1、蛙心灌流医学知识宣讲蛙心灌流医学知识宣讲。蛙心灌流医学知识宣讲2蛙心灌流医学知识宣讲3蛙心灌流医学知识宣讲4蛙心灌流医学知识宣讲5蛙心灌流医学知识宣讲6蛙心灌流医学知识宣讲7结扎左主动脉，剪口蛙心灌流医学知识宣讲8蛙心插管蛙心插管蛙心灌流医学知识宣讲9结扎静脉窦下端，完全分离出心脏蛙心灌流医学知识宣讲10蛙心灌流医学知识宣讲111、游离蛙心时，勿伤及静脉窦，要连静脉窦一起取下、游离蛙心时，勿伤及静脉窦，要连静脉窦一起取下2、在心脏收缩期插入插管、在心脏收缩期插入插管,在心脏舒张期夹蛙心夹在心脏舒张期夹蛙心夹3、实验中蛙心插管内液面应保持恒定、实验中蛙心插管内液面应保持恒定4、进行各观察项目时，
2、作用明显后应立即用新鲜任氏液、进行各观察项目时，作用明显后应立即用新鲜任氏液换洗，待心跳恢复正常后方可进行下一步实验换洗，待心跳恢复正常后方可进行下一步实验5、吸新鲜任氏液的滴管与吸插管内液体的滴管要分开，、吸新鲜任氏液的滴管与吸插管内液体的滴管要分开，以免影响实验现象的观察和结果分析以免影响实验现象的观察和结果分析6、滴加药品时，要及时标记、滴加药品时，要及时标记7、滴加药品后，可用滴管混匀、滴加药品后，可用滴管混匀蛙心灌流医学知识宣讲12心肌的收缩活动是由钙离子触发的，由于心肌心肌的收缩活动是由钙离子触发的，由于心肌细胞的肌浆网不发达，还需要细胞外钙离子内细胞的肌浆网不发达，还需要细胞外钙
3、离子内流触发。因此心肌收缩的强弱与细胞外钙离子流触发。因此心肌收缩的强弱与细胞外钙离子的浓度成正比。的浓度成正比。蛙心灌流医学知识宣讲14 曲线幅度：代表心脏收缩的强弱。曲线幅度：代表心脏收缩的强弱。曲线密度：代表心跳频率。曲线密度：代表心跳频率。曲线的规律性：代表心跳的节律性。曲线的规律性：代表心跳的节律性。曲线的基线：代表心室舒张的程度。曲线的基线：代表心室舒张的程度。曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。正常蛙心收缩曲线正常蛙心收缩曲线蛙心灌流医学知识宣讲150.65%NaCl0.65%NaCl低低CaCa离子离子心肌细胞动作电位心肌细胞动作电位2 2期
4、期CaCa内流内流胞浆内胞浆内CaCa离子浓度离子浓度心肌的收缩活动心肌的收缩活动1.长时间用长时间用0.650.65NaClNaCl溶液灌注蛙心，心脏最终会停止收缩，但仍溶液灌注蛙心，心脏最终会停止收缩，但仍能产生动作电位，这种现象称为兴奋收缩脱耦联，是心肌细胞能产生动作电位，这种现象称为兴奋收缩脱耦联，是心肌细胞内缺少内缺少CaCa离子的表现。离子的表现。蛙心灌流医学知识宣讲162%CaCl2%CaCl2 2高高CaCa离子离子2.收缩增强收缩增强心脏心脏舒张不全舒张不全在在CaCa离子浓度较高的情况下，心脏会停止在收缩状态，称为钙僵。离子浓度较高的情况下，心脏会停止在收缩状态，称为钙僵。
5、蛙心灌流医学知识宣讲17 高高CaCa离子，蛙心收缩力增强，但收缩基线上移，表明离子，蛙心收缩力增强，但收缩基线上移，表明舒张不完全。心肌的舒缩活动与肌浆中的舒张不完全。心肌的舒缩活动与肌浆中的CaCa离子浓度高低离子浓度高低有关，当有关，当CaCa离子浓度升高至离子浓度升高至1010-5-5mol/lmol/l时，作为钙受体的肌时，作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的钙蛋白结合了足够的CaCa离子，这就引起肌钙蛋白分子构型离子，这就引起肌钙蛋白分子构型的改变，从而触发肌丝滑行，肌纤维收缩。当肌浆中的的改变，从而触发肌丝滑行，肌纤维收缩。当肌浆中的CaCa离子浓度降至离子浓度降至1010-7-7m
6、ol/lmol/l时，时，CaCa离子与肌钙蛋白解离，心肌离子与肌钙蛋白解离，心肌随之舒张。当用高随之舒张。当用高CaCa离子任氏液灌注蛙心，使得肌浆中离子任氏液灌注蛙心，使得肌浆中CaCa离子浓度不断升高，离子浓度不断升高，CaCa离子与肌钙蛋白结合数量不断增加，离子与肌钙蛋白结合数量不断增加，甚至达到只结合而不解离的程度，于是，心肌将持续收缩，甚至达到只结合而不解离的程度，于是，心肌将持续收缩，出现钙僵。出现钙僵。蛙心灌流医学知识宣讲18 3.3.高高K K+，心跳明显减弱，甚至出现心脏停止于舒张状态，心跳明显减弱，甚至出现心脏停止于舒张状态的现象。的现象。一：细胞外一：细胞外K K浓度升
7、高时，浓度升高时，K K+与与CaCa2+2+有竞争性结抗作有竞争性结抗作用，用，K K+可以抑制细胞膜对可以抑制细胞膜对CaCa2+2+的转运，使进入细胞内的的转运，使进入细胞内的CaCa2+2+减少，心肌的兴奋收缩耦联过程减弱，心肌收缩力减少，心肌的兴奋收缩耦联过程减弱，心肌收缩力降低。降低。二：细胞外二：细胞外K K+浓度升高时，膜内外的浓度升高时，膜内外的K K+浓度梯度减小，浓度梯度减小，静息电位的绝对值减小，当轻微的高静息电位的绝对值减小，当轻微的高K K+时，细胞的静息电时，细胞的静息电位抬高，使得容易达到阈电位，兴奋性提高。但当细胞外位抬高，使得容易达到阈电位，兴奋性提高。但当
8、细胞外K K+浓度显著升高时，静息电位的绝对值过渡减小，浓度显著升高时，静息电位的绝对值过渡减小，NaNa+离子离子通道失活，心肌的兴奋性完全丧失，心肌兴奋性完全丧失，通道失活，心肌的兴奋性完全丧失，心肌兴奋性完全丧失，心肌不能兴奋和收缩，停止于舒张状态。心肌不能兴奋和收缩，停止于舒张状态。蛙心灌流医学知识宣讲191%KCl1%KCl高高K K离离子子K+K+与与Ca2+Ca2+拮抗拮抗Ca2+Ca2+平台期缩短平台期缩短Na+Na+通道失活通道失活兴奋性丧失兴奋性丧失收缩力收缩力心肌停跳心肌停跳于舒张期于舒张期蛙心灌流医学知识宣讲204.4.灌流液中加入肾上腺后，曲线幅度明显加大，可见蛙心收
9、灌流液中加入肾上腺后，曲线幅度明显加大，可见蛙心收缩增强，基线下降，说明心脏舒张完全，从而提高心输出缩增强，基线下降，说明心脏舒张完全，从而提高心输出量。肾上腺具有正性变力，正性变时，正性变传导作用。量。肾上腺具有正性变力，正性变时，正性变传导作用。蛙心灌流医学知识宣讲21 机理为：肾上腺与心肌细胞上的机理为：肾上腺与心肌细胞上的受体相结合，受体相结合，激活腺甘酸环化酶，使胞内激活腺甘酸环化酶，使胞内cAMPcAMP浓度增加，通过下游浓度增加，通过下游的信号转导机制使得钙通道开放的概率增加，动作电的信号转导机制使得钙通道开放的概率增加，动作电位位2 2期期(平台期平台期)钙内流增加，心肌收缩能
10、力增强。钙内流增加，心肌收缩能力增强。另外，肾上腺还有促使肌钙蛋白与另外，肾上腺还有促使肌钙蛋白与CaCa2+2+的释放，提的释放，提高肌浆网膜对高肌浆网膜对CaCa2+2+的回收，使心肌舒张速度增快，舒张的回收，使心肌舒张速度增快，舒张完全完全,此处区别于单纯高钙的情况此处区别于单纯高钙的情况,因此不会发生钙僵因此不会发生钙僵.蛙心灌流医学知识宣讲22促肌钙蛋白对促肌钙蛋白对CaCa2+2+的释放的释放提高肌浆网膜摄取提高肌浆网膜摄取CaCa2+2+的速度的速度肾上腺素肾上腺素心肌细胞上的心肌细胞上的受体相结合受体相结合ATPATPcAMPcAMP心肌膜上心肌膜上CaCa通道开放概率增加通道
11、开放概率增加肌浆中肌浆中CaCa2+2+浓度升高浓度升高心肌收缩增强心肌收缩增强心肌舒张速度增快，舒张完全。心肌舒张速度增快，舒张完全。加强加强4 4期的内向电流，使自动去极化速率加快，期的内向电流，使自动去极化速率加快，窦房结自律性频率变高，心率加快窦房结自律性频率变高，心率加快慢反应细胞慢反应细胞0 0期动期动作电位的上升幅作电位的上升幅度增大，去极化度增大，去极化加快，房室传导加快，房室传导时间缩短时间缩短蛙心灌流医学知识宣讲235 5灌流液中加入乙酰胆碱后，蛙心收缩幅度减弱，收缩灌流液中加入乙酰胆碱后，蛙心收缩幅度减弱，收缩曲线基线下移，心率减慢。乙酰胆碱与心肌细胞膜曲线基线下移，心率
12、减慢。乙酰胆碱与心肌细胞膜M M受受体结合，抑制腺甘酸环化酶，胞内体结合，抑制腺甘酸环化酶，胞内cAMPcAMP浓度降低，钙浓度降低，钙离子内流减少，心肌收缩力减弱。离子内流减少，心肌收缩力减弱。蛙心灌流医学知识宣讲24乙酰胆碱乙酰胆碱心肌细胞膜上心肌细胞膜上M M型受体结合型受体结合ATPATP抑制抑制腺甘酸环化酶腺甘酸环化酶cAMPcAMP心肌膜上心肌膜上CaCa通道开放概率降低通道开放概率降低肌浆中肌浆中CaCa2+2+浓度降低浓度降低心肌收缩减弱心肌收缩减弱慢反应细胞慢反应细胞0 0期动期动作电位的上升幅作电位的上升幅度减少，上升速度减少，上升速率减慢，房室传率减慢，房室传导速率减慢导
13、速率减慢激活细胞膜上的一种激活细胞膜上的一种K+K+通道，通道，促进胞内促进胞内K+K+外流外流，最大复极电最大复极电位更负，使得窦房结自律性频位更负，使得窦房结自律性频率降低，心率减慢。并且抑制率降低，心率减慢。并且抑制4期的内向电流也导致心率减期的内向电流也导致心率减慢。慢。蛙心灌流医学知识宣讲25 为何常用离体蛙心，而不常用离体哺乳为何常用离体蛙心，而不常用离体哺乳动物的心脏做心脏灌流实验？动物的心脏做心脏灌流实验？实验过程中，为什么必须保持蛙心插管实验过程中，为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定？内液面高度的恒定？蛙心灌流实验过程中，为什么不能改变蛙心灌流实验过程中，为什么不能改变蛙心与换能器连线的张力？蛙心与换能器连线的张力？蛙心灌流医学知识宣讲26
