1、药品生产洁净环境监测药品生产洁净环境监测2019版版GMP培训培训洁净环境监测的内容洁净环境监测的内容 1、空气洁净度测试（悬浮粒子监测）2、洁净室内表面空气中微生物测试 3、温湿度测试 4、空气压差测试 5、风速和风量均匀度测量 6、洁净室内空气自净时间测试 7、高效过滤器HEPA完整性测试相关术语相关术语洁净室状态 空态（as-built）：洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，但是没有生产设备、原材料或人员的状态。静态(at-rest）静态a：洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，生产工艺设备已安装、洁净室（区）内没有生产人员的状态。静态b：洁
2、净室（区）在生产操作全部结束，生产操作人员撤离现场并经过20 min自净后。动态（operational）：洁净室（区）已处于正常生产状态，设备在指定的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作。相关术语相关术语气流形式 单向流（unidirectional airflow）：沿单一方向呈平行流线并且与气流方向垂直的断面上风速均匀的气流。与水平面垂直的叫垂直单向流（vertical unidirectional airflow)，与水平面平行的叫水平单向流（horizontal unidirectional airflow）。非单向流（non-unidirectional airflow）：具有
3、多个通路循环特性或气流方向不平行的气流。洁净工作台（clean bench）一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是自身能够供给经过过滤的空气或气体，按气流形式分为垂直单向流工作台、水平单向流工作台等。相关术语相关术语 洁净度（cleanliness）洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径悬浮粒子的统计数量来区分的洁净程度。悬浮粒子（airborne particle）用于空气洁净度分级的空气悬浮粒子尺寸范围在0.1-1000 mm的固体和液体粒子。对于悬浮粒子计数测量仪，一个微粒球的面积或体积产生一个响应值，不同的响应值等价于不同的微粒直径。相关术语相关术语菌落（colon
4、y forming units）微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU。浮游菌(airborne microbe)按照标准（GBT 16293-2019）提及的方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。浮游菌浓度（airborne microbe concentration）单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少，以计数浓度表示，单位是CFU/m3或CFU/L相关术语相关术语沉降菌（settling microbe）用标准（GBT 16294-2019）提及的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条
5、件下繁殖到可见的菌落数。沉降菌菌落数（settling microbe plate count）规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以CFU/皿表示。洁净环境监测的法规依据洁净环境监测的法规依据新版新版GMP对药品生产环境的要求对药品生产环境的要求 第四十六条 为降低污染和交叉污染的风险，厂房、生产设施和设备应当根据所生产药品的特性、工艺流程及相应洁净级别要求合理设计、布局和使用。无菌药品，附录1 第三十八条 无菌药品生产的洁净区空气净化系统应当保持连续运行，维持相应的洁净度级别。因故停机再次开启空气净化系统，应当进行必要的测试以确认仍能达到规定的洁净度级别要求。洁净环境监测的法
6、规依据洁净环境监测的法规依据新版新版GMP对药品生产环境的要求对药品生产环境的要求 无菌药品生产级别洁净环境监测的法规依据洁净环境监测的法规依据新版新版GMP对药品生产环境的要求对药品生产环境的要求 洁净区微生物监测的动态标准洁净环境监测的法规依据洁净环境监测的法规依据温湿度、换气、气流组织温湿度、换气、气流组织 第四十二条 厂房应有适当的照明、温度、湿度和通风，确保生产和贮存的产品质量以及相关设备性能不会直接或间接地受到影响。第四十八条 应当根据药品品种、生产操作要求及外部环境状况等配置空调净化系统，使生产区有效通风，并有温度、湿度控制和空气净化过滤，保证药品的生产环境符合要求。洁净区与非洁
7、净区之间、不同级别洁净区之间的压差应不低于10帕斯卡。必要时，相同洁净度级别的不同功能区域（操作间）之间也应保持适当的压差梯度。洁净环境监测的法规依据洁净环境监测的法规依据温湿度、换气、气流组织温湿度、换气、气流组织 第四十八条 口服液体和固体制剂、腔道用药（含直肠用药）、表皮外用药品等非无菌制剂生产的暴露工序区域及其直接接触药品的包装材料最终处理的暴露工序区域，应当参照应当参照“无菌药品无菌药品”附录中附录中D级洁净区的级洁净区的要求设置要求设置，企业可根据产品的标准和特性对该区域采企业可根据产品的标准和特性对该区域采取适当的微生物监控措施取适当的微生物监控措施。洁净环境监测的法规依据洁净环
8、境监测的法规依据温湿度、换气、气流组织温湿度、换气、气流组织 第五十三条 产尘操作间（如干燥物料或产品的取样、称量、混合、包装等操作间）应保持相对负压或采取专门的措施，防止粉尘扩散、避免交叉污染并便于清洁。第一百九十条 在干燥物料或产品，尤其是高活性、高毒性或高致敏性物料或产品的生产过程中，应采取特殊措施，防止粉尘的产生和扩散。洁净环境监测的法规依据洁净环境监测的法规依据温湿度、换气、气流组织温湿度、换气、气流组织 第一百九十七条 生产过程中应尽可能采取措施，防止污染和交叉污染，如设置必要的气锁间和排风；空气洁净度级别不同的区域应有压差控制；应降低未经处理或未经充分处理的空气再次进入生产区导致
9、污染的风险。洁净室的控制参数洁净室的控制参数1 悬浮离子和微生物悬浮离子和微生物：主要影响产品纯度、交叉污染和无菌程度。2 温度和相对湿度温度和相对湿度：主要影响产品工艺条件和细菌的繁殖条件、由操作舒适度带来的对产品质量的影响。3 换气次数换气次数：影响洁净度和人员舒适度。4 工作面截面风速工作面截面风速：影响洁净度和人员舒适度。5 静压差静压差：影响洁净度。6 照度照度：影响产品的工艺条件。7 噪声噪声：影响人员舒适度。8 新风量新风量：影响人员舒适度。9 自净时间自净时间：代表系统的“恢复能力”。测试指标测试指标 温度和相对湿度的测试。洁净室（区）的温度和湿度应与其生产及工艺要求相适应（无
10、特殊要求时，温度在18-26，相对湿度在45-65%为宜）。静压差的测试。洁净室与非洁净室之间的静压差应大于10 Pa；相邻不同洁净级别的洁净室之间的压差应大于5 Pa；洁净区与室外压差应大于12 Pa。风量、风速的测试 a)非单向流洁净室系统的各项实测风量及换气次数应大于各自的设计风量或换气次数，但不应超过20%；室内各风口的风量与各风口设计风量之差均不应超过设计风量的15%。b)单向流净室实测室内平均风速应大于设计风速，但不应超过15%。悬浮粒子测试方法悬浮粒子测试方法 在空态或静态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应力求均匀，并不得少于最少采样点数目；在动态测试时，悬浮粒子采样点数目及其
11、布置应根据产品的生产及工艺关键操作区设置。1 1 采样次数的限定采样次数的限定 对任何小洁净室（区）或局部空气净化区域，采样点数目不得少于2个，总采样点次数不得少于5次。每个采样点的采样次数可以多于1次，且不同采样点的采样次数可以不同。悬浮粒子测试方法悬浮粒子测试方法2 采样点位置采样点位置 a)采样点一般在离地面0.8 m高度的水平面上均匀布置。b)采样点多于5点时，也可以在离地面0.8-1.5 m高度的区域内分层布置，但每层不少于5点。悬浮粒子测试方法悬浮粒子测试方法3 采样注意事项采样注意事项 a)对于单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口应正对气流方向；对于非单向流洁净室（区），粒子
12、计数器的采样管口宜向上。b)布置采样点时，应尽量避开回风口。c)采样时，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量少活动。d)采样完毕后，宜对粒子计数器进行自净。e)应采取一切措施防止采样过程的污染。悬浮粒子测试方法悬浮粒子测试方法4 测试状态测试状态 a)空态、静态和动态三种状态均可进行测试。b)空态或静态时，室内测试人员不得多于2人。5 测试时间测试时间 a)在静态测试时，对单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过10 min自净后开始；对非单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20 min自净后开始；b)在动态测试时，则须记录生产开始的时间以及测试时间。悬浮粒子测试
13、方法悬浮粒子测试方法6 采样采样 按照粒子计数器的操作规程，选择合适的粒径、采样量、采样时间及每个采样点的采样次数进行采样。7 结果计算结果计算 a）计算每个采样点的平均悬浮粒子浓度（粒/m3）b）计算洁净室的平均粒子浓度（粒/m3）c）计算标准差SE8 结果评定结果评定 判断悬浮粒子的洁净度级别应同时满足以下两个条件：a)每个采样点的平均悬浮粒子浓度必须不大于规定的级别界限；b)全部采样点才悬浮粒子浓度平均值均值的95%置信上限必须不大于规定的级别界限。浮游菌测试方法浮游菌测试方法1 最少采样点数目最少采样点数目 参照悬浮粒子测试方法。2 采样点的位置采样点的位置 参照悬浮粒子测试方法。3
14、采样次数采样次数 每个采样点一般采样一次。4 采样量采样量 最小采样量洁净度级别采样量 L/次100100010 000500100 000100300 0001005 采样注意事项采样注意事项 a)对于单向流洁净室（区）或送风口，采样器采样口朝向应正对气流方向；对于非单向流洁净室（区），采样口向上。b)布置采样点时，应尽量避开尘粒较集中的回风口。c)采样时，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量少活动。d)应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。e)培养皿在用于检测时，为避免培养皿运输或搬运过程造成的影响，宜同时进行阴性对照试验，每次或每个区域取1个对照皿，与采样皿同法操作但不需
15、暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，结果应无菌落生长。6 测试状态（测试状态（参照悬浮粒子测试方法）7 测试时间（测试时间（参照悬浮粒子测试方法）浮游菌测试方法浮游菌测试方法浮游菌测试方法浮游菌测试方法8 采样及培养采样及培养 按照浮游菌采样器的操作规程进行采样。全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配置的培养基经采样后，在30-35培养箱中培养，时间不少于2 d；采用沙氏培养基（SDA）配置的培养基经采样后，在20-25培养箱中培养，时间不少于5 d。9 结果观察及计算结果观察及计算 用计数方法得出各个培养皿的菌落数，并计算出每个测
16、点的浮游菌平均浓度（CFU/m3或CFU/L）。浮游菌测试方法浮游菌测试方法洁净度级别药品生产质量管理规范CFU/m3100510 000100100 000500300 0001000洁净室（区）浮游菌技术要求洁净室（区）浮游菌技术要求沉降菌测试方法沉降菌测试方法1 1 最少采样点数目（最少采样点数目（参照悬浮粒子测试方法）2 2 采样点的位置（采样点的位置（参照悬浮粒子测试方法）3 3 采样次数（采样次数（参照悬浮粒子测试方法）4 4 最少培养皿数最少培养皿数 在满足最少采样点数目的同时，还宜满足最少培养皿数。最少培养皿数洁净度级别最少培养皿数1001410 0002100 0002300
17、 00025 5 采样注意事项（采样注意事项（参照悬浮粒子测试方法）沉降菌测试方法沉降菌测试方法6 6 测试状态（测试状态（参照悬浮粒子测试方法）7 7 测试时间（测试时间（参照悬浮粒子测试方法）8 8 采样及培养采样及培养 将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基暴露在空气中。静态测试时，培养皿暴露时间为30 min以上；动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4 h。全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。培养方法同浮游菌测试培养方法。9 9 结果观察及计算结果观察及计算 用计数方法得出各个培养皿的菌落数，并计算出每个测点的沉降菌平均菌落数（CFU
18、/皿）。沉降菌测试方法沉降菌测试方法洁净室（区）沉降菌技术要求洁净室（区）沉降菌技术要求洁净度级别药品生产质量管理规范CFU/皿，0.5 h1001-10 0003100 00010洁净区控制微粒污染的途径洁净区控制微粒污染的途径 控制微粒污染的途径主要为三个方面：A A：有效地阻止室外的污染侵入室内（或防止室内污染逸出室外，如青霉素）最主要途径：空气净化处理的方法室内的压力等；B B：迅速有效地排除室内已经发生的污染；最主要途径：气流组织；C C：控制污染源，减少污染发生量洁净区控制微粒污染的途径洁净区控制微粒污染的途径 上述三项都与净化系统的风量（风速）或换气次数有关。在较好的气流组织下，
19、足够的净化送风量不仅能保证洁净室的正压，同时对洁净系统的自净时间影响很大（JGJ7190）。而自净时间将直接影响洁净室的动态性能（即实用性）。最主要途径：涉及发生污染的设备和装置的管理和进入洁净室的人与物的净化换气次数和风速换气次数和风速换气次数和风速换气次数和风速（可能存在的问题）可能存在的问题）换气次数如果只讲风速的话，将无法对洁净厂房进行评价。设想如果在厂房内只安装了一个面积很小的过滤器，然而只需要很少的风量通过，就会在风口产生一定的风速，然而无论多大的厂房只要有这一点风速就可以算洁净区的话很不合理。因为风速体现的是风量和面积（过滤器的面积）的流速关系，而换气次数体现的是风量和体积（厂房
20、体积）的倍数关系，也就是说体现了整个洁净室内每小时洁净空气轮换的次数。空气压差空气压差空气压差的监测空气压差的监测空空 气气 压压 差差从理论上讲，压差有二个作用：A A：在门窗关闭的情况下，防止洁净室外的污染由缝隙掺入洁净室内；B B：在门开启时，保证有足够的气流向外流动，尽量削减由开门动作和人的进入瞬时带进来的气流量，并在以后门开启状态下，保证气流方向是向外的，以便把带入的污染减小到最低程度。压差的测试：压差的测试：应在所有的门都关闭的条件下，由高压向低压、由平面布置上与外界最远的里间房间开始，依次向外测试；有孔洞相通的不同等级相邻的洁净室（区），其洞口处宜有合理的气流流向等。洁净室自净时
21、间洁净室自净时间 有的厂房自净能力很差，污染后会长时间的静不下来。一般原因是风量不够、压差相反、气流形式差等原因。其实自净能力是衡量净化系统好坏的一项重要指标。自净能力强的厂房，动态状况就比较好，并且最具有实用性。自净时间：自净时间表明了洁净室的“恢复能力”。洁净室自净时间洁净室自净时间 一般单向流洁净室的自净时间为10min以内比较好，而非单向流洁净室的自净时间则应不大于30min。本项测定必须在洁净室停止运行相当时间，室内含尘浓度已接近大气尘浓度时进行。先测出洁净室室内悬浮粒子浓度，立即开机运行，定时读数直到室内悬浮粒子浓度达到最低限度为止，这段时间即为自净时间。自净时间代表了净化系统对污
22、染源的稀释或消除能力。温度与相对湿度温度与相对湿度 主要影响产品工艺条件和细菌的繁殖条件、由操作舒适度带来的对产品质量的影响 可能存在的问题：因为温湿度对风速风量、洁净度、微生物都有一定的影响，特别是对洁净度和微生物的影响，所以也要引起足够的重视。（比如温度升高尘埃粒子运动速度加快，如果湿度增加尘粒自重就增加，比较容易消除尘粒，但有利细菌生长、繁衍，微生物污染的风险显著增大，还会产生静电问题，可能使灰尘吸附在金属表面。湿度降低尘粒还会更容易扬起。）数据分析中可能发生的问题数据分析中可能发生的问题检测项目不全尘粒最大允许数尘粒最大允许数的检测未按两种粒径同时检测换气次数换气次数检测时以截面风速代
23、替静压差静压差检测未注明相对位置尘粒最大允许数尘粒最大允许数的检测评价中缺少95置信上限值检测结果的评价检测结果的评价检测数据的采集 温度、相对湿度：采用温度、湿度计在洁净室中心位置，系统至少稳定运行一段时间后读出数值并记录 静压差：采用微压差计，在系统风量平衡，运行稳定时测量，测量时所有的门应该关闭。检测结果的评价检测结果的评价 换气次数：换气次数由送风量换算而得。对于非单向流洁净室，使用风量表直接测量，直接读出送风量值（m3/h），并根据各洁净室送风量值(m3/h)换算出换气次数。也可用风速仪测量，测点数不应少于10点，按平均风速计算送风量值，然后换算出换气次数。层流风速：采用风速仪，在工
24、作面上测量，读出数值，算出平均值。检测结果的评价检测结果的评价 尘粒最大允许数：现场检测人员：2人，测点高度距地面0.8米，测点布置按 GB/T 16292，一般为均匀布置，多于5点可以分层；每测点采样次数不少于12次。数据计算 结果评价检测结果的评价检测结果的评价 浮游菌：现场检测人员：2人，测点高度距地面0.8米，测点布置按GB/T16293标准，一般为均匀布置，多于5点可以分层；每测点采样次数不少于1次。经3035培养不小于48小时后计数。沉降菌：现场检测人员：2人，测点高度距地面0.81.5米，测点布置按GB/T16294标准，一般为均匀布置，多于5点可以分层；每测点采样次数不少于1次
25、。经3035培养不小于48小时后计数。可考虑真菌的测试（沙堡劳氏琼脂）。检测结果的评价检测结果的评价 检测数据经过整理后，可以与标准值比较后得出结论。检测时应做好记录，记录应包含足够的信息。标题、记录的唯一性标识（如编号等）、工序或洁净室名称、检测日期、采用标准、采用仪器名称及编号、检测项目、检测数据及其计算、签名等。48环境监测方案洁洁净净区区监监测测年度洁净级年度洁净级别确认别确认日常环境监测日常环境监测动态监测动态监测静态监测静态监测无菌生产区无菌生产区A/B最终灭菌最终灭菌C级的主要级的主要功能间功能间C级区域级区域D级区域级区域洁净环境监控整体要求洁净环境监控整体要求洁净环境监控整体
26、要求（一）洁净环境监控整体要求（一）监控区监控区（洁净度级别）监控频率监控频率监控项目监控项目最终灭菌产品生产区域称量配料、配液（C级区）每周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物灌封间（C/A级区）每周两次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物轧盖间、洗塞间（C/A级区）每周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物容器精洗区（D级区）两周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物1.每月一次洁净环境监控整体要求（二）洁净环境监控整体要求（二）监控区监控区（洁净度级别）监控频率监控频率监控项目监控项目非最终灭菌产品生
27、产区域称量配料、配液（C/A级区）每周两次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物无菌灌封辅助区（C级区）每周两次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物无菌灌封间(B/A级区)每班一次每批一次空气悬浮粒子空气浮游菌空气沉降菌表面微生物操作者手套和操作服表面微生物1.每月一次洁净环境监控整体要求（三）洁净环境监控整体要求（三）监控区监控区（洁净度级别）监控频率监控频率监控项目监控项目取样间(C/A级区)每周一次每次取样空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌表面微生物微生物实验室无菌实验室(B/A级区)每次实验空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌表面微生物操作者手套表面微生物限度检查实验室
28、（C/A级区）每次实验空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物抗生素效价测定室（D级区）每周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌表面微生物1.每月一次洁净区监测的位置洁净区监测的位置取样位置选择时考虑因素：哪些部位的微生物污染最可能对产品质量造成不良影响？在生产过程中，什么地点最容易长菌？哪些地方是清洁、消毒或灭菌时最难覆盖（接触）或最难奏效的部位？什么活动会导致污染的扩散？在某一部位的取样操作，足以导致测试数据的差错或污染产品？取样只应在生产结尾换班时进行吗？洁净区监测的位置洁净区监测的位置应符合“GB16292-2019”“GB16294-2019”的要求基于风
29、险的设计监测点应靠近“工作高度”监测点应设置在潜在风险最大的位置，如：药品贮存容器管道连接处人流和物流经过的地方洁净区监测的位置洁净区监测的位置系统取样点环境空气（灌装线）接近敞开和/或者已灌装的容器洁净室空气最接近工作区域水使用点表面（厂房）地面、门把手、墙、帘子表面（设备）灌装线、控制面板、供胶塞的料斗压缩空气离开压缩机最远点无菌检查系统最接近真空源的接口灌装线操作人员至少要检手指印 单向流（例如，单向流罩）靠近活动最多的区域示例：示例：洁净区监测的位置洁净区监测的位置示例：无菌灌装线示例：无菌灌装线取样点应在产品或组件暴露的区域周围取样，如：l在灌装针头处l将产品装载入冻干腔室处l胶塞供
30、料桶l无菌部件进行连接操作的部位l操作人员频繁活动处（不影响生产过程）注意：靠近产品，但不接触产品的位置注意：靠近产品，但不接触产品的位置文件和记录（一）文件和记录（一）文件记录中应包括文件记录中应包括：监测时间和日期监测时间和日期测试方法的参考依据测试方法的参考依据测试点的活动情况测试点的活动情况设备标识设备标识位置位置卫生级别卫生级别标有取样点的区域图标有取样点的区域图取样点取样点测试结果测试结果评估人员评估人员结果读取日期结果读取日期警戒警戒/纠偏限度纠偏限度培养温度和培养时间培养温度和培养时间文件和记录（二）文件和记录（二）文件记录中应包括：文件记录中应包括：培养基有关信息培养基有关信息污染菌鉴别结果污染菌鉴别结果复核人复核人数据报告数据报告历史数据回顾历史数据回顾变更控制系统变更控制系统设备校验日期设备校验日期各限度的确定原理与各限度的确定原理与具体分析具体分析调查调查/纠偏措施的文纠偏措施的文件记录件记录Thanks!Thanks!2019年年7月月谢谢你的阅读v知识就是财富v丰富你的人生
