1、实验室生物安全 实验室生物安全水平 生物安全保障与生物恐怖 生物安全技术 暴露的处理 感染性废弃物的处理 感染性物质的运输 实验室生物安全水平 实验室生物安全（laboratory biosafety）:描述防止实验室发生病原体或毒素意外暴露及释放的防护原则、技术以及实践。危险度评估生物安全基本设备实验室生物安全水平 危险度等级危险度1 级：无或极低危险，对人或动物常不致病。危险度2 级：个体危险中等，群体危险低。对人或动物 致病，传播有限，预防和治疗措施有效。危险度3 级：个体危险高，群体危险低。常致人或动物 严重疾病，不传播，预防和治疗措施有效危险度4 级：个体和群体危险均高。常致人或动物
2、严重 疾病，易传播，缺乏有效防治措施。微生物的危险度评估内容 危险度等级 微生物的稳定性、致病性和感染数量 暴露的潜在后果 自然感染途径 实验室感染途径、所操作微生物的浓度和标本量、拟进行的实验室操作、基因技术 适宜宿主 动物研究和实验室或临床报告信息 当地具备的有效的预防或治疗措施生物安全基本设备 生物安全柜 个人防护设备：防护服、面部防护、手套、鞋、呼吸道防护。注意：离开实验区域时应脱卸个人防护装备并洗手；脱手套、结束生物安全柜工作后，或离开实验室之前均应洗手。生物安全柜Biological safety cabinets，BSCs 生物安全柜分三级 级：设计简单，目前仍广泛使用 保护操作
3、者和环境，不保护操作对象 级：保护操作者和操作对象 操作危险度2 级和3 级微生物 穿正压防护服可处理危险度4 级微生物 级：对操作者防护最好 操作危险度4 级微生物 适用于三级和四级生物安全水平实验室生物安全柜使用 处理感染性物质 处理潜在空气传播的物质 密封离心杯的装样、取样 可能产生气溶胶的操作 微生物实验室生物安全水平及防护BSL：生物安全水平 BSC:生物安全柜 GMT:微生物学操作技术规范生物安全水平生物安全水平实验室类型实验室类型危险度危险度等级等级实验室操作实验室操作安全设施安全设施基础教学、研究1 级GMT不需要诊断、研究实验室2 级GMT、生物危害标志BSC个人防护装备特殊
4、的诊断、研究3 级BSL2增加特殊防护服、进入制度、定向气流BSC 和或所有实验室工作需要的基本设备危险病原体研究4 级BSL3增加气锁入口、出口淋浴、污染物品的特殊处理BSC 级或级，穿正压服、双开门高压灭菌器、经过滤的空气常规防护用品防护服、口罩、眼镜、手套、帽子和鞋套如何穿防护服如何脱防护服生物安全技术 感染性或潜在感染性物质的操作：标本运送、感染性或潜在感染性物质操作、感染性物质冻干管、血清分离、朊蛋白。常用设备的使用：接种环、移液管、离心机、生物安全柜等。血液和其他体液的标准预防措施。血液和其他体液标准预防措施 标本置密闭、防穿刺、防渗漏容器。戴手套、面罩和眼罩处理标本。操作完成脱手
5、套并洗手。在安全柜内处理已知或未知感染性标本或微生物。禁止用嘴吸取移液。使用针头和注射器时遵循标准预防指南。工作结束后被污染的工作台用合适的消毒剂消毒。污染的、重复使用的物品先消毒，再清洗。被污染的设备在维修、送往厂家或报废之前消毒。离开实验室前脱防护服、洗手。常用消毒剂常用消毒剂适用于物品、物体表面、分泌物、排泄物等消毒 擦拭法：大件物品或其他不能用浸泡消毒的物品用擦拭消毒，消毒所用浓度和作用时间同浸泡法。含含氯氯消消毒毒剂剂浸泡法：将待消毒的物品浸没于装有含氯消毒剂溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染的物品的消毒，用含有效氯500mg/L的消毒液浸泡10min，对经血传播病原体、分支杆菌和
6、细菌芽孢污染物品的消毒，用含有效氯2000-5000mg/L，浸泡30min。喷洒法干粉消毒法使用时限使用时限24h24h含氯消毒剂的配制含氯消毒剂的配制含氯消毒剂的配制含氯消毒剂的配制含氯消毒剂的配制含氯消毒剂的配制含氯消毒剂的配制含氯消毒剂的配制暴露的处理 职业暴露是指实验室、医护、预防保健人员以及有关的监管工作人员，在从事艾滋病防治工作及相关工作的过程中意外被艾滋病毒感染者或艾滋病患者的血液、体液污染了破损的皮肤或非胃肠道粘膜，或被含有艾滋病病毒的血液、体液污染了的针头及其它锐器刺破皮肤，而具有被艾滋病病毒感染的可能性的情况。美国CDC的研究显示：影响针头刺伤后的危险性因素包括 伤口的深
7、度有可见的血液从伤口溢出针头刺破了静脉或动脉污染源来自于晚期艾滋病病毒感染者(病毒载量高)紧急处理措施皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤出的血液，用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序。事故登记事故登记事故发生的时间、地点及详细经过。暴露方
8、式；受伤部位、伤口深浅、暴露程度；污染物种类（培养液、血液或其它体液）以及其中含有HIV的情况。处理方法和经过，包括专家或领导赴现场指导和处理的情况。是否采用暴露后药物预防，如果是，应详细记录用药情况，包括首次用药时间、服药方案和毒副作用。随访检测的日期、项目和结果。报告和检测发生重大事故时，在紧急处理的同时要立即向主管领导和专家报告。同时抽血检测HIV抗体，暴露一年内要定期检测。发生小型事故时可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法报告主管领导和专家，检测同前。对感染可能性很大的医护、检验人员可使用预防性治疗药物，治疗方案须根据暴露情况由专家决定。对于感染危险性很小的，建议不使用药物预防。对可
9、能有危险的人，是否用药治疗，应权衡较低的感染危险性与使用药物的效力和药物毒、副反应以及坚持用药的依从性等利弊。HIVHIV职业暴露后的预防职业暴露后的预防艾滋病病毒职业暴露的应急处理 （一）局部应急处理措施：（1）立即用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗黏膜。（2）如有伤口，应在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗。禁止进行伤口的局部挤压。（3）受伤部位的伤口冲洗后，用消毒液如 75%乙醇或 0.5%碘伏进行消毒，并包扎伤口。（4）衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。（5）污染物的泼溅：发生小范围的泼溅事故时，应立即进行消毒处理。发生大范围泼溅
10、事故时，应立即通知实验室领导和安全负责人到达现场，查清情况，确定消毒范围和程序。（二）发生艾滋病病毒职业暴露后的处理：l、院感科和检验科对暴露的级别和暴露源的病毒载量水平进行评估和确定。2、实施预防性用药。（1）用药时间 预防性用药应当在发生艾滋病病毒职业暴露后尽早开始，最好在4小时内实施，最迟不得超过24小时;超过24小时的，也应当实施预防性用药。（2）用药原则 发生一级暴露且暴露源病毒载量水平为轻度时，可以不使用预防性用药;发生一级暴露但暴露源病毒载量水平为重度或者发生二级暴露但暴露源病毒载量水平为轻度时，使用基本用药程序。发生二级暴露且暴露源病毒载量水平为重度，发生三级暴露且暴露源病毒载
11、量水平为轻度或重度时，使用强化用药程序。暴露源病毒载量水平不明时，可使用基本用药程序。（3）用药方案 预防性用药方案分为基本用药程序和强化用药程序。基本用药程序：两种逆转录酶抑制剂，使用常规治疗剂量，连续服用28天。如双汰芝(AZT与3TC联合制剂)300mg/次，每日2次，连续服用28天或参考抗病毒治疗指导方案。强化用药程序：强化用药程序是在基本用药程序的基础上，同时增加一种蛋白酶抑制剂，如佳息患或利托那韦，均使用常规治疗剂量，连续服用28天。3、暴露者应分别在暴露后即刻、6周、12周、6个月、12个月对HIV抗体进行检测，并对服用药物的毒性进行监控和处理，发现异常情况尽快报告预防保健科。4
12、、暴露者应如实填写“艾滋病职业暴露人员个案登记表”，完成后资料交预防保健科存稿。（二）乙型肝炎病毒职业暴露应急预案（二）乙型肝炎病毒职业暴露应急预案 l、已知暴露者HbsAg阳性或抗HBs阳性，则可不予特殊处理，如抗HBs滴度低(10IUmI)，需加强乙肝疫苗1次(5ug)。2、已知暴露者HbsAg和抗HBs均阴性，尽快给暴露者肌肉注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)200U和乙肝疫苗，乙肝疫苗接种期间按第01212月执行，并分别在暴露后即刻、4周、8周、12周检测乙肝两对半，发现异常情况尽快报告预防保健科。3、不明确暴露者HbsAg阳性或抗HBs是否阳性，立即抽血检验核心HbsAg和抗原HBs，并
13、尽快给暴露者肌肉注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)200U，并根据检验结果参照上述原则进行下一步处理。（三）梅毒职业暴露应急预案（三）梅毒职业暴露应急预案 病人梅毒病毒阳性者，给予职业暴露的医务人员抗生素预防治疗，推荐长效青霉素240万单位，每周一次，每侧臀部注射120万单位/次，连续注射两周。对青霉素过敏者可选用红霉素等。停药后1个月、3个月进行梅毒抗体检测。（四）丙型肝炎病毒职业暴露应急预案（四）丙型肝炎病毒职业暴露应急预案 含有丙肝病毒的血液、体液的针头或玻璃刺伤皮肤时，立即在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤部位的血液禁止进行伤口的局部挤压然后用流动的水或生理盐水彻底冲洗，再用0.5%碘伏、
14、75%酒精等消毒创面，24小时内抽血检查丙肝抗体。对丙肝抗体阳性者，立即予干扰素行早期治疗。感染性废弃物的处理 感染性废弃物：指丢弃的感染性或潜在感染性物品。处理原则：在实验室内清除污染后丢弃；或经适当包裹运送到其他地方处理。应对参与丢弃者不造成潜在危害。清除污染的方法：高压蒸汽灭菌器（首选）、焚烧等。感染性物质的运输遵循国内外相关规定。通常为三层包装 内层容器：装载标本。应密闭，防水、防渗漏，贴指示内容物的标签 第二层包装：吸水性材料，当内层容器泄漏时，吸收溢出的液体 第三层包装：保护第二层包装免受物理性损坏 高度危险性物质的运输要求严格，需查阅相关规定消毒灭菌 概念 消毒灭菌技术 消毒灭菌
15、效果评估消毒与灭菌 消毒（disinfection）：去除或杀灭大多数微生物的过程。灭菌（sterilization）：通过物理或化学方法杀灭或去除所有微生物的过程。医疗器械分类根据传播病原体、发生感染的危险性，分三类 高度危险类：进入正常无菌部位的物品 必需灭菌必需灭菌 中度危险类：接触黏膜、不完整皮肤的物品 高水平消毒 低度危险类：接触完整皮肤的物品 低效消毒剂消毒 消毒与灭菌技术及效果评估消毒灭菌技术 热力灭菌 包括湿热灭菌、干热灭菌 优点：方便、经济、有效，效果监测标准化 化学（液体或气体）用于处理热敏感物品 化学灭菌：过氧乙酸、环氧乙烷、福尔马林 化学消毒剂：分为高效、中效、低效 辐
16、射：辐射、紫外线 过滤技术效果评估：监测消毒灭菌过程优于自消毒灭菌物品 化学消毒剂种类根据消毒效果分为高效、中效、低效三类高效：杀灭芽胞、分枝杆菌、病毒、真菌、细菌 常见-过氧乙酸、次氯酸钠、戊二醛等中效：杀灭分枝杆菌、病毒、真菌、细菌 常见-酚类衍生物、乙醇和异丙醇低效：杀灭细菌 常见-季铵类化学消毒剂消毒效果影响因素 消毒剂的成分 浓度 接触时间 温度 PH值 有机物含量 钙或镁含量医院感染 医院感染病原体 常见的医院感染 医院感染流行病学 医院感染调查 概念 医院感染（Nosocomial Infection,NI）又称医疗机构相关感染（healthcare-associated inf
17、ection,HAI），指在医院中获得的感染。包括外源性和内源性感染。外源性感染：来自另一感染者或环境 内源性感染：来自患者自身。正常菌群迁徙至机体其他部位，或受损组织、抗菌药物不合理使用导致病原体过度生长 入院时处于潜伏期的感染，不属于医院感染。社区获得性感染可能经患者带入医院，感染患者及医务人员，导致医院感染。医院感染病原体几乎所有病原体都可以导致医院感染 细菌：多重耐药细菌分离率升高 病毒：病毒感染季节，儿科及老年病区易，发 生相应病毒的医院传播。真菌：免疫功能低下患者，或因侵入性操作感 染。常见白假丝酵母菌、曲霉菌属、新型隐球 菌、隐孢子虫属、放线菌、球孢子组织胞浆菌 其他：支原体、寄
18、生虫等。常见医院感染 泌尿道感染 呼吸道感染 外科伤口感染 血流感染 其他：烧伤、皮肤和软组织感染，眼和结膜感染、子宫内膜炎、产后生殖道感染，胃肠炎、肝炎等。医院感染流行病学 来源：人类、环境 传播途径：以空气、接触及媒介传播更重要 易感人群 年龄 免疫状况 基础疾病 其他感染 特殊药物 创伤 医院感染的预防 去除传染源 切断传播途径 增强宿主抗感染能力 医院感染调查临床微生物实验室在医院感染控制中的职责 制定标本采集、运送、处理规范。遵循标准化操作程序处理标本，预防实验室感染。监测消毒、灭菌效果，必要时进行环境监测。及时将具有流行病学意义的结果通知相关人员。必要时进行医院感染病原体的流行病学
19、分型。定期报告感染病原菌在不同解剖部位、病房的发生率及耐药谱。有效的感染控制依赖实验室准确检测病原菌的能力暴发调查的实验室诊断 分离病原体并证实暴发涉及的所有患者感染相同菌株，为调查传染源提供线索。分离菌尽可能鉴定到种，不常见或难鉴定的菌株应送有能力的实验室。病原体分型小结生物安全防护应具备：1、必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品，如个人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩。2、所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。3、应制定规定和程序确保实验室设施、设备、个人防护设备、材料等符合国家有关安全要求，定期检查、维护、更新、确保不降低其设计性能。4、实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区，非实验有关人员和物品不得进入实验室5、接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手6、禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及存储食物。7、每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒8、所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活（如高压）。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭容器内。9、用过的针头禁止禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止禁止用手直接从注射器取下。v用过的针头必须必须直接放入防穿透的容器中。
