1、物品及环境的消毒灭菌监测物品及环境的消毒灭菌监测方法方法主主要要内内容容1.空气消毒效果监测空气消毒效果监测 2.手卫生效果的监测手卫生效果的监测3.物品和环境表面消毒效果监测物品和环境表面消毒效果监测 4.医院环境卫生学监测报告单医院环境卫生学监测报告单5.灭菌物品的监测灭菌物品的监测上海手术室医院感染暴发流行事例上海手术室医院感染暴发流行事例 2001年年上上海海某某医医院院儿儿科科心心脏脏术术后后18例例肺肺炎炎克克雷雷伯伯杆杆菌菌血血液液感感染染 上上海海某某医医院院心心脏脏手手术术后后鲍鲍曼曼不不动动杆杆菌菌血血液液感感染染暴暴发发 Do not conduct random,und
2、irected,microbiologic sampling of air,water or environmental surfaces in health care facilities(270,343).”(Section IA)在在医医疗疗机机构构中中不不推推荐荐随随机，机，无无目目的的的的进进行行空空气、气、水、水、环环境境表表面面的的采采样。样。Where？Why？How？在在哪哪里里采采样？样？为为什什么么采采样？样？怎怎么么采采样？样？Where?在那里采样在那里采样 Air 空气空气 Water水质水质 Surface 环境表面环境表面 OR 手术室手术室 ICU 重症监护病
3、房重症监护病房Why?为为什什么么采采样样 Outbreak investigation 暴发调查暴发调查 Construction、renovation、repair 建筑、重建、维修建筑、重建、维修 Routine monitoring 常规监测常规监测HOW?怎怎么么采采样？样？空气空气消毒效果监测消毒效果监测 非非洁净区域空气消毒效果监测洁净区域空气消毒效果监测 采样时间：在消毒处理后，操作前进行采样时间：在消毒处理后，操作前进行 采样。采样。采样方法：根据其采样原理分平板暴采样方法：根据其采样原理分平板暴 露和微生物采样器法。露和微生物采样器法。平板暴露法：布点方法平板暴露法：布点方
4、法 室内面积室内面积30 m2，设置内、中、外对角线，设置内、中、外对角线3 个点，内、外布点部位距墙壁个点，内、外布点部位距墙壁1m处处，距地距地0.81.5米米 室内面积室内面积30 m2，设，设4角及中央角及中央5 点，点，4角布角布点部位距离墙壁点部位距离墙壁1m处。处。采样方法：将普通营养琼脂平板或血平板采样方法：将普通营养琼脂平板或血平板（直径（直径9cm）放在室内各采样点处，采样高）放在室内各采样点处，采样高度距地面度距地面1.5m，内外及四角距墙，内外及四角距墙1m，采样时，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5或或15分钟，盖好立即送检。分钟
5、，盖好立即送检。检测方法：将采样后平皿置检测方法：将采样后平皿置36 温箱培温箱培 养养48，计数并鉴定。，计数并鉴定。结果计算结果计算平板暴露法按平板暴露法按每皿的菌落数报告：每皿的菌落数报告：cfu/（皿（皿暴露时间）暴露时间）例：某例：某类环境病房治疗室类环境病房治疗室 30 m2 ，需放置，需放置三个平皿，其菌落计数分别为三个平皿，其菌落计数分别为 5、3、2 环环境境微微生生物物菌菌落落总总数数卫卫生生标标准准环境环境类别类别空气空气平均菌落平均菌落数数 cfu cfu/皿皿 cfu/m3物体物体表面平均菌落数表面平均菌落数cfu/cmcfu/cm2 2洁净手术部洁净手术部及及其他洁
6、净场所其他洁净场所 1 类环境类环境 符合符合GB 50333要求要求 4.0（30min）150 5.0类环境类环境类环境类环境类环境类环境 4.0（15min）4.0（5min）4.0（5min）5.010.010.0。各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准 a a：cfu/cfu/皿为平板暴露法，皿为平板暴露法，cfu/mcfu/m3 3为空气采样器法为空气采样器法 结果判断临床输血技术规范第二十三条 贮血冰箱内严禁存放其他物品；每周消毒一次；冰箱内空气培养每月一次，无霉菌生长或培养皿（90）细菌生长菌落810分钟或200立方米为合格。洁洁净净区区域
7、域空空气气消消毒毒效效果果监监测测8.2.2.1洁净手术部洁净手术部(室室)及其他洁净及其他洁净场所，根据洁净房间总数，场所，根据洁净房间总数，合理安排每次监测的房间数合理安排每次监测的房间数量，量，保证每个洁净房间能每保证每个洁净房间能每年至少监测一次年至少监测一次，其监测方，其监测方法及结果的判定应符合法及结果的判定应符合GB50333的要求的要求。GB50333-2013GB50333-2002洁净度洁净度5级级 洁净度洁净度100级级环境空气中0.5m的微粒数大于350粒/m3（0.35粒/L）到3500粒/m3（3.5粒/L）；5m的微粒数为0粒/L洁净度洁净度6级级环境空气中大于等
8、于0.5m 的微粒数大于3500粒/m3（3.5粒/L）到35200粒/m 3（35.2粒/L）；大于等于5m的微粒数293 粒/m3（0.3 粒/L）。洁净度洁净度1000级级0.5m的尘粒数3500粒m3(3.5粒/L)到35000粒m3(35粒/L)；5m的尘粒数300粒m3(0.3粒L)。洁净度洁净度7级级环境空气中0.5m 的微粒数大于35200 粒/m3（35.2粒/L）到352000 粒/m3（352粒/L）；大于等于5m 的微粒数293粒/m 3（0.3 粒/L）到2930 粒/m 3（3粒/L）。洁净度洁净度10000级级0.5m的尘粒数35000粒m3(35粒/L)到350
9、000粒m3(350粒L)；5m的尘粒数300粒m3(0.3粒/L)到3000粒m3(3粒/L)。洁净度洁净度8级级境空气中00.5m 的微粒数352000 粒/m3（352 粒/L）到3520000 粒/m3（3520 粒/L）；5m 的微粒数大于2930 粒/m3（3 粒/L）到29300 粒/m3（29 粒/L）。洁净度洁净度100000级级0.5m的尘粒数350000粒m3(350粒/L)到3500000粒m3(3500粒L)；5m的尘粒数3000粒m3(3粒L)到30000粒m3(30粒L)。洁净度洁净度8.5级级环境空气中0.5m 的微粒数大于3520000 粒/m3（3520 粒
10、/L）到11120000粒/m3（11200 粒/L）；5m 的微粒数大于29300 粒/m3（29 粒/L）到92500 粒/m3（92 粒/L）。洁净度洁净度300000级级0.5m的尘粒数3500000粒m3(3500粒L)到10500000粒m3(10500粒/L)；5m的尘粒数30000粒m3(30粒L)到90000粒m3(90粒/L)。布点方法布点方法GB50333-2002洁净度局部洁净度局部百百级周围级周围千级千级设置设置13个点个点 GB50333-2013等级等级区域区域空气洁净空气洁净级别级别沉降法监沉降法监测点数测点数含尘浓含尘浓度测点度测点数数布点数（取布点数（取大值
11、）大值）合计合计（不含对（不含对照）照）手术区 5级13513 21周边区6级488（每边2点）布点方法布点方法GB50333-2002洁净度局部洁净度局部千千级周围级周围万级万级设置设置9个点个点 GB50333-2013等级等级区域区域空气洁空气洁净级别净级别沉降法沉降法监测点监测点数数含尘浓含尘浓度测点度测点数数布点数布点数（取大（取大值）值）合计合计（不含（不含对照）对照）手术区6级434（四角布点）10周边区7级366（长边2点，短边1点）布点方法布点方法GB50333-2002洁净度局部洁净度局部万万级周围级周围十万级十万级设置设置7个点个点 GB50333-2013等级等级区域区
12、域空气洁净空气洁净级别级别沉降法监沉降法监测点数测点数含尘浓度含尘浓度测点数测点数布点数布点数（取大值）（取大值）合计合计（不含对（不含对照）照）手术区7级333（单对角线布点）9周边区8级266（长边2点，短边1点）布点方法布点方法GB50333-2002洁净度洁净度三十万三十万级设置级设置5个点个点 GB50333-2013等级等级区域区域空气洁净空气洁净级别级别沉降法沉降法监测点监测点数数喊尘浓度测喊尘浓度测点数点数布点数布点数（取大值）（取大值）合计合计（不含对（不含对照）照）8.5级 2（均匀布点，避开送风口正下方）手手卫生效果的监测卫生效果的监测采样时间：在采样时间：在接触病人、从
13、事医疗活动前接触病人、从事医疗活动前进行进行 采样采样。采样面积及方法：采样面积及方法：被检人五指并拢，将浸有被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水无菌生理盐水（或含有相应中和剂或含有相应中和剂）采样液的采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各擦各 （一只手涂擦面（一只手涂擦面3030cm2），并随之），并随之转动采样棉拭子，转动采样棉拭子，剪去手接触部分，剪去手接触部分，将棉拭子将棉拭子放入装有放入装有1010ml采样液的试管内送检。采样液的试管内送检。细菌菌落数总数细菌菌落数总数计算方法计算方法：例：某例：某2类环境病房医务人员卫生手消毒平皿
14、计数类环境病房医务人员卫生手消毒平皿计数88个个卫生卫生手清毒，监测的细菌菌落总数手清毒，监测的细菌菌落总数应应 10cfu/2 外科外科手消毒，监测的细菌菌落总数手消毒，监测的细菌菌落总数应应 5cfu/2 评价（合格）标准评价（合格）标准物物品品和和环环境境表表面面消消毒毒效效果果监监测测 采样时间采样时间：在消毒处理后或怀疑与医院感染在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样暴发有关时进行采样。采样面积：被采面积采样面积：被采面积100c2取全部表取全部表 面；面；采样面积采样面积100 c2，取，取100c2 采样方法采样方法：（棉拭子法、压印法两种）棉拭子法、压印法两种）棉拭棉拭
15、子法：用子法：用55cm的标准灭菌规格版，放在被的标准灭菌规格版，放在被检物检物 体表面，用浸有含有相应中和剂的无菌体表面，用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭洗脱液的棉拭 子，在规格板内横竖往返均匀子，在规格板内横竖往返均匀涂抹涂抹5次，并随之转动棉次，并随之转动棉 拭子，可连续采样拭子，可连续采样14个规格板面积个规格板面积。具体图示具体图示方法方法1：具体图示具体图示方法方法2：计算方法：计算方法：评评价价（合合格）格）标标准准类类区域：物体表面细菌总数区域：物体表面细菌总数5cfu/cm2；类类区域：物体表面细菌区域：物体表面细菌总数总数 10cfu/cm2；类类区域：物体表面细菌总
16、数区域：物体表面细菌总数10cfu/cm2；1.1.不得不得检出致病性微生物为消毒合格检出致病性微生物为消毒合格。2.2.采取采取的标本要有足够的样本数量且具有代表性。的标本要有足够的样本数量且具有代表性。如层流洁净手术室，选择具有代表性采样地点，如层流洁净手术室，选择具有代表性采样地点，每个房间每种（如手术台、桌、灯等）表面不少每个房间每种（如手术台、桌、灯等）表面不少于于2 2点。点。内内镜镜消消毒毒灭灭菌菌效效果果的的监监测测采样时间：采样时间：在在消毒灭菌后消毒灭菌后，使用前进行。，使用前进行。采样采样方法：方法：监测采样部位为内镜的内腔面。监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器用无
17、菌注射器抽取抽取50ml含相应中和含相应中和剂，剂，从待检内镜活检口注入后再将冲洗水全部从待检内镜活检口注入后再将冲洗水全部收集，及时送检，收集，及时送检，2小时内检测。小时内检测。血血液液透透析析液液的的监监测测采样时间：采样时间：每月每月1次。若采样结果超标时，次。若采样结果超标时，须、重复检查，怀疑或确定病人在治疗中须、重复检查，怀疑或确定病人在治疗中有热原反映和菌血症时，应随时检测。有热原反映和菌血症时，应随时检测。采样方法：采样方法：透析用水透析用水（即自来水经粗滤、砂过滤器、活、（即自来水经粗滤、砂过滤器、活、性碳过滤器、水软化器（树脂置换）、反性碳过滤器、水软化器（树脂置换）、反
18、渗透装渗透装 置、储水罐、出水加压泵等步骤处置、储水罐、出水加压泵等步骤处理后出口的理后出口的 液体）在液体）在反渗水反渗水进入血液透析进入血液透析机的位置采样；机的位置采样；入口端和出口端均需采样。入口端和出口端均需采样。透析液：透析液：（即透析用水与（即透析用水与A、B两种液体混两种液体混合、后进合、后进 入入人体透析之前人体透析之前的液体）应在进的液体）应在进入透析器前采入透析器前采 样。样。注：注：疑有透析液污染或严重感染病例时，疑有透析液污染或严重感染病例时，应增加应增加 采样点，如原水口、软化水出口、采样点，如原水口、软化水出口、透析液配液透析液配液 口、反渗水出口、贮水罐出口口、
19、反渗水出口、贮水罐出口等。等。灭菌效果监测灭菌效果监测目的：灭菌效果的监测能有效保证灭目的：灭菌效果的监测能有效保证灭菌质量及医疗安全！菌质量及医疗安全！灭灭菌菌效效果果监监测测灭效果的监测方法分类：灭效果的监测方法分类：1.物理监测物理监测2.化学监测化学监测3.B-D试验试验4.生物监测生物监测物物理理监监测测法法 物理物理监测监测法又称为法又称为工艺监测。工艺监测。检测检测灭菌器上的量器（压力表、温度表、灭菌器上的量器（压力表、温度表、计时表）、图表、指示针、报警器等。此计时表）、图表、指示针、报警器等。此法作为常规监测方法法作为常规监测方法，均均应进行。应进行。化化学学监监测测法法 化
20、学监测指示整个消毒过程的完成，取化学监测指示整个消毒过程的完成，取出灭菌包即可显示结果，但不反应微生物出灭菌包即可显示结果，但不反应微生物真实情况。真实情况。包括：包括：包外指示包外指示胶带和胶带和包内指示包内指示卡。卡。进行测试。进行测试。灭菌灭菌前前包包外指示外指示胶带：胶带：灭菌灭菌后后 压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器 包内指示包内指示卡卡：灭菌灭菌前前 灭菌灭菌后后爬行式包内指示卡：爬行式包内指示卡：灭菌灭菌前前 灭菌后灭菌后环环氧氧乙乙烷烷灭灭菌菌包外指示胶带：包外指示胶带：灭菌灭菌前前灭菌后灭菌后包内指示卡：包内指示卡：灭菌灭菌前前 灭菌后灭菌后过过氧氧化化氢氢等等离离子子体体灭灭菌
21、菌包外指示胶带：包外指示胶带：灭菌灭菌前前灭菌后灭菌后包内指示卡：包内指示卡：灭菌灭菌前前 灭菌后灭菌后生生物物指指示示剂剂监监测测 利用利用耐热的非致病性细菌芽胞作指示菌，耐热的非致病性细菌芽胞作指示菌，以测定热力灭菌的效果以测定热力灭菌的效果。进行，对新灭菌器使用前或拟采用新进行，对新灭菌器使用前或拟采用新包装容器、摆放方式、排气方式及特殊灭菌包装容器、摆放方式、排气方式及特殊灭菌工艺都必须进行生物监测，合格后才能采用。工艺都必须进行生物监测，合格后才能采用。灭菌植入型器械、特殊感时每锅灭菌植入型器械、特殊感时每锅进行。进行。小型快速灭菌器小型快速灭菌器 环氧乙烷灭菌器环氧乙烷灭菌器 快速内镜灭菌器快速内镜灭菌器 等离子体灭菌器等离子体灭菌器 均应进行均应进行(工艺、生物、化学工艺、生物、化学)监测监测B B-D D试试验验 监监测测真真空空水水平，平，检检查查灭灭菌菌器器是是否否漏漏气。气。适适用用于于预预真真空空灭灭菌菌锅，锅，开开始始灭灭菌菌运运行行前前进进行行，合合格格后后方方可可使使用。用。放放置置位位置：置：灭灭菌菌炉炉排排气气口口的的上上方方温温度度：1 13 34 4 时时间：间：3.3.5 5-4 4min空空锅锅做，做，锅锅应应预预热热或或有有直直接接B B-D D测测试试程程序序的的灭灭菌菌器器不不需需要要预预热。热。
