1、微生物鉴定和药敏分析系统2 微生物检验逐步走向了简易化、微量化、系统化、商微生物检验逐步走向了简易化、微量化、系统化、商品化和标准化,实现了从生化模式到数字模式的转化品化和标准化,实现了从生化模式到数字模式的转化。功能范围包括细菌、厌氧菌和真菌等微生物鉴定以及功能范围包括细菌、厌氧菌和真菌等微生物鉴定以及抗菌药物敏感试验和最低抑菌浓度抗菌药物敏感试验和最低抑菌浓度(MIC)的测定。的测定。返回目录3(一)微生物的鉴定原理(一)微生物的鉴定原理 微生物鉴定系统采用数码鉴定原理。数码鉴定的微生物鉴定系统采用数码鉴定原理。数码鉴定的基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对基本原理是计算并比较数据库
2、内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。系统中每个生化反应出现的频率总和。返回目录41.数据库数据库 由许多细菌条目组成。由许多细菌条目组成。每个条目代表一个细菌菌每个条目代表一个细菌菌种或一个细菌生物型。种或一个细菌生物型。有些细菌只靠生化反应无有些细菌只靠生化反应无法将属内细菌鉴定到种,法将属内细菌鉴定到种,则条目代表细菌属并提出则条目代表细菌属并提出“需用血清学试验需用血清学试验”等进等进行下一步鉴定的指示行下一步鉴定的指示。返回目录5常用生化反应如下:常用生化反应如下:发酵试验发酵试验 同化试验同化试验同化或发酵抑制试验同化或发酵抑制试验 酶试验酶试验 其他生化试验其他生化试
3、验 返回目录62.2.编码编码 将所得到的细菌生化反应模式转换成数学模式将所得到的细菌生化反应模式转换成数学模式 编码的原则是将二十个生化反应得出的阴阳性结编码的原则是将二十个生化反应得出的阴阳性结果以果以“+”+”或或“一一”为标志的信息编为一组数字为标志的信息编为一组数字 具体步骤是:将全部生化反应每三个归为一组具体步骤是:将全部生化反应每三个归为一组 将每组所有生化反应得出的三个数字相加,结果将每组所有生化反应得出的三个数字相加,结果可能为可能为0 07 7之间的任何一个数字。之间的任何一个数字。返回目录7 在有些情况下,在有些情况下,7 7位数码还不足以分辨,需要位数码还不足以分辨,需
4、要作一些补充试验:作一些补充试验:硝酸盐还原成亚硝酸盐试验;硝酸盐还原成亚硝酸盐试验;亚硝酸盐还原成氮气试验;亚硝酸盐还原成氮气试验;动力试验;动力试验;麦康凯琼脂上生长试验;麦康凯琼脂上生长试验;葡萄糖氧化试验;葡萄糖氧化试验;葡萄糖发酵。葡萄糖发酵。返回目录83.查码查码 有编码检索本和计算机软件两种查码方式有编码检索本和计算机软件两种查码方式(1)一种情况是有该数码,并写有以下信息:)一种情况是有该数码,并写有以下信息:有一个或几个菌名条目及其鉴定百分率和有一个或几个菌名条目及其鉴定百分率和T值;值;对鉴定结果好坏的评价有最佳、很好、好、可以接对鉴定结果好坏的评价有最佳、很好、好、可以接
5、受、不可接受等;受、不可接受等;用小括号指出关键的生化结果,并列出该项反应应用小括号指出关键的生化结果,并列出该项反应应得的阳性百分率;得的阳性百分率;返回目录9遇到分辨不清或多条菌名排列在一起时,指出必须增加补遇到分辨不清或多条菌名排列在一起时,指出必须增加补充试验的项目及该反应应得的阳性百分率;充试验的项目及该反应应得的阳性百分率;指出某些注意要点,需用指出某些注意要点,需用“推测性鉴定推测性鉴定”,将此菌送至参,将此菌送至参考实验室,用血清学鉴定,作进一步证实。考实验室,用血清学鉴定,作进一步证实。(2)另一种情况是无该数码,可能有三种原因:)另一种情况是无该数码,可能有三种原因:此菌生
6、化谱不典型;此菌生化谱不典型;不能接受,鉴定百分率不能接受,鉴定百分率80.0;可疑。可疑。返回目录104.解释解释 如果排序第一的细菌鉴定百分率如果排序第一的细菌鉴定百分率80.0,则可将未,则可将未知菌鉴定在此条目中,评价:知菌鉴定在此条目中,评价:(1)鉴定百分率)鉴定百分率99.9和和T0.75为最佳的鉴定结果为最佳的鉴定结果(2)鉴定百分率在)鉴定百分率在99.099.8之间,之间,T0.5为很好的为很好的鉴定结果鉴定结果(3)鉴定百分率在)鉴定百分率在90.098.9之间,之间,T0.25为好的鉴为好的鉴定结果定结果返回目录11(4)鉴定百分率在)鉴定百分率在80.089.9之间为
7、可接受鉴定结果之间为可接受鉴定结果 如果第如果第1条目的鉴定百分率条目的鉴定百分率80.0,就将前,就将前2个条目的个条目的id加在一起。加在一起。若还不足若还不足80.0,则将前,则将前3个条目鉴定百分率加在一起个条目鉴定百分率加在一起若前若前3个条目鉴定百分率的和个条目鉴定百分率的和80.0,就有两种可能,就有两种可能鉴定到种的水平鉴定到种的水平;鉴定到属的水平。鉴定到属的水平。如果前如果前3个条个条目鉴定百分率的和目鉴定百分率的和80.0,则此结果被认为是不可接,则此结果被认为是不可接受的。受的。第四节第四节 微生物鉴定和药敏分析系微生物鉴定和药敏分析系统返回目录12(二)抗菌药物敏感性
8、试验的(二)抗菌药物敏感性试验的检测原理检测原理 自动化抗菌药物敏感性试验使自动化抗菌药物敏感性试验使用药敏测试板用药敏测试板(卡卡)进行测试进行测试 仪器每隔一定时间自动测定小仪器每隔一定时间自动测定小孔中细菌生长状况孔中细菌生长状况返回目录13 并根据并根据NCCLSNCCLS标准得到相应敏感度:标准得到相应敏感度:敏感敏感“S(sensitive)”、中度敏感、中度敏感“MS(middle-sensitive)”和耐药和耐药“R(resistance)”药敏测试板也分为常规测试板和快速荧光测试板药敏测试板也分为常规测试板和快速荧光测试板两种两种返回目录14二、基本结构二、基本结构(一)测
9、试卡(一)测试卡(板板)最基本的测试卡最基本的测试卡(板板)包括革兰阳性菌鉴定卡包括革兰阳性菌鉴定卡(板板)、革兰阴性菌鉴定卡、革兰阴性菌鉴定卡(板板)、革兰阳性菌药敏试验、革兰阳性菌药敏试验卡卡(板板)和革兰阴性菌药敏试验卡和革兰阴性菌药敏试验卡(板板)。使用时应根据涂片和革兰染色结果进行选择。使用时应根据涂片和革兰染色结果进行选择。有些配有分别鉴定厌氧菌、酵母菌、需氧芽胞杆有些配有分别鉴定厌氧菌、酵母菌、需氧芽胞杆菌、奈瑟菌、嗜血杆菌、李斯特菌、弯曲菌等特菌、奈瑟菌、嗜血杆菌、李斯特菌、弯曲菌等特殊鉴定卡殊鉴定卡(板板)及多种不同菌属的药敏试验卡及多种不同菌属的药敏试验卡(板板)。返回目录
10、15(二)菌液接种器(二)菌液接种器 测试卡的菌液接种一般采用真空接种器。真空接测试卡的菌液接种一般采用真空接种器。真空接种器分为上、下两部分:上部为封口器并有切割种器分为上、下两部分:上部为封口器并有切割作用,下部为真空充液接种装置。作用,下部为真空充液接种装置。测试板的菌液接种一般采用活塞接种器。测试板的菌液接种一般采用活塞接种器。返回目录16(三)培养与监测系统(三)培养与监测系统 测试卡测试卡(板板)放入孵育箱后,监测系统就要对测试放入孵育箱后,监测系统就要对测试板进行一次初次扫描,并将各孔的检测数据自动板进行一次初次扫描,并将各孔的检测数据自动储存起来作为以后读板结果的对照。储存起来
11、作为以后读板结果的对照。有些通过比色法测定的测试板经适当的孵育后,有些通过比色法测定的测试板经适当的孵育后,测试孔需添加试剂,此时系统会自动添加,并延测试孔需添加试剂,此时系统会自动添加,并延长孵育的时间。长孵育的时间。返回目录17(四)数据管理系统(四)数据管理系统 数据管理系统就像整个系统的神经中枢数据管理系统就像整个系统的神经中枢 当反应完成时,计算机自动进行菌种发生率、菌种当反应完成时,计算机自动进行菌种发生率、菌种分离率、抗生素耐药率等流行病学统计分离率、抗生素耐药率等流行病学统计 有些还配有专家系统有些还配有专家系统返回目录18三、性能与评价三、性能与评价1.1.自动化程度高自动化
12、程度高 2.2.功能范围大功能范围大 3.3.检测速度快检测速度快 4.4.结果准确结果准确 5.5.避免误差避免误差 6.6.设置可供使用者调节设置可供使用者调节的可变程序的可变程序 四、使用四、使用 不同的微生物鉴定和药敏分析系统使用步骤基本不同的微生物鉴定和药敏分析系统使用步骤基本相似。相似。返回目录19微生物鉴定和药敏分析系统使用步骤:微生物鉴定和药敏分析系统使用步骤:分离培养待测细菌分离培养待测细菌专用培养基将纯种扩大培养专用培养基将纯种扩大培养将菌悬液接种至测试卡将菌悬液接种至测试卡(板板)培养培养配制一定浊度的菌悬液配制一定浊度的菌悬液将培养后的测试卡将培养后的测试卡(板板)放入读数仪中读数,计算机软件自动给出鉴定结果放入读数仪中读数,计算机软件自动给出鉴定结果返回目录