1、尿液分析URINALYSIS北医大学第三院检验科Department of laboratory medicine,Peking University Third Hospital 实验内容及目的n掌握尿液一般性状检查的内容和方法。n掌握尿液干化学分析的原理、方法及意义。n掌握尿沉渣检查的内容和方法。n了解尿细菌学检查的方法。n了解尿脱落细胞检查的方法和意义。标本收集n晨起尿：当人体处于夜间睡眠状态时，各种生理因素较平衡，尿液倾向于浓缩和酸化。细胞和管型等有形成分在酸性环境中较稳定，且含量较多，利于发现。n随机尿：易受饮食、活动和时间差异等各因素影响，病理性成分含量不定。n餐后尿：餐后2小时对
2、病理性蛋白尿和糖尿的检出更为敏感。n定时尿：12h/24h尿，冰箱保存。n30分钟内完成，最迟不宜超多1小时。1.尿液一般性状检查n尿量n外观颜色及透明度n气味尿量Urine volume器材：量筒方法：n直接法：将24h内各次排出的尿液，全部收集在一个容器内，然后用量筒测定其总量。n累计法：分别测定24h内每次排出的尿液体积，然后计其总量。参考值：n成年人：11.5L/24h。n儿童：16岁 0.31.0L 712岁 0.51.5L临床意义：nPolyuria：24h尿液总量2.5Ln饮水过多，急性肾功能不全多尿期，糖尿病溶质性利尿nOliguria：24h尿液总量0.4LnAnuria：2
3、4h尿液总量3个/HP。n血红蛋白尿(Hemoglobinuria)n胆红素尿(Bilirubinuria)n脓尿(Pyuria)：尿液中含有大量的白细胞、脓细胞等炎性渗出物，使新鲜尿液即呈浑浊黄白色；常含有浓丝状悬浮物，放置后可有云絮状沉淀。n菌尿(Bacteriuria)：尿液中含有大量的细菌；多呈云雾状，静置后也不下沉。Normal urine PusuriaBilirubinuria HemoglobinuriaHematuria Chyluria尿液气味Urine odorn正常尿液的气味是由尿液中挥发酸及酯类共同产生的。n正常新鲜尿液具有特殊微弱的芳香气味，如果标本放置时间过久或冷
4、藏时间过长，尿素分解，可出现氨臭味。n新鲜排出的尿液即有氨臭味，见于慢性膀胱炎、慢性尿潴留等。特征性尿液气味异常：n烂苹果味：糖尿病酮症酸中毒n腐臭味：泌尿系感染或晚期膀胱癌n大蒜臭味：有机磷中毒n老鼠尿样臭味：苯丙酮尿症2.尿液干化学分析Urinary chemical analyzer试剂模块反应原理n尿液的酸度(PH)n比密(SG)n蛋白质(PRO)n葡萄糖(GLU)n酮体(KET)n胆红素(BIL)n尿胆原(UBG)n亚硝酸盐(NIT)n白细胞(LEU)n红细胞/隐血(Hb)n维生素C(Vitc)尿液干化学分析仪检测原理n尿液中相应的化学成分使尿多联试带上各种含特殊试剂的模块颜色发生变
5、化。n呈色的深浅与尿液中相应物质的浓度成正比。n将多联试带置于尿液分析仪比色进样槽，各模块依次受到仪器光源照射并产生不同的反射光，后者被光电监测器接收，仪器将不同的光强度转换为相应的电讯号，再经微处理器校正为测定值，最后以定性或半定量方式自动打印出结果。Proceduren用质控尿液浸湿试带，置于仪器检测槽内。任意一个试剂模块的测定结果与质控尿液期望靶值允许有1各定性等级的差别。n浸渍试带条 将多联试带完全浸入尿液12s，然后立即取出。n沥去多余尿液 沿试管壁将试带上多于尿液去尽。n检测标本 将试带置于仪器检测槽内，直至仪器自动打印出报告。Notesn尿液标本必须新鲜。n尿液pH影响蛋白测定，
6、强碱性尿（pH9.0），超过了试带的缓冲能力，出现假阳性结果；尿液pH低于3.0时，可出现假阴性结果。n尿蛋白试带法对白蛋白敏感，对球蛋白、粘蛋白、本周蛋白不敏感，对球蛋白的灵敏度仅为白蛋白的1/1001/50。对于肾病患者，特别是疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的病例，最好使用对白、球蛋白灵敏度一致的方法进行测定(磺基水杨酸法)。n尿糖试带法只与葡萄糖反应，比班氏法特异性高。高浓度维生素C可导致试带法假阴性结果。尿液被过氧化物、次氯酸盐、强氧化性清洁剂污染可出现假阳性结果。Notesn酮体试带法对乙酰乙酸敏感，丙酮次之，不与-羟丁酸反应（糖尿病酮症治疗监测时注意分析）。n尿亚硝酸盐用于泌
7、尿系细菌感染的快速筛检，阴性并不能排除菌尿的可能。阳性结果条件：尿液中的致病菌含有硝酸盐还原酶；体内有适量的硝酸盐存在；尿液在膀胱内有足够的停留时间。n尿隐血检测采用血红蛋白类过氧化物酶法，肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或菌尿，可呈现假阳性结果；尿液大量维生素C可出现假阴性结果。n尿白细胞检测主要对中性粒细胞敏感，单核细胞、淋巴细胞无粒细胞酯酶，不能检出。3.尿沉渣检查Examination of urine sedimentsMicroscopic Examination of Urine SedimentnBlood(+)(+)nProtein(+)(+)nWBC(+)(+)nNitrit
8、e(+)(+)nRequired by doctorsnA certain group of patientsWhen to do it?原理和器材n用显微镜检查方法，依据尿液细胞、管型等有形成分的形态特征，识别并记录其在一定显微镜视野内的 数目。n玻片n离心机n刻度离心管n盖玻片n滴管n普通显微镜Proceduren充分混匀尿标本。n用刻度离心管取刚混匀的尿液10ml。n以1500r/min离心5min。n倾去上清液，留管底沉淀物尿液0.2ml。n将留取的尿沉淀充分混匀，取1滴置于玻片上，加盖玻片并避免产生气泡。n镜检计数：先用低倍镜观察全片细胞、管型等，然后高倍镜确认。注意使用弱光观察尿有
9、形成分，特别是透明管型。管型在低倍镜至少观察计数20个视野；细胞在高倍镜至少观察计数10个视野；结晶按高倍镜视野中分布范围估计。报告方式n细胞成分：最低最高值/HPn管型成分：最低最高值/LPn结晶和盐类：在高倍镜视野下，以“”表示。按每占据1/4视野区为一个“”，以“”表示结晶和盐类的数量。n微生物：同上报告方式，或 用“少量、较多、很多、极多”表示。尿沉渣中的有形成分红细胞Erythrocyten尿沉渣中见到的红细胞，因尿渗透压、PH值、留尿后的经时变化、红细胞通过肾单位时及离心时的物理性损伤、红细胞本身的寿命、盖片的压挤等影响，可有多样的形体变化。n尿沉渣中典型红细胞是淡黄色双凹圆盘形，
10、类似外周血未染色涂片上的形态。n高渗尿中，红细胞因脱水而皱缩成颜色较深星芒状（锯齿状）球体。n在低渗尿中，红细胞因吸水而胀大，颜色较浅，甚至血红蛋白从红细胞中脱出，成为一些大小不等的圆圈，此称为红细胞淡影或影红细胞。白细胞Leukocyten尿中白细胞主要为中性粒细胞，偶尔见到淋巴细胞和单核细胞。n新鲜尿中，白细胞外形完整，圆形，浆内颗粒清晰可见，胞核清楚。n低渗尿及碱性尿中，白细胞常胀大，约半数可在了2小时内溶解。n高渗尿及酸性尿中，白细胞常萎缩。n炎症时，变性的白细胞外形多不规整，结构模糊，浆内充满粗大颗粒，核不清楚，细胞常粘连成团，胞界不清，称脓细胞。Leukocyte上皮细胞Epith
11、elial celln在生理和病理代谢过程中，泌尿生殖道的上皮细胞可随时脱落并混入尿中排出。尿中上皮细胞：n肾小管的立方上皮n肾盏、肾盂、输尿管、膀胱和部分尿道的各层移行上皮n尿道中段的假复层柱状上皮n尿道口和阴道的复层鳞状上皮Epithelial cellSquamous epithelial cell:形体扁平而薄，胞体大，形状不规则，多边多角，边缘常卷折，胞核很小，胞质丰富。管型Castn管型是在远端肾小管和集合管内形成的,是蛋白质、细胞、颗粒等成分构成的管状凝聚物。n当血浆白蛋白自肾小球从溶液状态渗透到肾小管后，与来自肾小管上皮细胞的Tamm-Horstall粘蛋白结合。n结合物进入并
12、通过肾小管和集合管时，在尿液浓缩、盐类增多、pH下降、流速减低等诸因素影响下，形成了以微纤维蛋白网为基本结构的管型基质（相当于透明管型）。n此管型基质如包入或吸附碎解的细胞颗粒、血细胞、上皮细胞、脂肪滴、细菌、盐类、色素等物，即可形成各种各样的管型。n管型常呈直或微弯的圆柱状，长短不一，宽窄不同，两边平行，两端或一端圆钝。管型的外形，大体上可以反映肾小管或集合管的内腔形状。Cast尿中常见管型的形成透明管型白蛋白T-H粘蛋白细胞管型其他管型白细胞管型脂肪变性上皮细胞上皮细胞管型红细胞上皮细胞白细胞透明管型盐类管型细菌管型真菌管型脂肪管型红细胞管型粗颗粒管型细颗粒管型蜡样管型盐类细菌真菌白蛋白T
13、-H粘蛋白Hyaline CastWaxy CastErythrocyte castFine granular castLeukocyte castCoarse granular cast结晶Crystalsn结晶在尿中的析出，与尿中该物质的浓度、饱和度及尿的酸碱度和温度有关。n一般说来，大部分盐类结晶多物临床意义，可以不必报告。n但也要结合具体情况，若在新鲜尿中经常看到草酸钙或尿酸结晶，且又常伴较多或大量的红细胞时，则应疑及尿结石的可能而写入报告。CrystalsTriple phosphate crystalCalcium oxalate crystal其他尿沉渣自动化分析仪原理n尿标本经
14、稀释、染色后通过鞘液流动池时，其中的每个有形成分（细胞、粒子）均被氩激光光束照射，并各自发出相应的信号。n尿沉渣细胞信号可表达为三类，即前向散射光、荧光和电阻抗。n前向散射光信号又分为前向散射光强度和前向散射光脉冲宽度，前者反映细胞的大小，后者反应细胞的长度。n荧光信号也分为荧光强度和荧光脉冲宽度，前者反映细胞染色质的强度，后者反映细胞染色质的长度。n电阻抗反映细胞的体积。n仪器对以上各种信号进行综合分析，可得出每个细胞的大小、细胞的长度、染色性强度、染色部分的长度以及细胞的体积等信息资料，并给出每类细胞的散射图和直方图，以及每微升尿中各中细胞的数量和百分比等参数。参考值尿流式沉渣检查n尿红细
15、胞数 U-RBC 0-25 /Ln尿白细胞数 U-WBC 0-30 /Ln尿上皮细胞数 U-EC 0-15 /L n尿管型数 U-CAST 0-0.7 /L n尿细菌数 U-BACT 0-6000 /L n病理管型 U-Path.CAST 0.0 /L n小圆上皮细胞 U-SRC 0.0 /L n类酵母样菌 U-YLC 0.0 /L n结晶 U-XTAL 0.0 /L n红细胞信息 U-RBC info n非溶血红细胞数量 U-Nlysed#/L n非溶血红细胞百分比 U-Nlysed%尿干化学检查npH 4.68.0n蛋白质 PRO n葡萄糖GLU n酮体KET n尿胆原UBG +n胆红素B
16、IL n亚硝酸盐NIT n红细胞ERY n白细胞LEU n比密SG 1.0151.025n维生素C VitC 0.6mmol镜检结果n红细胞RBC:03/HP 白细胞WBC:05/HP n上皮细胞EC:少 结晶CRYSTAL:少n管型CAST:0偶见/LP病例1：男，29岁，尿干化学检查npH 5.0n蛋白质 PRO n葡萄糖GLU n酮体KET n尿胆原UBG n胆红素BIL n亚硝酸盐NIT n红细胞ERY +n白细胞LEU n比密SG 1.015n维生素C VitC 0.6mmol尿流式沉渣检查n尿红细胞数 U-RBC 1440.2 /Ln尿白细胞数 U-WBC 5.9 /Ln尿上皮细胞
17、数 U-EC 1.5 /L n尿管型数 U-CAST 0.13 /L n尿细菌数 U-BACT 132.6 /L n病理管型 U-Path.CAST 0.0 /L n小圆上皮细胞 U-SRC 0.0 /L n类酵母样菌 U-YLC 0.0 /L n结晶 U-XTAL 171.6 /L n红细胞信息 U-RBC info Isomorphic?n非溶血红细胞数量 U-Nlysed#1431.3/L n非溶血红细胞百分比 U-Nlysed%99.3%镜检结果nWBC:03/HP RBC:满视野/HP肾结石病例2：男，81岁，尿干化学检查npH 7.0n蛋白质 PRO +n葡萄糖GLU n酮体KET
18、 n尿胆原UBG +n胆红素BIL n亚硝酸盐NIT +n红细胞ERY +n白细胞LEU +n比密SG 1.010n维生素C VitC 0.6mmol尿流式沉渣检查n尿红细胞数 U-RBC 195.9 /Ln尿白细胞数 U-WBC 1509.8 /Ln尿上皮细胞数 U-EC 74.3 /L n尿管型数 U-CAST 1.15 /L n尿细菌数 U-BACT 1025.0 /L n病理管型 U-Path.CAST 0.2 /L n小圆上皮细胞 U-SRC 2.0 /L n类酵母样菌 U-YLC 0.0 /L n结晶 U-XTAL 7.0 /L n红细胞信息 U-RBC info Isomorph
19、ic?n非溶血红细胞数量 U-Nlysed#177.9/L n非溶血红细胞百分比 U-Nlysed%90.8%镜检结果nWBC:满视野/HP RBC:1020/HP EC:28/HP急性膀胱炎病例3.男，25岁，尿干化学检查npH 6.5n蛋白质 PRO +n葡萄糖GLU n酮体KET n尿胆原UBG +n胆红素BIL n亚硝酸盐NIT n红细胞ERY +n白细胞LEU +n比密SG 1.010n维生素C VitC 0.6mmol尿流式沉渣检查n尿红细胞数 U-RBC 141.5 /Ln尿白细胞数 U-WBC 97.0 /Ln尿上皮细胞数 U-EC 602.3 /L n尿管型数 U-CAST
20、118.39 /L n尿细菌数 U-BACT 2090.7/L n病理管型 U-Path.CAST 38.9 /L n小圆上皮细胞 U-SRC 18.2 /L n类酵母样菌 U-YLC 0.0 /L n结晶 U-XTAL 0.0 /L n红细胞信息 U-RBC info Dysomorphic?n非溶血红细胞数量 U-Nlysed#14.8/L n非溶血红细胞百分比 U-Nlysed%10.4%镜检结果nWBC:510/HP RBC:1020/HP EC:满视野/HP n透明管型:满视野/LP 颗粒管型:满视野/LP肾小球肾炎4.尿液的微生物学检查标本采集n中段尿n导尿法n肾盂尿采集法n膀胱穿
21、刺采集法标本处理n直接涂片检查n培养检查n分离鉴定n药敏试验留取合格标本定量（10ul）接种 药敏试验 分离鉴定5.脱落细胞检查n脱落细胞学（exfoliative cytology）是采集人体各部位，特别是管腔表面的脱落细胞，经染色后用显微镜观察这些细胞的形态，并做出诊断的一门临床检验学科。n优点：安全，可多次重复取材，所需设备简单，操作方便，适于普查。癌细胞检出率较高，一般在60以上。n缺点：有一定误诊率，1040。不能确定肿瘤的具体部位，需结合其他方法确诊。取材n自然管腔内表面粘膜 正常情况下，人体器官粘膜上皮细胞经常有脱落更新，有病变的粘膜上皮细胞更易脱落。如支气管粘膜上皮（痰）、肾盂膀胱移行上皮（尿）等，都是自然脱落的上皮细胞。n体腔抽出液 胸膜腔、腹膜腔、心包积液和脑脊液等。n针吸细胞 利用细针穿刺病变器官或肿物，抽吸出少许病变组织细胞作涂片检查，称针吸细胞学。吸出的细胞完全是人为的“脱落”细胞。尿脱落细胞检查留取尿标本离心尿标本取离心尿沉渣涂片染色镜检实验报告n实验题目n实验目的n实验原理n实验步骤n实验结果n实验讨论
