1、可传播性海绵状脑病可传播性海绵状脑病Transmissible spongiform encephalopathies正常正常PrPC：a a-螺旋螺旋42%，b b-片层片层3%，可溶，易消化，可溶，易消化 致病性致病性PrPSc：a a-螺旋螺旋30%,b b-片层片层45-55%，不可，不可溶，抗消化溶，抗消化factors?PrPScPrPCBSENormal BSENormal PK-+-+不溶于常规去污剂不溶于常规去污剂抵抗常规灭活方法抵抗常规灭活方法抵抗蛋白酶消化抵抗蛋白酶消化可被强碱溶液灭活可被强碱溶液灭活 异常的朊病毒蛋白（异常的朊病毒蛋白（PrPPrPScSc）进入中枢神经
2、）进入中枢神经系统，使存在于神经细胞的系统，使存在于神经细胞的PrPPrPCC转变为转变为PrPPrPScSc，发，发生了构象的改变，其氨基酸序列没有任何变化。生了构象的改变，其氨基酸序列没有任何变化。由于神经细胞不能正常切割和分解异常由于神经细胞不能正常切割和分解异常PrPPrP蛋白的蛋白的毒性单位序列，这样神经细胞毒性片段就以不可毒性单位序列，这样神经细胞毒性片段就以不可溶性的溶性的PrPPrP蛋白和淀粉样变形式聚积在脑组织中，蛋白和淀粉样变形式聚积在脑组织中，进一步造成神经细胞死亡和脑组织海绵样变性。进一步造成神经细胞死亡和脑组织海绵样变性。PrPPrPScSc蛋白的致病机理蛋白的致病机
3、理PrPPrPScSc蛋白所致疾病蛋白所致疾病 在动物主要引起在动物主要引起羊瘙痒病、疯牛病（羊瘙痒病、疯牛病（BSE）和其他动物的和其他动物的海绵状脑病。海绵状脑病。羊瘙痒病是于羊瘙痒病是于17301730年最早发现的一种年最早发现的一种TSETSE，自然感染遍布全球：，自然感染遍布全球：英国羊群感染率英国羊群感染率5传播途径包括经胎盘、口、鼻、眼或皮肤传播途径包括经胎盘、口、鼻、眼或皮肤，母羊到小羊垂直传，母羊到小羊垂直传播，成年羊中也存在着水平传播播，成年羊中也存在着水平传播 实验感染实验感染1930年进行了年进行了scrapie的第一次实验性感染，将病羊脑组织接的第一次实验性感染，将病
4、羊脑组织接种给一只健康母羊，母羊患病种给一只健康母羊，母羊患病20世纪世纪60年代的动物实验证明年代的动物实验证明scrapie可传染给小鼠可传染给小鼠 目前还没有目前还没有scrapie可传播给人的证据可传播给人的证据 牛海绵状脑病于牛海绵状脑病于1986年年11月第一次月第一次在英国报道。在英国报道。平均发病年龄平均发病年龄5岁（从岁（从29个月到个月到18岁），平均潜伏期岁），平均潜伏期60个月。个月。最常观察到的表现是恐惧、感觉过敏和共济失调，受感染的动物也可能出最常观察到的表现是恐惧、感觉过敏和共济失调，受感染的动物也可能出现产奶量下降和身体状况下降，疾病常常恶化直至受感染的动物死亡
5、。现产奶量下降和身体状况下降，疾病常常恶化直至受感染的动物死亡。BSE临床过程持续的时间典型的是临床过程持续的时间典型的是12个月，但可以从个月，但可以从7天到天到14个月。个月。英国在英国在19872019年间证实的疯牛病就达到年间证实的疯牛病就达到17万头以上，而迄今为止有包万头以上，而迄今为止有包括亚洲国家日本在内的括亚洲国家日本在内的24国家已经发现了疯牛病。国家已经发现了疯牛病。含有被瘙痒病病原因子污染的反刍动物蛋白的肉骨粉含有被瘙痒病病原因子污染的反刍动物蛋白的肉骨粉造成在世界各国的更大范围的传播则是由于肉骨粉（造成在世界各国的更大范围的传播则是由于肉骨粉（MBM）的）的大范围出口
6、大范围出口感染母牛可垂直感染牛犊感染母牛可垂直感染牛犊高度危险物质包括：高度危险物质包括：12个月龄以上的牛头（包括脑组织和眼）个月龄以上的牛头（包括脑组织和眼）12个月龄以上的牛脊髓个月龄以上的牛脊髓任何年龄的牛的胸腺、扁桃体、脾脏、肠任何年龄的牛的胸腺、扁桃体、脾脏、肠捕获及野生反刍动物捕获及野生反刍动物疯牛病暴发期间在捕获及野生反刍动物也发现了类似的海绵状脑病，涉及的动疯牛病暴发期间在捕获及野生反刍动物也发现了类似的海绵状脑病，涉及的动物包括物包括Nyala、大羚羊、阿拉伯大羚羊、非洲大羚羊、纰角鹿、单弯刀角大羚羊、大羚羊、阿拉伯大羚羊、非洲大羚羊、纰角鹿、单弯刀角大羚羊、Ankole、
7、野牛等。、野牛等。猫科动物猫科动物1990年在英国出现猫海绵状脑病（年在英国出现猫海绵状脑病（FSE），以后在英国多数地区均有报道（到），以后在英国多数地区均有报道（到2019年总共有年总共有77例）。例）。挪威和列支敦士登的土生猫中也有单个病例的报道。挪威和列支敦士登的土生猫中也有单个病例的报道。FSE在捕获的大型猫科动物中也有发现：在捕获的大型猫科动物中也有发现：3只美洲狮，只美洲狮，4只猎豹，只个老虎和只猎豹，只个老虎和2只只豹猫。豹猫。Human TSEs Creutzfeldt-Jakob disease(克雅氏病，克雅氏病，CJD）Sporadic(85-90%)散发型散发型 Fa
8、milial(5-15%)家族型家族型 Iatrogenic(1%)医源型医源型 vCJD(more than 170 reported cases)变异型变异型 Gerstmann-Strussler-Scheinker Syndrome（GSS综合征）综合征）Kuru（库鲁病）库鲁病）Fatal Insomnia（致死性失眠症）致死性失眠症）Familial SporadicTSE脑组织具有感染性脑组织具有感染性TSE感染因子具有感染因子具有“株株”的现象的现象TSE感染存在的明显的感染存在的明显的“种属屏障种属屏障”消化道：消化道：Kuru，vCJD，疯牛病，动物，疯牛病，动物TSE神经
9、外科手术神经外科手术:医源性医源性器官移植：器官移植：医源性医源性血液：血液：医源性，医源性，vCJD母婴垂直：母婴垂直：羊瘙痒病，疯牛病，动物羊瘙痒病，疯牛病，动物TSE密切接触：密切接触：羊瘙痒病羊瘙痒病遗传：遗传：家族遗传性家族遗传性自发：自发：散发性散发性传统的传统的CJDCJD最早于最早于19201920年报道，与年报道，与19861986年英国年英国BSEBSE报道间隔了报道间隔了将近将近7070年年发病人群为老年人群发病人群为老年人群发病频率：每百万人中发病频率：每百万人中1 12 2例年例年约约10101515 CJDCJD病例为家族性疾病，与病例为家族性疾病，与prionpr
10、ion蛋白基因的致蛋白基因的致病突变有关病突变有关8585 CJDCJD病例为散发性疾病，没有公认的传播方式病例为散发性疾病，没有公认的传播方式约约1%CJD1%CJD为医源性为医源性 1970s开始，医疗操作引起的人与人之间开始，医疗操作引起的人与人之间CJD的传的传播已有所报道播已有所报道v 污染角膜的移植污染角膜的移植v 硬脑膜的移植硬脑膜的移植v 被污染的神经外科手术器械的使用被污染的神经外科手术器械的使用v 使用人源的生长激素使用人源的生长激素感染形式感染形式 病人数量病人数量感染途径感染途径 平均潜伏期平均潜伏期临床表现临床表现趋实体的趋实体的EEG 2大脑内大脑内 18个月（个月
11、（16，22）痴呆痴呆/小脑症状小脑症状神经手术神经手术4大脑内大脑内20个月（个月（15-28）视觉视觉/痴呆痴呆/小脑症状小脑症状角膜移植角膜移植3视神经视神经18个月（个月（16个月个月-30年）年）痴呆痴呆/小脑症状小脑症状脑硬膜移植脑硬膜移植 83大脑表面大脑表面6年（年（1.5-16）小脑症状（视觉小脑症状（视觉/痴呆）痴呆）促性腺激素促性腺激素 4血源性血源性13年（年（12-16）小脑症状小脑症状生长激素生长激素98血源性血源性12年（年（5-30）小脑症状小脑症状传染源：传染源：CJD病人病人潜伏期人群潜伏期人群2019年下半年英国报道了两例罕见的少年年下半年英国报道了两例罕
12、见的少年CJD病例，在随后病例，在随后数月内又发现了数月内又发现了8例年轻的例年轻的CJD患者患者 所有这所有这10例病人临床病理学特征都与传统的例病人临床病理学特征都与传统的CJD有所差异有所差异 发病年龄从发病年龄从16岁到岁到52岁（平均岁（平均28岁岁）对于病人的资料分析，未发现有任何有关职业危险的信息。对于病人的资料分析，未发现有任何有关职业危险的信息。所有病人都有自所有病人都有自1986年吃过牛肉或牛肉制品的历史，但无一年吃过牛肉或牛肉制品的历史，但无一吃过牛脑吃过牛脑。虽然虽然BSE 传播给人的途径仍不能确定，但是传播给人的途径仍不能确定，但是牛、羊的动物实验中确实可以经口进行感
13、染，因此，牛、羊的动物实验中确实可以经口进行感染，因此，目前对于目前对于vCJD最为认可的仍然是饮食方面的原因，最为认可的仍然是饮食方面的原因，但是为什么出现于年轻人尚不清楚。但是为什么出现于年轻人尚不清楚。世界范围内超过世界范围内超过180例例主要在英国、法国等欧洲国家主要在英国、法国等欧洲国家北美（加拿大、美国）出现病人北美（加拿大、美国）出现病人日本、沙特等亚洲国家出现病人日本、沙特等亚洲国家出现病人中国香港地区出现病人中国香港地区出现病人消化道消化道血液血液医源？医源？129位氨基酸位氨基酸M/MVariant CJD国家病例数（人）英国英国 法国法国 爱尔兰爱尔兰 美国、荷兰、美国、
14、荷兰、加拿大、日本、加拿大、日本、各各意大利、葡萄牙意大利、葡萄牙西班牙、沙特阿拉伯西班牙、沙特阿拉伯WHO Guideline on Tissue Infectivity Distribution in TSE,2019(Adopted From The Public Health Impact of Prion DiseaseAnnu.Rev.Public health 2019.26:191-212)流行病学上的时空吻合性流行病学上的时空吻合性实验动物中实验动物中BSE和和vCJD感染因子在发病潜伏期和病程上的一致性感染因子在发病潜伏期和病程上的一致性 实验动物上实验动物上BSE和和vC
15、JD感染因子在神经病理学上的一致性感染因子在神经病理学上的一致性 BSE和和vCJD感染因子（感染因子（PrP-res）在电泳类型和糖基化比例上的）在电泳类型和糖基化比例上的一致性一致性BSE感染因子可通过消化道自然或实验感染非人类灵长类动物，诱感染因子可通过消化道自然或实验感染非人类灵长类动物，诱发发vCJD类似的神经病理变化类似的神经病理变化转基因小鼠（人转基因小鼠（人PRNP）对）对BSE感染因子敏感感染因子敏感传染源因素（暴露机会增加）传染源因素（暴露机会增加）疯牛病感染因子污染疯牛病感染因子污染 欧洲旅游、旅居激增欧洲旅游、旅居激增传播途径因素传播途径因素 多途径多途径 血液及血液制
16、品血液及血液制品 饮食习惯饮食习惯易感人群易感人群 93汉族为汉族为129位位M/M临床表现：临床表现：进行性痴呆进行性痴呆肌阵挛肌阵挛视觉或小脑障碍视觉或小脑障碍锥体锥体/锥体外系功能异常锥体外系功能异常无动性缄默无动性缄默脑电图改变：脑电图改变：60-80%的病例出现特征性的的病例出现特征性的0.5-2 Hz的双相的双相/三相周期性复合波三相周期性复合波病理学改变：病理学改变：海绵状变性海绵状变性淀粉样斑块淀粉样斑块神经元丢失神经元丢失星状胶质细胞增生星状胶质细胞增生病程：病程：2年年CJDCJD的临床表现的临床表现潜伏期长潜伏期长发病后临床病程短发病后临床病程短病死率病死率100 sCJ
17、D的主要症状：的主要症状：症状症状具体表现具体表现前期症状前期症状注意力不集中，易疲劳、抑郁、头昏、下肢无力等，持续数周。注意力不集中，易疲劳、抑郁、头昏、下肢无力等，持续数周。早期症状早期症状行为的变化，情感反应异常和智能减退或伴有持物或走路不稳。行为的变化，情感反应异常和智能减退或伴有持物或走路不稳。大脑皮层功能损坏大脑皮层功能损坏判断能力和计算能力下降和各方面的智能下降，并进行性发展为痴呆判断能力和计算能力下降和各方面的智能下降，并进行性发展为痴呆锥体系锥体系/锥体外系症锥体外系症状状如手指徐动、指划样动作、肌张力呈铅管样、舞蹈样动作、静止性震如手指徐动、指划样动作、肌张力呈铅管样、舞蹈
18、样动作、静止性震颤。颤。肌阵挛肌阵挛90会出现，可从单侧某组肌群开始，进展成为双侧及多组肌群会出现，可从单侧某组肌群开始，进展成为双侧及多组肌群小脑功能障碍小脑功能障碍表现为眼球震颤、共济失调、自主运动等表现为眼球震颤、共济失调、自主运动等视觉障碍视觉障碍视力模糊、事物变形、视野缩小、复视，失明等视力模糊、事物变形、视野缩小、复视，失明等存活时间存活时间大部分病人在发病的大部分病人在发病的6至至12个月内死亡个月内死亡对于典型的对于典型的sCJD，在疾病的早期，病在疾病的早期，病人呈现广泛的慢波节律，随着病情的人呈现广泛的慢波节律，随着病情的加剧，脑电图则表现为阵发性爆发性加剧，脑电图则表现为
19、阵发性爆发性改变周期发放的高尖波幅的三相或改变周期发放的高尖波幅的三相或双相尖波（约每秒出现一次的三相周双相尖波（约每秒出现一次的三相周期性复合波）期性复合波）大约有大约有2/3病例具有此表现，但有的病例具有此表现，但有的病例始终无此现象。病例始终无此现象。对于其他亚型对于其他亚型sCJD，以及以及FFI和和vCJD，这种特征不明显。这种特征不明显。The typical periodic EEG seen in many cases of sporadic CJD vCJDvCJD各种神经症状的出现时间和频率分析各种神经症状的出现时间和频率分析CT和和MRI CT可用于发现病人的脑萎缩，但这
20、不是特异性的，不能判可用于发现病人的脑萎缩，但这不是特异性的，不能判定是否与定是否与PrPSC相关。相关。MRI同样可用于发现脑萎缩，如同样可用于发现脑萎缩，如T2 MRI，约约80%的情况能的情况能对对CJD显示一个增强的信号，同时能显示一些高强度的弥显示一个增强的信号，同时能显示一些高强度的弥散性图像序列。散性图像序列。MRI能把能把vCJD和和sCJD区分开来，因为区分开来，因为90%的的vCJD病人丘脑病人丘脑的的posterior pulvinar区域能显示一个高强度信号。区域能显示一个高强度信号。sCJD和和vCJD的的MRI差异差异(A)sCJD:axial FLAIR imag
21、e at the level of the basal ganglia showing symmetrical high signal in the caudate head and anterior putamen(arrows).(B)vCJD:axial FLAIR image at the level of the basal ganglia showing symmetrical high signal in the pulvinar and dorsomedial nuclei of the thalamus(arrows）确诊诊断确诊诊断 具有典型具有典型/标准的神经病理学改变，
22、和标准的神经病理学改变，和/或免疫细胞化学和或免疫细胞化学和/或或Western印迹法确定存在蛋白酶耐受性印迹法确定存在蛋白酶耐受性PrP临床诊断：临床诊断：具有进行性痴呆，在病程中出现典型的脑电图改变，和具有进行性痴呆，在病程中出现典型的脑电图改变，和/或脑脊液或脑脊液14-3-3蛋白阳性，以及至少具有以下蛋白阳性，以及至少具有以下4种临床表现中的两种：种临床表现中的两种：肌阵挛肌阵挛视觉或小脑障碍视觉或小脑障碍锥体锥体/锥体外系功能异常锥体外系功能异常无动性缄默无动性缄默以及临床病程短于以及临床病程短于2年年 疑似诊断疑似诊断 具有进行性痴呆，以及至少具有以下具有进行性痴呆，以及至少具有以
23、下4种临床表现中的种临床表现中的2种，种，肌阵挛肌阵挛 视觉或小脑障碍视觉或小脑障碍 锥体锥体/锥体外系功能异常锥体外系功能异常 无动性缄默无动性缄默 以及临床病程短于以及临床病程短于2年。年。所有诊断应排除其它痴呆相关疾病所有诊断应排除其它痴呆相关疾病 家族遗传性家族遗传性TSE包括家族性包括家族性CJD、吉斯特曼、吉斯特曼-施特施特劳斯综合征（劳斯综合征（Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome,GSS）、家族性致死性失眠症（）、家族性致死性失眠症（Fatal familial insomnia,FFI）。）。确诊诊断或临床诊断确诊诊断或临床诊断CJD
24、病人，具有一级亲属病人，具有一级亲属中的肯定或可疑的中的肯定或可疑的CJD病人，和病人，和/或本病特异的或本病特异的PrP基因突变。基因突变。家族性家族性CJD（fCJD）：）：点突变：105，145，160，178（129密码子为Val），180，183，187，188，196，200，208，210，211，212，232，238。八肽重复区域的多重24 bp插入突变。GSS：点突变：102，105，117，198，217。家族性致死性失眠症（家族性致死性失眠症（FFI）点突变：178（129密码子为Met）。病史病史 进行性神经精神障碍，病程进行性神经精神障碍，病程6个月，常规检查不提示
25、其它疾病，无医个月，常规检查不提示其它疾病，无医源性接触史源性接触史临床表现临床表现（1）早期精神症状（抑郁、焦虑、情感淡漠、退缩、妄想）早期精神症状（抑郁、焦虑、情感淡漠、退缩、妄想）（2）持续性疼痛感（疼痛和）持续性疼痛感（疼痛和/或感觉异常）或感觉异常）（3）共济失调）共济失调 （4）肌阵挛、舞蹈症、肌张力障碍）肌阵挛、舞蹈症、肌张力障碍 （5）痴呆）痴呆 临床检测临床检测（1）脑电图无典型的散发性）脑电图无典型的散发性CJD波型，或未进行脑电图检测波型，或未进行脑电图检测 （2）MRI质子密度相出现双侧丘脑后结节部高信号质子密度相出现双侧丘脑后结节部高信号扁桃体活检扁桃体活检 阳性阳性
26、（扁桃体活检不应作为常规检查，在脑电图出现典型的散发性（扁桃体活检不应作为常规检查，在脑电图出现典型的散发性CJD样波型后不样波型后不应进行。对临床表现与应进行。对临床表现与vCJD相似，而相似，而MRI未出现双侧丘脑后结节部高信号病未出现双侧丘脑后结节部高信号病例的诊断有意义。）例的诊断有意义。）临床资料提示脑脊液14-3-3的检测脑组织的病理学和PrP检测PRNP129的多态性+control30 KD1 2 3脑脊液中脑脊液中14-3-314-3-3蛋白的检测蛋白的检测 CJD病人脑脊液中病人脑脊液中14-3-3蛋白含量往往增高。脑脊液经蛋白含量往往增高。脑脊液经SDS-PAGE电泳、电
27、转后，与电泳、电转后，与14-3-3蛋白特异性抗体进行蛋白特异性抗体进行Western blot反应。蛋白条带显色后，位置在反应。蛋白条带显色后，位置在30 KD左右。左右。阳阳性对照采用兔脑组织匀浆液，或阳性性对照采用兔脑组织匀浆液，或阳性14-3-3脑脊液。脑脊液。显色后显色后在在30 KD位置出现条带，与阳性对照中蛋白条带泳动位置相同，位置出现条带，与阳性对照中蛋白条带泳动位置相同，即可判定为脑脊液中即可判定为脑脊液中14-3-3阳性。阳性。10 l脑脊液脑脊液15%SDS-PAGE转膜转膜特异性抗体检测特异性抗体检测判断结果判断结果诊断诊断CJD的重要实验室指标，但不作为筛选指标的重要
28、实验室指标，但不作为筛选指标敏感性敏感性:90-97%特异性特异性:87-100%诊断：诊断：1.进行性痴呆少于进行性痴呆少于2年年 2.14-3-3阳性阳性sCJD中EEG的诊断脑脊液中重要的检查指标就是脑脊液中重要的检查指标就是14-3-3蛋白的含量，尤其是针对蛋白的含量，尤其是针对sCJD。Alzheimers disease和其它痴呆症的患者脑脊液中不能检出和其它痴呆症的患者脑脊液中不能检出14-3-3蛋白。蛋白。但一些组织器官坏死疾病，如病毒性脑炎，但一些组织器官坏死疾病，如病毒性脑炎，14-3-3蛋白检测呈蛋白检测呈阳性。阳性。对于更多的病程缓慢的对于更多的病程缓慢的CJD，如家族
29、性如家族性TSE和和vCJD，14-3-3蛋白蛋白的检测常呈阴性。的检测常呈阴性。WHO在在2019年报道，对于年报道，对于vCJD的诊断，检测的诊断，检测14-3-3蛋白只有蛋白只有53%的敏感性。的敏感性。iCJD：与疾病发展的不同阶段相关：与疾病发展的不同阶段相关fCJD：与患者不同的：与患者不同的PRNP点突变相关点突变相关vCJD：检测率：检测率50-60%CJD的病理学特点的病理学特点 CJD：在大脑、小脑皮质、皮质下灰质中出现海绵状病变；在大脑、小脑皮质、皮质下灰质中出现海绵状病变；和和/或具有或具有PrPSc的沉积。的沉积。vCJD：有大量的有大量的PrPSc沉积的海绵状变性，
30、周围围绕着一圈沉积的海绵状变性，周围围绕着一圈海绵状空泡的海绵状空泡的PrP斑块（花瓣样）。小脑细胞周围和血管周围斑块（花瓣样）。小脑细胞周围和血管周围的无明确形态的的无明确形态的PrP 斑块。斑块。GSS：家族成员具有显性遗传特征的进行性共济失调和家族成员具有显性遗传特征的进行性共济失调和/或痴呆，以及或痴呆，以及PrP基因突变。脑（脊髓）组织中出现多中心基因突变。脑（脊髓）组织中出现多中心PrP斑块。斑块。FFI：178位基因突变及位基因突变及129位甲硫氨酸多态性；具有视神经萎缩，小脑位甲硫氨酸多态性；具有视神经萎缩，小脑的海绵状改变，的海绵状改变，丘脑的中背部和前部核群的神经元丢失和星
31、型神经胶质化丘脑的中背部和前部核群的神经元丢失和星型神经胶质化。脑组织切片脑组织切片 sCJD：白色空泡状斑点是：白色空泡状斑点是TSE患者脑组织切片的典型特征，患者脑组织切片的典型特征，sCJD的空泡细小，均匀分布。的空泡细小，均匀分布。正常脑组织切片正常脑组织切片vCJD：它的空泡相对较大，呈簇它的空泡相对较大，呈簇聚集，呈斑块状，称为聚集，呈斑块状，称为florid plaques或者或者daisy plaques这这是是vCJD的特点。的特点。CJD 病人脑组织切片中的海绵样变（右）病人脑组织切片中的海绵样变（右）PrPPrPScSc的的Western blotWestern blot
32、方法是利用方法是利用PrPPrPScSc具有抵抗蛋白酶具有抵抗蛋白酶K K水解作用的特点，提取脑组织蛋白，经水解作用的特点，提取脑组织蛋白，经PKPK处理后，处理后，SDS-PAGESDS-PAGE电泳分离蛋白分子，转移至硝酸纤维素膜，再通过与电泳分离蛋白分子，转移至硝酸纤维素膜，再通过与PrP特特异性单克隆抗体反应，与未经异性单克隆抗体反应，与未经PKPK处理相比，观察是否有蛋白处理相比，观察是否有蛋白位置下移的特异性反应条带，位置在位置下移的特异性反应条带，位置在1727 KD左右。该方法左右。该方法具有准确、操作简单的特点。该方法甚至可以从动物或人未具有准确、操作简单的特点。该方法甚至可
33、以从动物或人未出现症状时，即可检测出异常的出现症状时，即可检测出异常的PrPPrPScSc，可提供蛋白特异的分，可提供蛋白特异的分子构型，因此，结果的解释更具有可信性，同时可对朊病毒子构型，因此，结果的解释更具有可信性，同时可对朊病毒株进行鉴别。株进行鉴别。脑组织脑组织PrPSc的的 WB检测方法检测方法10%脑组织匀浆脑组织匀浆20-50 g/ml PK消化消化5-20 l 15%SDS-PAGE转膜转膜特异性抗体检测特异性抗体检测判断结果判断结果0.5 h1 h3 h2 h0.5 h流程流程时间时间原理原理PK+PK+PK+PK+PK+PK+PK+PK-PK+PK+PK+PK+PK-43
34、KD21 KD43 KD21 KD原理原理 PrPScPrPSc具有抵抗变性剂、蛋白酶水解破坏作用，组织切片经高压水解、具有抵抗变性剂、蛋白酶水解破坏作用，组织切片经高压水解、变性剂或蛋白酶处理破坏正常变性剂或蛋白酶处理破坏正常PrPCPrPC蛋白后，以蛋白后，以PrPPrP蛋白特异性抗体进行免蛋白特异性抗体进行免疫组织化学染色，光学显微镜下观测疫组织化学染色，光学显微镜下观测PrPScPrPSc蛋白沉积。蛋白沉积。免疫组织化学法免疫组织化学法正常脑组织正常脑组织sCJD 棕色斑点均匀棕色斑点均匀 而广泛地分布而广泛地分布 在视野内在视野内vCJD 深棕色的斑块，深棕色的斑块，呈不均匀分布，呈
35、不均匀分布，出现聚集的特点出现聚集的特点 sCJDsCJD病人中病人中129129位氨基酸纯合位氨基酸纯合子比例比正常人群高（子比例比正常人群高（8989，4949）。）。129129为氨基酸纯合子比为氨基酸纯合子比杂合子更容易患杂合子更容易患sCJDsCJD。在目前已知的在目前已知的150150多例多例vCJDvCJD病病人为人为129Met129Met的纯合子的纯合子129129位氨基酸的多态性决定了同位氨基酸的多态性决定了同一致病突变的两种不同的表型一致病突变的两种不同的表型通过血液样本检测。通过血液样本检测。129M387 bp75 bpM/V462 bp 300 bp387 bp46
36、2 bp300 bp75 bpNspI NspI300 bpM：甲硫氨酸：甲硫氨酸V:缬氨酸缬氨酸M/MV/VCJD :Genetic Predispositionform normal sCJD iCJD vCJDM/V 45%16%7%M/M 43%70%60%100%V/V 12%14%33%Relative risk rateMM/VV/MV 11:4:1CJDCJD的其它实验室检验的其它实验室检验 免疫测定免疫测定 免疫化学鉴定免疫化学鉴定 构象依赖性免疫检测构象依赖性免疫检测 动物鉴定动物鉴定 无细胞转化无细胞转化 毛细管电泳法毛细管电泳法 多谱紫外荧光光谱分析法多谱紫外荧光光谱分
37、析法 荧光相关光谱分析法荧光相关光谱分析法 傅立叶转换红外光谱法傅立叶转换红外光谱法扁桃腺切片扁桃腺切片 扁桃腺切片已用于对疑似扁桃腺切片已用于对疑似vCJD患者的检查。免疫组化法显患者的检查。免疫组化法显示扁桃腺切片不适用于对示扁桃腺切片不适用于对sCJD患者的诊断。原因可能包括患者的诊断。原因可能包括种间屏障和种间屏障和vCJD可经口腔传播。现在没有足够多的病例来可经口腔传播。现在没有足够多的病例来检验这种辅助检测手段的敏感性。检验这种辅助检测手段的敏感性。现在依然不清楚在人的淋巴组织中要经过多久才会出现现在依然不清楚在人的淋巴组织中要经过多久才会出现PrPsc聚集的症状，也不清楚是否每一
38、个阳性结果都会导致聚集的症状，也不清楚是否每一个阳性结果都会导致致死性的致死性的CNS疾病。疾病。对自然感染搔痒病的羊和实验室感染对自然感染搔痒病的羊和实验室感染TSE的小鼠的研究表的小鼠的研究表明，在出现临床症状之前的很长一段时间，就可以在淋巴明，在出现临床症状之前的很长一段时间，就可以在淋巴组织中检测到组织中检测到PrPsc。低发病率：低发病率：12人人/百万百万极高病死率：极高病死率：100医源性传播：医源性传播：潜在危险潜在危险人人传播：人人传播：kuru人兽传播：人兽传播：羊瘙痒病羊瘙痒病人人传染源传染源传播途径传播途径易感人群易感人群罕见罕见多样多样但不易形成但不易形成易感易感 农
39、业畜牧业农业畜牧业 人类公共卫生健康人类公共卫生健康 食品化妆品食品化妆品 医药产业医药产业 新兴生物技术新兴生物技术 由于对由于对TSE感染因子和发病机理有限的认识，对类感染因子和发病机理有限的认识，对类似的神经退行性疾病缺少有效的治疗，同时发病后的免似的神经退行性疾病缺少有效的治疗，同时发病后的免疫耐受使得特异性预防难以实现，因此对于疯牛病暴发、疫耐受使得特异性预防难以实现，因此对于疯牛病暴发、防止对人类形成灾难性的后果以及在可预见的时期内彻防止对人类形成灾难性的后果以及在可预见的时期内彻底消灭疯牛病只有依靠有效的监控（包括动物底消灭疯牛病只有依靠有效的监控（包括动物TSE及人及人CJD的
40、监控）。的监控）。2019年中国预防医学科学院朊病毒检测中心年中国预防医学科学院朊病毒检测中心 2019年由中国疾病预防中心病毒病预防控制所朊病毒室负责开始我年由中国疾病预防中心病毒病预防控制所朊病毒室负责开始我国部分城市的国部分城市的CJD监控工作，包括北京、长春、西安和武汉。监控工作，包括北京、长春、西安和武汉。2019年病毒所朊病毒室和北京友谊医院神经内科完成了年病毒所朊病毒室和北京友谊医院神经内科完成了“克克-雅氏病雅氏病的诊断标准及处理原则的诊断标准及处理原则”的制定的制定 2019年底我国的年底我国的CJD监控被监控被WHO纳入全球监控网络纳入全球监控网络 2019年年3月月CJD
41、监控项目负责人会议监控项目负责人会议 2019年年12月对包括北京、吉林、陕西、湖北、上海、贵州、重庆和月对包括北京、吉林、陕西、湖北、上海、贵州、重庆和广东监测定点医院进行了广东监测定点医院进行了CJD监测的临床和实验室培训监测的临床和实验室培训 CJD surveillance network 2019-2019监测省（市）：监测省（市）：10个个北京、吉林、陕西、湖北北京、吉林、陕西、湖北上海、广东、重庆、贵州、天津、安徽上海、广东、重庆、贵州、天津、安徽中国中国CDC省省CDC定点医院定点医院1）统一使用统一使用“克克-雅氏病诊断标准和处理原则雅氏病诊断标准和处理原则”，统一使，统一使
42、 用用CJD报告表格。报告表格。2）监测散发性监测散发性CJD的发病病例和发病情况，了解我国的发病病例和发病情况，了解我国 CJD发病的状况。发病的状况。3）严密监测在我国是否有严密监测在我国是否有vCJD病例出现。病例出现。4）对我国对我国CJD病人进行必要的流行病学调查。病人进行必要的流行病学调查。5）建立我国建立我国CJD病人脑组织、脑脊液和血液标本库病人脑组织、脑脊液和血液标本库6）对对CJD病例进行分型。病例进行分型。1）我国主要城市我国主要城市CJD发病病例和发病情况发病病例和发病情况2）我国我国CJD病人发病特点和流行病学特点病人发病特点和流行病学特点3）我国我国CJD病人病人P
43、RNP基因型特点基因型特点4）我国有无我国有无vCJD病例的出现病例的出现 第一阶段：第一阶段：1）继续推广使用继续推广使用CJD诊断标准和诊断标准和CJD报告表格报告表格2）了解我国主要城市了解我国主要城市CJD发病病例发病病例第二阶段：第二阶段：1）了解我国了解我国CJD病人发病特点和流行病学特点病人发病特点和流行病学特点2）了解我国了解我国CJD病人病人PRNP基因型特点基因型特点第三阶段：第三阶段：1）严密观测我国有无严密观测我国有无vCJD病例的出现病例的出现2）综合分析我国综合分析我国CJD发病特征发病特征 （一）监测对象（一）监测对象1出现进行性痴呆、肌阵挛、锥体出现进行性痴呆、
44、肌阵挛、锥体/锥体外系功能异常视觉锥体外系功能异常视觉障碍等临床症状和体征的病人障碍等临床症状和体征的病人250岁以下出现精神症状和进行性痴呆病人岁以下出现精神症状和进行性痴呆病人（二）监测病例定义（二）监测病例定义 1散发型散发型CJD 2医源型医源型CJD 3家族遗传型家族遗传型CJD 4变异型变异型CJD（variant CJD,vCJD）（1）病例个案调查）病例个案调查包括一般信息、病人信息、发病情况（发病时间、临床首包括一般信息、病人信息、发病情况（发病时间、临床首发症状、死亡时间）、诊断、临床和实验室检测、病材收集等信发症状、死亡时间）、诊断、临床和实验室检测、病材收集等信息息（2
45、）流行病学调查）流行病学调查包括病人家族史、居住地信息、旅游或旅居信息、饮食习包括病人家族史、居住地信息、旅游或旅居信息、饮食习惯等信息惯等信息（3）标本采集）标本采集包括尸（活）检脑组织（全脑、部分脑组织）、脑脊液、包括尸（活）检脑组织（全脑、部分脑组织）、脑脊液、血液和其它组织血液和其它组织（4）实验室检测）实验室检测包括脑组织常规神经病理学检测（包括脑组织常规神经病理学检测（HE染色），染色），PrPSc检测检测（Western blot、免疫组化、电镜），脑脊液、免疫组化、电镜），脑脊液14-3-3蛋白检测蛋白检测（Western blot），血液或组织），血液或组织PRNP基因检测基因检测 中国中国CDC疾病控制与应急处理办公室疾病控制与应急处理办公室国家级国家级CJD监测机构监测机构（中国（中国CDC病毒病所朊病毒室）病毒病所朊病毒室）省（市）省（市）CJD监测机构监测机构（北京、陕西、吉林、湖北、上海、重庆、广东、贵州、天津、安徽（北京、陕西、吉林、湖北、上海、重庆、广东、贵州、天津、安徽CDC 定点临定点临床医院）床医院）其它城市其它城市 Clinical Cycle of DiagnosisSurveillanceData CollectionFeedback谢谢！谢谢！
