1、12前言前言事件：炭疽粉末、SARS、猪链球菌及各地的实验 室感染。投入：各国政府对卫生部门加大投入。实际：实验室相关感染在各地经常发生。3相关文件相关文件v 中华人民共和国传染病防治法（中华人民共和国传染病防治法（20192019）v 病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例（2019年年11日国务院第日国务院第69次次常务会议通过）常务会议通过）v 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定（定（05年年12月月28日卫生部令第日卫生部令第45号发布号发布）v 医疗废物管理条例（医疗废物管理条例
2、（国务院第国务院第380号，号，2019）v 人间传染的病原微生物名录（人间传染的病原微生物名录（中华人民共和国卫生部令第中华人民共和国卫生部令第45号号）v 实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求(GB19489-2019)v 生物安全实验室建筑技术规范生物安全实验室建筑技术规范(GB50345-2019)v 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则微生物和生物医学实验室生物安全通用准则(WS233-2019)v II级生物安全柜美国级生物安全柜美国/国际标准国际标准(NSF/ANS145-2019),v WHO生物安全手册生物安全手册,第三版第三版.2019.v 上海市一、二级病原微生
3、物实验室生物安全管理规范（上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范（上海市卫上海市卫生局沪卫科教生局沪卫科教201934号号）4Laboratory Biosafety Manual1st edition19831993201920195实验室布局实验室布局危险度评估危险度评估 生物安全柜的检测生物安全柜的检测生物安全柜的使用生物安全柜的使用6BSL-2BSL-2实验室布局实验室布局78上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范第二节第二节 设施设备设施设备第三十四条第三十四条 二级病原微生物实验室的二级病原微生物实验室的设施设备要求设施
4、设备要求（一）可设在共用建筑内，但应相对独立，设可自动关闭的（一）可设在共用建筑内，但应相对独立，设可自动关闭的带锁的门带锁的门。（二）实验时门应呈关闭状态，在实验结束后实验室应呈锁（二）实验时门应呈关闭状态，在实验结束后实验室应呈锁闭状态。实验室的门或墙上闭状态。实验室的门或墙上应有可视窗应有可视窗。（三）在室内应配备（三）在室内应配备生物安全柜生物安全柜，生物安全柜的型号应根据，生物安全柜的型号应根据实验的项目和对象确定。生物安全柜应放在气流流动少，人实验的项目和对象确定。生物安全柜应放在气流流动少，人员走动少，离出口处较远的位置，周围留有一定的空间。员走动少，离出口处较远的位置，周围留有
5、一定的空间。（四）当对可能产生（四）当对可能产生气溶胶气溶胶的感染性材料样本的操作无法在的感染性材料样本的操作无法在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，应加装负压罩。生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，应加装负压罩。9（五）在所在的区域内应配备（五）在所在的区域内应配备高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器，并按期检，并按期检查和验证，作好记录，确保消毒效果和使用安全。高压蒸查和验证，作好记录，确保消毒效果和使用安全。高压蒸汽灭菌器的安全、计量鉴（检）定和管理应符合国家压力汽灭菌器的安全、计量鉴（检）定和管理应符合国家压力容器管理的有关规定，使用人员应作好使用记录。容器管理的有关规定，使用人员应作好
6、使用记录。（六）在室内应设有（六）在室内应设有洗眼装置洗眼装置，必要时应设紧急喷淋。，必要时应设紧急喷淋。（七）应保障实验室的（七）应保障实验室的通风和换气通风和换气，可采用自然通风，如，可采用自然通风，如采用机械通风，应保证有不少于每小时采用机械通风，应保证有不少于每小时3-43-4次的通风换气次的通风换气次数。次数。（九）在门口应有二级生物安全防护水平实验室（九）在门口应有二级生物安全防护水平实验室标识标识。1011微生物危险度评估 1213病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例v第四条第四条 国家对病原微生物实行国家对病原微生物实行分类管理分类管理，对实，对实验
7、室实行分级管理。验室实行分级管理。v第五条第五条 国家实行统一的实验室生物安全标准。国家实行统一的实验室生物安全标准。实验室应当符合国家标准和要求。实验室应当符合国家标准和要求。v第二十一条第二十一条 一级、二级实验室不得从事高致病一级、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。性病原微生物实验活动。1415161718病原微生物实验室生物病原微生物实验室生物安全管理条例安全管理条例实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求（GB19489-2019）WHO生物安全手册生物安全手册（第三版，（第三版，2019）四类：在通常情况下不会四类：在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的引起人类或者
8、动物疾病的微生物。微生物。1级：（低个体危害，低群体级：（低个体危害，低群体危害）不会导致健康工作者危害）不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。病毒和寄生虫等生物因子。1级：（级：（无或极低的个体和无或极低的个体和群体危险）不太可能引起人群体危险）不太可能引起人或动物致病的微生物。或动物致病的微生物。三类：能够引起人类或者三类：能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有起严
9、重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生效治疗和预防措施的微生物。物。2级：级：(中等个体危害，有限中等个体危害，有限群体危害群体危害)能引起人或动物发能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原微生会引起严重危害的病原微生物。实验室感染不导致严重物。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。措施，并且传播风险有限。2级：（级：（个体危险中等，群个体危险中等，群体危险低）病原微生物能够体危险低）病原微生物能够对人或动物致病，但对实验对人或动物致病，但对实验室
10、工作人员、社区、牲畜或室工作人员、社区、牲畜或环境不易导致严重危害。实环境不易导致严重危害。实验室暴露也许会引起严重感验室暴露也许会引起严重感染，但对感染有有效的预防染，但对感染有有效的预防和治疗措施，并且疾病传播和治疗措施，并且疾病传播的危险有限。的危险有限。19病原微生物实验室生病原微生物实验室生物安全管理条例物安全管理条例实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求（GB19489-2019）WHO生物安全手册生物安全手册（第三版，（第三版，2019）二类：能够引起人类或二类：能够引起人类或者动物严重疾病，比较者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人容易直接或者间接在人与人、动物与人、动
11、物与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。与动物间传播的微生物。3级：（高个体危害，低群体级：（高个体危害，低群体危害）能引起人类或动物严危害）能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的抗生素、抗寄生虫药治疗的病原微生物。病原微生物。3级：（级：（个体危险高，群体个体危险高，群体危险低）病原微生物通常危险低）病原微生物通常能引起人或动物的严重疾能引起人或动物的严重疾病，但一般不会发生感染病，但一般不会发生感染个体向其他个体的传播，个体向其他个体的传播
12、，并且对感染有有效的预防并且对感染有有效的预防和治疗措施。和治疗措施。一类：能够引起人类或一类：能够引起人类或者动物非常严重疾病的者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭发现或者已经宣布消灭的微生物。的微生物。4级：级：(高个体危害，高群体高个体危害，高群体危害危害)能引起人类或动物非常能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物或人与动物，或动物与动物间传播的病原微生物。间传播的病原微生物。4级：（级：（个
13、体和群体的危险个体和群体的危险均高）病原微生物通常能均高）病原微生物通常能引起人或动物的严重疾病，引起人或动物的严重疾病，并且很容易发生个体之间并且很容易发生个体之间的直接或间接传播，对感的直接或间接传播，对感染一般没有有效的预防和染一般没有有效的预防和治疗措施。治疗措施。20 法定报告传染病所涉及的病原微生物法定报告传染病所涉及的病原微生物 法定报告传染病以外常见传染病病原微生物法定报告传染病以外常见传染病病原微生物 国外新发现和已消灭传染病病原微生物国外新发现和已消灭传染病病原微生物2122v 国外新发现（我国尚未发现）传染病病原体的操作级国外新发现（我国尚未发现）传染病病原体的操作级别完
14、全按照国外同类标准别完全按照国外同类标准v 非法定传染病病原微生物的操作级别主要参照国际相非法定传染病病原微生物的操作级别主要参照国际相关标准关标准v 本规定中所涉及病毒的操作级别主要指野生型病原微本规定中所涉及病毒的操作级别主要指野生型病原微生物，重组体另加说明生物，重组体另加说明23242526272829303132333435 36 暴露以后，后果的轻重取决于病原微生物的暴露以后，后果的轻重取决于病原微生物的致病力和机体致病力和机体的抵抗力的抵抗力，不同属、种、亚种、型的病原微生物，甚至不同株，不同属、种、亚种、型的病原微生物，甚至不同株的病原微生物，其致病性各异。的病原微生物，其致病
15、性各异。还取决于所感染病原微生物的还取决于所感染病原微生物的数量数量，当大量病原微生物侵，当大量病原微生物侵袭人体时，潜伏期一般较短，而病情则较为严重；反之，则潜袭人体时，潜伏期一般较短，而病情则较为严重；反之，则潜伏期较长而病情较轻，或不发病。伏期较长而病情较轻，或不发病。不同个体被传染后，可产生各种不同的结局，最轻的不出不同个体被传染后，可产生各种不同的结局，最轻的不出现任何症状、最重的发生严重型临床疾病而死亡。对暴露的潜现任何症状、最重的发生严重型临床疾病而死亡。对暴露的潜在后果评估，应参考教科书并收集相关资料，突出个体传染过在后果评估，应参考教科书并收集相关资料，突出个体传染过程与结局
16、。程与结局。37 病原微生物可通过空气、水、食物、接触、血液、母婴、病原微生物可通过空气、水、食物、接触、血液、母婴、虫媒、土壤等途径传播。虫媒、土壤等途径传播。每一种传染病的传播途径不一定相同，同一种传染病在每一种传染病的传播途径不一定相同，同一种传染病在各个具体病例中的传播途径也可以不同，同一种病原微生各个具体病例中的传播途径也可以不同，同一种病原微生物也可以有一种以上的传播途径。物也可以有一种以上的传播途径。通过通过呼吸道呼吸道传播的病原微生物容易引起不同的感染性疾传播的病原微生物容易引起不同的感染性疾病。因此，气溶胶是引起实验室感染的最重要因素。病。因此，气溶胶是引起实验室感染的最重要
17、因素。38 3940 在某些病原微生物或待检样品危害程度相关背景信在某些病原微生物或待检样品危害程度相关背景信息量不足时，应尽可能从病人医学资料、流行病学资料息量不足时，应尽可能从病人医学资料、流行病学资料以及样品来源地收集有用的信息，同时可以利用动物致以及样品来源地收集有用的信息，同时可以利用动物致病性、传染性和传播途径的研究数据获取对危害评估有病性、传染性和传播途径的研究数据获取对危害评估有用的信息。用的信息。4142434445 46 4748 49v 各种实验活动的危害程度及其防护措施；各种实验活动的危害程度及其防护措施；v 感染控制与医疗监测方案感染控制与医疗监测方案v 应采取的消毒
18、灭菌方案应采取的消毒灭菌方案 5051 52 对于同一病原微生物而言，从事不同的实验活对于同一病原微生物而言，从事不同的实验活动，操作者接触微生物的数量、浓度、可能的感染动，操作者接触微生物的数量、浓度、可能的感染途径是不同的，一旦暴露，其后果也是不同的，所途径是不同的，一旦暴露，其后果也是不同的，所以对于不同的实验活动均应进行危害评估，以指导以对于不同的实验活动均应进行危害评估，以指导操作者采取合适的生物安全防护。操作者采取合适的生物安全防护。53 54 在待检样品信息不足时，可以利用病人的医学资料、流在待检样品信息不足时，可以利用病人的医学资料、流行病学资料（发病率和病死率资料、可疑的传播
19、途径、其他行病学资料（发病率和病死率资料、可疑的传播途径、其他有关暴发的调查资料）以及有关标本来源地的信息，帮助确有关暴发的调查资料）以及有关标本来源地的信息，帮助确定处理这些样本的危害程度，同时应当谨慎地采取一些较为定处理这些样本的危害程度，同时应当谨慎地采取一些较为保守的标本处理方法。保守的标本处理方法。l 对于取自病人的标本，均应当遵循标准防护方法，并采用对于取自病人的标本，均应当遵循标准防护方法，并采用隔离防护措施（如手套、防护服、眼睛保护等）。隔离防护措施（如手套、防护服、眼睛保护等）。l 基础防护基础防护-处理此类标本时最低需要二级生物安全水平。处理此类标本时最低需要二级生物安全水
20、平。l 标本的运送应当遵循国家和或国际的规章和规定。标本的运送应当遵循国家和或国际的规章和规定。l 在暴发病因不明的疾病时，应根据国家主管部门和在暴发病因不明的疾病时，应根据国家主管部门和或或WHO WHO 制订的专门指南，进行标本的运输并按规定的生物安制订的专门指南，进行标本的运输并按规定的生物安全等级进行相关操作。全等级进行相关操作。55 56 575859 606162安全柜各类标准：安全柜各类标准：EN12469:2000(欧盟生物安全柜统一标准欧盟生物安全柜统一标准)NSF49:2019(美国生物安全柜标准美国生物安全柜标准-二级生二级生物安全柜物安全柜)JIS K3800:2000
21、(日本生物安全柜标准日本生物安全柜标准)SFDA YY0569-2019(中国国家食品药品监中国国家食品药品监督管理局生物安全柜标准督管理局生物安全柜标准)63执行标准：执行标准：医药行业标准医药行业标准YY 0569_2019本标准为强制性标准本标准为强制性标准-2019-06-01实施实施本标准参考本标准参考:1)NSF/ANSI49-2019(美国)2)EN12469:2000(欧洲)国家食品药品监督管理局发布国家食品药品监督管理局发布 6465YY0569-2019标准制定背景标准制定背景v SARS之后，中国政府加强了对生物安全的管理力度，出台了一系列的生物实验室相关政策法规及国家/
22、行业标准v YY0569-2019生物安全柜也在此背景下由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化委员会提出，由北京医疗器械检验所及部分国内外厂家代表起草v YY0569-2019 生物安全柜由国家食品药品监督管理局于2019年7月18日发布；于2019年6月1日正式实施 标准针对中国用户的实际情况，综合借鉴了NSF49和EN12469的要求和检测手段:采用了NSF49标准对二级生物安全柜的分类要求，分为A1、A2、B1、B2四种类型 借鉴了EN12469中针对人员防护检测的特色检测方法KI-Discus(碘化钾)测试法 针对中国市场的现状，参考两大标准提出了部分性能要求，例如:实时气流显示
23、 警报系统 工作区三面一体成型及负压设计 以及年度维护性能检测的要求YY0569-2019 简介简介 该标准共分为9个章节和6个附录,其中附录A和B为资料性附录;附录C、D、E、F为规范性附录。其目的是控制生物安全柜的生产质量，确保安全。该标准规定了安全柜的术语和定义、分类、材料、结构和性能要求，试验方法、检测规则、标志标签、说明书、包装、运输和储存的要求。生物安全柜标准内容生物安全柜标准内容68生物安全柜分类：生物安全柜分类：级生物安全柜级分为（A1、A2、B1、B2）级为全封闭，排出的气体经两道HEPA或通过一道HEPA过滤后再经焚烧处理69 生物安全柜分类生物安全柜分类级别级别 类型类型
24、 排风排风 循环空气比例循环空气比例%柜内气流柜内气流 工作窗口进风平均速度工作窗口进风平均速度m/s m/s 保护对象保护对象 I I级级 可向室内排风可向室内排风乱流乱流0.400.40使用者、环境使用者、环境IIII级级 A1A1型型可向室内排风可向室内排风7070单向流单向流0.400.40使用者、受试样本使用者、受试样本和环境和环境 A2A2型型可向室内排风可向室内排风7070单向流单向流0.500.50B1B1型型不可向室内排风不可向室内排风3030单向流单向流0.500.50B2B2型型不可向室内排风不可向室内排风0 0单向流单向流0.500.50级级 不可向室内排风不可向室内排
25、风0 0单向流单向流无工作窗进风口时，当一只无工作窗进风口时，当一只手套筒取下时，手套口风速手套筒取下时，手套口风速0.70.7主要是使用者和环主要是使用者和环境，有时兼顾受试境，有时兼顾受试样本样本70BSC-1示意（示意（WHO)v BSC-1级生物安全柜原理图。级生物安全柜原理图。v A：前开口，v B：可视窗，v C：排风HEPA过滤器，v D：压力排风系统。v 71级级A1型安全柜型安全柜(30%)-前窗操作口流入气流的最低平均流速为0.40m/s;-柜内的污染部位可处于正压状态,且可以无负压区域 包围;级级A1A1安全柜不能用于安全柜不能用于有挥发性有毒化学品有挥发性有毒化学品和挥
26、发性放射性核素的实验和挥发性放射性核素的实验72级级A2型安全柜型安全柜(30%)-前窗操作口流入气流的最低平均流速为0.50m/s;-柜内所有的污染部位均处于负压状态,或被负压通道 和负压通风系统环绕.级级A1A1安全柜用于微量挥发性有毒化学品和安全柜用于微量挥发性有毒化学品和痕量挥发性放射性核素为辅助剂的微生物实验时痕量挥发性放射性核素为辅助剂的微生物实验时必须连接功能合适的排气罩必须连接功能合适的排气罩.73 级级A2A2型生物安全柜型生物安全柜 1、空气流入速度至少空气流入速度至少-应该达应该达0.38-0.51 m/s74级级B1型生物安全柜型生物安全柜 适用于：适用于：含有微量挥发
27、性有毒化学物质或含有微量挥发性有毒化学物质或痕量放射性核素的微生物学研究痕量放射性核素的微生物学研究A：前开口；：前开口；B：窗口；：窗口；C：排风排风HEPA过滤器；过滤器；D：供风供风HEPA过滤器；过滤器；E：负压压力排风系统；：负压压力排风系统；F：风机；：风机；G：送风过滤器：送风过滤器安全柜需要有与建筑物排安全柜需要有与建筑物排风系统相连接的排风接口风系统相连接的排风接口75级级B1型安全柜型安全柜(70%)-前窗操作口流入气流的最低平均流速为0.50m/s;-柜内所有的污染部位均处于负压状态,或被负压通道 和负压通风系统环绕级级B1B1安全柜用于微量挥发性有毒化学品和安全柜用于微
28、量挥发性有毒化学品和痕量挥发性放射性核素为辅助剂的微生物实验痕量挥发性放射性核素为辅助剂的微生物实验76级级A1、A2和和B1型生物安全工作原理图型生物安全工作原理图洁净空气室内空气污染空气77级级B2型安全柜型安全柜(100%)-前窗操作口流入气流的最低平均流速为0.50m/s;-柜内所有的污染部位均处于负压状态,或被直接排气的 负压通道和负压通风系统环绕级级B2B2安全柜用于挥发性有毒化学品和安全柜用于挥发性有毒化学品和挥发性放射性核素为辅助剂的微生物实验挥发性放射性核素为辅助剂的微生物实验78污染空气室内空气洁净空气级级B2型生物安全工作原理图型生物安全工作原理图79性能v 柜体防泄漏v
29、 HEPA完整性 v 噪声v 照度v 振动80噪声测试噪声噪声-67dB1）打开风机和照明灯，在安全柜前面中心水平向外300；工作台上方380 处测量。2）关闭风机和照明灯，如有室外排气风机则继续运行，在相同位置测量背景噪声。81照度测试平均照度不小于平均照度不小于650lx,每个照度每个照度实测值不小于实测值不小于430lx。1）在工作台上，沿两内侧壁中心连线设置测量点，点间距离不超过300，与侧壁最小距离150；2）关灯，从一侧依次测背景照度；3）打开灯，启动风机，从一侧依次测量照度。82振动测试 频率在频率在10Hz-10KHz之间，在范围内的净振动小于之间，在范围内的净振动小于5m。测
30、量安全柜气流流速在标称值0.015m/s范围内运行时的振动83人员保护试验人员保护测试用微生物法或碘化钾法,仲裁时用微仲裁时用微生物法。生物法。84从从6个个AGI-30采样器回收采样器回收到枯草芽孢杆菌的到枯草芽孢杆菌的CFU数量，数量，在每次检测时不得超过在每次检测时不得超过10个。采样时间达个。采样时间达30 min时，时，裂隙式空气采样器的平板计裂隙式空气采样器的平板计数不得超过数不得超过5个菌落。必须个菌落。必须重复重复3次试验。对照平板必次试验。对照平板必须是阳性结果。当平板含有须是阳性结果。当平板含有300个以上的枯草芽孢杆菌个以上的枯草芽孢杆菌菌落时，即为阳性。菌落时，即为阳性
31、。85人员保护试验86产品保护测试在工作台面上排满敞开的在工作台面上排满敞开的琼脂培养皿琼脂培养皿每次试验中，在琼脂平板每次试验中，在琼脂平板上枯草芽孢杆菌的菌落数上枯草芽孢杆菌的菌落数不得超过不得超过5个。必须重复个。必须重复3次试验。对照平板必须是次试验。对照平板必须是阳性结果。当平板含有阳性结果。当平板含有300个以上的枯草芽孢杆个以上的枯草芽孢杆菌菌落时，即为阳性。菌菌落时，即为阳性。87产品保护试验88防交叉污染试验从攻击侧壁到距离侧壁14 in（36 cm）之间的一些琼脂平板可以得到枯草芽孢杆菌菌落，它们用作阳性对照。每次测试时，在大于14 in（38 cm）中心处的琼脂平板所得到
32、的菌落总数不得超过2个。在安全柜的左侧和右侧各做3次重复实验。89柜体抗变形试验90柜体抗变形试验91工作台面抗变形92前窗负载抗前倾试验93下降气流流速测量试验94A型安全柜计算流入气流流速95B1型安全柜计算流入气流流速96B2型安全柜计算流入气流流速97安装检验v 安装检验安装检验：安全柜安装完成、位置移动后、进行安装检验。检验项目中出现一项不符合要求，将判定该安 全柜为安装检验不合格。维护检验：维护检验：当安全柜更换过滤器和内部部件维修后要进行检验。98性能检测和验证性能检测和验证v 生物安全柜安装后安全性能生物安全柜安装后安全性能v 根据试验和实验室调查,我国实验室的排风过滤、生物安
33、全柜，安装后经常规方法检测大部分是合格的，但是也有相当大的部分生物检测是不合格者,经过反复试验才能达到使用要求,对生物安全参数这是不允许的。v 某单位一个进口二级生物安全柜物理现场检测合格，但经生物检测发现其排风过滤器有严重泄漏，经检查发现过滤有明显伤痕。v 某单位进口生物安全柜在个人保护试验验证检查时发现效果非常差，经厂家反复调试才合格。v 某单位进口二级生物安全柜物理参数现场检测虽然达到了标准,但生物检测个人保护根本不合格。v 对几家国产生物安全柜检测结果也证明，物理检测不能完全保证“零泄漏”。其中包括过滤器泄漏,安全柜内污染从操作口泄漏超标等。99 柜体泄漏测试目的_测试安全柜柜体的防泄
34、漏性能 a)压力计，量程为0-600Pa，精确5Pab)肥皂溶液，由25g/L的软肥皂的微温蒸馏 水溶液组成100方法v压力衰减法压力衰减法:a)将安全柜的前窗和排气孔封好，使安全柜成为一密封系统；b)给安全柜增压到500Pa，封闭加压空气，30min后测定压力。允许初始压力下降10%，如果安全柜不能保持500Pa压力，用肥皂泡法查找泄漏位置；101方法v 肥皂泡法肥皂泡法:沿安全柜压力通风系统的所有焊缝、衬垫、套接处和封口处的外表面喷或涂刷检漏仪液体，小的泄漏会出现气泡，如果从孔中吹出检测液体而未形成泡，则可能发生大的泄漏，可通过轻微的气流感觉和声音来发现102HEPA过滤器系统泄漏测试 目
35、的:测定安全柜过滤器安装结构的完整性其中包括:1)下降气流HEPA过滤器、2)排气HEPA过滤器、3)过滤器外罩4)框架1031)邻苯二甲酸二辛酯（DOP）;2)或与之相当的液体即可以产生与DOP气溶胶颗粒尺寸分布相同气溶胶颗粒的液体;如：聚-烯烃（PAO）、二(2-乙基已基)癸二酸酯、聚乙二醇，以及药物级的轻矿物油。试剂试剂104检测仪器 v a)线性或对数标尺的气溶胶光度计，标示出含100%上升气流的10g/L多分散气溶胶微粒的浓度，能检测110-3%同一气溶胶的微粒，光度计应按其生产商的使用说明进行校准；v b)气溶胶发生器，发生器压力计的最大量程为0-550 kPa，分辨率和精确度为7
36、kPa。发生器压力计由生产厂家校准或按照厂家的使用说明校准。105试验方法 将气溶胶发生器的压力调至最小140kPa，使用DOP或与之相当的液体产生气溶胶。注意:发生器喷嘴浸入液体的深度应不超过25mm。）打开安全柜的风机和灯（A1/A2和B2类型安全柜：下降气流过滤器测试），去掉过滤器的扩散装置和保护盖，放置发生器，将气溶胶引入安全柜。使产生均匀分布的HEPA过滤器的上升气流。引入气溶胶的方式应确保其在安全柜气流中充分混合；106试验方法b)打开光度计，按厂商使用说明进行调整；c)对HEPA过滤器含有气溶胶的上升气流进行 取样,证实该浓度的气溶胶的光散射强度至少应等于10g/L DOP的光散
37、射强度；107NSF 49 vs.YY 0569NSF 49 vs.YY 0569要求NA气流警报气流警报作为生物挑战备用检测NA碘化钾人员保护检测碘化钾人员保护检测工作台面以上36cm工作台面以上36cm人员保护喷雾器的位置要求人员保护喷雾器的位置要求要求要求微生物挑战异常气流检测微生物挑战异常气流检测型式检测出厂检测+型式检测压力检测适用性压力检测适用性500 Pa500 Pa柜体完整性柜体完整性/压力检测压力检测要求要求气流模式检测气流模式检测/烟雾示踪烟雾示踪工作台面几何中心工作台面几何中心振动检测方法振动检测方法工作台面以上38 cm,柜体前方30 com 工作台面以上38 cm,柜
38、体前方30 com 噪音取点要求噪音取点要求67 dBA67 dBA噪音合格要求噪音合格要求距侧壁15cm,检测点间距30 cm距侧壁15cm,检测点间距30 cm照度检测方法照度检测方法650 lux,背景照度110 lux 50 lux650 lux,背景照度110 lux 50 lux照度要求照度要求采用DOP/PAO模拟气溶胶进行检测采用DOP/PAO模拟气溶胶进行检测过滤器完整性检测过滤器完整性检测160-250cmN.A 前窗高度要求前窗高度要求 20%or 0.08 m/s 20%or 0.08 m/s 下沉气流均匀度下沉气流均匀度0.25 0.50m/sNA下沉气流范围下沉气流
39、范围0.50 m/s0.50 m/s最小进气流最小进气流SFDA YY0569-2019NSF 49:2019检测项目检测项目生物安全柜现场性能生物安全柜现场性能鉴定检测项目与意义鉴定检测项目与意义生物安全柜现场性能检测生物安全柜现场性能检测v 根据NSF49和YY0569生物安全柜标准，生物安全柜需要进行以下全部或部分的现场性能检测：进气流 下沉气流 照度 噪音 震动 过滤器扫描（气溶胶挑战）可视化气流模式 压力检测 现场安装评估及警报系统检验生物安全柜维护检测意义生物安全柜维护检测意义v 来自国内外的诸多事实证明，购买生物安全柜并不是实验室生物安全的最终解决方案。严格的生物安全柜现场性能鉴
40、定检测以及有效的生物安全管理及培训制度对保障实验室生物安全是至关重要的v 来自NSF的数据证实：大约20%的生物安全柜无法通过现场性能鉴定检测，原因包括 高效过滤器的负载 电气系统老化或损坏 实验室排风系统设计安装不合理 安全柜的移位或维修v 这些安全柜需要厂家进行进一步维护和重新调试校准，性能达标后才可投入使用112生物安全柜相关检测与维护事项生物安全柜相关检测与维护事项113安全柜的摆放要求安全柜的摆放要求充分清除与维护空间充分清除与维护空间最佳安全柜摆设地点取决于安全柜所受到的外在气流干扰减到最小最佳安全柜摆设地点取决于安全柜所受到的外在气流干扰减到最小：避免高流量通道 远离空调排气口，
41、排气扇 限制安全柜的数量 根据 ANSI/NSF49:49 和英国标准BS5726:1992推荐安装指南114安装地点的选择安装地点的选择No.1 地点1是远离周遭的气流扰动因素，是适当安装的地点。No.2 地点2 太靠近门、走道以及空调出风口，影响安全柜的气流。No.3 地点3的空调出风口会影响安全柜的气流。No.4 地点4是太靠近门，侧面太要紧墙壁。No.5 如果毗邻的回风口气流不影响安全柜的气流。那地点5的位置适合安装安全柜。115安全柜顶部空间要求安全柜顶部空间要求比安全柜顶部至少高出100mm116检测实验室供电电压检测实验室供电电压117B2生物安全柜的安装生物安全柜的安装建议使用
42、专用的排气系统不建议使用支管/总管设计如使用支管，请只用B2型组对，不要B2与A2共用（因为很难平衡）外置风机达到额定排气要求外置风机应可克服排气管道内的压力损耗管道连接处需安装节流装置：节流蝶阀或频率控制器清除污染时需要气密的节流阀（福尔马林，甲醛溶液）118生物安全柜的净化与灭菌生物安全柜的净化与灭菌当需要对生物安全柜任何被污染的部位进行日常维护、更换过滤器以及现场性能测试时，都必须进行灭菌处理。l一般是采用多聚甲醛或甲醛熏蒸的方法来杀灭潜在生物危害物质。l安全柜在灭菌前需要用特殊灭菌袋进行仔细密封，所在实验室门上应贴上生物危害警告标志以避免人员进入。l通过可设置程序的福尔马林灭菌器进行福尔马林灭菌和氨水中和的过程，整个过程历时大约10-15个小时l 由于福尔马林的毒性，此过程必须由厂家或者专业机构受过培训的技术人员来进行119安全柜灭菌与过滤器更换安全柜灭菌与过滤器更换120121122123124 125
