1、江苏省句容中等专业学校1细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校2知识回顾知识回顾1.什么是什么是微生物？微生物？2.细菌简单染色及其操作步骤细菌简单染色及其操作步骤？细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校3引导探索引导探索细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校41.革兰氏染色的基本原理革兰氏染色的基本原理2.革兰氏染色所需要的材料和器材革兰氏染色所需要的材料和器材3.革兰氏染色的操作方法及步骤革兰氏染色的操作方法及步骤4.革兰氏染色结果分析革兰氏染色结果分析5.小结小结学习内容学习内容细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省
2、句容中等专业学校51.能够说出革兰氏染色的基本原理。能够说出革兰氏染色的基本原理。2.能够描述出革兰氏染色法的操作步骤及注意事项。能够描述出革兰氏染色法的操作步骤及注意事项。3.能够熟练规范的对细菌进行革兰氏染色。能够熟练规范的对细菌进行革兰氏染色。通过本节课学习，学生能够达到以下目标：通过本节课学习，学生能够达到以下目标：学习目标学习目标细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校6 1.革兰氏染色法革兰氏染色法 革兰氏染色法是革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。细菌所创立的。细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，先经
3、碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，复复染染后可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（后可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性）和革兰氏阴性菌（菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。染色的基本原理染色的基本原理细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校72.革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较染色的基本原理染色的基本原理细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 肽聚糖肽聚糖江苏省句容中等专业学校81.材料材料 培养培养12-16h枯草杆菌（枯草杆菌（Bacillus subtilis
4、）培养培养16h大肠杆菌（大肠杆菌（Escherichia coli）2.染色液和试剂染色液和试剂 草酸铵结晶紫、碘液、草酸铵结晶紫、碘液、95%乙醇、蕃红乙醇、蕃红、二甲苯、香柏油、二甲苯、香柏油3.器材器材 载玻片、接种环、酒精灯、废液缸、洗瓶、擦镜纸、显微镜等载玻片、接种环、酒精灯、废液缸、洗瓶、擦镜纸、显微镜等需要的材料及器材需要的材料及器材细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校9涂片涂片干燥干燥固定固定初染初染水洗水洗媒染媒染水洗水洗脱色脱色水洗水洗 复染复染水洗水洗干燥干燥观察观察实验步骤实验步骤细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校10
5、实验方法及步骤实验方法及步骤-涂片、干燥、固定涂片、干燥、固定细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校11革兰氏染色步骤革兰氏染色步骤-染色染色碘液媒染1min脱色脱色2030s草酸铵结晶紫草酸铵结晶紫染色染色1-2min媒染目的是提高染料和菌体细胞媒染目的是提高染料和菌体细胞的结合程度，在细胞壁内形成了的结合程度，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物不溶于水的结晶紫与碘的复合物脱色后使革兰氏阴性菌变为无色脱色后使革兰氏阴性菌变为无色 细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校12蕃红复染蕃红复染 12min复染的目的是使被脱色的细胞染复染的目的是
6、使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色，而未被上不同于初染液的颜色，而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色脱色的细胞仍然保持初染的颜色，从而将细胞区分成，从而将细胞区分成G+和和G-两大两大类群类群革兰氏染色步骤革兰氏染色步骤-复染复染细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校13革兰染色结果革兰染色结果细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容中等专业学校14思考讨论：细菌革兰氏染色的意义？思考讨论：细菌革兰氏染色的意义？1.鉴别细菌鉴别细菌 2.选择药物选择药物 3.与致病性有关与致病性有关江苏省句容中等专业学校15小结小结细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 江苏省句容
7、中等专业学校16课堂检测课堂检测1.细菌革兰氏染色的步骤包括：涂片、细菌革兰氏染色的步骤包括：涂片、_、_、_、_、_、_ 和镜检。和镜检。2.革兰氏阳性菌呈革兰氏阳性菌呈 _ 色，革兰氏阴性菌呈红色。色，革兰氏阴性菌呈红色。3.细菌染色多采用细菌染色多采用 _ 染料染料4.革兰氏染色的关键步骤是（）革兰氏染色的关键步骤是（）A 脱色脱色B 媒染媒染C 复染复染D 固定固定5.当对未知菌进行革兰氏染色时，如何保证操作正确及结果可靠？当对未知菌进行革兰氏染色时，如何保证操作正确及结果可靠？细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法 作业：作业：1.简述革兰氏染色的原理。简述革兰氏染色的原理。2 2.为什么说酒精脱色是革兰氏染色的关键步骤？为什么说酒精脱色是革兰氏染色的关键步骤？
