1、农药残留前处理-提取农药残留农药残留农药残留检测农药残留检测一、主要提取技术分类一、超临界萃取技术一、超临界萃取技术 二、微波萃取技术二、微波萃取技术 三、超声波辅助萃取三、超声波辅助萃取四、衍生化技术四、衍生化技术 五五、生物大分子的细胞破碎与蛋白质的去除、生物大分子的细胞破碎与蛋白质的去除COCO2 2超临界萃取（超临界萃取（Supercritical Supercritical Fluid Extraction,SFEFluid Extraction,SFE）是一种物理）是一种物理分离和纯化的方法，利用分离和纯化的方法，利用压力和温度压力和温度对对COCO2 2超临界流体溶解能力的影响而
2、进超临界流体溶解能力的影响而进行的，其萃取过程由萃取和分离过程行的，其萃取过程由萃取和分离过程组合而成。在超临界状态下，将组合而成。在超临界状态下，将COCO2 2与与待分离的物质接触，使其按照沸点高待分离的物质接触，使其按照沸点高低、极性大小、和分子量大小将成分低、极性大小、和分子量大小将成分依次萃取出来。依次萃取出来。二、超临界萃取技术二、超临界萃取技术三相点：任何一种物质都存在三种相态-气相、液相、固相。三相呈平衡态共存的点叫三相点。临界点：液、气两相呈平衡状态的点。临界温度：在临界点时的温度。临界压力：在临界点时的压力。二、超临界萃取技术 物体处于其临界温度和临界压力以上时的状态。气体
3、：粘稠度、表面张力低，溶解能力强，萃取功能高。压力，溶解能力。液体：体积小。二、超临界萃取技术流体名称流体名称分子式分子式临界压力临界压力(bar)(bar)临界温度临界温度()()临界密度临界密度(g/cm(g/cm3 3)二氧化碳二氧化碳COCO2 272.972.931.231.20.4330.433水水H H2 2O O217.6217.6374.2374.20.3320.332氨氨NHNH3 3112.5112.5132.4132.40.2350.235乙烷乙烷C C2 2H H6 648.148.132.232.20.2030.203氧化二氮氧化二氮N N2 2O O71.771.
4、736.536.50.4500.450二、超临界萃取技术可在接近室温可在接近室温(35(3540)40)下提取下提取,不会影响萃取物中有效成分不会影响萃取物中有效成分功能功能 ；绿色清洁的提取方法绿色清洁的提取方法:由于全程不用任何有机溶剂由于全程不用任何有机溶剂 ,防止了对人防止了对人体有害的化学残留以及加工过程对环境的污染体有害的化学残留以及加工过程对环境的污染；CO CO2 2是一种惰性的气体，是一种惰性的气体，在萃取过程中不会发生化学反应同时在萃取过程中不会发生化学反应同时COCO2 2是不可燃气体，无味、无臭、无毒、安全性非常好；是不可燃气体，无味、无臭、无毒、安全性非常好；循环使用
5、，降低成本；循环使用，降低成本；参数（压力、温度）可以调节。参数（压力、温度）可以调节。二、超临界萃取技术三、微波萃取三、微波萃取三、微波萃取频率：300300 000MHz的电磁波。穿透：玻璃、塑料、陶瓷等绝缘体。当微波作用于水和酸性物质时，将被极性分子所吸收，因而物质很快被加热。三、微波萃取三、微波萃取 吸收微波细胞内部温度，细胞内部压力超过细胞壁膨胀承受能力细胞破裂有效成分自由流出在较低的温度条件下萃取介质捕获并溶解。通过进一步过滤和分离，便获得萃取物质。微波萃取操作过程中，影响萃取效果的因素很多，包括萃取剂、物料的含水量、微波剂量、温度、时间、操作压力及溶剂pH值等。物料的含水量：水是
6、介电常数较大的物质，可以有效物料的含水量：水是介电常数较大的物质，可以有效吸收微波能转化为热能，所以物料含水量的多少对萃取率吸收微波能转化为热能，所以物料含水量的多少对萃取率的影响很大；含水量多少对萃取时间也有很大影响。的影响很大；含水量多少对萃取时间也有很大影响。三、微波萃取是利用超声波辐射压强产生的强烈空化效应、是利用超声波辐射压强产生的强烈空化效应、机械振动、扰动效应、高的加速度、乳化、机械振动、扰动效应、高的加速度、乳化、扩散、击碎和搅拌作用等多级效应，增大物扩散、击碎和搅拌作用等多级效应，增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透了，质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透了，从而加速目标成
7、分进入溶剂促进提取的进行。从而加速目标成分进入溶剂促进提取的进行。原理价廉快速，简便安全，批量处理样品。优点四、超声波辅助萃取 原理原理？Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click h
8、ere to add your text.Click here to add your text.在色谱分析过程中，有的样品不能或难以直接分离和在色谱分析过程中，有的样品不能或难以直接分离和检测，如液相色谱仪的检测器是紫外检测，如液相色谱仪的检测器是紫外-可见检测器，而可见检测器，而样品的待测组分在紫外样品的待测组分在紫外-可见区没有吸收，或者吸收很可见区没有吸收，或者吸收很弱，这是应采用衍生化技术。就是在色谱分析过程中弱，这是应采用衍生化技术。就是在色谱分析过程中使用具有特殊官能团的化学试剂，与待测样品进行化使用具有特殊官能团的化学试剂，与待测样品进行化学反应，将特殊的官能团引入到样品中，使
9、样品转变学反应，将特殊的官能团引入到样品中，使样品转变成相应的衍生物，然后进行分离和检测。成相应的衍生物，然后进行分离和检测。五、衍生化技术目的理化稳定性改善色谱分离：挥发性、降低与色谱材料的相互作用灵敏度与选择性123五、衍生化技术柱柱前前衍生化：为了分离衍生化：为了分离柱柱后后衍生化：为了检测衍生化：为了检测五、衍生化技术（1）硅烷化衍生化方法（2）酯化衍生化方法（3）卤化衍生化方法（4）酚化衍生化方法方法方法五、衍生化技术1.紫外衍生化反应2荧光衍生化反应 3电化学衍生化反应五、衍生化技术（一）生物样品（一）生物样品植物：植物：营养成分、农药残留等动物：动物：体内的药物及代谢产物、糖类、
10、维生素、氨基酸等微生物：微生物：五、衍生化技术体液或细胞外：体液或细胞外：采用萃取方法。也可将干扰组分（如蛋白质、DNA、多糖等等）沉淀除去。生物细胞内：生物细胞内：首先将细胞破碎，再采用萃取或沉淀等方法。五、衍生化技术（二）细胞的破碎（二）细胞的破碎目的：目的：就是为了破坏细胞的外壳，使细胞内含物有效地释放出来，获得有效的提取。五、衍生化技术1 1、细胞的破碎方法、细胞的破碎方法 组织较柔软：匀浆器研磨 组织较韧：铰碎匀浆 纤维组织：捣碎器破碎或加砂研磨 微生物坚韧的细胞壁：用自溶、冷热交 替、加砂研磨、超声波和加压处理。五、衍生化技术五、衍生化技术2 2、机械法（机械切力）、机械法（机械切
11、力）高速组织捣碎机：20000rmin。对象：动植物组织 匀浆器：铰碎组织。对生物大分子破坏较少。研磨：玻璃砂。五、衍生化技术3 3、物理法（物理作用）、物理法（物理作用）反复冻融法：-15 -20。冷热交替法：90维持数分钟，立即置于冰浴中冷却。超声波处理法：用于微生物。加压破碎法：加气压或水压，可使90以上细胞被压碎。五、衍生化技术4 4、化学及生物化学法（化学试剂或酶）、化学及生物化学法（化学试剂或酶）自溶法：在一定条件（pH、温度），利用自身的酶系将细胞破坏。溶菌酶处理：具有专一地破坏细菌细胞壁的功能。五、衍生化技术例：溶菌酶处理例：溶菌酶处理（三）蛋白质的去除（三）蛋白质的去除目的：
12、目的：蛋白质的存在，常常严重干扰分析。1、加热法 2、盐析法3、膜分离法 4、高速离心5、有机溶剂沉淀法五、衍生化技术1 1、加热法加热法u欲测组分热稳定性好时采用。加热到90。u蛋白沉淀后可用离心或过滤除去，能除去热变性蛋白。五、衍生化技术2 2、盐析法、盐析法 原理：利用不同蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同程度的降低来沉淀除去蛋白质。在低盐浓度下，蛋白质溶解度随着盐浓度升高而增加，称为盐溶作用。当盐浓度不断升高时，不同蛋白质的溶解度又以不同程度下降，并先后析出沉淀，称为盐析作用。五、衍生化技术3 3、膜分离法、膜分离法超滤：靠薄膜两侧压力差作为推动力来分离不同分子量的物质。将欲测小分子化合物和大分子蛋白质分离。五、衍生化技术4 4、高速离心、高速离心 物质沉降系数、质量、浮力因子等不同，用离心力使物质分离、浓缩、提纯的方法。小小中中大大五、衍生化技术
