1、实验二实验二 改良牛鲍计数板使用、红细胞计数改良牛鲍计数板使用、红细胞计数目的要求：目的要求：1.掌握改良牛鲍计数板的结构和使用方法2.掌握手工显微镜红细胞计数的方法。（一）改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法（一）改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 临指导临指导P7 1.改良牛鲍氏计数板的结构（见图）2.改良牛鲍氏计数板的使用方法1)准备计数板：准备计数板：用绸布擦拭，“推压”法加盖玻片2)稀释的血液：稀释的血液：准确吸取稀释液和血液，立即混匀。3)充池充池：充池前充分混匀稀释液，充池要一次性完成，充液不能过多、过少、有气泡、断续充液、充池后移动盖玻片。4)静置静置2-3min，待细胞下沉。5)显
2、微镜计数显微镜计数：小心移动；手和显微镜镜头不能 碰到盖玻片。6)计数原则计数原则：逐格计数；按一定方向进行计数；对压线细胞遵循“数上不数下，数 左不数右”的原则。（一）改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法（一）改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 1.保证所用器材清洁，勿用手触膜。2.)充池充池：充池前充分混匀稀释液，一次性完成，充液不能过多、过少、有气泡、断续充液。3.充池后移动盖玻片。4.计数池使用后用蒸馏水冲，纱布轻试，切不可用粗糙织物擦试，以免磨损刻度。3.改良牛鲍氏计数板使用注意事项改良牛鲍氏计数板使用注意事项 （二）（二）红细胞计数红细胞计数P141原理原理 用红细胞等渗稀释液用红细胞等
3、渗稀释液(2.0ml)将血液将血液(10l)稀稀释一定倍数，滴入计数池，于高倍镜下计数一定范释一定倍数，滴入计数池，于高倍镜下计数一定范围内的红细胞数，再换算成每升血液中的红细胞数。围内的红细胞数，再换算成每升血液中的红细胞数。2.红细胞稀释液红细胞稀释液（1）Hayem（赫姆氏液）即传统的红细胞稀释液 成分及作用：氯化钠：调节渗透压至等渗 硫酸钠：提高比密，防止细胞粘连 氯化高汞：防腐剂 缺点：遇高球蛋白血症患者，球蛋白沉淀使红细胞 容易凝结。（二）红细胞计数（二）红细胞计数（二）红细胞计数（二）红细胞计数-2.红细胞稀释液红细胞稀释液（2）甲醛枸橼酸盐成分及作用：枸橼酸钠：抗凝、保持等渗
4、甲醛：防腐、固定红细胞优点：配制简单、红细胞不凝集，可保持红细胞正常的 圆盘状数小时，目前应用广泛。(3)不含甲醛的枸橼酸盐：成分及作用：31.3g/L的枸橼酸钠。优点：遇自身凝集素增高者，可使凝集的红细胞分散并照常计数。（4）急诊时可用生理盐水或含1%甲醛的生理盐水作为红细胞稀释液。（二）红细胞计数（二）红细胞计数-2.红细胞稀释液红细胞稀释液3.操作步骤操作步骤（1）准备稀释液：加红细胞稀释液(赫姆氏液)2.0ml于试管中。（2）采血：10 l至稀释液中，立即混匀。（3）准备计数板、混匀稀释液、充池、静置2-3min。（4）显微镜计数：高倍镜下计数中间大方格内四角及中央的5个中方格内的红细胞总数。（二）红细胞计数（二）红细胞计数4计算计算 红细胞数/L =N25/510106200=N1010=N/1001012参考值：参考值：成年男性：4.05.5*1012/L；成年女性：3.55.0*1012/L；初生儿:6.07.0*1012/L（二）红细胞计数（二）红细胞计数 5注意事项：注意事项：（1）同白细胞计数（2）红细胞在计数池中若分布不均，每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正常数值范围内，2次红细胞计数相差不得超过5%。（二）红细胞计数（二）红细胞计数
