1、“十二五”职业教育国家规划教材编写组 食品理化检验技术（第二版）子情境二 农药残留量的测定学习情境四学习情境四 学习目标知识目标：1.了解食品中常见农药的种类和农药残留的概念。2.熟悉食品中常见农药残留的检测方法。3.掌握气相色谱法测定食品中有机磷农药的原理及操作要点。技能目标：1.能对样品进行处理，配制标准溶液。2.会使用气相色谱仪、高效液相色谱仪等仪器。3.能对食品中有机磷农药进行测定。子情境二 农药残留量的测定杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀螨剂、植物生长调节剂、杀鼠药 农药残留是指农药施用后，残存在生物体、农副产品和环境中的微量农药原体、有毒代谢产物、降解物和杂质的总称。残留的数量叫残留量。
2、农药残留是目前影响我国食品和农产品安全的主要因素，已经给我国农产品销售、出口和消费者的身体健康带来了严重影响。学习情境四学习情境四 学习情境四学习情境四 对人体危害：通过食物和水的摄入、空气吸入和皮肤接触等途径对人体造成多方面的危害，如急、慢性中毒和致癌、致畸、致突变作用等；对环境危害：污染环境，破坏生态平衡。污染食品：使一些食品残留少量农药。食品中农药残留的来源：1.施用农药对农作物的直接污染 2.农作物从污染的环境中吸收农药 3.通过食物链、生物富集污染食品 4.其他来源的污染：事故性污染学习情境四学习情境四 有机氯杀虫剂 有机磷杀虫剂 拟除虫菊杀虫剂 氨基甲酸酯杀虫剂主要农药学习情境四学
3、习情境四 一、食品中有机磷农药残留量的测定 是含有CP键或COP、CSP、CNP键的有机化合物。应用广。1、分类：高毒有机磷 （早期发展，现已被禁止使用）如对硫磷（1605）、内吸磷（1059）、甲胺磷（3911）等；中等毒有机磷 如乐果、杀螟松、倍硫磷等；低毒有机磷 如敌百虫、马拉硫磷、双硫磷等。学习情境四学习情境四 S(C2H5O)2PNO2O一六0五(CH3O)2PSCH2CONHCH3O乐乐 果果(CH3O)2PSCCHCOOCH3CH3O甲胺磷甲胺磷学习情境四学习情境四 2、特点化学性质不稳定，易分解，污染食品后残留时间短，在生物体不易蓄积。在加工处理过程（碾磨、洗涤、去皮、烹调）中
4、可减少。以急性毒性为主，表现出神经中毒症状。长时间接触对肝脏功能有损。过量或施用时期不当或使用高毒农药 是造成有机磷农药污染食品的主要原因我国食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量（GB 2763）对322种农药2293项最大残留限量作出了具体的规定。学习情境四学习情境四 检测依据GB/T5009.20-20032粮、菜、油中有机磷农药残粮、菜、油中有机磷农药残留量的测定留量的测定学习情境四学习情境四 3肉类、鱼类中有机磷农药残肉类、鱼类中有机磷农药残留量的测定留量的测定1水果、蔬菜、谷类中有机磷水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留的测定农药的多残留的测定食品中有机磷农药残留量的测定 原理：
5、果蔬中有机磷残留提取有机溶剂净化气化注入GC 浓缩色谱柱中分离FPD检测记录色谱峰比较样品和标准品的色谱峰外标定量（多用峰高）学习情境四学习情境四 测定原理水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留的测定GB/T5009.20-2003第一法学习情境四学习情境四 含有机磷的试样在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526nm的特性光。这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。（一）仪器及试剂 学习情境四学习情境四 仪器 组织捣碎机。粉碎机。旋转蒸发器。气相色谱仪:附有火焰光度检测器(FPD)。
6、试剂 丙酮。二氯甲烷。氯化钠。无水硫酸钠。助滤剂Celiee545。农药标准品:敌敌畏99%，速灭磷顺式60%，反式40%，久效磷99%，甲拌磷98%，巴胺磷99%，二臻农98%，乙噶硫磷97%，甲基嘧啶硫磷99%，甲基对硫磷99%，稻瘟净99%，水胺硫磷99%，氧化唾硫磷99%，稻丰散99.6%，甲喹硫磷99.6%，克线磷99.9%，乙硫磷95%，乐果99.0%，喹硫磷98.2%，对硫磷99.0%，杀螟硫磷98.5%。学习情境四学习情境四 标准溶液的配制 分别准确称取标准品，用二氯甲烷为溶剂，分别配制成1.0mg/ml，的标准储备液，储于冰箱(4)中。使用时用二氯甲烷分别稀释成1.0ug/m
7、L的标准使用液。再根据各农药品种的最小检测限，吸取不同量的标准储备液，用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。取粮食样品经粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样;取水果、蔬菜样品洗净，晾千，去掉非可食部分后制成待测试样。学习情境四学习情境四 （二）试样的制备果蔬搅碎足量的无水硫酸钠30100g取样10g振摇0.5h脱色70ml二氯甲烷脱水定容至2ml过滤35ml滤液室温通风挥至近干移入5ml具塞刻度试管0.20.8g 活性炭二氯甲烷多次研洗残渣样品处理不同种类样品，处理方法有所不同。不同种类样品，处理方法有所不同。学习情境四学习情境四 称取5000g水果、蔬菜试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和1
8、00mL丙酮(总体积150mL)。用组织捣碎机捣12min。匀浆液经铺有两层滤纸和约10gCelite545的布氏漏斗，减压抽滤。从滤液中分取100mL，移至500mL分液漏斗中。称取25.00g谷物试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮，以下同上一步骤。向以上两种滤液中，加入1015g氯化钠，使呈饱和状态。猛烈振摇23min，静置10min，使丙酮从水相中盐析出来，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再静置分层。将丙酮与二氯甲烷提取液合并，并经装有20一30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水，滤人250mL圆底烧瓶中。再以约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，洗涤液也并人
9、烧瓶中。用旋转蒸发器浓缩至约2mL，浓缩液定量转移至525mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。（三）提取（四）净化学习情境四学习情境四 气相色谱条件：色谱柱:a玻璃柱2.6m3mm(i.d)，填装涂有4.5%(质量分数)DC200十2.5%(质量分数)OV-I7的ChromosorbWAWDMCS(80100目)的担体。b玻璃柱2.6m3mm(id)，填装涂有1.5%(质量分数):DCOE-l的ChromosorbWAWDMCS(60一80目)。气体速度:氮气(N，)50nll/Min,氢气(H2)100ml/min、空气50mL/min。温度:柱温240，汽化室260，检测器270。（五）测
10、定学习情境四学习情境四 二氯甲烷作提取剂毒性较小较便宜说明：国际上多用乙腈作为有机磷农药的提取剂及分配净化试剂，但其毒性较大，且较贵。测定：吸取25uL混合标准液及样品净化液，注入色谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。学习情境四学习情境四 结果计算式中：Xii组分有机磷农药的含量，mg/kg；Ai试样中i组分的峰面积，积分单位；Asi混合标准液中i组分的峰面积，积分单位；V1试样提取液的总体积，mL；V2净化用提取液的总体积，mL；V3浓缩后的定容体积，mL；V4进样体积，L；Esi注入色谱仪中的i标准组分的质量，ng；m试样的质量，g。计算结果保留两位有效数字。精密度
11、：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的%。学习情境四学习情境四 16种有机磷农药的色谱图 学习情境四学习情境四 二、食品中有机氯农药残留量的测定 学习情境四学习情境四 1.有机氯农药有机氯农药(OCPs)是具有杀虫活性的氯代烃的总称。OCPs分为滴滴涕及其类似物、六六六和环戊二烯衍生物，均为神经毒性物质；常见的OCPs有滴滴涕、六六六、林丹、氯丹、硫丹、毒杀芬、七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂等；毒性特点：难分解、半衰期10年以上，高残留；污染食品严重，脂溶性强，蓄积于脂肪和脂肪高的组织；中等毒性，致癌、致畸作用。性质：不溶于水，易溶于脂肪、丙酮、乙醇、石油醚、环己
12、烷，对光、热、酸稳定，对碱不稳定。有多种异构体较强杀虫作用学习情境四学习情境四 检测依据GB/T5009.19-20082填充柱气相色谱填充柱气相色谱-电子捕获检电子捕获检测器法测器法学习情境四学习情境四 1毛细管柱气相色谱毛细管柱气相色谱-电子捕获电子捕获检测器法检测器法填充柱气相色谱-电子捕获检测器法学习情境四学习情境四 配标准混合使用液样品提取（用丙酮、己烷、乙醚、石油醚等）与净化（用H2SO4磺化）、浓缩（旋转蒸发器）、GC检测、ECD检测器。色谱柱用硬质玻璃柱，若用不锈钢柱，易引起农药分解。液体样品采样，应用玻璃瓶，不能用塑料瓶。固定相：固定相：1.5OV17和和2QF1混合固定液的混合固定液的80-100目硅藻土目硅藻土学习情境四学习情境四 有机磷农药是目前我国使用最普遍的农药，残留在蔬菜上的农药进入人体，可引起各系统和功能的损害。因此国家对蔬菜中农药残留量的控制要求越来越严格，其中敌敌畏、对硫磷等是其中必检项目。通过查阅食品中有机磷农药残留量的测定（GB/T 5009.20），小组讨论后制订检验方案，正确测定蔬菜中有机磷农药的残留量，并与食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量（GB 2763）规定限量比较，以确定样品中有机磷农药的残留量是否合格。学习情境四学习情境四
