1、生物恐怖的特点与防护要点车凤翔 朱 虹序 言什么是恐怖？恐怖(terror,horror,panic,fright):遇到危险和邪恶所产生的极度恐惧。生物恐怖（bio-terror):想象或未来时间较长的恐怖。生物恐怖：用生物因子（bio-agent)造成的恐怖。人工生物恐怖实际上即是生物战。恐怖的类别 物理恐怖，化学恐怖，生物恐怖 内部恐怖，外来恐怖 自然恐怖，人为恐怖 精神恐怖，白色恐怖什么是生物恐怖？恐怖(terror,horror,panic,fright):遇到危险和邪恶所产生的极度恐惧。生物恐怖（bio-terror):想象或未来时间较长的恐怖。生物恐怖：用生物（恐怖）剂造成的恐怖
2、。人工生物恐怖实际上即是生物战。表1 恐怖现象的分类恐怖因子恐 怖 种 类生物化学物理精神其他微生物及生物毒素目前尚未见到统一分类方法。此种分类，可能不能涵盖全部恐怖现象。化学毒剂爆炸枪击持刀抢劫斜教迷信反动统治生物恐怖与生物战争 生物武器 生物战争 生物战剂 生物武器防护生物恐怖的特点 攻击的多样性 手法的灵活性 事件的突发性 后果的恐怖性 防治的艰难性表2 攻击的广泛性（特点1）生物恐怖袭击的广泛性生物因子攻击对象结果人动物植物细菌人失能致死，动物致死减产，作物减产、绝产。病毒真菌毒素？表3 恐怖剂特点不一（10）特性生物恐怖剂类别备注细菌病毒真菌毒素其他细胞结构真菌是真核细胞，细菌是原核
3、细菌感染人致死或失能感染动物？致死和减产感染植物？大面积减产备注不破坏建筑物和古迹号称穷人原子弹表4 病毒袭击方法和作用（1-1）病毒作用媒介侵入途经呼吸道消化道皮肤粘膜黄热致死气 和蚊委马失能气 和蚊天花致死气马尔堡致死气和 蚊？拉沙热致死气李夫特热失能气 和蚊登革热失能气 和蚊乙脑致死气和 蚊森脑致死气和 蜱+基孔肯亚失能气 和蚊表5 细菌袭击作用和方法（1-2）细菌作用 媒介侵入途经呼吸道消化道 皮肤粘膜炭疽致死气鼠疫致死气蚤霍乱致死气水土拉致死气食肠伤寒 致死水食痢疾致死水食布氏致死气水表6 立克次体衣原体的作用（1-3）微生物作用 媒介侵入途经说明呼吸道消化道皮肤粘膜鸟疫致死气溶胶
4、衣原体斑疹伤寒致死气 虱 立克次体落叽山斑疹热致死气 蜱 立克次体Q热失能气 蜱 立克次体说明按分类学与细菌一大类表7 毒素和真菌的作用（14）生物恐怖剂作用媒介呼吸道消化道粘膜皮肤毒素肉毒致死气 水肠毒素B失能气 水真菌粗球孢子菌失能气荚膜组织胞浆菌失能气备注主要是对人的毒素和真菌表8 攻击动物潜在的生物剂（1-5）可能用于攻击动物的生物剂传播方式说明病毒口蹄疫空气二次大战中曾经广泛研究，可气溶胶攻击牛瘟空气新城鸡瘟空气立克次体羊心水病蜱可释放蜱真菌禽类曲霉菌病空气可气溶胶攻击表9 攻击植物潜在的生物剂（1-6）微生物传播方式说明病毒烟草花叶自然空气传播 气溶胶可气溶胶袭击甜菜上卷自然空气传
5、播 气溶胶细菌蹈枯病多种途经传播玉米枯萎多种途经传播真菌番茄晚期枯萎空气传播谷物黑锈病空气传播水稻枯萎空气传播标准生物战剂表10 袭击手段灵活（特点2）攻击对象攻击媒介物攻击目的气溶胶动物昆虫物品人战略战术使用动物战略战术植物？战略备注大面积主动主动被动个人行为表11 生物恐怖剂投放媒介多（2-1）投放的媒介多种多样（1）投放污染物品：邮件、衣物、食品、羽毛等等。（2）投放污染的媒介昆虫。（3）投放污染的哺乳动物。（4）湿性和干性气溶胶造成大面积和局部攻击。（5）各类的直接针刺。表12 输送方法多种多样（2-2）（1）特务携带和投放。（2）炮弹射击投放。（3）飞机、军籍喷洒、投放。（4）火箭、
6、巡航导弹投放或喷洒。（5）弓箭和手榴弹投放。（6）远距离借风传送。表13 攻击场所多（2-3）（1）商贸中心、会议场所、文体活动、地铁、机场、车站、码头等共场所，（2）党政机关、标志建筑物，（3）江河湖泊、水库，（4）水源、食品厂，（5）街道和个人住宅，（6）非法邮寄，（7）攻击动物场所、植物种植地，（8）各类生产基地。表14 生物恐怖突发性（特点3）突 发 原 因投放时间投放目的袭击媒介各季政治气溶胶随时军事水源和食品早晚民用动物和昆虫说明充分全面准备难度大，事件发生的随意性大，突然发生常常出现。表15 后果的延续性（特点4）因子特性攻击对象说明人动物植物潜伏个病有潜伏期和共性长远潜伏传染人
7、、动物传染和互相间传染疫源长时间潜伏的发病疫源地后果致死失能致死减产减产殃及子孙后代表16 防制的艰难性（特点5）物理防护免疫预防预防治疗口罩不好 针对性难特异性难面具好及时性难及时性难公事不好 有效性不定 有效性不定备注如果是基因武器防治更加艰难表17 生物恐怖与粉体（特点6）要素能力说明生产能力大可大量使用有效浓度高（1010）单位重量攻击力强粒径控制小于5微米单位生物感染力强存活力强保存作用时间长表18 生物恐怖与气溶胶（特点7）要素能力说明发生灵活多样各种场合和地点浓度相当高在一定范围达到杀伤扩散相当远随气流扩散渗透相当强无孔不入防护相当难除防毒面具外，呼吸道防护效果都不好免疫治疗相当
8、难免疫保护效果可能不佳，误诊延误治疗或无法治疗生物恐怖的防护 全 民 性 统 一 性生物恐怖的全民防御教育 提高生活质量 提高防范意识 普及防御知识 即时报告就医应队生物恐怖的统一指挥 建立统一指挥系统 建立专家咨询系统 建立军民联合系统 建立技术防护系统 加强防护技术研究 加强信息网络研究 加强防护方法训练应对生物恐怖中的安全概述 安全问题普遍存在 安全是人类之需 安全是事业成功的保障安全是人第二需要 生理需要 安全需要 受教育需要 社交需要 成就需要生物安全范畴 一是指人类的健康安全；二是指人类赖以生存的农业生物安全；三是指与人类生存有关的环境生物安全。因此广义生物安全涉及到多个学科和领域
9、：预防医学、环境保护、植物保护、野生动物保护、生态、农药、林业等，而管理工作分属各个不同的行政管理部门生物安全问题来源（1）首先是人和动植物的各种致病有害生物。除了疯牛病、口蹄疫，古今中外由于有害生物危害人类健康和农业生物的安全，给人类带来的灾难是十分沉痛的。公元五世纪下半叶，鼠疫病菌从非洲侵入中东，进而到达欧洲，造成约1亿人死亡；1845年马铃薯晚疫病侵入欧洲，造成了历史上著名的大饥荒，夺去了数十万人的生命；1933年猪瘟在中国传播流行造成920万头猪死亡；1997年，中国香港发生禽流感事件，致使多人死亡，不得不销毁140万只鸡，仅赔偿鸡农鸡贩的损失即达14亿港元。生物安全来源（2）其次是外
10、来生物入侵。虽然历史上有不少外来生物曾经为人类造过福，但是也有许多外来生物导致了农作物和牲畜的死亡以及生物多样性的下降甚至丧失，严重危害环境生物安全，这种现象称之为生物入侵，也有人称之为“生物污染”。据1999年康乃尔大学公布的研究结果说明，美国外来生物入侵所造成的直接经济损失每年都达1226亿美元。生物安全来源（3）第三，随着现代科学技术的发展，世界上出现了越来越多的转基因生物，转基因生物是通过现代生物重组DNA技术导入外源基因的生物，因此从某种意义上说转基因生物也是外来生物。正如核技术一样，转基因技术既可以造福人类也可以危害人类，转基因生物存在着一定风险，一些科学家认为，转基因生物有可能对
11、人类健康、农业生物和环境生物构成极大的威胁。生物安全来源（4）现代技术的负面影响生物安全是指对由现代生物技术的开发和应用可能产生的负面影响，所采取的有效预防和控制措施，目的是保护生物多样性、生态环境和人体健康。为预先防范和控制转基因生物可能产生的各种风险，保护全球的生物多样性和人类健康，联合国环境规划署和生物多样性公约秘书处从1994年开始组织制定了“生物安全议定书”，共组织了10轮工作组会议和政府间谈判。我国政府十分重视“议定书”的谈判。国家环保总局牵头编制的中国国家生物安全框架，提出了我国生物安全管理体制、法规建设和能力建设方案，受到联合国有关部门的高度评价。2000年8月，我国政府正式签
12、署生物多样性公约的卡塔赫纳生物安全议定书。生物安全是生物多样性公约最重要的议题之一。来源于实验室感染 生物医学实验室感染 医院感染 动物饲养的交叉感染来源实验室生物危害传播途径 动 物 抓咬 呼吸 粪便 体表 人 外伤 气溶胶 接触食入 接触食入 吸入 外伤 传染病 过敏 癌症 人体接触动物的生物学互相作用 初级防护安全柜个人防护 次级防护安全实验室 最终防护安全操作和管理 免疫、治疗等实验室生物安全三项策略初级物理防护（屏障初级物理防护（屏障）-对策1 生物安全实验室必须配备一级物理防护，它包括各级生物安全柜和个人防护器材。现有生物安全柜分3级，1-3级防护能力逐级提高。个人防护器材包括口罩
13、、面具、眼镜，各类防护衣、帽、裤、鞋、靴、袜、手套等。次级物理防护（屏障）次级物理防护（屏障）-对策对策2 实验室的设施结构和通风设计构成二级物理防护。二级物理防护的能力取决于实验室分区和室内气压，要根据实验室的安全要求进行设计。一般把实验室分为洁净、半污染和污染三个区。实验室的墙壁保持密闭，空调通风的气流方向永远保持：外界HEPA洁净区半污染区污染区HEPA外界。三级和四级生物安全水平的实验室，污染区与半污染区的气压相对于大气压分别为-5010Pa和-2510Pa.最终防护管理和规程对策3 建立安全管理组织系统 建立安全管理制度 制定附和实际的技术操作规程 培养造就附和要求的技术队伍 准备一
14、套免于预防、预防治疗和临床治疗方案 特约生物安全专家指导，采用先进的防护技术。实验室生物安全指标（5-1）保护工作人员 不感染，不受伤害 保护环境 不受污染，周围人不受伤害 保护样品 不受污染，保持本来性质三项技术措施（5-2）样品隔离技术（机械、气幕）防止传染因子进入环境接触人体 定向流技术（三级负压系统）防止传染因子扩散 消毒灭菌技术（物理、化学）消灭有害传染源生物安全柜分类20 表38-35 生物安全柜的分类及特性 级别 I IIB3 IIB2 III 项 目 IIA IIB1 密封形式 气流经操作口流入，防止扩散 完全密闭 前面开口结构 开放固定型 开放可调型 手套密封 危 致病微生物
15、 低中度 高度 险 度 一般病原体 生物安全水平13级(枯草菌、破伤风菌、肝炎、斑疹伤寒、巴斯德菌、风疹等)4级(拉沙热、出血热)重组DNA P1P3 P4 使用目的 对操作者和环境保护 不保证无菌操作 气流从前面开口流入防止操作者感染 送风经HAPE高效过滤器过滤，防止实验样品污染及交叉污染 排风经HAPE高效过滤，保护环境 操作者及环境与实验样品完全隔离 可进行最高危险度的操作 对实验室的 污染 柜内及污染管道部分存在正压 污染管道为负压，送风为室内空气 安全柜内至少保持127Pa的负压 前面气流 气流在安全柜与操作者间流过 操 作 口 处的风速0.4m/s 操作口处的平均风速0.5m/s
16、 正常时无气流，当掉下1只袖套时，袖套口处的气流速度0.5m/s 气流 送 风 无送风，气流 从 前 面进入 送风经HAPE高效过滤器过滤除菌 送风小于排风，进排风经HAPE过滤器除菌 方向 排 风 排 风 全 部经 过 滤 处理 回风经过滤器，一部分循环使用，一部分排出柜外 污染空气全部经高效过滤器后排至室外 2层高效过滤，或经高效过滤后再燃烧 生物安全議定書 生物多樣性公約 议定书主要内容 生物安全議定書包括前言、四十條、與三項附錄。主要精神由此國際公約確保基因改性活體在國際間越境運輸能被安全的運送、處理與使用，並且確保基因改性活體(Living modified organism,LMO
17、)不會對生物多樣性與人類健康，產生負面的影響。LMO是指任何經由現代生物技術所獲得擁有新的遺傳物質組合之具生命現象之生命體，包括無法生育之生命體(sterile organisms)、病毒及裸露之病毒核酸(viroids)。议定书的由来 近年來，由於基因改造作物與其衍生食品，迅速進入消費市場而引起全球關心這項新科技，是否會對人類健康及生態與生物多樣性，帶來負面影響。聯合國下生物多樣性公約組織於今年1月通過全球矚目的生物安全議定書，並於今年5月起開放各國簽署，預期年底將會生效。议定书的影响和作用 此生物安全議定書，勢必將對我國經貿、科技帶來至深至遠之衝擊。本文因此描述介紹此一議定書之形成背景，及
18、其精神與對全球經貿與科技發展之可能影響。对议定书的态度 美國、加拿大、阿根廷為目前全球主要GMO輸出國，因此相當程度反對生物安全議定書的通過。日本等对抗态度。中國擁有可能是全球最大的消費市場，但會議中多數時間都低調參與。可能是因為中國不但是全球最早商業栽種GMOs的國家，且仍堅持繼續積極發展GMOs。目前中國已有超過百萬公頃面積以上之GMOs作物種植，日後甚或可能成為GMOs輸出國。至少目前中國的政策選擇接受GMOs。结语 由於GMOs及其衍生產品的時代，終將到來。它可大幅降低農產品生產成本，化肥、殺蟲、殺草劑的減少使用以維護環境生態，營養成份的提高，保健功能的增加，及附帶提升我國生物科技與經
19、貿之競爭力等等。因此，加強對GMOs及其衍生產品的檢驗，及其對人類健康與我國生態及生物多樣性的安全風險評估之能力，短期內建立國內之檢驗評估體系，與建立檢查與防範GMOs超越規範之散佈機制等，均應為當務之急 议定书生物安全生物安全是指对由现代生物技术的开发和应用可能产生的负面影响，所采取的有效预防和控制措施，目的是保护生物多样性、生态环境和人体健康。为预先防范和控制转基因生物可能产生的各种风险，保护全球的生物多样性和人类健康，联合国环境规划署和生物多样性公约秘书处从1994年开始组织制定了“生物安全议定书”，共组织了10轮工作组会议和政府间谈判。我国政府十分重视“议定书”的谈判。国家环保总局牵头
20、编制的中国国家生物安全框架，提出了我国生物安全管理体制、法规建设和能力建设方案，受到联合国有关部门的高度评价。2000年8月，我国政府正式签署生物多样性公约的卡塔赫纳生物安全议定书。生物安全是生物多样性公约最重要的议题之一。生物安全实验室 生物安全实验室 动物安全实验室生物安全装置 為一有抽氣裝置之操作箱，其氣流向內流動以保護操作者，排出廢氣需經HEPA過濾器，其平均流速為0.40公尺/秒以上（排氣量/前面進氣口之面積）。此級操作箱依操作方式不同可分為三種：(1)正面全開。(2)正面裝有可關閉之面板，上有四個開口。(3)正面裝有可關閉之面板，上加齊臂長之橡膠手套。I级生物安全柜房间空气污染空气
21、HAPE过滤空气II级生物安全柜 IIA型生物安全柜房间空气HAPE过滤空气IIB1型生物安全柜图38-5 II级B1型生物安全柜污染空气房间空气HAPE过滤空气II级生物安全柜用途 進行低度或中度危險性之微生物、病原體之無菌操作時，保持作業空間空氣的清淨。通常可分為一般生物性作業時使用之A型，及操作含有少量有害危險化學物質、放射性物質、氣體物質等HEPA過濾器無法有效捕集去除之物質之作業時使用之B型。II级生物安全柜的结构 具備前面開口部及排氣口，由前面開口部流入之氣流，可防止內部污染氣體流出，經HEPA過濾器過濾之清淨空氣，流入作業空間，排氣時要經過HEPA過濾器處理後排出箱櫃之外。II级
22、生物安全柜结构 密閉度：箱櫃內以空氣加壓到50毫米水柱時，經30分鐘後，內壓下降須在10%內。將肥皂水或專用之防漏檢查發泡劑塗佈或噴霧，在箱櫃內所有的融接部份時，不會觀察到有因漏氣而產生發泡現象。II级生物安全柜质量检测 作業的安全性試驗：以510108 cfu（colony forming unit）之枯草菌作噴霧檢查時，在內部inbin罐能夠補集到的菌落總共在四個以下。實驗開始後5-15分鐘能採獲之 slit sampler 的菌落數，每次實驗在五個以下，經連續三次測試才算合格。II级生物安全柜质量检测 試料保護試驗：以枯草菌芽胞 5-10106 cfu噴霧檢查時，在10公分培養皿之洋菜平
23、板上所採到的菌落數為五個以下，連續三次實驗則合格。II级生物安全柜的质量检测 試料間相互污染之防止試驗：以枯草菌芽胞 5-10104 cfu噴霧檢查時，在洋菜板中心以外離355毫米以上的位置所採集到的菌落數為二個以下，左右各三次連續測試則合格。II级生物安全柜的进排风速度 排氣速度：在15公分內之格子測試，各測定點排氣之風速在平均值的20之內，在指定範圍內設計一個能均勻排氣風速之箱櫃。進氣風速：由前門開口部流進來的風速平均為0.4公尺/秒以上，（B型則在0.5公尺/秒以上）。II级生物安全柜的风机 送風機：送風機的濾片壓力損失在20以上時，不做迴轉控制處理，風量減少在25以內。II级生物安全柜
24、的要求 氣流方向：以目測發煙管流出來的狀態來制定，在前面開關下端10010毫米上的高度，作業空間的下層前後之吸氣流分散位置，前面開閥之下端150毫米之高度，前面開閥20-30毫米內側之位置，檢查側面空間左右側面時，煙能慢慢向地下流動。沒有煙流下來的部分，煙不可向上逆流，又不可使煙漏出安全箱櫃外。在前面開口部之外側30-40毫米位置檢查其周圍時不會使煙漏出箱櫃，或不可使煙漏入作業空間。II级生物安全柜的要求 溫度上升：在4小時連續運轉後，室溫和箱櫃內之溫差相差在8以內。噪音程度：噪音要保持在67分貝以下。照明度：平均照明度為800-1200 lux。II级生物安全柜的要求 震動：直角3方向作業震
25、動變位在5微米 RMS以下。液體接收皿：液體接收皿要容易清洗，且至少可以裝4公升之容量。II级生物安全柜的消毒灭菌 在表面上由流體之飛沫所污染時，能夠不用工具就可洗除，實驗台及實驗空間需局部處理清除。不移動安全箱櫃之下，能夠用甲醛滅菌，前面的開口部、排氣口等用金屬板、塑膠板、黏膠紙可密封。為了能夠容易清掃，地板與安全箱櫃最下面之間隔要保持80毫米之空間，或地板或實驗台要使用密封紙封密。HEPA過濾器設置後每年施行一次檢查。III级生物安全柜 密閉式的箱櫃，由吸氣口流入之氣體及排氣口之排氣需用HEPA過濾器處理，排氣要用雙重的HEPA過濾器過濾，或經燃燒滅菌裝置方可排出外面。作業空間對作業室要保
26、持負壓（15毫米水銀柱以上），作業用的手套、試料、器具在進出時，要設有高壓滅菌器或滅菌液槽滅菌。III级生物安全柜房间空气污染空气HAPE过滤空气图38-9 III级生物安全柜气流的形式III级生物安全柜80220011009001300600主要参数：滤除效率：99.99%(0.3 um DOP粒子)进风滤器：1级HAPE过滤器排风滤器：2级HAPE过滤器柜内压力：12.7 mmH2O换气次数：50次/h密封性能：柜内加压75 mmH2O时，所有焊缝处漏气量10 mm 支架：碳钢 窗户：强化玻璃 照明：15W1只 杀菌灯：15W1只图38-10 BHC-1301型III级生物安全柜连通使用8
27、00800800400760750125010012501001250800132456789101112图38-11 BSL4级生物安全实验室系列生物安全柜实例1高压蒸气灭菌器7观察窗2排风高效过滤器(HAPE)8袖套孔3负压计9配电箱4进风调节阀门10水管5进风高效过滤器(HAPE)11排气口6照明灯、杀菌灯12排风机950HEPA检查 HEPA過濾器之外側以氣霧作負荷的檢查時，各為小區域之氣體透過率（內側之氣霧濃度和外側濃度之比）不超過百分之0.01用相對濃度計或用28.3公升/分吸收粒子計，檢查時，0.3微米附近的氣霧透過率不超過百分之0.01。需使用鋁製之分離器，設置HEPA過濾器之
28、差壓計以測壓力損失。安全柜的HEPA HEPA過濾器之外側以氣霧作負荷的檢查時，各為小區域之氣體透過率（內側之氣霧濃度和外側濃度之比）不超過百分之0.01用相對濃度計或用28.3公升/分吸收粒子計，檢查時，0.3微米附近的氣霧透過率不超過百分之0.01。需使用鋁製之分離器，設置HEPA過濾器之差壓計以測壓力損失。1.生物安全实验室生物安全实验室(BSL)对微生物及其他活性生物因子进行试验操作中（一般不含动物试验）所产生的生物危害具有物理防护能力的生物实验室。适用于人和非人脊椎动物生物致病因子的临床检验、培养分离、纯化鉴定和各种预防治疗生物制剂的研究等工作。2.动物实验生物安全实验室动物实验生物
29、安全实验室(ABSL)对在进行微生物及其他生物活性因子对脊椎动物感染试验研究时所产生的生物危害具有物理防护功能的实验室。也适用于动物传染病临床诊断、治疗、预防研究等工作。生物安全水平分级及依据生物安全水平分级及依据 上述两类生物安全实验室，根据所用活性生物因子的危害程度、人体和动物对其易感性、气溶胶传播与否、预防和治疗的难易等因素，其防护水平通分为四级，一级最低，四级最高。其设计水平,对人和动物、环境和社会的保护水平逐级增加。生物安全水平分级依据（生物安全水平分级依据（BSL）一级生物安全水平，简称一级生物安全水平，简称BSL-1：能够安全地进行没有发现肯定能引起正常成人发病的,对实验室工作人
30、员、动物和环境危害微小的，具有明显特征的生物因子工作的生物安全水平，称为BSL-1。二级生物安全水平，简称二级生物安全水平，简称BSL-2：能够安全地进行对工作人员、动物和环境有轻微危害的生物因子操作的生物安全水平称为BSL-2。三级生物安全水平（三级生物安全水平（BSL-3）能够安全地从事国内和国外的，可能通过呼吸道吸入感染、引起严重或致死性疾病的生物因子工作的生物安全水平称为BSL3。与上述活性生物因子相近的或有抗原关系的，但尚未完全认识的生物因子，也应在此种水平条件下进行操作;直到取得足够的数据后才能决定，是继续在此种安全水平下对其工作还是在低一级安全水平下工作。四级生物安全水平（四级生
31、物安全水平（BSL-4）能够安全地从事国内和国外的，对人体具有气溶胶传播实验室感染高度危险、严重危及生命和环境的，没有特效预防和治疗方法的生物因子工作的生物安全水平称为BSL-4。与上述活性生物因子相近的或有抗原关系的，但尚未完全认识的生物因子也应在此种水平条件下进行操作；直到取得足够的数据后才能决定，是继续在此种安全水平下对其工作还是在低一级安全水平下工作。生物安全水平的构成 生物安全水平依赖于一级防护、二级防护、操作规则。三者不同的结合形成4个级别生物安全水平，1-4级安全水平逐级提高，从而构成1-4级生物安全实验室（BSL1-1V）。要根据实验的安全要求进行各种组合的设计.生物安全实验室
32、（BSL）BSL1-IV示意图 I级 II级I级生物安全实验室标准操作（1）其工作一般在桌面上进行,采用微生物的常规操作。工作面至少每天消毒一次,凡活性材料污染都要消毒。（2）工作区,不准吃、喝、抽、用手接触隐形眼镜、使用化妆品、存放人用食品.（3）严禁用嘴吸取试验液体,应该使用专用的移液管.（4）操作活性生物材料后,脱掉手套,离开实验室前要洗手.（5）防止皮肤损伤.（6）所有操作均需小心,避免外溢、产生气溶胶.（7）所有培养物和其他法定的废物,在处理之前用公认有效的方法灭菌消毒。从实验室拿出试验过的材料要放在一个牢固不漏的容器内,在拿出实验室前要按照地方或国家法规进行包装.昆虫和啮齿动物控制
33、方案应参考其他文件进行。I级生物安全实验室设备（初级屏障)BSL-1实验室可不配置特殊的物理防护设备。（1）工作时应穿着实验室专用长工作服。（2）戴乳胶手套。（3）要佩带防护眼镜或面罩。I级生物安全实验室实验室设施(次级屏障)（1）实验室应设有控制进出的门。（2）每个实验室应有一个洗手池。（3）室内装饰便于打扫卫生，不用地毯和垫子。（4）工作台面不漏水、耐酸耐碱和中等热度、抗化合物、有机溶剂的腐蚀。（5）实验室内器具安放稳妥,器具之间留有一定的距离,方便清扫。（6）实验室的窗户,必须安纱窗。生物安全实验室 I级 普通生物实验室已知对正常成人不致病微生物操作 1.工作台 白大褂 2.洗手池 3.
34、一般消毒灭菌II级生物安全实验室的标准操作标准操作(1)工作一般在桌面上进行,采用微生物的常规操作和特殊操作。(2)工作区内禁止吃、喝、抽、手接触隐形眼镜和化妆。食物贮藏在专门设计的工作区外的柜内或冰箱内。(3)使用移液管吸取液体,不用口吸。(4)操作传染材料以后要洗手,离开实验室前脱掉手套并洗手。(5)制定对利器安全操作对策（见后）.。(6)所有操作均须小心,以减少实验材料外溢、飞溅、产生气溶胶。(7)每天完成实验后对工作面进行消毒。实验材料溅出时，要用有效的消毒剂消毒。(8)所有培养物和法定的废物在处理前都要用高压蒸汽灭菌器消毒。消毒后的物品要放入结实的不漏的容器内,根据国家法规给予包装，
35、密闭传出处理。(9)昆虫和啮齿动物的控制应参考其他法规进行。(10)妥善保管菌、毒种，使用要经领导批准，对使用量登录。II级生物安全实验室级生物安全实验室特殊操作（特殊操作（1）（1）操作传染性材料的人员，由领导指定。一般,受染概率增加的人和受染后果严重的人不允许进入实验室。例如,免疫功能低下和缺乏的人受染危险增加。（2）领导要告知工作人员工作中的潜在危险和所需的防护措施(如免疫),否则不能进入实验室工作。（3）操作生物因子期间，在实验室进口必须展示生物危险信号，其内容包括微生物种类、生物安全水平、需要的免疫、研究者的姓名和电话号码、进入人员必须佩带的防护器具、遵守退出实验室的程序。（4）实验
36、室人员接受相应的免疫或对实验室试验因子或可能存在的因子(如乙肝疫苗和TB皮肤试验)进行试验。（5）要收集和保存实验室人员和其他受威胁人的基础血清，进行试验因子抗体水平的测定，以后定期或不定期收取血清样本进行监测。（6）实验室领导要制定具体的生物安全规则和标准操作程序,或制定实验室特殊的安全手册。参加工作人员经常学习、认真执行。II级生物安全实验室特殊操作（2）（7）实验室领导对实验人员和辅助人员要进行有针对生物危害防护的专业训练,定期培训。必须防止暴露、学会评价暴露危害的方法。（8）必须始终不渝地高度重视污染利器包括针头、注射器、玻璃片、吸管、毛细管和手术刀的安全对策（见后）。（9）培养物、组
37、织或体液标本的收集、处理、加工、储存、运输过程应把其放在防漏的容器内。（10）用感染性材料工作以后,对仪器表面和工作表面用有效的消毒剂进行常规消毒,特别是发生材料外溢、溅出,或其他污染时更要严格消毒。污染的仪器在送出设施检修、维修或运输、打包之前都要给予消毒。（11）发生感染材料溅出或其他事故要立即报告领导,领导要进行恰当的危害评价、监督、处理,并记录和保存。（12）非本实验所需动物不允许进入实验室。II级生物安全实验室设备（初级屏障）（1）实验室内工作要穿短、长的防护服，内衣。离开实验室到非工作区(如餐厅、图书室和办公室)之前要脱掉工作服。所有工作服或在实验室处理或由洗衣房清洗。不准带回家。
38、（2）可能接触感染材料和接触污染表面时要戴乳胶手套。完成传染性材料工作之后经过消毒处理后脱掉。待处理的手套不能接触清洁表面（键盘、电话），不能丢弃至实验室外面。脱掉手套后要洗手。如果手套被损坏时，先消毒后脱掉。（3）能产生传染物外溢、溅出的和发生气溶胶的操作,包括离心、研磨、搅拌、强力震荡混合、超声波破碎、打开装有传染性材料的容器、动物鼻腔注射、收取感染动物和孵化卵的组织，都要使用2级生物安全柜,和物理防护设备。（4）高浓度和大容量的传染性材料离心，如果使用密闭转头、带有安全帽的离心机可在开放的实验室内进行,否则只能在生物安全柜内进行。（5）当操作(微生物)不得不在安全柜外面进行时,应采取严格
39、的面部安全防护措施(护目镜、口罩、面罩或其他),并防止气溶胶发生。II级生物安全实验室实验室设施（次级屏障）实验室设施（次级屏障）（1）设施门要加锁，限制人员进入。（2）实验设施地点离开公共区。（3）每个实验室设一个洗手水池。建议设置用足、膝启动开关。（4）实验室结构要便于清洁卫生。地毯和垫子都不能用。（5）工作台不能渗水，耐热和有机溶剂、酸、碱等。（6）实验室内家具应预先设计，便于摆放和使用，表面应便于消毒，并在其间留有空隙便于清洁卫生。（7）生物安全柜的安装，室内的送、排风要符合物理防护参数要求。远离门口、风口和能开的窗户，远离室内人员经常走动的地方，远离其他的可能干扰的仪器，以保证生物安
40、全柜的气流参数和物理防护功能。（8）建立冲洗眼睛的工作站。（9）照明适合于室内一切活动，避免反射和耀眼，以免干扰视线。（10）只须一般舒适空调，没有特殊通风要求。但是，新设施应该考虑能够提供向室内的单向气流。如果有通向室外的窗户，必须安装纱窗。II级生物安全实验室示意图 普通生物安全实验室对人和环境有轻微危害微生物 1.I后II级生物安全柜 2.高压灭菌器，污染物要高压灭菌 3.控制人员进入、门上锁、保管好菌毒种III级生物安全实验室标准操作标准操作（1）完成传染性材料操作后，对手（套）消毒冲洗，离开实验室之前，脱掉手套和洗手。（2）设施内禁止吃、喝、抽，不能操作隐形眼镜和使用化妆品。戴隐形眼
41、镜的人也要佩带防护镜或面罩。食物只能存放在工作区以外的地方。（3）禁止用嘴吸取试验液体，要使用专用的移液管。（4）一切操作均要小心，以减少或避免产生气溶胶。（5）实验室每天清洁卫生至少一次，工作表面工作后随即消毒，传染材料外溢、溅出污染时要立即消毒。（6）所有培养物、储存物和其他日常废物在处理之前都要用高压灭菌器进行有效地消毒。需要在实验室外面处理的材料，要装入坚固、不漏的容器内，加盖密封传出实验室，。实验室的废物在送到处理地点之前应该消毒、包装，避免污染环境。（7）对BSL3内被试因子（菌毒种）要经过充分论证（见前）。菌（毒）种要由两人保管，保存在安全可靠的设施内，2人同时到场方能索取使用。
42、索取使用要有报告批准手续，说明使用剂量，并详细登录。试验要有详细使用和销毁记录。（8）昆虫和啮齿动物控制应参考国家有关其他法规进行。III级生物安全实验室特殊操作（特殊操作（1）（1）制定安全细则：实验室领导要结合实际制定出并经安全委员会批准的实验室特殊的全面的生物安全规则和具体的操作规程，以补充细化本标准的操作要求。工作人员必须了解细则，认真贯彻。（2）生物危害标志：a)平时，要在实验室进入的门上展示国际通用生物危险标志。实验室门口展示说明实验因子种类、实验室负责人或其他负责人的名单和电话号码，指明进入本实验室的特殊要求，诸如需要免疫、防毒面具或其他个人防护器材。b)实验室使用期间，无关人员
43、不宜参观，参观必须经过批准并在个体条件和防护达到要求时方能进入，参观人数宜少不宜多。（3）生物危险警告：a)实验时、实验室或物理防护设备里放有传染性材料或感染动物时，实验室的门必须保持紧闭，无关人员一律不能进入。b)门口要示以危险警告标志，如挂红牌或文字说明实验的状态，禁止进入或靠近。III级生物安全实验室特殊操作（2)（4）进入实验室的条件：a)实验室领导要指定、控制或禁止进入实验室的实验人员和辅助人员。b)未成年人不允许进入实验室。c)实验室感染机会增加的人和感染后果严重的人不允许进入实验室。d)只有了解实验室潜在的生物危害、特殊要求、遵守规定、合乎条件的人才能进入实验室。e)与工作无关的
44、动物、植物和其他物品不允许进入实验室。（5）工作人员的培训：a)对实验室工作人员和辅助人员要进行与工作有关的潜在危害防护的定期的和不定期的培训，以适应必要的实际情况和变化。对实验人员需经专门生物专业训练和生物安全训练，并由有经验的专家指导，或成立生物安全委员会指导、监督工作。b)必须学会气溶胶暴露危害的评价和预防方法。c)在BSL-3作传染性工作之前，实验室领导要保证和证明，所有工作人员熟练掌握了微生物标准操作和特殊程序，熟练掌握本实验室设备、设施的特殊操作运转技术。III级生物安全实验室特殊操作（3）（6）避免气溶胶暴露：一切传染性的操作不可直接暴露于空气之中，都应在生物安全柜内或其他物理防
45、护设备内进行。a)一般在2A型生物安全柜内进行。不保护样品操作可在1级生物安全柜内进行。b)如果操作带有放射性或化学性有害物,应用全排式2B2型生物安全柜。c)为了更安全可使用3级生物安全柜。禁止使用超净工作台。（7）避免利器的感染：对可能污染的利器，包括针头、注射器、玻璃片、吸管、毛吸管和解剖刀等，必须坚持不懈地采取高度有效的防范措施，必须预防经皮实验室感染。a)在BSL-3里，尽量不使用针头、注射器和其他锐利的器件。只在必要时，如实质器官的注射、静脉切开、或从动物体内和（密封胶盖）瓶子里吸取液体时才能使用。尽量用塑料制品代替玻璃制品。b)使用一次性注射器（针头与注射器一体的）。使用过的针头
46、在消毒之前避免不必要的操作，如不可折弯、折断、破损，不要用手直接盖上原来的针头帽；要小心地把其放在固定方便不会刺破的处理利器的容器里，然后进行高压消毒灭菌。c)破损的玻璃不能用手直接操作，必须用机械的方法清除，如刷子、夹子和镊子等。III级生物安全实验室特殊操作（4）（8）污染的清除和消毒：a)完成传染性工作之后，实验室设备和工作面用有效的消毒剂进行常规消毒，特别是传染材料溢出、溅出，或其他污染，更要及时消毒。b)溅出的传染物消毒由适合的专业人员处理和清除，或由其他的经过训练和有用高浓度传染物工作经验的人处理。c)一切废物处理之前都要高压灭菌。一切潜在的实验室污物（如，手套、工作服等）均需在处
47、理或丢弃之前消毒。d)需要修理、维护的仪器，在包装运输之前要进行消毒。（9）传染样品的储藏运输：a)一切试验因子的样品如培养物、组织培养、体液样本，等在储藏、搬动、运输过程中都要放在不可泄漏的容器内,容器外表面要彻底消毒，包装和标记。b)实验室内的试验记录不允许直接拿出，要用电讯传输，如计算机网络。（10）传染因子痕迹的监测：a)采集所有实验室工作人员和其他有关人员的本底血清样品，试验保存，进行试验因子痕迹跟踪。b)定期、不定期采集血清样本，进行特异性监测。III级生物安全实验室特殊操作（5）（11）医疗监督和保健：a)在BSL-3内工作期间对工作者进行医疗监督和保健，对于操作的因子或实验室内
48、可能存在的因子，工作人员要接受相应的试验或免疫（如，乙肝疫苗，TB皮肤试验）。b)确证是非自身责任事故所造成的身体损伤，受损者有权力要求单位或领导给予适当补偿。（12）暴露事故的处理：a)当生物安全柜或实验室出现持续正压时，室内人员应立即停止操作并戴上防毒面具，采取措施恢复负压。如不能及时恢复和保持负压，应停止实验，并对房间进行消毒。各类人员应及早按规程退出。b)发生此类事故或具有传染性暴露潜在危险的其他事故和污染，当事者除了采取紧急措施外，应立即向实验室领导报告，听候指示。领导和当事人应对其事故进行紧急科学处理。事后，当事人和实验室领导应提供切合实际的医学危害评价，进行医疗监督和预防治疗。c
49、)实验室领导对事件的过程要予以调查和公布，写出书面报告呈报安全委员会并保留备份。III级生物安全实验室初级屏障（1）个人防护安全设备（一级屏障）安全设备（一级屏障）（1）防护服装：a)实验室内，工作人员要穿防护性实验室服装，如长服装、短套装，或附有护胸的工作服装。在清洗前要消毒，如果有明显的污染应该及时换掉，作为污物处理。b)在实验室外面不能穿工作服。（2）防护手套：a)在操作传染性材料、感染动物和污染的仪器时必须戴手套，戴双层为好，必要时再戴不能损坏的防护手套。b)更换手套前，戴在手上消毒冲洗，一次性手套用一次后不可再用。III级生物安全实验室初级屏障（2）生物安全柜（3）生物安全柜：a)传
50、染性材料的操作，如感染动物的解剖，组织培养、鸡胚接种、动物体液的收取等等，都要在2级或3级生物安全柜内进行。b)离心、粉碎、搅拌等不能在2级安全柜内进行的工作可在较大或特制的1级柜内进行。（4）其他物理防护：当操作不能在生物安全柜内进行时，个人防护（面具和面罩）和其他物理防护设备（离心机安全帽，或密封离心机转头）并用。（5）面部保护：污染区和半污染区应备有防毒面具以便紧急使用，当房间内有感染动物时要戴面具保护面部。（6）紧接用品：污染区或半污染区备用防毒面具、冲洗眼睛的器具和药品等，随时可用。III级生物安全实验室实验室设施实验室设施（1）（1）建筑结构和平面布局：a)建筑物抗震能力七级以上，
