1、轮虫的培养轮虫的培养1第1页，共64页。必需小型：作为鱼类的开口饵料；必需小型：作为鱼类的开口饵料；形状简单，容易被破碎；形状简单，容易被破碎；富有营养，容易消化；富有营养，容易消化；不使水质恶化；不使水质恶化；容易制备（培养）；容易制备（培养）；能适应养殖幼体的摄食生态条件。能适应养殖幼体的摄食生态条件。一、一、动物性生物饵料动物性生物饵料必须必须具备的条件具备的条件轮虫的培养轮虫的培养第一节第一节 生物饵料的应用概述生物饵料的应用概述2第2页，共64页。常见种类常见种类 牡蛎担轮幼虫：受精卵牡蛎担轮幼虫：受精卵 担轮幼虫担轮幼虫:大约饵用大约饵用13-14小时；小时；藤壶无节幼虫藤壶无节幼
2、虫、期：大约饵用期：大约饵用3-4小时；小时；轮虫：轮虫：S、L、M型，有鳍鱼类开口饵料；型，有鳍鱼类开口饵料；卤虫：幼体和成体，商品化；卤虫：幼体和成体，商品化；枝角类：大部分淡水种；枝角类：大部分淡水种；桡足类：海水种；桡足类：海水种；糠虾、颤蚓、黄粉虫、沙蚕。糠虾、颤蚓、黄粉虫、沙蚕。个体大小：个体大小：颤蚓、沙蚕、糠虾黄粉虫卤虫成体桡足类颤蚓、沙蚕、糠虾黄粉虫卤虫成体桡足类 枝角类卤虫幼体轮虫牡蛎担轮幼虫和枝角类卤虫幼体轮虫牡蛎担轮幼虫和 藤壶无节幼虫藤壶无节幼虫、期。期。3第3页，共64页。四、四、轮虫的概况轮虫的概况（一）（一）轮虫特点轮虫特点 生命力强，繁殖快，营养丰富，大小适宜
3、，生命力强，繁殖快，营养丰富，大小适宜，易培养。易培养。（二）（二）简史简史 1960年日本伊藤发现褶皱臂尾轮虫作为仔鱼饵料的价值，年日本伊藤发现褶皱臂尾轮虫作为仔鱼饵料的价值，并进行大量培养技术的探索；并进行大量培养技术的探索；1964年日本开始大量培养年日本开始大量培养褶皱臂尾轮虫；褶皱臂尾轮虫；1965年年Hirata and Mori发现面包酵母是轮虫的合适饵料；发现面包酵母是轮虫的合适饵料；70年代广泛使用面包酵母；随后发现酵母轮虫缺乏鱼年代广泛使用面包酵母；随后发现酵母轮虫缺乏鱼类必需的高度不饱和脂肪酸，造成仔鱼大量死亡。因类必需的高度不饱和脂肪酸，造成仔鱼大量死亡。因此研究轮虫的
4、营养强化技术；此研究轮虫的营养强化技术；4第4页，共64页。我国我国60年代初，傅素宝等（年代初，傅素宝等（1962）研究壶状臂）研究壶状臂 尾轮虫；尾轮虫；70-80年代，解承林、郑严、王育、何年代，解承林、郑严、王育、何 进金、何连金、张道南、陈世杰等研究褶皱臂进金、何连金、张道南、陈世杰等研究褶皱臂 尾轮虫；尾轮虫；90年代，研究轮虫品系的选育，如大轮虫品系、年代，研究轮虫品系的选育，如大轮虫品系、小轮虫品系（中国科学院海洋研究所）和低温小轮虫品系（中国科学院海洋研究所）和低温 轮虫品系（轮虫品系（15，张学武）；，张学武）；至今，褶皱臂尾轮虫已经成为一种极为重要的至今，褶皱臂尾轮虫已经
5、成为一种极为重要的 生物饵料，在世界范围内广泛培养和应用。生物饵料，在世界范围内广泛培养和应用。5第5页，共64页。（三）（三）应用情况应用情况 在在60种种海洋有鳍鱼类和海洋有鳍鱼类和18种种甲壳动物幼体的培育甲壳动物幼体的培育 中应用。中应用。（四）（四）存在问题存在问题 探明轮虫两性繁殖的机制；探明轮虫两性繁殖的机制；开发轮虫高密度培养系统；开发轮虫高密度培养系统；选育、引进优良的轮虫品系；选育、引进优良的轮虫品系；如：如：100um小轮虫和小轮虫和500-1000um大轮虫；大轮虫；探讨室外土池稳定生产轮虫的技术措施；探讨室外土池稳定生产轮虫的技术措施；进一步探讨轮虫培养过程中增殖率突
6、然进一步探讨轮虫培养过程中增殖率突然 下降的原因和机制。下降的原因和机制。6第6页，共64页。第二节第二节 轮虫生物学轮虫生物学一、分类一、分类 欧美国家：袋形动物门，轮虫纲、真轮毛虫欧美国家：袋形动物门，轮虫纲、真轮毛虫 亚纲、亚纲、单生殖巢上目、臂尾单生殖巢上目、臂尾 轮虫轮虫 目、臂尾轮虫科，臂尾轮虫属。目、臂尾轮虫科，臂尾轮虫属。我国分为：轮虫门，单生殖巢纲，游泳目，臂我国分为：轮虫门，单生殖巢纲，游泳目，臂 尾尾 轮虫科，臂尾轮虫属。轮虫科，臂尾轮虫属。7第7页，共64页。培养种类培养种类：褶皱臂尾轮虫（褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis)L型型圆型臂尾轮虫（圆
7、型臂尾轮虫（Brachionus rotundiformis）-S型型壶状臂尾轮虫（壶状臂尾轮虫（B.bennini）萼花臂尾轮虫（萼花臂尾轮虫（B.calyciflorus）钩状狭甲轮虫（钩状狭甲轮虫（Colurella uncinata）：小型。）：小型。8第8页，共64页。二、形态特点二、形态特点 轮虫的三大特征轮虫的三大特征 轮轮 盘：盘：摄食、运动；摄食、运动；咀嚼器：咀嚼器：磨碎食物；磨碎食物；原肾管：原肾管：肾的雏形，内有焰细胞。肾的雏形，内有焰细胞。雌雄异体、异形雌雄异体、异形 雌性：雌性：常见，大小常见，大小196-250150-202um，结构完整；，结构完整；雄性：雄性：
8、少见，个体小：少见，个体小：80-130um，结构简单，只，结构简单，只 有轮盘、精巢和阴茎，不摄食；只在不良有轮盘、精巢和阴茎，不摄食；只在不良 环境下看见出现，游泳快，只为了交配。环境下看见出现，游泳快，只为了交配。9第9页，共64页。10第10页，共64页。1、外部结构外部结构被甲：被甲：透明、前缘有片状棘（背面透明、前缘有片状棘（背面6个、腹面个、腹面4个）；个）；轮盘部：轮盘部：由棒状由棒状突、纤毛环（打动水流）和触毛（感觉突、纤毛环（打动水流）和触毛（感觉 作用）组成；作用）组成；足部：足部：足趾、足腺；与头部均能缩进。足趾、足腺；与头部均能缩进。2、内部结构内部结构消化系统：消化
9、系统：口（漏斗状）口（漏斗状）口腔口腔 咀嚼器咀嚼器 食道（短）食道（短）胃（大，消化腺胃（大，消化腺1对）对）肠肠 泄殖腔泄殖腔 肛门肛门排泄系统：排泄系统：原肾管（焰细胞）原肾管（焰细胞）膀胱膀胱 泄殖腔泄殖腔11第11页，共64页。呼吸呼吸：靠纤毛打动的水流通过体壁进行气体交换。靠纤毛打动的水流通过体壁进行气体交换。神经：神经：脑（咽上脑（咽上N N节）和咽下节）和咽下N N节节 各器官。各器官。另外：眼点（另外：眼点（红色红色）、背触手和侧触手（刺毛为）、背触手和侧触手（刺毛为 应激反应）。应激反应）。生殖系统：生殖系统：雌体：雌体：卵巢（卵黄腺）卵巢（卵黄腺）输卵管输卵管 泄殖腔泄殖
10、腔 肛门。肛门。雄体：雄体：发达的精巢和阴茎，遇到雌性就交配。发达的精巢和阴茎，遇到雌性就交配。12第12页，共64页。三种臂尾轮虫的区别三种臂尾轮虫的区别 被甲前端被甲前端 被甲后端被甲后端 被甲后被甲后 被甲形状被甲形状 被甲长（被甲长（）棘刺棘刺（对）（对）棘刺棘刺（对）（对）端开口端开口 萼花臂萼花臂 2 1 园钝形园钝形 椭圆形椭圆形 300-350尾轮虫尾轮虫壶状臂壶状臂 3 0 园钝形园钝形 宽钝形宽钝形 190-240尾轮虫尾轮虫褶皱臂褶皱臂 3 0 腹面三角形腹面三角形 椭圆形椭圆形 S：80-180尾轮虫尾轮虫 背面正方形背面正方形 L：196-25013第13页，共64页
11、。褶皱臂尾轮虫褶皱臂尾轮虫 Brachionus plicatilis14第14页，共64页。萼花臂尾轮虫萼花臂尾轮虫 B.calyciflorus15第15页，共64页。壶状臂尾轮虫壶状臂尾轮虫 Brachionus urceus16第16页，共64页。龟甲轮虫龟甲轮虫 Keratella矩形龟甲轮虫矩形龟甲轮虫 螺形龟甲轮虫螺形龟甲轮虫 17第17页，共64页。水轮虫水轮虫Epiphanes18第18页，共64页。疣毛轮虫疣毛轮虫 Synchaeta19第19页，共64页。旋轮虫旋轮虫 Philodina20第20页，共64页。晶囊轮虫晶囊轮虫 Asplanchna21第21页，共64页。
12、三、轮虫的变异三、轮虫的变异 水温变化、饵料质量和培养密度等是引起水温变化、饵料质量和培养密度等是引起 轮虫形态和大小变化的主要原因。轮虫形态和大小变化的主要原因。S型轮虫（型轮虫（B.rotundiformis）：）：100-190um，适合较高，适合较高水温下培养；有两个亚种，水温下培养；有两个亚种，SS型（高盐）、型（高盐）、SM型（低型（低盐）。盐）。L型轮虫（型轮虫（B.plicatilis）：）：140-290um，适合较低水温，适合较低水温下培养的，广盐性种类。下培养的，广盐性种类。22第22页，共64页。四、生殖习性四、生殖习性单性生殖单性生殖即孤雌生殖，即孤雌生殖，某些水生动
13、物在适宜的环境条件下，某些水生动物在适宜的环境条件下，雌性个体产生的卵无需受精直接发育成雌性小个雌性个体产生的卵无需受精直接发育成雌性小个体，体，如轮虫、枝角类，卤虫等如轮虫、枝角类，卤虫等。在良好环境下：冬卵在良好环境下：冬卵 （非混交）（非混交）雌性雌性夏卵夏卵（无需受精，挂在足（无需受精，挂在足 基部）基部）雌性小个体。褶皱雌性小个体。褶皱臂尾轮虫大约臂尾轮虫大约4h产卵产卵1次，次，21个卵个卵/雌，持续时间雌，持续时间6.7d。23第23页，共64页。有性生殖有性生殖即混交生殖，即混交生殖，不混交雌体不混交雌体产生产生混交雌体混交雌体，混交雌，混交雌体经过减数分裂产生单倍体混交卵（需
14、精卵）。体经过减数分裂产生单倍体混交卵（需精卵）。若混交雌体在年轻时不与雄体交配，不论以后有若混交雌体在年轻时不与雄体交配，不论以后有无交配混交卵均不受精，发育为单倍体的雄体；无交配混交卵均不受精，发育为单倍体的雄体；若混交雌体交配了，混交卵受精，精和卵结合为若混交雌体交配了，混交卵受精，精和卵结合为双倍体的受精卵，再形成壳厚的休眠卵。双倍体的受精卵，再形成壳厚的休眠卵。在不良环境下，如在不良环境下，如饥饿、缺氧、密度过高、种饥饿、缺氧、密度过高、种群本身产生化学物质累积和生态环境群本身产生化学物质累积和生态环境（水温、盐水温、盐度、度、PH等等)突变突变等，等，非需精卵非需精卵混交雌体混交雌
15、体混交卵混交卵 休眠卵（冬卵）。休眠卵（冬卵）。24第24页，共64页。夏卵夏卵非需精卵，壳薄而非需精卵，壳薄而 光滑，卵形，个体小；长光滑，卵形，个体小；长56-130，宽，宽48-96，挂在，挂在母体上，母体上，2-14个。个。冬卵（休眠卵）冬卵（休眠卵）需精卵需精卵 受精受精 冬卵。冬卵。壳厚，个体大，弓形，卵壳厚，个体大，弓形，卵一端有较大空隙，卵黄呈一端有较大空隙，卵黄呈橘红色长约橘红色长约130，宽，宽88，不挂卵。不挂卵。25第25页，共64页。生活史生活史（夏卵）（夏卵）26第26页，共64页。诱发两性生殖的因子诱发两性生殖的因子（1）外源性因素）外源性因素生育酚：生育酚：维生
16、素维生素E直接作用于胚胎发育后期而诱直接作用于胚胎发育后期而诱 发混交雌发混交雌 体的形成；体的形成；种群密度：种群密度：种群密度的控制；种群密度的控制；食物：食物：食物的组成、丰度和成分对混交雌体的形食物的组成、丰度和成分对混交雌体的形 成具有诱发作用；成具有诱发作用；27第27页，共64页。温度：温度：温度高（温度高（30）或低（）或低（25）混交）混交 雌体的比例增大；雌体的比例增大；盐度：盐度：在褶皱臂尾轮虫培养中，盐度在褶皱臂尾轮虫培养中，盐度35，无，无 产生混交生殖，盐度为产生混交生殖，盐度为2和和30，有低水，有低水 平的混交生殖，盐度平的混交生殖，盐度4-20，有高的混交，有
17、高的混交 生殖；生殖；pH：较高的较高的pH（8.5）产生的混交生殖越多。）产生的混交生殖越多。28第28页，共64页。（2）外源性因素）外源性因素 遗传因子：遗传因子：与不同的品系有关；与不同的品系有关；母体的年龄：母体的年龄：年龄与混交雌体的比例成负相关；年龄与混交雌体的比例成负相关；孤雌生殖的累积时代数：孤雌生殖的累积时代数：时代数的积累对混交雌时代数的积累对混交雌 体的产生具有诱导作用。体的产生具有诱导作用。影响休眠卵形成效率的因素影响休眠卵形成效率的因素 遗传因素、温度、食物种类和浓度、培养液的盐度、遗传因素、温度、食物种类和浓度、培养液的盐度、pH值等。值等。29第29页，共64页
18、。五、培养环境五、培养环境 温度温度：适宜适宜2535，低于低于5不能存活，高于不能存活，高于40死亡，死亡，繁殖临界点繁殖临界点10和和40。S型：型：高温下（高温下（30）繁殖快，个体小；）繁殖快，个体小；L型：型：低温下（低温下（20-25 ）繁殖快，个体大。）繁殖快，个体大。盐度盐度：广盐性，广盐性，250，适宜，适宜1030，最适，最适15-25（海水稀（海水稀 释培养）；释培养）；S型：型：在盐度在盐度15-25下，下，含含n-3HUFA最高；最高；L型：型：在盐度在盐度30下，含下，含n-3HUFA最高。最高。轮虫对盐度突变适应能力差。低盐培养的轮虫投喂时要进行轮虫对盐度突变适应
19、能力差。低盐培养的轮虫投喂时要进行24小时驯化（小时驯化（20 40）30第30页，共64页。光照光照：间接影响。对藻类和光合细菌有利，且抑制原生间接影响。对藻类和光合细菌有利，且抑制原生 动物生长。研究认为：适宜动物生长。研究认为：适宜440010000lx。pH：6-9范围内无不良影响，适宜范围内无不良影响，适宜7.58.1。溶解氧溶解氧：保持：保持1.5mg/l以上，耐低氧能力强。以上，耐低氧能力强。L型轮虫缺型轮虫缺氧状态下，经氧状态下，经6h有半数存活。有半数存活。0.9mg/L时，生殖率开始下降。时，生殖率开始下降。直接影响：轮虫增殖、活力。直接影响：轮虫增殖、活力。间接影响：共存
20、微生物的生物相；投喂酵母时，溶氧保间接影响：共存微生物的生物相；投喂酵母时，溶氧保 2mg/l时，细菌生长良好，产生足够时，细菌生长良好，产生足够VB12供轮虫供轮虫 增殖用；高溶氧则影响细菌生长。增殖用；高溶氧则影响细菌生长。31第31页，共64页。非离子氨非离子氨（游离氨）：（游离氨）：不不超过超过1mg/L，（一般鱼类的安全值为一般鱼类的安全值为0.025mg/L）可容纳）可容纳6-10mg/LNH3+NH4+。氨氮氨氮 NH3+H2O NH4+OH-蛋白质分解蛋白质分解 尸体、残铒、粪便尸体、残铒、粪便 种群密度种群密度：（1）密度大：）密度大：怀卵量少，繁殖慢；怀卵量少，繁殖慢；（2
21、）密度小：）密度小：怀卵量多，繁殖快。怀卵量多，繁殖快。间疏采收：间疏采收：轮虫达到一定密度时（轮虫达到一定密度时（200个个/ml），繁），繁 殖力下降，必需稀疏密度，才能正常生长。殖力下降，必需稀疏密度，才能正常生长。32第32页，共64页。悬浊物悬浊物：主要由细菌、粪便、残饵构成；量多时主要由细菌、粪便、残饵构成；量多时影响收获作业，并可能把病源性细菌带入饲育池；影响收获作业，并可能把病源性细菌带入饲育池；可用过滤网垂放于培养槽去除悬浊物。可用过滤网垂放于培养槽去除悬浊物。细菌细菌细菌相细菌相：弧菌属（弧菌属（Vibrio）、不动杆菌属）、不动杆菌属（Acinetobacter）、假单胞
22、菌属（）、假单胞菌属（Pseudomonas）占占优势时，增殖快。色素生产菌，如黄杆菌属优势时，增殖快。色素生产菌，如黄杆菌属（Flavobacterium）和解藻朊酸弧菌（）和解藻朊酸弧菌（Vibrio alginolyticus）占优势时，增殖受阻碍。可添加有益）占优势时，增殖受阻碍。可添加有益菌保持轮虫培养的稳定性。菌保持轮虫培养的稳定性。维生素维生素V12生产菌生产菌：对轮虫增殖有明显的促进作用。对轮虫增殖有明显的促进作用。33第33页，共64页。原生动物及其他大型生物原生动物及其他大型生物原生动物原生动物鞭毛虫（滴虫鞭毛虫（滴虫 Monas和波豆虫和波豆虫Bodo）纤毛虫（游仆虫纤毛
23、虫（游仆虫Euplotes 和尾丝虫和尾丝虫Uronema）原生动物的增加，一方面消耗有益轮虫增殖的细菌，原生动物的增加，一方面消耗有益轮虫增殖的细菌，另方面又与轮虫竞争生存空间，对轮虫的增殖非常另方面又与轮虫竞争生存空间，对轮虫的增殖非常不利。不利。太阳虫（太阳虫（Oxnerella maritima）：分泌毒物刺杀轮虫。：分泌毒物刺杀轮虫。其他大型生物其他大型生物桡足类、卤虫：桡足类、卤虫：捕食轮虫，粪便堵塞收获网目并带入捕食轮虫，粪便堵塞收获网目并带入培育池粘附在仔鱼身上。培育池粘附在仔鱼身上。34第34页，共64页。轮虫培养槽中食物链关系图轮虫培养槽中食物链关系图35第35页，共64页
24、。六、轮虫培养的饵料六、轮虫培养的饵料食性：食性：滤食性，靠轮盘部的纤毛打动水流。滤食性，靠轮盘部的纤毛打动水流。饵料大小：饵料大小：5-25 m，15 m以下较适合。以下较适合。上限由食道直径决定，下限由上限由食道直径决定，下限由咀嚼器咀嚼器 大小决大小决定。定。饵料种类：饵料种类：细菌、酵母、微藻、小型原生细菌、酵母、微藻、小型原生动物、有机碎屑、微生物团絮、微颗粒饲动物、有机碎屑、微生物团絮、微颗粒饲料等。料等。36第36页，共64页。七、生长与繁殖七、生长与繁殖 生长生长 重重1-3 ug/只。只。夏卵（挂在雌性足基部）夏卵（挂在雌性足基部）小轮虫小轮虫 成虫（生物学最小型成虫（生物学
25、最小型 ）产卵期产卵期 死亡。死亡。个体发育（席贻龙、黄祥飞）个体发育（席贻龙、黄祥飞）胚胎发育期：卵产出胚胎发育期：卵产出-幼体孵出。幼体孵出。生殖前期：生殖前期：幼体孵出幼体孵出-产出第一个卵。产出第一个卵。生殖期：产卵期间（第一个生殖期：产卵期间（第一个-最后一个）。最后一个）。生殖后期：最后一个卵产出生殖后期：最后一个卵产出-死亡。死亡。0.52d3d4-5d37第37页，共64页。生殖量生殖量 几几-10多个多个/次，一般为次，一般为2-4个个/次，周期次，周期4-5天，天，雌性一生平均产卵雌性一生平均产卵21个。个。寿命寿命 7-10天。天。与水温成反比；环境好时，寿与水温成反比；
26、环境好时，寿 命长。命长。38第38页，共64页。第三节第三节 轮虫的分离和培养轮虫的分离和培养 一、种源一、种源分离分离：水温水温15时出现，用时出现，用250-300目的目的浮游生物网捞取，用眼或在解剖镜下吸出。浮游生物网捞取，用眼或在解剖镜下吸出。休眠卵孵化休眠卵孵化产品：产品：600美元美元/克；克；原培养轮虫池排掉旧水（留原培养轮虫池排掉旧水（留10-20cm），），纳入新水和微藻，池底休眠卵即可孵化。纳入新水和微藻，池底休眠卵即可孵化。索取或购买索取或购买 科研、教学、生产单位的轮虫种。科研、教学、生产单位的轮虫种。39第39页，共64页。二、培养方式二、培养方式一次性培养（一次性
27、培养（batch culture）：水体在水体在10m3以以内，先培养藻类内，先培养藻类接种接种投喂投喂达到一定密度达到一定密度 一次性收集，需一次性收集，需4-7天。天。S型轮虫（高水温、高密度、型轮虫（高水温、高密度、高给饵率）高给饵率）半连续培养（半连续培养（semi-continuous culture）间收培养，水体间收培养，水体10-40m3，藻类培养，藻类培养接种接种投喂投喂间间疏采收（虹吸法）疏采收（虹吸法）注入藻液。每天采收，注入藻液。每天采收，15-30天移池。天移池。L型轮虫（低水温、低密度、低给饵率）型轮虫（低水温、低密度、低给饵率）40第40页，共64页。连续培养（连
28、续培养（continuous culture）：室内封室内封闭性高密度培养系统；主要进行残饵、粪闭性高密度培养系统；主要进行残饵、粪便、尸体等有机物的处理便、尸体等有机物的处理 。41第41页，共64页。连续培养装置的特点连续培养装置的特点持续注水、持续收获、持续给饵。持续注水、持续收获、持续给饵。注水量注水量=收获量收获量防止有害生物的侵入，防止水质恶化。防止有害生物的侵入，防止水质恶化。生产量（日本）生产量（日本）S型轮虫：型轮虫：30-40亿亿/m3/日。日。42第42页，共64页。轮虫一级培养轮虫一级培养43第43页，共64页。轮虫二级培养轮虫二级培养44第44页，共64页。轮虫三级培
29、养轮虫三级培养45第45页，共64页。三、大量培养三、大量培养1、培养容器培养容器一次性培养：一次性培养：10m3，玻璃钢槽、小型水泥池等。，玻璃钢槽、小型水泥池等。半连续培养：半连续培养：40-50m3，大型水泥池。，大型水泥池。2、培养用水培养用水砂滤加砂滤加300目网过滤水，刚接种用水一定要消毒目网过滤水，刚接种用水一定要消毒（漂（漂白粉浓度要低：白粉浓度要低：20-30ppm，曝气时间要长：，曝气时间要长：2天）。天）。46第46页，共64页。3、接种接种一次性培养：一次性培养：先培养微藻，接种密度为先培养微藻，接种密度为0.1-0.5 个个/ml；7-10天采收；如投喂酵母，天采收；
30、如投喂酵母，接种密度为接种密度为14-70个个/ml；半连续培养：半连续培养：接种密度为接种密度为30-50个个/ml。如种不。如种不 足，足，接种水位可低些，要保证接种水位可低些，要保证 接种密度。接种密度。接种密度过低（数个接种密度过低（数个/ml），残饵过多，易引起原），残饵过多，易引起原生动物大量增殖，轮虫培养失败。生动物大量增殖，轮虫培养失败。47第47页，共64页。4、投饵投饵微藻类微藻类：优点：优点：营养好，水质好；以绿藻为最优，金藻次之营养好，水质好；以绿藻为最优，金藻次之；缺点：缺点：需要培养池，培养密度低需要培养池，培养密度低（40-60个个/ml）。）。培养设施不足时，国
31、外采用补充浓缩小球藻培养设施不足时，国外采用补充浓缩小球藻 （自浓缩或商品）。（自浓缩或商品）。投喂量：投喂量：小球藻小球藻100-500万细胞万细胞/ml；扁藻；扁藻2.5-5细胞细胞/ml酵母类酵母类：主要是面包酵母主要是面包酵母优点：优点：供应稳定，投喂简便，生长快，培养密度可达供应稳定，投喂简便，生长快，培养密度可达 400-600个个/ml；缺点：缺点：水质易污染，单独投喂，刚接种时培养较难；水质易污染，单独投喂，刚接种时培养较难；酵母轮虫缺少高度不饱和脂肪酸酵母轮虫缺少高度不饱和脂肪酸 。48第48页，共64页。投喂量：投喂量：5-8次次/日为好日为好 A、水温在、水温在20以下，
32、投喂量是以下，投喂量是50g/亿亿.日；日；B、水温在、水温在25以上，投喂量是以上，投喂量是100g/亿亿.日。日。投喂方法投喂方法 称重后放称重后放150-200目筛绢袋中，浸泡几分钟后利用目筛绢袋中，浸泡几分钟后利用 手搓滤，或采用搅拌机匀浆后，均匀泼洒池中，手搓滤，或采用搅拌机匀浆后，均匀泼洒池中，由于面包酵母不耐盐，应采取多次投喂。可用定由于面包酵母不耐盐，应采取多次投喂。可用定 时水泵进行投喂。时水泵进行投喂。49第49页，共64页。混合投喂混合投喂 用微藻（用微藻（30%-50%）和面包酵母（）和面包酵母（50%-70%）混）混 合投喂是一种规范化的投喂技术。合投喂是一种规范化的
33、投喂技术。A、微藻类：、微藻类：在轮虫收集后，以加水形式加入在轮虫收集后，以加水形式加入 一部分微藻一部分微藻,作为一次投喂；作为一次投喂；B、面包酵母：、面包酵母：50-70g/亿亿.日，分日，分4-7次投喂。次投喂。50第50页，共64页。5、轮虫计数轮虫计数 吸管法：吸管法：校正一支校正一支1毫升吸管毫升吸管(利用移液管移利用移液管移1毫升毫升水于一小烧杯中水于一小烧杯中,用吸管全吸取用吸管全吸取,利用玻璃刀或胶布作利用玻璃刀或胶布作液面记号液面记号)；先数；先数1毫升有几滴；利用小烧杯在充气毫升有几滴；利用小烧杯在充气周围取样，在单凹玻片上利用肉眼数周围取样，在单凹玻片上利用肉眼数5-
34、10滴或全数。滴或全数。几滴几滴/毫升毫升n个个/滴（平均）；滴（平均）；浮游生物计数框法：浮游生物计数框法：利用利用0.1ml、0.5ml、1ml浮游浮游生物计数框，在解剖镜或显微镜下观察。生物计数框，在解剖镜或显微镜下观察。51第51页，共64页。6、日常管理日常管理 观察轮虫的摄食状况、活力，维持准确观察轮虫的摄食状况、活力，维持准确 的投喂量；的投喂量；观察轮虫生长情况：数量变化、肥壮、观察轮虫生长情况：数量变化、肥壮、怀卵量；怀卵量；注意水质变化：吸底检查，尸体、残饵、注意水质变化：吸底检查，尸体、残饵、有机物厚度和原生动物数量，判断水质有机物厚度和原生动物数量，判断水质 好坏，是否
35、换水或移池。好坏，是否换水或移池。培养小球藻中加培养小球藻中加VB12（0.5mg/L）等，使轮虫增殖稳）等，使轮虫增殖稳定。定。52第52页，共64页。7、收获收获 一次性培养：一次性培养：100-200个个/ml，高时达，高时达400-600 个个/ml；半连续培养：半连续培养：200-300个个/ml,每次采收每次采收10-20%。收集方法：收集方法：虹吸：自吸或水泵抽，虹吸：自吸或水泵抽，250-300目网收集目网收集；光诱；光诱；网捞。网捞。53第53页，共64页。轮虫的人工收集轮虫的人工收集54第54页，共64页。55第55页，共64页。56第56页，共64页。8、轮虫的营养强化技
36、术、轮虫的营养强化技术用海水微绿藻（小球藻、微绿球藻、球等鞭金用海水微绿藻（小球藻、微绿球藻、球等鞭金 藻）进行二次强化培养藻）进行二次强化培养2-6小时以上；小时以上；用生鸡蛋黄和水乳化鱼肝油，强化用生鸡蛋黄和水乳化鱼肝油，强化6-12小时上；小时上；投喂含投喂含n-3HUFA的油脂酵母；的油脂酵母；使用各种商品强化剂进行营养强化。使用各种商品强化剂进行营养强化。57第57页，共64页。四、土池大面积培养四、土池大面积培养 1、建池：建池：面积面积1-2亩（池太大不好管理），水深亩（池太大不好管理），水深1-1.2米，米，泥或泥沙底；靠近淡水源，可调节比重。泥或泥沙底；靠近淡水源，可调节比重
37、。2、清池：清池：彻底消除淤泥：彻底消除淤泥：抽掉污泥或晒干后利用推土机推掉。抽掉污泥或晒干后利用推土机推掉。消毒消毒 A、漂白粉：、漂白粉：60ppm，氯，氯0.15-0.2ppm，药效，药效3-5天；天；B、石灰：、石灰：200ppm，药效，药效7-10天；天；C、氨水：、氨水：15-17%，250ppm，杀死动物，培养藻类。，杀死动物，培养藻类。药效药效2-3天；天；D、茶饼：、茶饼：50kg/亩。泡亩。泡1天后用，杀死动物，培养藻类。天后用，杀死动物，培养藻类。药效药效1个月。个月。58第58页，共64页。3、纳水纳水：30-50cm 轮虫养殖：滤网轮虫养殖：滤网250-300目；目；
38、鱼虾养殖：滤网鱼虾养殖：滤网60-80目，使动物及卵进不来。目，使动物及卵进不来。4、施肥施肥：培培养水色。养水色。选择好天气，上午选择好天气，上午8-10点施肥。点施肥。有机肥：有机肥：鸡粪（鸡粪（100-150kg/亩）或猪粪（亩）或猪粪（200-300kg/亩）；亩）；发酵：发酵：100kg（湿）（湿）+5kg石灰混合后盖上塑料薄石灰混合后盖上塑料薄 膜发酵膜发酵7-10天。天。无机肥：无机肥：尿素（尿素（2kg/亩）亩）+过磷酸钙（过磷酸钙（0.5kg/亩），亩），或复合肥（或复合肥（2kg/亩）亩）+尿素（尿素（0.5-1kg/亩）。亩）。5、接种接种：待有一定水色后，接种待有一定水
39、色后，接种0.5-1个个/ml，带水抽入。，带水抽入。59第59页，共64页。6、日常管理日常管理 维持水色：维持水色：是否要追肥；是否要追肥；调节比重：调节比重：加淡水调节盐度加淡水调节盐度18；防止水质恶化：防止水质恶化：换水。换水。7、收获收获 超过超过20个个/ml，维持，维持5-20个个/ml。拖网收集：拖网收集：250目大网；目大网；置一小网箱于池中，利用抽水泵不断抽入小网箱置一小网箱于池中，利用抽水泵不断抽入小网箱 中收集；中收集；趋光收集。趋光收集。60第60页，共64页。五、轮虫的运输五、轮虫的运输轮虫的选择轮虫的选择要求活力好，病弱的轮虫不宜采用。要求活力好，病弱的轮虫不宜
40、采用。高溶氧低温海水的准备高溶氧低温海水的准备70%海水海水+30%海水冰（海水冰（WT：0-5；DO：200%以上）以上）轮虫的收获轮虫的收获收获好的轮虫暂放于塑料桶内（收获好的轮虫暂放于塑料桶内（10亿个体亿个体/10升，冲气）。升，冲气）。轮虫的冲洗轮虫的冲洗用用40-60目筛绢过滤去除杂物，尽量冲洗干净，可使用目筛绢过滤去除杂物，尽量冲洗干净，可使用8-20的海水。的海水。轮虫的冷却轮虫的冷却用用海水再冲洗数回，然后移入装有海水再冲洗数回，然后移入装有高溶氧低温海水的塑料高溶氧低温海水的塑料桶内（桶内（10亿个体亿个体/6-8升）升）装袋装袋：用塑料袋打包，并添加适量（用塑料袋打包，并
41、添加适量（20ml）的微藻，然后）的微藻，然后用泡沫箱装运。用泡沫箱装运。61第61页，共64页。六、休眠卵的采收与保藏六、休眠卵的采收与保藏 1、刺激产生休眠卵的方法刺激产生休眠卵的方法 高密度+饥饿；突然改变盐度和温度。2、休眠卵的分离休眠卵的分离 糖盐高渗液：饱和食盐水+20%的蔗糖。3、保藏保藏 置5冰箱，可保存1-2年，最长8年。62第62页，共64页。作业：作业：1、轮虫产生休眠卵所需条件。2、用半连续培养方式叙述轮虫获得高产、稳产的措施。3、轮虫大面积培养的技术。63第63页，共64页。2、用半连续培养方式叙述轮虫获得高产、稳产的措施。答：一、种源二、小型培养三、大量培养1、池子与消毒2、接种与投饵3、日常管理与采收4、提供适宜的生态条件5、酵母轮虫的营养强化6、病害防治64第64页，共64页。
