当两种病毒感染同干扰现象：当两种病毒感染同一种细胞时，常发生一种病毒抑一种细胞时，常发生一种病毒抑制另一种病毒复制增殖的现象。制另一种病毒复制增
34、殖的现象。（3 3）病毒定量方法）病毒定量方法 空斑形成单位（空斑形成单位（PFUPFU）：）：测定病毒数量可用空斑形成单位。测定病毒数量可用空斑形成单位。一个空斑是标本中一个病毒大量复制所致，有感染性的病毒一个空斑是标本中一个病毒大量复制所致，有感染性的病毒经适当稀释后接种于单层细胞，由于单个病毒的复制增殖使经适当稀释后接种于单层细胞，由于单个病毒的复制增殖使局部单层细胞脱落，此即空斑。局部单层细胞脱落，此即空斑。5050组织细胞感染量（组织细胞感染量（TCID50TCID50）三、病毒感染的血清学诊断三、病毒感染的血清学诊断 1.1.中和试验中和试验 2.2.血凝抑制试验血凝抑制试验四、检
35、测病毒核酸的方法四、检测病毒核酸的方法1.1.核酸杂交技术核酸杂交技术2.2.多聚酶链反应多聚酶链反应3.3.基因芯片技术基因芯片技术第二节第二节 病毒感染的特异性预防病毒感染的特异性预防 乙脑疫苗、狂犬疫苗流感灭活疫苗、HAV、HBV疫苗人工主动免疫人工主动免疫灭活疫苗灭活疫苗：减毒活疫苗减毒活疫苗：脊髓灰质炎疫苗 麻疹疫苗、腮腺炎疫苗乙肝疫苗 亚单位疫苗亚单位疫苗：人工被动免疫人工被动免疫免疫血清胎盘球蛋白丙球 转移因子等第三节第三节 病毒感染的治疗病毒感染的治疗第三节第三节 治疗原则治疗原则-抑制病毒复制；-增强机体免疫应答能力，消灭病毒感染的细胞。病毒病毒穿入穿入脱壳脱壳核酸复制、转录核酸复制、转录 及蛋白质合成及蛋白质合成装配装配吸附吸附释放释放药物药物药物药物药物药物药物药物药物药物思考题思考题1 1、病毒的结构？各结构有何化学组成？有何、病毒的结构？各结构有何化学组成？有何功能功能?2 2、病毒的复制周期包括哪些阶段？、病毒的复制周期包括哪些阶段？3 3、定义、核衣壳、缺陷病毒、干扰现象、定义、核衣壳、缺陷病毒、干扰现象4 4、简述病毒标本的采集与送检要点？、简述病毒标本的采集与送检要点？5 5、简述病毒疫苗的种类？、简述病毒疫苗的种类？
