1、南京科捷分析仪器有限公司南京科捷分析仪器有限公司阚育荣阚育荣化学分析中的二个概念化学分析的目的：1.要确定被分析物是什么性质，即给物质定性。定性。2.要确定被分析物中每个组份的含量的大小，即给物质定量定量定性分析 定量分析色谱仪器的重要指标色谱分析仪器完成分析过程的工作原理：用已知的标准物来比对、衡量未知物。由上述的工作原理可知，色谱分析仪器对同一种样品分析后所得结果的重复性是最重要的指标。为什么色谱仪器的重复性指标最重要？色谱仪器的重要指标色谱仪器的哪些指标重要？1.保留时间的重复性（重现性）2.色谱峰面积或峰高的重复性（重现性）3.在以上基础之上的灵敏度（敏感度）等等色谱仪器的重要指标A.
2、色谱仪器靠哪些手段保证其重复性?GC:温度控制的稳定;气体流量的稳定;检测器的设计及制造LC:高压输液泵流量的稳定;检测器的设计制造;流动相的配比B.色谱仪器检测器的敏感度的衡量：1.国产仪器怎样衡量的？2.国外仪器怎样衡量的？2/12max2tEdVNMt inputinputAIRAIRH H2 inputN N2 inputINJINJFIDFIDNeedleValveNeedleValve稳流阀压力表压力表稳压阀稳压阀稳压阀气源色谱柱检测器信号处理计算装置气相色谱仪的介绍-气路系统气相色谱仪的介绍-气路系统气相色谱仪的气路控制部分inputAIRAIRH H2N N input2inp
3、ut分流放空清扫放空二位三通阀背压阀进样器FID毛细管色谱柱气体输出阀针气体输入波纹管 弹簧调节旋钮气路系统的主要部件稳压阀P0P出P0BAP1针形阀阀门硅橡胶压缩弹簧橡胶膜片气路系统的主要部件稳流阀气路系统的主要部件针形阀气体入口气体出口阀针弹簧阀杆旋钮气路系统的主要部件填充柱进样口载气入口（接稳流阀出口）硅橡胶垫进样口导向件填充色谱柱色谱柱的两种接法1.柱上进样接法2.普通接法载气输入隔垫清扫输出0.5-5ml/分钟分流输出根据分流比调节针形阀背压阀三通管毛细管色谱柱二位三通电磁阀由主机微机板控制稳流阀气路系统的主要部件毛细柱进样口不分流状态气路系统的主要部件毛细柱进样口载气输入隔垫清扫输
4、出0.5-5ml/分钟分流输出根据分流比调节针形阀背压阀三通管毛细管色谱柱二位三通电磁阀由主机微机板控制经稳压后载气入口稳流阀分流状态薄片式导向件石英玻璃内衬管不锈钢进样器接头密封螺母和石墨密封圈带钢套石墨密封圈开槽螺母不锈钢检测器接头0.53mm毛细管柱色谱柱安装关键所色谱柱安装关键所在：在：确保石英玻璃管收口确保石英玻璃管收口处将毛细管柱紧紧夹处将毛细管柱紧紧夹住住毛细管色谱柱喷嘴尾管离子室底座大口径毛细柱不分流进样气路系统的主要部件气路系统的主要部件流量的计量10ml10ml20ml接被测气体流量起泡剂放空皂膜流量计组成：1.玻璃管2.盛起泡剂的橡皮囊3.秒表原理：被测气体流量从侧管进入
5、主管，顶起在主管中已经存在的起泡剂的液膜，将液膜上升体积的时间加以计量，则得流量。气路系统的主要部件流量的计量250ml40ml30ml20ml10ml0ml转子放大图气体入口气体出口转子流量计组成：1.进出口接头2.锥形玻璃管3.转子原理：气体从气体入口进入后，将转子托起，气体流量越大，转子托起越高，转子被托起的高度和流量的大小成正比。气路系统的主要部件流量的计量3刻度针形阀、刻度稳流阀组成：刻度旋钮原理：利用稳流阀、针形阀旋转的度数和流量近似成正比这一原理来进行流量的计量。气路系统的主要部件流量的计量4稳压阀可调气阻压力表压力显示型组成：1.稳压阀2.压力表3.可调气阻原理：在稳压阀后加一
6、固定气阻，在稳压阀与气阻间加入一各压力表此时稳压阀输出气体流量越大，只要气阻不变，则压力表显示值也越大。气路系统的主要部件流量的计量5电子气体流量计电子气体流量计的原理是：在气体的流路中接入一个流量传感器，流量传感器将气体流量这个物理量转成与之成正比的模拟量，这个模拟量可以是电压或电流，将这个模拟量量化后转成数字量，即可在色谱仪的屏幕上以数字显示出来。气相色谱仪的电路部分RAMROMCPU键盘与显示TCD测温Inj测温Cap测温Det测温Col测温Aux测温接口电路1多路开关与温度A/D转 换温度控制输出6柱箱加热检测器加热热导检测器加热填充柱进样口加热毛细柱进样口加热辅助加热220V输入检测
7、器控制电路1检测器控制电路2检测器控制电路3后开门步进电机气相色谱仪的电子控制部分框图220V/50HzPt模拟量转数字量物理量转模拟量加热丝可控硅控制器件光电耦合器CPU运算控制测温铂电阻开关温度设定气相色谱仪的电路部分气相色谱仪的温度控制详图 气相色谱仪的检测器 火焰离子化检测器（FID）介绍原理：在氢氧焰的高温作用下，许多分子均将分裂为碎片，并有自由基和激态分子产生，从而在氢焰中形成这些高能粒子所组成的高能区，当有机分子进入此高能区时，就会被电离，从而在外电路中输出离子电流信号。特点：灵敏度高，死体积小，应答时间快，除载气外还需引入空气和氢气，对永久性气体和水无应答。适用范围：有机化合物
8、，能直接用于毛细管色谱分析。噪音：510-14A敏感度：110-11g/S线性：106 *空气入口氢气入口FIDFID-+VoutVoutIiIiIRfRfRzRzZero AdjZero Adj+6V+6V-6V-6VA AVout=-IiR fVout=-(IiR f+6 V/Rz Rf)To WorkstationTo Workstation2 00V2 00V气相色谱仪的检测器FID与微电流放大器的原理气相色谱仪的检测器 热导检测器（TCD）介绍原理：气流中样品浓度发生变化，则从热敏元件上所带走的热量也就不同，从而改变热敏元件的电阻值，由于热敏元件为组成惠斯顿电桥之臂，只要桥路中任何一
9、臂电阻发生变化，则整个线路就立即有信号输出。特点：热敏元件一般为铼钨丝组成，温度系数为正。适用范围：普遍适用。噪音：20uv灵敏度：5000mvml/mg 线性范围：10000 -+R1R1R3R3R4R4R2R2To WorkstationTo WorkstationD/ADataContrD/AVoutFrom main CPUFrom main CPUTo TCD main PowerTo TCD main PowerA AB B接色谱柱A接色谱柱B当A、B 两色 谱柱都无样品流出时当A、B 两色 谱柱都无样品流出时R1=R2=R3=R4R1=R2=R3=R4AB两端的电压等于零AB两端
10、的电压等于零气相色谱仪的检测器TCD与稳流电源的原理空气入口氢气入口气相色谱仪的检测器 热离子化检测器（NPD）介绍原理：在FID中加入一个用碱金属盐制成的玻璃珠当样品分子含有在燃烧时能与碱盐起反应的元素时，则将使碱盐的挥发度增大，这些碱盐蒸气在火焰中将被激发电离，而产生新的离子流，从而输出信号。特点：这是一种有选择性的检测器，对含有能增加碱盐挥发性的化合物特别敏感。适用范围：对含氮有机物，含磷有机物有很高的灵敏度。噪音：510-13A 敏感度：110-13g/S 线性范围：103*空气入口氢气入口低压大电流直流稳压电源A电流调节-6V-6V+6V+6V接数据处理机或色谱工作站RfRfRzRz
11、Zero ADJZero ADJ-250V-250V气相色谱仪的检测器NPD与铷珠稳压电源、放大器原理 气相色谱仪的检测器 电子捕获检测器（ECD）介绍原理：射线与载气分子作用产生慢电子，具有亲电基团的试样分子能捕获慢电子而变成负离子，这种负离子能与载气受放射粒子所产生的正离子复合，从而改变检测器的基流，使之减少，输出信号。特点：只对具有亲电基团的样品分子才有应答对水敏感，载气必须充分干燥，脱氧，易受污染。适用范围：对卤素、硝基等化合物选择性极好。噪音：110-12A 灵敏度：110-13g/ml 线性：10000废气口尾吹气信号输出电极色谱柱放射源63Ni*气相色谱仪的检测器ECD与脉冲调制
12、器、放大器原理废气口尾吹气信号输出电极色谱柱放射源63Ni-+-V/F转换脉冲宽度调节脉冲放大接色谱数据处理或色谱工作站Zero ADJZero ADJ脉冲变压器书152页气相色谱仪的检测器火焰光度检测器（FPD）介绍空气入口氢气入口PMT滤光片原理：燃烧着的氢焰中，当有样品进入时，则氢焰的谱线和发光强度均发生变化，然后由光电倍增管将光度变化转变为电信号。特点：对磷、硫化合物有很高的选择性，适当选择光电倍增管前的滤光片将有助于提高选择性，排除干扰。使用范围：含磷、硫化合物的分析噪音：1020uv 敏感度：110-11g/S 线性范围：1000*气相色谱仪的检测器 FPD与负高压电源、放大器原理
13、空气入口氢气入口滤光片PMT-+A A可调节直流负高压（-300V-700V）RfRfRzRzZero ADJZero ADJ接色谱数据处理或色谱工作站书153页填充柱和毛细柱的特点对比材料填充柱的材料为不锈钢或玻璃管毛细柱的材料为柔性石英管外观填充柱的内径粗，一般23毫米；长度一般0.53米毛细柱的内径细，0.20.53毫米；长度一般15100米内部填充柱内有涂过固定液的填料，所以在气路中会形成气阻毛细柱为空管，固定液涂在毛细管的内管壁表面，气阻很小分离效率填充柱低，塔板数一般不超过2000/米毛细柱高，塔板数一般达几万流量填充柱的流量一般为2030毫升/分毛细柱的流量一般为0.25毫升/分
14、 *填充柱和毛细柱的特点对比对样品的承受能力填充柱大，一般液体进样量为0.52ul毛细柱小，一般液体进样量为0.010.1ul对仪器系统的要求填充柱低，只需一路载气即可毛细管高，除了载气外，还需分流、清扫和尾吹气体在操作上填充柱操作简单，只需调整一路载气即可毛细柱操作复杂，除了调整载气外，还需调整清扫、分流和尾吹 *毛细管柱的应用薄片式导向件石英玻璃内衬管不锈钢进样器接头M12螺母和石墨密封圈带钢套石墨密封圈开槽螺母不锈钢检测器接头0.53mm毛细管柱色谱柱安装关键所色谱柱安装关键所在：在：确保石英玻璃管收口确保石英玻璃管收口处将毛细管柱紧紧夹处将毛细管柱紧紧夹住住毛细管色谱柱喷嘴尾管离子室底
15、座大口径柱不分流进样应用上的几个问题关键:减少死体积,减少进样量.1.进样口的安装.2.检测器的安装.3.流量的调节.4.根据柱长控制进样量5.是否需要尾吹?毛细管柱的应用载气输入隔垫清扫输出0.5-5ml/分钟分流输出根据分流比调节针形阀背压阀三通管毛细管色谱柱二位三通电磁阀由主机微机板控制图1经稳压后载气入口稳流阀由于在进样时分流通道被关闭，在进样器中被迅速气化的样品气体在柱头聚集并冷凝，大量的溶剂在柱子前端形成一层临时固定液膜，溶质在这一层临时固定液膜上的运动呈前慢后快状态，被分析样品在进入色谱柱前端的同时也得到了压缩。分流/不分流进样原理简述不分流状态经过40 60秒后分流通道被打开，
16、与此同时柱温根据设定已开始逐渐升温，溶剂首先汽化并在柱子中向前运动，进样器汽化管由于分流通道的开启而得到清洗，在不分流期间被压缩的溶质也由于柱温的逐渐升高而开始在柱子中运动并进行分离。由于压缩的原因进入柱子的样品量比只分流进样多几倍甚至几百倍，等于有了一个柱头浓缩的过程所以毛细管分流/不分流进样的检测限比普通分流进样的检测限要提高13个数量级。毛细管柱的应用载气输入隔垫清扫输出0.5-5ml/分钟分流输出根据分流比调节针形阀背压阀三通管毛细管色谱柱二位三通电磁阀由主机微机板控制图2经稳压后载气入口稳流阀分流/不分流进样原理简述分流状态inputAIRAIRH H2N N input2input
17、分流放空清扫放空二位三通阀背压阀进样器FID毛细管色谱柱毛细管柱的应用分流/不分流进样应用上的几个问题关键:1.柱子的安装2.载气系统的流量调节3.柱温的设定4.不分流时间的确定5.溶剂的选择6.柱流量的确定7.尾吹流量的确定*分流出口分流出口分流出口毛细管柱毛细管柱毛细管柱图1 A图1 B图1 C毛细管柱的应用毛细管柱在进样口处的安装正确装法不正确装法分流/不分流装法JTP-1喷嘴FID底座空气入口氢气入口530u毛细管色谱柱喷嘴尾管密封垫圈毛细管柱的应用毛细管柱在检测器处的安装毛细管柱的应用毛细管柱流量的确定、分流比的确定毛细管柱流量的较精确设定一般只能应用进样结合计算的方法，方法如下：1
18、.公式 FC60u式中 FC：柱流量,单位为 ml/min u：载气线速度,单位为 cm/s ：3.14 ：柱内半径的平方 60：时间转换系数2.式中u为载气的平均线速度。u可以通过进样后用某物质的保留时间求得，某物质可以用甲烷、甲醇等均可，要求是色谱柱对该物质的吸附要小，一般以甲烷为宜。具体计算方法为：u=CL(cm)/RT(s)式中 CL：柱长 RT：保留时间3.分流比的确定分流比可根据以下公式确定：分流比=FC/（FC+F分流）式中F分流为分流流量，单位都是用ml/min *2r2r电磁阀的设定开机后将二位三通电磁阀设定在“不分流”状态，在此状态下设定“不分流”时 间（一般为4060秒）
19、，然后再将电磁阀设定为“分流”状态，由于程序升温的启动与电磁阀联动，所以在启动程升后有4060秒的不分流时间。毛细管柱的应用溶 剂沸点（摄氏度）建议使用的起始柱温二氯甲烷401030氯仿612550二硫化碳461035乙醚351025戊烷361025己烷694046异辛烷997090分流/不分流进样法常用的溶剂毛细管柱的应用毛细管柱流量的确定、分流比的确定分流比及分流有大小靠分流阀进行调节，选择适当的分流比也很重要。如果分流比很小，样品大多数进入柱子、容易使峰变宽，形成前伸峰。分流比一般选择在1:100200之间，这时样品的起始组分的谱带扩展很小，出峰尖锐。对一根0.25mm内径的毛细管柱，用
20、N2作载气，最佳流速0.30.4ml/分，则分流流量调到50ml/分左右即可。在毛细管分流进样系统中一般以柱头压力来恒量柱流量的大小，下表给出一些常用的毛细管柱在标准线速度的情况下的柱头压力：柱内径柱长度0.2mm0.25mm0.32mm0.53mm15m0.06Mpa0.039Mpa0.024Mpa0.009Mpa25m0.1Mpa0.065Mpa0.04Mpa0.016Mpa30m0.13Mpa0.08Mpa0.048Mpa0.019Mpa50m0.22Mpa0.14Mpa0.08Mpa0.032Mpa上表所使用的载气为氮气，线速度为20cm/s，如果是氦气，线速度为40cm/s毛细管柱的
21、应用小口径毛细管色谱分析用FID检测器时，一定要加尾吹气，一般用空气或N2气。加尾吹气的作用之一是减少柱后死体积对色谱峰造成的扩散，之二是保证FID有合适的氮氢比。FID系质量型检测器，适当地增加尾吹气可提高检测的灵敏度，但尾吹气太高，会引起基线不稳以至灭火尾吹气太低，会引起色谱峰拖尾、对毛细管柱效损失大大。尾吹气流量一般在20-30ml比较适合，可用皂沫流量计来测量。5432167810ml15ml20ml25ml30ml35ml5ml峰高(m m)X100尾吹气流速(m l/分)毛细管柱尾吹流量的确定毛细管柱的应用涂渍好的毛细管柱首先要经过充分的老化，以除去固定液中的低分子量物质，一般商品
22、毛细管柱，在制造出厂前都已经过充分老化；但柱子一经从仪器上拆卸下来，较长时间接触空气，在下一次使用之前，最好以较低的初始温度程序升温至最高使用温度老化23次。各种固定液因其性质和生产厂家不同而最高使用温度有所不同，所以要注意毛细管的说明，生产毛细管柱的厂家应注明最高使用温度。老化中应注意载气的流速不易过大，否则会破坏均匀的液膜。一般非极性柱在250以下老化使用，可用普通氮气，在250以上高温使用时，必须使用高纯氮气或普通氮气经脱氧后使用，以延长柱子的使用寿命。对极性柱，尤其是PEG类（聚乙二醇）FFAP、含氰基的固定液（OV225、OV275），一定要用99.99%高纯氮气（最好高纯氮气经过脱
23、氧，）否则，固定液很快被氧化，以致不能使用。毛细管柱的老化气相色谱分析方法介绍气相色谱柱的选择1固定液的选择：*对于填充色谱柱，极性样品选极性固定液，非极性样品选非计性固定液。原则：相似相溶相似相溶*对于毛细管色谱柱，较为宽松，因为许多样品的分析都可以在非极性固定液柱上完成，应用最广泛的是：SE-54；SE-30；OV-101。原则：尽可能选用较低极性的固定液来完成分析工作尽可能选用较低极性的固定液来完成分析工作原因1：非极性或弱极性固定液具有较高的柱效。原因2：具有较高的抗氧化能力，可以有较高的使用温度，使用寿命长。原因3：一柱多用。只有当被分析极性化合物与固定液之间作用力很小或为了减少分析
24、时间，才需要换用极性较强的固定液。*气相色谱分析方法介绍气相色谱柱的选择1（附表）固 定 相名 称商 品 代号使 用 温度 范围（摄 氏温 度）极 性应 用 范围100%甲基 硅酮（弹 性体）SE-30OV-1-80300/320非 极 性碳 氢 化 合 物，硫化 物，酚，胺，多 环 芳烃，农 药100%甲基 硅酮（液 体）OV-101SP10000280非 极 性氨 基 酸 衍 生 物，基 油，碳 氢 化 合物5%苯 基；95%甲 基 硅酮SE-54-80-300/320非 极 性脂 肪 酸 甲 脂，药物 卤 代 烃，生 物碱50%苯基；50%甲 基 硅酮OV1740280/300中 极 性
25、药 物，卤 族 化 合物，农 药，二 元醇聚 乙 二醇-TPA改 性FFAP60220/240极 性（酸 性）酸，醇，醛，酮丙 烯 酸 脂，腈 类等聚 乙 二醇 二万PEG-20M80220极 性游 离 酸，醇，醚，基 油，溶 剂，二元 醇Al2O3/KClAl2O3320C1C4，烃分 子 筛分 子 筛320惰 性 气 体，氦，氢，氩，氧，氪等 气 体气相色谱分析方法介绍气相色谱柱的选择2填充色谱柱的尺寸选择内径2长度2M是最常用的尺寸，一般用于分离10个组份以下的样品。1M长度的次之，一般用于分离4个组份的样品。在特殊用途上有采用3M或4M的，但超过4M的很少应用。内径3的填充柱应用越来越
26、少，只有在应用玻璃柱时使用这种内径。填充色谱柱管的材料选择绝大部分的应用场合都使用不锈钢管材料，对于有反应性易分解或具有腐蚀性的样品可使用玻璃或聚四氟乙烯管材料。填充色谱柱载体（担体）的选择当固定液含量大于5%，可选用硅藻土型的白色或红色载体；当固定液含量小于5%，应选用处理过的载体；对高沸点的样品应选用玻璃微球载体；对于强腐蚀性样品，可选用氟载体。粒度范围，一般常用80100目，高效柱可用100120目。气相色谱分析方法介绍气相色谱柱的选择3毛细管柱的尺寸选择内径选择：柱效率与半径平方成反比，半径越小柱效越高，但半径越小使用难度越大，如要求仪器的灵敏度高，时间常数小，死体积小以及柱前压大。一
27、般常用内径0.25m/m,0.32m/m,0.53m/m。长度选择：柱越长，总柱效越高，只有当分析样品十分复杂时才需要选择长柱（50M以上），对于含4050组份的不太复杂的样品，用20M左右的长度已能满足分离要求，柱越长，分析时间也越长。另外柱长增加4倍，样品的分离度才增加1倍，所以首先应选择合适的固定液，其次才是增加长度。液膜厚度选择：选择液膜厚度与选择柱长一样重要，恰当的膜厚度可使感兴趣的组份分离得更好。厚液膜柱适用于挥发性大的轻组份，使组份在柱内滞留时间长，得到较好的分离，厚液膜还具有较高的负荷量。挥发性低的重组份样品应选用薄液膜柱，这样可使用较低柱温将组份从柱中赶出，减少柱流失延长柱寿
28、命。标准液膜厚度：0.25m/m 0.33um;0.32m/m 0.5um;0.53m/m 1um。气相色谱分析方法介绍各项分析参数的选择（填充柱）载气种类的选择：经常使用的载气为氮气、氢气和氦气。其中氦气是最好的选择，但价格较高，有些地方购买有困难。所以在我国最常用的GC载气是氮气，氢气一般在使用TCD时为提高灵敏度而使用，在使用毛细管柱和ECD时需要高纯度氮气（99.999%）。载气流量的选择：使用氢气作载气线速度在1520cm/s，使用氮气作载气线速度在1012cm/s。柱温的选择：使用13%浓度固定液柱子，分析沸点在300400度的样品，柱温可定在200250度左右。使用510%浓度固
29、定液柱子，分析沸点在200300度的样品，柱温可定在150200度左右。使用1015%浓度固定液柱子，分析沸点在100200度的样品，柱稳可定在样品平均沸点的2/3左右。使用1520%浓度固定液柱子，分析气体、气态烃样品，柱温可定在室温或50度左右。对于宽沸程的混合样品使用柱温程序升温方法进行分析。检测器、进样器温度的选择：检测器、进样器温度一般比柱温高2050度，但是FID、FPD、NPD的温度最低不得低于100度，以防止检测器积水。气相色谱分析方法介绍各项分析参数的选择（毛细管柱）载气种类的选择：经常使用的载气为氮气、氢气和氦气。其中氦气是最好的选择，但价格较高，有些地方购买有困难。所以在
30、我国最常用的GC载气是氮气，氢气一般在使用TCD时为提高灵敏度而使用，在使用毛细管柱和ECD时需要高纯度氮气（99.999%）。载气流量的选择：使用氢气作载气线速度在40cm/s，使用氮气作载气线速度在20cm/s，但在毛细管分析中需根据具体分析的结果仔细调整流量。分流比的选择：由于毛细管柱的柱容量小，所以在使用时必须在进样器上进行分流，尤其对0.32mm以下口径的柱必须分流。分流比根据样品的浓度进行选择，浓度较低的选用较小的分流比，浓度较高的选用较大的分流比一般常用100：1200：1的分流比。尾吹流量的选择：由于柱直径细，载气的流量低，所以载气在进入检测器时必须加入一股推力，这就是尾吹气。
31、一般尾吹流量在20ml30ml之间。柱温的选择：柱温选择主要取决于样品的性质，分析气态物质时用50度以下，对于沸点在300度以下的物质用150度左右，对于沸点大于300度的物质，柱温用200度左右。最佳的温度是根据实验的结果来确定。宽沸程的样品使用程序升温。检测器、进样器温度的选择同填充柱。气相色谱分析方法介绍定性分析定性分析：定性分析是GC的弱项，一般有以下几种方法1.利用已知物对照定性。（使用得较为广泛）2.利用文献保留数据定性。（需要有大量的文献资料库）3.利用化学反应定性。（比较麻烦，一般要进行样品的前处理）4.利用其它仪器分析结合定性。（需配备多种仪器，投资大，运行成本高）5.利用检
32、测器定性。（最简便易行，但定性的范围较窄）定量分析：定量分析是GC的强项，一般采用以下三种方法1.峰面积归一法：如果被分析样品的组份是同系物，校正因子相近可直接用峰面积求出组份的百分含量。如果被分析样品的组份不是同系物，则要知道每种组份的相对校正因子。优点：不必准确知道进样量，操作条件略为变动对结果影响较小，计算方便，适合于多组份的工厂例行分析。2.内标法：当色谱柱不能使所有组份都流出，或检测器不是对所有组份都有信号，以及在定量分析中只要求测定某一个或某几个组份，其他组份因含量太低或太高而难以测定时，可用内标法。在一定量的样品中加入一定量某纯物质作内标。选用的内标物是样品中不存在的物质，并能与
33、样品中各组份在色谱柱上分离，必须与样品中各组份不起化学反应。内标法定量准确度高，但每次分析需称样配样，操作比较麻烦。3.外标法：不论样品中的所有的组份是否全部出峰，均可采用外标法对出峰组份做定量分析。就定量参比物而言，外标法是最为准确的方法，因为是同质组份进行比较；然而由于检测器的响应性能、工作温度和载气流速等GC条件很难绝对稳定，而且进样量也很难完全相同，因此外标法容易出现较大的误差。气相色谱分析方法介绍定量分析气相色谱仪的安装使用仪器的环境放置GC的房间面积应不小于20m2，具备空调。放置仪器的桌子应结实、稳固，最好是水泥台。仪器使用的电源的总功率不得小于5KW，并且是单独走线。电源必须另
34、外安排地线，这不但是仪器稳定使用的问题，更是操作者人身安全的问题。如使用电源稳压器，注意稳压器输出电压的波形不能畸变，否则会影响温度控制的稳定性。如果使用ECD，注意废气的排放。气相色谱仪的安装仪器的气源 气相色谱仪用的气体，不管是载气还是检测器的工作气，它们的纯度最好都大于99.99%，并且都要脱氧、脱水、去除微量有机物质。对于电子捕获检测器，载气的纯度必须大于99.999%并且带有脱氧管。如果有条件，载气选用氦气则是最理想的。气体的获得第一种办法：载气用钢瓶、氢气用氢气发生器、空气用超净空气泵。第二种办法：载气、氢气都用钢瓶、空气用超净空气泵。第三种办法：载气、氢气和空气都用钢瓶。气相色谱
35、仪的安装气源的安装 钢瓶的安装，主要是钢瓶减压阀的安装，泄漏是关键。怎样知道减压阀是否安装好了？减压阀装好后，不要打开减压阀上的小阀（小的输出压力调节）而打开钢瓶的开关，此时减压阀上的大表就会有显示，这个压力是钢瓶内的压力，待表上显示压力稳定，再关紧钢瓶开关，此时显示压力应稳定不动，并应保持半小时以上。如符合这种情况，则减压阀安装合格。否则不是减压阀没有装好，就是减压阀本身的质量有问题。另外一个需要注意的问题是氢气瓶上和氢气减压阀上的丝扣都是反牙的，不要硬拧。气相色谱仪使用中的问题A.色谱柱是否与进样口和检测器正确地连接B.进样口是否漏更换进样垫检查进样衬管是否损坏C.柱是否与进样口连接？?D
36、.FID点火了吗？FID高压静电正常吗？E.柱中是否有载气无峰或峰很小气相色谱仪使用中的问题F.火点着了吗?用一个玻璃片放在 FID 出口-有水蒸汽冷凝检测仪器的输出值-数值是否大于 0.0？观察色谱数据工作站或积分仪的输出信号有无变化G.柱中是否有载气?n拆开柱到检测器一端 n用流量计（或皂沫流量计）测量有流量H.综合n已点火n柱出口有流量n检测器喷嘴可能被堵塞I.检查FID组件（注意请记录零件的安装顺序）n检查喷嘴本身-被石墨碎屑堵塞（拆下柱子时，石墨垫的外型有变化）J.用旧的进样针清除堵塞物K.重新安装FID组件L.再次进样气相色谱仪使用中的问题基线不好的问题1.检查气源的纯度 解决：更
37、换气源；加装气体净化2.检查气路系统是否被污染 解决：清洗被污染处气相色谱仪使用中的问题l柱过载减少进样量或将样品稀释10倍稀释样品可以得到较好的结果l试一下较厚液膜的其他色谱柱前面介绍的所有内容均适用前伸峰和拖尾峰均说明是非线形的分配即色谱柱与样品不匹配使用不同选择性的色谱柱可以解决这个问题峰型不好（拖尾）气相色谱仪使用中的问题分析过程中基线位置突然变化偏离o 基线偏离或漂移o 基线偏离 不规律地升高或降低 在整个色谱过程中基线不规律地升高或降低o 偏离或漂移是由于下列原因产生的 温度 流速o 确保在两次进样之间有足够的平衡时间o 检查体系是否有漏 主要检查进样口部分 柱前o前次色谱过程中的
38、残余的低挥发性流出物气相色谱仪使用中的问题基线漂移漂移o 正确地使用高纯度的载气o 色谱柱老化o 色谱柱的最高使用温度不能超过该柱所规定的最高温度极限o 进样口温度与检测器温度要高于色谱柱的最高使用温度气相色谱仪使用中的问题基线噪音o色谱图的基线噪音太高o进样垫流失o密封垫的类型不对或使用时间过常，需要更换o新的密封垫在柱温箱中老化过夜，以除去易挥发性化合物o密封垫不能超过使用温度 (350)o衬管被污染o较脏的样品每进样1520次后，更换新的衬管o气源可能被污染o选择正确的在线气体净化器(traps)o每使用四瓶气体，至少要更换一次气体净化器o检测器可能已被污染清洗检测器o实验室是否有异常的
39、气体噪音气相色谱仪使用中的问题流失由柱外产生的杂峰色谱柱：HP 5 30mx0.25mmx0.25um柱温：80 25/min 160，160 3/min(4)320，320 20/min(4)325 进样：分流比 100:1;1ul of 100ng/ul检测器：FID4.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00峰高大约相当于 5 ppb of PAH(真正的杂质)636.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.005000010000015000020000025000030000035000040000045000050
40、0000Time-AbundanceTIC:PC241NG1.DHP 绿色的高级进样垫P/N 5183-4594(11 mm)320 325 气相色谱仪使用中的问题进样垫隔垫类型隔垫类型性性 能能高温进样垫适合与进样口温度在400以上使用（批检）350 以上普通用途的高温进样垫长寿命的进样垫，无需特殊保护（可用于自动进样器）经济型 比 BTO、高级绿色垫、长寿命黄色垫（较贵）的流失高，但更经济流失及温度优化的进样垫(BTO)橙/红色HP 绿色高级进样垫HP 黄色长寿命进样垫灰色低流失进样垫红色低流失进样垫与灰色低流失进样垫接近流失高于BTO、绿色垫、黄色垫气相色谱仪使用中的问题附加峰o鬼峰o
41、柱头污染o 烘焙色谱柱，然后做空运行（无样品）o 进样垫流失 使用高质量的产品o 进样口污染 残留在进样口或衬管中的物质o 载气不纯 使用高纯度的载气及高质量的气体净化器，并定期更换o 载气中杂质与固定相发生反应 o 若使用分离/无分流进样口 进样口底部的密封垫可能会与样品反应 使用金制进口密封垫有两种类型的附加峰1.即使不进样也会出现的峰(鬼峰)，并且在色谱分析过程中也会出现 在真实的峰之中2.由样品产生的附加峰气相色谱仪使用中的问题附加峰 o即使进纯样，也会出现附加峰o做一次空运行-o 如果这些峰还存在，不是由样品产生的，按照前面介绍的方法检查o 进样口温度过热，可以导致样品组分的降解o
42、每次将进样口降低20，观察这些峰是否还出现o 衬管与样品起反应o 使用脱活的衬管o 衬管内填充物有活性o 更换衬管内填充物或使用无填充物的衬管o样品在进样口停留的时间太长o 增加柱流速o样品组分稳定性差o 尽可能降低进样口温度o 使用脉冲式无分流或脉冲式分流进样气相色谱仪使用中的问题丢失色谱峰o 进样口温度太低 高沸点的化合物不能很快地气化 增加进样口温度o 进样口温度太高 许多挥发性的组分在进样口降解 降低进样口温度o 进样口被污染 进样口的污染物与样品发生反应 清洗进样口，更换衬管和进样垫o 衬管有活性 使用脱活的衬管 色谱图中没有出现你希望得到的样品组分峰气相色谱仪使用中的问题峰型不好
43、o柱过载 将样品稀释10倍重新进样o使用较厚液膜但固定液相同的色谱柱o减少进样量 小体积进样 增加分流比o可能是几个未分离的色谱峰 将柱温降低20再进样 局部的分离可以显示其它额外的样品组分o使用较长的色谱柱o试一试不同选择性或不同极性的柱子 如将OV-1换成SE-54 如将SE-54换成PEG-20M或极性更强的气相色谱仪使用中的问题峰型很差o合并的峰（未分离的峰）o将柱温降低20-30o将进样口温度增加20-30o检查样品与溶剂的选择是否正确o对极性的化合物使用极性的溶剂峰顶分叉（双肩峰）检测器过载减少进样量或将样品稀释10倍 或者使用较大的分流比稀释样品可以达到较好的效果气相色谱仪使用中的问题色谱柱安装位置可能引起的问题o 色谱柱到检测器安装位置不正确;使其不能到达FID喷嘴o 色谱柱到进样口安装位置不正确.使其不能到达进样口o 色谱柱到进样口及检测器的位置安装正确气相色谱仪使用中的问题色谱柱安装到进样口评定因素o 安装深度-柱到针的间隙 按照厂方的介绍,在进样针头到柱保留1-2厘米的间隙 o 对分析物和样品基质选择适用的衬管o 使用专用的柱切割器o 保证所有的柱接头及其它接口不漏气相色谱仪使用中的问题色谱柱密封垫通用技术o 使用轻触点-不能过紧.o 保持清洁.o 在使用前烘焙密封垫.o 避免污染-指纹、油脂等.o 检查使用的密封垫是否有裂纹、碎片、或其它的损坏.
