1、好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏1兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 第第 八八 章章 兽医生物制品兽医生物制品 制造基本程序制造基本程序生物制品教学课件下载-样章.ppt好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏2兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件要求要求【知识目标知识目标】熟悉兽医生物制品制造的基本程序:理解兽医生物制品的生产工艺;掌握疫苗、免疫血清的制造程序;【能力目标能力目标】能操作相关的仪器,如组织捣碎机、培养箱等:能进行简单疫苗和免疫血清、卵黄抗体的制备。好运动者
2、健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏3兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件内内 容容u 疫苗制造;疫苗制造;u 类毒素制造;类毒素制造;u 免疫血清制造;免疫血清制造;u 诊断试剂制造。诊断试剂制造。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏4兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 第一节第一节 疫苗制造疫苗制造u 细菌性灭活疫苗细菌性灭活疫苗u 细菌性活疫苗制造细菌性活疫苗制造u 病毒性动物组织疫苗制造病毒性动物组织疫苗制造u 好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求
3、者成 持续更新请收藏5兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 细菌性灭活疫苗制造细菌性灭活疫苗制造 菌种菌种 种子液种子液 菌液菌液 灭活菌液灭活菌液 菌苗原液菌苗原液 配苗、乳化配苗、乳化 分装分装 检验检验 接种培养基接种培养基浓缩浓缩佐剂佐剂好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏6兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 细菌性活疫苗制造细菌性活疫苗制造弱毒菌种弱毒菌种 种子液种子液 菌液菌液 配苗配苗 菌苗原液菌苗原液 检验检验 活疫苗活疫苗 冻冻干干接种培养基接种培养基保护剂保护剂好运动者健,好思考者智,好助人者乐好
4、读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏7兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 病毒性动物组织疫苗制造病毒性动物组织疫苗制造 种毒种毒 健康动物健康动物 感染动物感染动物毒液毒液 保护剂保护剂 分装冻干分装冻干 活疫苗活疫苗 灭活病毒液灭活病毒液 乳化乳化分装分装 灭活苗灭活苗佐剂佐剂好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏8兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 注意事项注意事项:u 动物选择动物选择u 种毒种毒u 常用的接种途径常用的接种途径 u 观察与收获观察与收获u 制苗制苗u脑内注射脑内注射u静脉注射静脉注
5、射u肌肉注射肌肉注射u皮下注射皮下注射u腹腔注射腹腔注射好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏9兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 种毒种毒 鸡胚鸡胚 收获尿囊液收获尿囊液 配苗配苗 浓缩病毒浓缩病毒 分装检验分装检验 离离心心佐剂佐剂好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏10兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 种毒与毒种继代种毒与毒种继代 适应于鸡胚的种毒包括自然弱毒与适应于鸡胚的种毒包括自然弱毒与人工培育的弱毒两类。多为冻干毒。人工培育的弱毒两类。多为冻干毒。冻干毒种
6、需按规定要求在鸡胚继代冻干毒种需按规定要求在鸡胚继代复壮,通常继代复壮,通常继代3代以上,经检定符合代以上,经检定符合标准后方可作为生产疫苗的毒种标准后方可作为生产疫苗的毒种,包括无包括无菌检测、毒价和其他项目的检定等。菌检测、毒价和其他项目的检定等。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏11兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 鸡胚选择鸡胚选择:受精卵必须来自受精卵必须来自SPF鸡群鸡群,从受精卵入从受精卵入孵开始至培育全过程都应保持无菌,要求孵开始至培育全过程都应保持无菌,要求一定的温度和湿度,且需不断翻动。一定的温度和湿度,且需
7、不断翻动。58日龄胚适用于卵黄囊接种:日龄胚适用于卵黄囊接种:911日龄胚用于尿囊腔接种;日龄胚用于尿囊腔接种;1012日龄胚日龄胚适于羊膜腔接种;适于羊膜腔接种;1113日龄胚用于绒毛日龄胚用于绒毛尿囊膜接种。尿囊膜接种。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏12兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 接毒与收获接毒与收获 鸡胚接种途径主要有鸡胚接种途径主要有尿囊腔接种尿囊腔接种、羊膜羊膜腔接种腔接种、卵黄囊接种卵黄囊接种和和绒毛尿囊膜绒毛尿囊膜接种接种4 4种。种。鸡胚接毒后培养增殖的时间、温度、湿鸡胚接毒后培养增殖的时间、温度、湿
8、度,以及收获的标准与内容物依不同的病毒度,以及收获的标准与内容物依不同的病毒 和不同疫苗而异和不同疫苗而异。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏13兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 配苗配苗经无菌检验合格后即可进行配苗。经无菌检验合格后即可进行配苗。湿苗湿苗:通常于鸡胚液内按每毫升加入通常于鸡胚液内按每毫升加入青、链霉素青、链霉素5001000Iu,放置,放置010冷冷暗处处理后分装。暗处处理后分装。冻干苗冻干苗:按比例加入保护剂,充分混按比例加入保护剂,充分混 合后过滤,在滤液内按每毫升加入青、合后过滤,在滤液内按每毫升加入青
9、、链霉索链霉索5001000Iu,混匀后分装冻干,混匀后分装冻干。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏14兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 五病毒性细胞培养疫苗制造五病毒性细胞培养疫苗制造动物或胚胎动物或胚胎 组织组织 剪碎消化剪碎消化 细胞悬液细胞悬液 收获病毒收获病毒 接种病毒接种病毒 生长细胞生长细胞 原苗原苗 配苗检验配苗检验 活疫苗活疫苗 灭活病毒液灭活病毒液 配苗检验配苗检验 灭活苗好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏15兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八
10、章 第二节第二节 类毒素制造类毒素制造u 细菌毒素的概念细菌毒素的概念u 脱毒脱毒u 类毒素的精制类毒素的精制 好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏16兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 细菌毒素的概念细菌毒素的概念 细菌毒素指致病性细菌产生的毒性物质。细菌毒素指致病性细菌产生的毒性物质。分为外毒素和内毒素两类。外毒素是细菌在分为外毒素和内毒素两类。外毒素是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏17兽用生物制品与
11、检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 u 外毒素主要是由革兰氏阳性细菌产生。外毒素主要是由革兰氏阳性细菌产生。u 外毒素属蛋白质,一般容易灭活。外毒素属蛋白质,一般容易灭活。u 外毒素可用甲醛脱毒而成为类毒素。外毒素可用甲醛脱毒而成为类毒素。u 由于类毒素既无毒性,又保持了毒素的由于类毒素既无毒性,又保持了毒素的 抗原性,能产生抗毒素抗体,故可用于抗原性,能产生抗毒素抗体,故可用于 人工免疫。人工免疫。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏18兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 脱毒脱毒u 温度温度:一般脱毒采用一般脱毒采用3739
12、。u pH:在微酸性时脱毒速度慢;在碱性在微酸性时脱毒速度慢;在碱性 时脱毒速度快,但类毒素抗原性易受时脱毒速度快,但类毒素抗原性易受 破坏。破坏。u 甲醛含量甲醛含量:1%。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏19兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 类毒素的精制类毒素的精制 u 物理学方法:冻干、氧化铝吸附剂物理学方法:冻干、氧化铝吸附剂 u 化学沉淀法:酸、盐析、有机溶剂化学沉淀法:酸、盐析、有机溶剂 u 层析法层析法:凝胶过滤凝胶过滤好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏20兽用
13、生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 第三节第三节 免疫血清制造免疫血清制造好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏21兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 一免疫血清的概念一免疫血清的概念 又称高免血清,亦称为抗血清,为含又称高免血清,亦称为抗血清,为含有高效价特异性抗体的动物血清制剂,能有高效价特异性抗体的动物血清制剂,能用于治疗或紧急预防相应病原体所致的疾用于治疗或紧急预防相应病原体所致的疾病。此种血清凶含有特异性的免疫抗体,病。此种血清凶含有特异性的免疫抗体,用作被动免疫。根据免疫血清作用的对象用作被动免疫。根据免疫血
14、清作用的对象不同,可分为抗病血清和抗毒素两类。不同,可分为抗病血清和抗毒素两类。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏22兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 u动物的选择与管理动物的选择与管理u免疫原免疫原u免疫程序及制定的原则免疫程序及制定的原则 u血液采集与血清的提取血液采集与血清的提取好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏23兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 动物的选择与管理动物的选择与管理:u 动物的品种动物的品种:马、牛、山羊、绵羊、:马、牛、山羊、绵羊、猪、
15、兔等,马居多。猪、兔等,马居多。u 年龄及健康状况年龄及健康状况:青壮年:青壮年u 动物的管理动物的管理好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏24兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 免疫原免疫原:制备抗苗免疫血清,基础免疫用制备抗苗免疫血清,基础免疫用抗原多为疫苗或死菌,而高度免疫的抗抗原多为疫苗或死菌,而高度免疫的抗原,一般选用毒力较强的毒株。原,一般选用毒力较强的毒株。制造抗病毒免疫血清制造抗病毒免疫血清(如抗猪瘟(如抗猪瘟血清)血清)基础免疫的抗原,可用猪瘟兔化基础免疫的抗原,可用猪瘟兔化弱毒疫苗;高度免疫抗原,则用猪瘟血弱毒
16、疫苗;高度免疫抗原,则用猪瘟血毒或脏器毒乳剂等强毒。毒或脏器毒乳剂等强毒。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏25兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 免疫程序及制定的原则免疫程序及制定的原则(一)(一)免疫程序免疫程序 1 基础免疫基础免疫 2 高度免疫高度免疫(二)(二)制定原则制定原则 u 常用常用皮下皮下或或肌肉肌肉注射注射,也可也可多部位多部位注射。注射。u每次免疫后,血清中抗体效价会逐渐升每次免疫后,血清中抗体效价会逐渐升 至至最高水平后最高水平后又又下降。下降。u 给被免疫动物给被免疫动物间隔间隔时间,解除抑制作用。时
17、间,解除抑制作用。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏26兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 血液采集与血清的提取血液采集与血清的提取(一)(一)血液的采集血液的采集 1 全放血全放血 2 部分采血部分采血 (二)(二)血清的提取血清的提取 1自然凝结加压法自然凝结加压法 2枸橼酸盐血浆分离血清法枸橼酸盐血浆分离血清法 好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏27兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章(一)(一)猪瘟抗血清猪瘟抗血清(二)(二)破伤风抗毒素破伤风抗毒素(三三)
18、卵黄抗体卵黄抗体 好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏28兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章(一)(一)选用选用60kg左右健康猪,注射猪瘟兔化左右健康猪,注射猪瘟兔化弱毒疫苗弱毒疫苗2 ml,隔,隔1421 d后高度免疫。后高度免疫。高度高度免疫程序:免疫程序:第一次高免,肌注血毒第一次高免,肌注血毒100 ml 第二次高免,肌注血毒第二次高免,肌注血毒200ml 第三次高免,肌注血毒第三次高免,肌注血毒300 ml。每次间隔每次间隔10 d。第三次免疫后。第三次免疫后911 d放血,也可以多次采血。放血,也可以多次采血。好运动
19、者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏29兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章(二)破伤风抗毒素(二)破伤风抗毒素1 选择选择512岁营养良好的马匹,先用岁营养良好的马匹,先用 破伤风类毒素进行基础免疫,破伤风类毒素进行基础免疫,2 第一次注射精制破伤风类毒素油佐第一次注射精制破伤风类毒素油佐 剂抗原剂抗原1 ml,第二次注射,第二次注射2ml。3 13个月后进行高度免疫个月后进行高度免疫。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏30兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 4 第一程高
20、度免疫注射第一程高度免疫注射58针,最后一次针,最后一次免疫后免疫后67 d采血,隔采血,隔l天再次采血,检测天再次采血,检测效价。效价。5 抗毒素效价每毫升不低于抗毒素效价每毫升不低于1 200个单位个单位(AE)。休息。休息1416d,进行第二程免疫,进行第二程免疫,一般免疫一般免疫3次,间隔次,间隔57 d,最后一次免疫,最后一次免疫后后79 d采血。采血。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏31兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 6 破伤风血清,用胃酶消化,按次序加破伤风血清,用胃酶消化,按次序加 入入15、20硫酸铵进行
21、沉淀,硫酸铵进行沉淀,7 加入加入10的明矾使明矾含量为的明矾使明矾含量为1,静置使之沉淀。静置使之沉淀。8 取沉淀后的上清加取沉淀后的上清加38的硫酸铵沉的硫酸铵沉 淀,沉淀物经透析即成精制破伤风抗淀,沉淀物经透析即成精制破伤风抗 毒素。毒素。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏32兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章(三三)卵黄抗体()卵黄抗体(IBD):):u 健康产蛋鸡群,油佐剂灭活苗肌注健康产蛋鸡群,油佐剂灭活苗肌注 2ml/2ml/只只7 71010日后,重复注射一次;日后,重复注射一次;u 再过再过7 71010刚再注
22、一次,油苗剂量适度刚再注一次,油苗剂量适度 递增递增;u 定期检测卵黄抗体水平,琼扩效价达定期检测卵黄抗体水平,琼扩效价达 l l:128128时时,收集高免蛋大约一个月。收集高免蛋大约一个月。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏33兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 u 消毒,分离蛋黄。消毒,分离蛋黄。u 加入生理盐水进行稀释加入生理盐水进行稀释(卵黄抗体琼卵黄抗体琼 扩效价不低于扩效价不低于l:16一一l:32),加青、链,加青、链 霉素各霉素各1 000u,加硫柳汞浓度达,加硫柳汞浓度达1/10 000,充分搅拌后分装,充分
23、搅拌后分装,4贮存。贮存。u 效价测定、细菌培养和安全试验,合效价测定、细菌培养和安全试验,合 格后出厂。格后出厂。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏34兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 治疗时应用越早效果越好。治疗时应用越早效果越好。血清用量根据动物的体重和年龄确定。血清用量根据动物的体重和年龄确定。静脉注射血清的量较大时,将血清加温静脉注射血清的量较大时,将血清加温 至至30左右再注射。左右再注射。皮下或肌肉注射,当血清量大时,可分皮下或肌肉注射,当血清量大时,可分 为几个部位注射,并揉压使之分散。为几个部位注射,并揉压使之分散。对不同动物源的血清应事先脱敏。对不同动物源的血清应事先脱敏。好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏35兽用生物制品与检测课件兽用生物制品与检测课件第八章 1解释:类毒素、高免血清、卵黄抗体。解释:类毒素、高免血清、卵黄抗体。2细菌性灭活疫苗的制备包括哪些过程细菌性灭活疫苗的制备包括哪些过程?3细菌性活疫苗的质量受哪些因素的影响细菌性活疫苗的质量受哪些因素的影响?4病毒性疫苗有哪几类,各有何优缺点病毒性疫苗有哪几类,各有何优缺点?5简述类毒素制备的基本过程。简述类毒素制备的基本过程。