1、第三章第三章 药物的药物的杂质检查杂质检查第一节 概述第二节 一般杂质的检查方法第三节 特殊杂质的检查方法 第一节第一节 概述概述1 杂质的杂质的来源来源与与种类种类2 药物的纯度要求药物的纯度要求三三 杂质的限量检查杂质的限量检查来来 源源1生产过程引入2 贮藏过程引入生产过程引入生产过程引入（1）原料药（2）制剂药（3）试剂和溶剂、容器和工具（4）生产操作人员：人员污染种种 类类1 按来源分：一般杂质和特殊杂质2按性质分：信号杂质（%）和有害杂质（ppm)药物的纯度要求药物的纯度要求1 制订杂质检查项目的依据 2 对杂质检查项目的理解与使用3 药物纯度的评价指标 4 药物纯度与化学纯度的根
2、本区别杂质的限量检查杂质的限量检查1 杂质限量检查的合理性2 限量检查的方法3 限量的大小及单位4 限量的计算%100ScVL供试品量标准溶液浓度标准溶液体积杂质量供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量 杂质限量的计算杂质限量的计算第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 一 氯化物检查法 二 硫酸盐检查法 三 砷盐检查法 四 铁盐检查法 五 重金属检查法 六 炽灼残渣检查法 七 干燥失重测定法 八 有机溶剂残留量测定法 九 溶液颜色检查法 十 溶液澄清度检查法 十一 易炭化物检查法氯化物检查法氯化物检查法1 原理 2 方法3 实例4 讨论5 供试品的处理氯化物检查法的原理氯化物检查法
3、的原理白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3 白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3 Vc供试品的处理供试品的处理（1）沉淀：滤过（2）颜色：对照溶液背景颜色的制备 利用有色物质的氧化还原性质（3）共有反应：利用干扰物质与被测物质间的性质差异（4）Cl元素的存在形式：破坏共价键为离子键硫酸盐检查法的原理硫酸盐检查法的原理白色浑浊药物：4HCl224BaSOBaClSO白色浑浊）、（对照：4HCl242BaSOBaClSOKVc砷盐检查法砷盐检查法（一）（一）古蔡法古蔡法（二）（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法二乙基二硫代氨基甲酸银法古蔡法古蔡法 Ch.P、BP1 原理原理2
4、装置装置3 方法方法4 注意事项注意事项5 供试品的处理供试品的处理 遇遇HgBr2试纸生成黄色棕色的试纸生成黄色棕色的砷斑，与砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。下生成的砷斑比较。原原 理理2HHCl2Zn3332AsHAsOH古蔡法注意事项古蔡法注意事项（1）溶液的浓度）溶液的浓度（2）氢气发生的速度）氢气发生的速度（3）As5+的反应速度的反应速度（4）酸性氯化亚锡与碘化钾的作用）酸性氯化亚锡与碘化钾的作用（5）醋酸铅棉花的作用）醋酸铅棉花的作用（6）砷斑不稳定，应立即检视。）砷斑不稳定，应立即检视。二乙基二硫代氨基甲酸银法二乙基二硫代氨基甲酸银法（s
5、ilver diethyldithiocarbamate）Ag（DDC）法 Ch.P、USP 1 原理 2 装置 3 方法 4 注意事项Ag-DDC法的原理法的原理2HHClZn3HDDC6Ag(DDCAs 6Ag(DDC)AsH33红色）砷化氢还原Ag(DDC)为红色胶态银目视比色或于510nm波长处测定吸收度3332AsHAsOH铁盐检查法铁盐检查法硫氰酸盐法的原理硫氰酸盐法的原理巯基醋酸法的原理巯基醋酸法的原理铁盐检查法铁盐检查法硫氰酸盐法的原理硫氰酸盐法的原理 红色药物：36HClFeFeFeSCNFe6SCN3o23红色、对照：36HCl3SCNFe6SCNFeVc铁盐检查法铁盐检查
6、法巯基醋酸法的原理巯基醋酸法的原理红色药物：巯基醋酸巯基醋酸枸橼酸OHNH22%20FeFe2332Feml红色对照：巯基醋酸巯基醋酸枸橼酸OHNH22%20323FeFeml重金属检查法重金属检查法以铅为代表（一）第一法（二）第二法（三）第三法（四）第四法重金属检查法（第一法）重金属检查法（第一法）1 适用范围 2 原理 3 方法 4 讨论 5 供试品的处理 （1）颜色 （2）Fe+3 （3）其他 硫代乙酰胺法的原理硫代乙酰胺法的原理SHCONHCHOHCSNHCH223pH3.5223 黄色棕黑色药物：PbSSHPbpH3.522 黄色棕黑色、对照：PbSSH)Pb(NOpH3.5223
7、Vc 重金属检查法（第二法）重金属检查法（第二法）1 适用范围：药物分析的多数情况适用范围：药物分析的多数情况2 原理原理3 方法方法4 注意事项：温度等注意事项：温度等 依一法检查氯化物残渣置坩埚中样品：缓冲液左右调节至、炽灼残渣mlS0.25.3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6005002323依一法检查的试剂置坩埚中对照：配制供试品溶液溶液）（标准，缓冲液232NOPbOH0.25.3pHml炽灼残渣法炽灼残渣法重金属检查法（第三法）重金属检查法（第三法）1 适用范围 2 原理（显色剂：硫化钠）硫化钠法的原理硫化钠法的原理黄色棕黑色药物：PbSSNaPbNaOH22 黄色棕黑色、
8、对照：PbSSNa)Pb(NONaOH223 Vc重金属检查法（第四法）重金属检查法（第四法）1 适用范围 2 原理（微孔滤膜法）3 试验装置 4 方法 5 注意事项炽灼残渣检查法炽灼残渣检查法 原理原理 方法方法 注意事项注意事项原原 理理%100%供试品重空坩埚重残渣及坩埚重炽灼残渣 加硫酸处理，是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化。操作方法残渣（恒重）蒸气除尽至放冷至全部黑色、无烟雾，炽灼至恒重的坩埚样品高温灼烧湿润，直火加热直火缓缓加热8007004215.0SOHSOH42ml 注意事项注意事项 （1）供试品的取样量）供试品的取样量（2）加热）加热 若残渣需留作重金属检查，则
9、于若残渣需留作重金属检查，则于500600炽灼至恒重。炽灼至恒重。含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。（3）瓷坩埚的编号）瓷坩埚的编号 干燥失重测定法干燥失重测定法（一）（一）常压恒温干燥法常压恒温干燥法（二）（二）干燥剂干燥法干燥剂干燥法（三）（三）减压干燥法减压干燥法（四）（四）热分析法热分析法 干燥失重是指药物在规定条件下经干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量。干燥后所减失的重量。减失的重量主要是水分，也包括其减失的重量主要是水分，也包括其他挥发性物质。他挥发性物质。干燥失重：第二次及以后各次称重干燥失重：第二次及以后各次称重均应在
10、规定条件下继续干燥均应在规定条件下继续干燥1h后进行。后进行。常压恒温干燥法常压恒温干燥法适用范围：受热较稳定的药物适用范围：受热较稳定的药物方法方法注意事项注意事项安全安全干燥剂干燥法干燥剂干燥法适用范围：受热易分解或易挥发的供试品。适用范围：受热易分解或易挥发的供试品。方法方法干燥剂：硅胶、浓硫酸、干燥剂：硅胶、浓硫酸、P2O5。减压干燥法减压干燥法适用范围：熔点低、受热不稳定或水分难驱除的药物。适用范围：熔点低、受热不稳定或水分难驱除的药物。原理原理方法：除另有规定外，压力应控制在方法：除另有规定外，压力应控制在2.67kPa（20mmHg）以下。）以下。注意事项注意事项 安全：安全：减
11、压干燥器减压干燥器（玻璃）、（玻璃）、减压干燥箱减压干燥箱 热分析法热分析法1 热重分析法热重分析法（TGA）2 差示热分析法差示热分析法（DTA）3 差示扫描量热法差示扫描量热法（DSC）热分析法热分析法 在程序控制温度下，在程序控制温度下，精确记录待测物质理化性精确记录待测物质理化性质的变化与温度的关系质的变化与温度的关系，研究待测物质在受热过程，研究待测物质在受热过程中发生的熔融、晶型转变、升华、吸附等中发生的熔融、晶型转变、升华、吸附等物理变化物理变化和脱水、热分解等和脱水、热分解等化学变化化学变化，从而对该物质进行，从而对该物质进行物物理常数（如熔点）的确定理常数（如熔点）的确定、鉴
12、别和纯度检查鉴别和纯度检查。亦可。亦可用于药物的稳定性研究及制剂辅料的优选。用于药物的稳定性研究及制剂辅料的优选。热重分析法热重分析法Thermogravimetric Analysis,TGA概念：测量物质概念：测量物质质量质量随温度变化的热分析技术随温度变化的热分析技术仪器仪器适用范围适用范围特点特点 适用范围适用范围贵重贵重药物药物/在空气中在空气中易氧化易氧化药物的药物的干燥失重干燥失重测定测定药物药物结晶水与吸附水结晶水与吸附水的区分的区分特特 点点 准确测量物质的质量变化及准确测量物质的质量变化及变化速度变化速度 样品用量少样品用量少 样品不易被空气氧化样品不易被空气氧化 测定速度
13、快测定速度快 差示热分析法差示热分析法differential thermal analysis,DTA 概念概念 仪器仪器 适用范围适用范围 差示热分析法差示热分析法 测量供试品和参比物之间的温度测量供试品和参比物之间的温度差（差（T）与温度（或时间）关系的）与温度（或时间）关系的热分析技术。热分析技术。适用范围适用范围测定测定药物熔点药物熔点鉴别药物或其晶形鉴别药物或其晶形检查药物纯度检查药物纯度差示扫描量热法差示扫描量热法differential scanning calorimetry,DSC 概念概念 仪器仪器 适用范围适用范围适用范围适用范围熔点测定熔点测定鉴别药物或其晶形鉴别药物
14、或其晶形纯度检查纯度检查 检查低共熔点杂质检查低共熔点杂质有机溶剂残留量测定法有机溶剂残留量测定法 分析手段：分析手段：GC法法 色谱条件色谱条件 色谱系统适用性试验色谱系统适用性试验 测定法测定法 有机溶剂残留量测定法有机溶剂残留量测定法 检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂。检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂。包括苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲包括苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯及环氧乙烷等。苯及环氧乙烷等。色谱条件色谱条件固定相：直径固定相：直径0.250.18mm的高分子多孔小球的高分子多孔小球 （二乙烯苯乙基乙烯苯型）（二乙烯苯乙基乙烯苯型）载载 气：氮气气：氮
15、气检测器：氢火焰离子化检测器检测器：氢火焰离子化检测器柱柱 温：温：80170色谱系统适用性试验色谱系统适用性试验（1）用待测物的色谱峰计算的）用待测物的色谱峰计算的理论塔板数理论塔板数应大于应大于1000；（2）用内标法测定时，内标物与待测物色谱峰的）用内标法测定时，内标物与待测物色谱峰的分离度分离度应大于应大于1.5；取标准溶液（限量待测溶剂与内标）；取标准溶液（限量待测溶剂与内标）进样进样5次，待测物与内标物峰面积之比的次，待测物与内标物峰面积之比的相对标准相对标准偏差偏差应不大于应不大于5；（3）用外标法测定时，待测物峰面积的相对标准偏差应）用外标法测定时，待测物峰面积的相对标准偏差应
16、不大于不大于10。测定法测定法第一法第一法 溶液直接进样法溶液直接进样法第二法第二法 顶空进样法顶空进样法 溶液颜色检查法溶液颜色检查法（一）目视比色法（与标准比色液比较）（二）分光光度法（单一波长定量）（三）色差计法（全波长范围定量）标准比色液的配制标准比色液的配制 个色号标准比色液种色调种色调标准贮备液溶液、不同量水稀释不同比例5055CuSOCoClOCrK42722黄绿黄橙黄橙红棕红色差计法色差计法1 原理 2 方法3 优点 溶液澄清度检查法溶液澄清度检查法 1 原理原理2 方法方法 3 浊度标准液的配制浊度标准液的配制4 检查结果检查结果5 注意事项注意事项6 例如例如反应原理反应原
17、理 乌洛托品在偏酸性条件下水解产生乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。于水，形成白色浑浊。比较供试品溶液规定级号的浊度标准液 浊度标准贮备液的配制浊度标准贮备液的配制：1.00硫酸肼水溶液与10.0乌洛托品水溶液等容量混合 浊度标准原液浊度标准原液 浊度标准液浊度标准液：0.5，1，2，3，4（5个级号）判判 断断药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。易炭化物检查法易炭化物检查法 检查对象检查对象：药物中遇药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈易炭化或易被氧化呈色的
18、微量有机杂质。色的微量有机杂质。检查方法检查方法：H2SO4炭化后与炭化后与对照液对照液比较。比较。比色方式比色方式：同置白色背景前，平视观察比较。同置白色背景前，平视观察比较。注意事项注意事项 对照液对照液（1）“溶液颜色检查溶液颜色检查”项下的标准比色液；项下的标准比色液；（2）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规定方法配成液，比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；的对照液；（3）高锰酸钾液。）高锰酸钾液。第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法 The relative substance test一 利用药物与杂质在物理性质
19、上的差异二 利用药物与杂质在化学性质上的差异利用药物与杂质在物理性质上的差异利用药物与杂质在物理性质上的差异（一）臭味及挥发性的差异 （二）颜色的差异 （三）溶解行为的差异 （四）旋光性质的差异 （五）光吸收性质的差异（六）吸附或分配性质的差异 光吸收性质的差异光吸收性质的差异1 紫外分光光度法2 红外分光光度法3 原子吸收分光光度法4 荧光分析法吸附或分配性质的差异吸附或分配性质的差异1 薄层色谱法2 纸色谱法 3高效液相色谱法4气相色谱法 薄层色谱法薄层色谱法（1）杂质对照品法（2）供试品自身对照法（3）对照药物法（4）灵敏度试验 杂质对照品法 方法：供试品供试品溶液 杂质对照品对照品溶液
20、 判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点 优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强；缺点：需要杂质对照品。高低浓度对比法 方法：对照溶液一定量供试品溶液供试品溶液稀释溶剂溶解 S 判断：供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）控制杂质斑点个数，控制杂质种类 缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度差、直观性差。优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液；高效液相色谱法高效液相色谱法（1）峰面积归一化法 （2）不加校正因子的主成分自身对照法 （3）加校正因子的主成分自身对照法（4）内标法加校正因子测定供试品
21、中杂质的含量（5）外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量利用药物与杂质在化学性质上的差利用药物与杂质在化学性质上的差异异 （一）（一）酸碱性的差异酸碱性的差异 （二）氧化还原性质的差异（二）氧化还原性质的差异 （三）杂质与一定试剂反应产生沉淀（三）杂质与一定试剂反应产生沉淀 （四）（四）杂质与一定试剂反应产生颜色杂质与一定试剂反应产生颜色 （五）（五）杂质与一定试剂反应产生气体杂质与一定试剂反应产生气体 （六）（六）药物经有机破坏后检查杂质药物经有机破坏后检查杂质酸碱性的差异酸碱性的差异1 规定消耗滴定液的体积2 pH值法3 指示剂法4 其他方法 杂质与一定试剂反应产生颜色杂质与一定试剂反应产生颜色1 灵敏度试验灵敏度试验2 与杂质对照液的颜色比较与杂质对照液的颜色比较3 吸收度的控制吸收度的控制 杂质与一定试剂反应产生气体杂质与一定试剂反应产生气体1 砷2 硫3 碳酸盐4 氨或胺盐5 氰化物（一法、二法）药物经有机败坏后检查杂质药物经有机败坏后检查杂质 氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法被测元素与有机分子中的碳以共价键结合；药物在检查条件下不溶解，影响测定。硒检查法 氟检查法
