1、微生物检验实验室质量技术和安全要求2017.62017.6 主要内容 微生物检验质量技术要求 微生物检验生物安全要求1 12 2 微生物检验质量技术要求4 病原微生物检验实验室病原微生物检验实验室 卫生微生物检验实验室卫生微生物检验实验室微生物检验实验室特点传染病检测与监测传染病检测与监测卫生细菌学检测卫生细菌学检测医院消毒监测医院消毒监测消毒产品检测消毒产品检测微生物检测实验室常用技术手段：微生物检测实验室常用技术手段：微生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学 微生物微生物检验实验室专业特点：检验实验室专业特点：检测对象复杂 通过指标菌检验评价卫生质量 无菌观念贯穿检验全过程 微生物检验人机
2、料环法专业背景要求专业背景要求:微生物检验相关专业背景，如预防医学、卫生检验、生物学、微生物学、传染病学、分子生物学培训和评估：培训和评估：岗前培训、持续培训、考试提问、能力考核能力确认与授权能力确认与授权教育程度、专业背景、接受的培训、工作技能、工作经验v评估总的工作表现评估总的工作表现技术能力完成工作效率履行政策遵守安全规则沟通技巧客户服务人员仪器设备样品采集和处理设备样品采集和处理设备称量与移液设备称量与移液设备 形态学观察设备形态学观察设备生物学检验设备生物学检验设备 匀浆器稀释器显微镜仪器设备 清洗消毒灭菌设备清洗消毒灭菌设备恒温培养设备恒温培养设备生化分析仪器生化分析仪器灭菌器培养
3、箱手提式卧式立式鉴定仪仪器设备 基因检测仪器基因检测仪器 分子检测仪器分子检测仪器消毒与灭菌 培养基培养基试剂试剂材料材料废物废物消毒消毒(Disinfection）：杀灭病原微生物的方法灭菌（灭菌（Sterilization）：杀灭物体上所有的微生物（包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞）的方法10灭菌指示物 化学指示物化学指示物 (chemical indicator/non-biological indicator)基于暴露于某一灭菌过程而导致的物理或化学变化所引起的一个或多个预定过程变量的变化系统。干热灭菌指示胶带 环氧乙烷灭菌指示胶带 射线灭菌指示标签 生物指示物生物指示物 (biol
4、ogical indicator)含有活微生物，对特定灭菌过程提供特定的抗力的测试系统灭菌指示物化学指示物化学指示物 仅指示灭菌温度不涉及灭菌时间和压力生物学指示物生物学指示物指示灭菌需要的温度、时间和压力注意：注意：指示物在以下情况下不保证灭菌的效果：-高压锅内东西放的过多；-培养液体积过大；灭菌后的生物验证试验十分重要仪器设备管理u建档管理：一机一档建档管理：一机一档u标识管理：标识管理：l 唯一性标识 l 性能状态标识u检定与校准管理：检定与校准管理：u操作维护规程操作维护规程l 操作技能培训与考核授权l 使用与维护保养l 期间核查v 监控温度监控温度 培养箱 冰箱 冷冻柜 v 进行功能
5、检测进行功能检测 移液器 高压锅 酸度计v 保存记录保存记录微生物检验材料试剂试剂 染色液 诊断血清 商业化试剂盒培养基培养基 运输培养基、增菌培养基、分离培养基 鉴别培养基标准物质标准物质/标准菌株标准菌株 大肠杆菌(ATCC#25922 金黄色葡萄球菌(ATCC#25923）实验用水实验用水过期培养基已失水培养基污染的培养基培养基相关标准 YYT 0557-2005YYT 0557-2005 营养琼脂培养基 YYT 0578-2005 YYT 0578-2005 沙门、志贺菌属琼脂培养基 SNT 1538.1-2005 SNT 1538.1-2005 培养基制定指南 第一部分：实验室培养基
6、制备质量保证通则 SNT 1538.1-2007 SNT 1538.1-2007 培养基制定指南第2部分:培养基性能测试实用指南 检测所有培养基的性能检测所有培养基的性能l 自行配制：所有批次自行配制：所有批次l 商业制备：只检测新批号商业制备：只检测新批号微生物培养基微生物污染微生物污染生长特性生长特性n生长率生长率 n选择性选择性 生理生化特性生理生化特性n选择性和特异性选择性和特异性外观、色泽和均一性外观、色泽和均一性琼脂凝胶的硬度琼脂凝胶的硬度水份含量水份含量pH pH 缓冲能力缓冲能力 对培养基进行质量控制的主要内容对培养基进行质量控制的主要内容16标准菌株/质控菌株v什么是质控菌株
7、？什么是质控菌株？在染液和培养基中有预期反应的已知菌株v菌株的来源？菌株的来源？ATCC 美国菌种保藏中心 NTCC 国际菌种保藏中心(英国)CIP 巴斯德保藏中心(法国）CMCC 中国医学菌种保藏中心v质控菌株如何使用？质控菌株如何使用？确保培养基，试剂和用品有预期的效能 设置阴性和阳性对照株 储备检测所有培养基和实验系统的质控菌株每批培养基及新的药敏片使用时同时做质控，标准菌株的抑菌环或MIC值在标准范围内根据抑菌环直径分析变化根据你的检测使用不同的标准株（ATCC,IP或其他）实验室质量控制种类 对检验人员的要求对检验人员的要求 操作规程操作规程 检测环境要检测环境要 设备设备/仪器要求
8、仪器要求 仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测 培养基的质量控制培养基的质量控制 试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控 检验过程的质量控制检验过程的质量控制 标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存 实验室安全防护实验室安全防护 v 室内质量控制室内质量控制 为组织内部向管理者提供信任提供保证 增强信心v 室间质量控制室间质量控制 向客户提供信任 增强实验室的信誉 对照试验对照试验 方法对照方法对照 人员对照人员对照 仪器对照仪器对照 留样复检留样复检 标准物质标准物质(或质控样或质控样)对比分析对比分析 不同方法比较分析不同方法比较分析 质量控制图质量控制图 Levey-Je
9、nnings Levey-Jennings质控图质控图 Westgard Westgard规则规则 平行双样分析平行双样分析 加标回收率实验加标回收率实验 室内互检室内互检 微生物检验质量控制方法微生物检验检验方法管理层面管理层面 国家标准 行业标准 地方标准 企业标准 检验方法使用原则检验方法使用原则优先选择国家强制性标准采用能最大限度满足检测目的并适用于本实验室的检测方法所用方法必须经过审批或确认检验方法的审批和确认受控管理非标方法制定检验方法变更样本 样本采集样本采集样本是进行一切实验室检测的基础样本是进行一切实验室检测的基础所有实验室检测的结果所有实验室检测的结果,都依赖于所得到样本的
10、质量都依赖于所得到样本的质量直接关系到实验室检测的准确性与效率直接关系到实验室检测的准确性与效率影响到处置事件的评估与策略制定影响到处置事件的评估与策略制定 疫情处理：疫情的判断与防控策略的制定 监测与普查：流行状况的评估 病例诊断：治疗方案制定、病人预后、疾病负担微生物检测采抽样技术v 微生物检测微生物检测 病原微生物样本：病原微生物样本：含有病原微生物的体液、组织、排泄物、污染物等物质 卫生微生物样本：卫生微生物样本：各类产品（如食品、化妆品、涉水产品）及环境样品 微生物检测采抽样基本原则微生物检测采抽样基本原则 无菌操作无菌操作：防止一切可能的外来（交叉）污染 生物安全防护：生物安全防护
11、：专业技术要求：专业技术要求：具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员 管理要求：管理要求：具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施，具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段 准确性：准确性：性质不同的样品应分开包装采样方法应符合要求采样数量应满足要求及时性：及时性：采样应及时，采样后应及时送检 代表性：代表性：保证检验时能完全反映原来的样本状态 真实性：真实性：使检测结果真实地反映食品本来的卫生状况食品样本采集水样本采集 应使用玻璃材质的采样容器，使用前应洗涤并灭菌应使用玻璃材质的采样容器，使用前应洗涤并灭菌 采样时不可搅动水底的沉积物样采样时不可搅动水底的沉积物样 同一水源同一水源/时间
12、采集几类检测指标水样时，应先采集微生物学指标检测水样时间采集几类检测指标水样时，应先采集微生物学指标检测水样采样时应直接采集，不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶，并避免对瓶口的污染采样时应直接采集，不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶，并避免对瓶口的污染 水体的采样一般要求用灭菌的水体的采样一般要求用灭菌的500ml500ml水样瓶采集相对静止的表层水（水样瓶采集相对静止的表层水（30cm30cm以以内）内）500ml500ml，加盖密封后在室温（，加盖密封后在室温（20-2520-25）下送实验室检测）下送实验室检测测试样品应填写采样记录或标签，编号、采样者、日期、时间及地点等测试样品应填写采样记录或标签
13、，编号、采样者、日期、时间及地点等水样采集后应立即送回实验室水样采集后应立即送回实验室血液样本采集 样本采集及应注意事项样本采集及应注意事项采血时期及次数发热初期或发热高峰用抗菌药物前，已用药而不能中止的病人，应在下次用药前采集，用药前24h内采集采集3-4次血液标本，检出率可达90%以上 一般不用抗凝剂一般不用抗凝剂 EDTA，枸橼酸钠等抗凝剂可能对细菌有抑制作用 肝素抗凝尚未见对细菌有影响。病人已用抗生素时病人已用抗生素时 -磺胺类药：100ml培养基加对氨基苯甲酸5mg -青霉素：100ml培养基加200u青霉抗生素：培养基中常加入硫酸镁培养基中常加入硫酸镁 中和链霉素、四环素、土霉素、
14、金霉素、新霉素及多粘 菌素等抗菌药物粪便标本采集 应尽量在病程早期和治疗前采集应尽量在病程早期和治疗前采集 疾病急性期致病菌往往占优势，以后数日即迅速减少 服用服用抗菌药物3d，标本中病原菌即转阴性 尽量采集新鲜粪便尽量采集新鲜粪便 若无法获得时，可用采便管或直肠拭子采集 采集时注意先取有脓血、粘液、上皮碎片等病理成分 固体标本采23g，液体标本采13ml 标本立即送检标本立即送检 拖延送检可致病原菌数目迅速减少或杂菌过度生长影响检出率 不能及时送检，标本置于保存液或运送培养基中送检病毒样本采集 流行性感冒病毒样本流行性感冒病毒样本采集时间：采集时间：发病后头3d，越早越好，发病后7d虽然还能
15、分离到病毒，但随时间延长，分离率大大地下降标本种类：标本种类：较好为鼻腔洗液，但病人不易接受，尤其是小孩，故常用咽喉拭子、鼻拭子或咽喉漱液疑似流感死亡的病例：疑似流感死亡的病例：取肺，气管粘膜和血。标本运送：标本运送：4冰壶，送到实验室，越快越好，如48h内未能接种，放低温（最好-70）保存。样本处理样本处理 鼻腔鼻腔/咽部洗液标本：咽部洗液标本：充分振荡，打碎粘液，4，510min，自然沉淀，取上清液3ml，加青霉素1000u/ml，链霉素1000g/ml，42h，接种。鼻咽拭子标本：鼻咽拭子标本：棉拭子在管壁反复挤压取出，加青、链霉素处理。器官组织标本：用灭菌的乳钵磨碎，生理盐水配成200
16、g/L悬液，离心沉淀，取3ml上清液加青、链霉素处理。细菌性食物中毒采样要求样品采集流程样品采集流程 样品采集与送检流程 无菌采样方法采集 及时做好样品标记，完整填写采样送检申请单 详细填明检样名称、来源、送检时间、中毒情况、患者主要临床症状、检验项目等 学校等集体单位至少采集新发病人或具有典型的临床症状、未经过抗生素治疗的样品（粪便或肛拭）10份 可疑食品应分别采集（剩余食品、留样食品、原配料、半成品）食品容器、用具和加工设备等环节采样510份 食堂或盒饭公司从事食品从业人员进行肛拭采样样品采集注意事项样品采集注意事项 采样用的试管、瓶子、盛器、剪/镊子、棉拭等均应无菌 采样用的生理盐水、卡
17、里运送培养基及有关试剂等都应该满足新鲜、无菌的要求，同时应符合所需试剂量，卡里运送培养基为5ml/5ml/管管为宜 肛拭、食品和环节等采样，其采样量须满足必须开展的检验项目的要求，食品采样应尽量多于25g25g（mlml）以上 采样的同时，应及时做好样品标记，完整填写采样单。立即将检样送检验室，并有交接手续 细菌性食物中毒采样要求各类样品采集方法v 可疑食物、水样：将残余食物或水样用灭菌镊子或匙采取后置于灭菌容可疑食物、水样：将残余食物或水样用灭菌镊子或匙采取后置于灭菌容器中。体积较大的鱼、肉应在表面消毒后取内部检样。罐头样品可直接器中。体积较大的鱼、肉应在表面消毒后取内部检样。罐头样品可直接
18、送检送检 v 环镜样品：炊事用具如锅、碗、刀、抹布、操作人员的手等用棉拭涂擦环镜样品：炊事用具如锅、碗、刀、抹布、操作人员的手等用棉拭涂擦采样，菜墩用刀刮取表面后将刮取物放入灭菌容器中采样，菜墩用刀刮取表面后将刮取物放入灭菌容器中v 肛拭子肛拭子:一般不适用于毒素测定及病毒腹泻检测一般不适用于毒素测定及病毒腹泻检测,仅适合于目标相对明确仅适合于目标相对明确的病原检索的病原检索v 必须医务人员负责采集！必须医务人员负责采集！拭子应插入肛门括约肌约拭子应插入肛门括约肌约3cm3cm 轻轻旋转拭子至少一周轻轻旋转拭子至少一周 拭子应看到有粪便标本黏附拭子应看到有粪便标本黏附各类样品采集方法v 粪便粪
19、便:5g:5g或或5-10ml5-10ml，新鲜送往实验室，新鲜送往实验室v 呕吐物：呕吐物：5g 5g或或5-10ml,5-10ml,直接放入无菌容器中及时送检直接放入无菌容器中及时送检 v 咽拭样品：采集时应将棉签檫拭咽喉及扁桃体红肿处（特别咽拭样品：采集时应将棉签檫拭咽喉及扁桃体红肿处（特别是白膜处），然后将棉签插入是白膜处），然后将棉签插入4-5ml4-5ml生理盐水中，尾部弃去生理盐水中，尾部弃去 v 血液：采集患者急性发病期（血液：采集患者急性发病期（3 3天内）和恢复期（天内）和恢复期（2 2周左右）周左右）各各3ml3ml全血分离血清送检全血分离血清送检 v 从业人员：从业人员
20、：根据食物中毒的情况要求，可采取售货员或制根据食物中毒的情况要求，可采取售货员或制作食品的工作人员及直接或间接接触食品的有关人员肛拭检作食品的工作人员及直接或间接接触食品的有关人员肛拭检样，特别对那些在事件发生前或现正患有肠炎、发烧、化脓样，特别对那些在事件发生前或现正患有肠炎、发烧、化脓性及可疑带菌者进行采样性及可疑带菌者进行采样样品送检v 标本采集后最好及时运送到实验室标本采集后最好及时运送到实验室,采取后立即由专人在采取后立即由专人在2 2小时内小时内送区县疾病预防控制中心或（和）市疾病预防控制送区县疾病预防控制中心或（和）市疾病预防控制中心实验室检验中心实验室检验v 若不能，应储存在合
21、适的一定环境条件若不能，应储存在合适的一定环境条件v 送检检样时，应附送采样送检申请单，并按要求注意送检检样时，应附送采样送检申请单，并按要求注意冷藏冷藏 v 运送过程运送过程防止泄漏和破碎防止泄漏和破碎v 感染性样本应注意安全防护感染性样本应注意安全防护标本记录（标识、包装）样本采集记录表样本采集记录表 样本唯一编号：样本唯一编号：编号反复，导致序号混乱，无法辨识 采样人信息：采样人信息：保证标本能够随时追溯到采样者，核实其他现场信息 额外信息记录：额外信息记录：现场发现额外重要信息，及时记录，特殊标记 采集记录表采集记录表:在采样前印刷备齐，现场及时填写，杜绝采样后补填 在采样结束后，立即
22、录入为电子版，原版表格封存备查采样日志：采样日志：标本采集表的汇总记录，一直记录到标本交接到实验室 v 样本交接样本交接v 填写交接表格，包括送样、接受的日期、时间、地点填写交接表格，包括送样、接受的日期、时间、地点 双方签字采样日志中标注交接信息双方签字采样日志中标注交接信息v 样本核对样本核对v 样本标记是否与采样记录单记录一一对应样本标记是否与采样记录单记录一一对应v 包装是否完整无泄漏包装是否完整无泄漏v 样本种类是否符合检测的要求样本种类是否符合检测的要求v 样本现场处理是否符合要求样本现场处理是否符合要求v 标本量是否足够标本量是否足够v 保存与运输条件是否正确等保存与运输条件是否
23、正确等标本交接与核对v 检测后继续保存原始样本，直到保存时限，用于备查、复核v 制定保存方案，填写保存记录-样本追踪系统的最后环节 保存方案：保存方式、温度、期限等 保存记录：标本唯一编号、入库日期、标本类型、保存条件、保存期限、保存地点、销毁日期、销毁理由等 同一批样本集中保存 通过保存记录建立样本查找索引（如：以接收日期或入库编号），能够迅速查找到标本v样本保存应有专人负责，交接中做好完整记录v 定期检查保存情况，保证标本完好样本保存采样前准备人员、场所、试剂耗材准备人员、场所、试剂耗材准备 与现场人员协调，安排妥当，避免混乱 采样对象做好准备，安排好采样场所 按照采样要求一一准备用品 例
24、：血液采集：各种不同的采血管 不同增菌液、保存液 低温运输设备 标本包装与标识 人员防护与消毒用品 避免过度防护现场采样注意问题v 严格按照指定采样要求进行v 携带适量物品进入现场，避免污染v 样本采集无菌要求v 严格无菌p血液、脑脊液、胸水、腹水、组织活检、尸检标本p尸检标本中，所有尸检操作者必须随时具备无菌意识 尤其打开胸、腹腔后，各个脏器的采集必须严格无菌操作v 粪便等标本采集时的无菌要求则相对较低v 需要避免不同标本之间的交叉污染样本检测程序记录 对所接受样本立刻建立样本处理程序，并进行文本记录 立即检测样本处理的程序 稍后检测样本的处理 实验检测需要等待预处理时间或暂时没有检测条件，
25、如：血浆/血清的存储和分离 需要特殊处理样本的程序 文本记录实际样本处理所采用的程序、检测进度、检测结果与样本用量、样本剩余量等不合格标本处理明确样本放弃准则：明确样本放弃准则：未标记的标本，最主要的没有检测价值的标本 提供的标本背景资料不清；标本标记与采样记录不符，并且无法追溯修正；采样后处理错误的标本（如：用于血清学检测的标本出现了严重溶血；血象检测标本未抗凝等）；标本量严重不足；保存与运输条件不当或严重超出时限；以及其他未达到本次采样实际要求的标本不合格样本处理 在采样日志上注明，写清楚不合格的原因，妥善处理 采集到的样品是非常珍贵的，尤其是疫情标本，不能够轻易拒绝或丢弃标本，仍需要与采
26、样人员明确说明后妥善保存 重大疫情采样如果出现不合格样本，应该及时向上级汇报 实验检测进行中发现的无法检测的样本 分析无法检测原因；判断排查是样本质量问题还是保存问题；（如：样本降解、严重污染等）保留相应的书面证据 对样本做出妥当处置决定或找到弥补措施 及时通知采样者或被检测者标本无法检测，并说明理由 可能的情况下再次采集标本样本保存检测后继续保存原始样本，直到达到保存时限，用于备查、复核制定保存方案，填写保存记录，样本追踪系统的最后环节保存方案：保存方式、温度、期限等保存记录：标本唯一编号、入库日期、标本类型、保存条件、保存期限、保存地点、销毁日期、销毁理由等同一批样本集中保存通过保存记录建
27、立样本查找索引（如：以接收日期或入库编号）能够迅速查找到标本样本保存应有专人负责，交接中做好完整记录定期检查保存情况，保证标本完好 微生物检验生物安全要求几个概念 生物安全生物安全 (biosafety)：避免或控制生物因子特别是意外的和有意的利用生物因子对人员的暴露和伤害的意识、措施、技术。生物安全实验室生物安全实验室 ：具有一定的生物安全防护水平的实验室。生物安全实验室生物安全实验室（BSLBSL)动物生物安全实验室动物生物安全实验室（ABSLABSL）实验室感染感染直接原因感染直接原因溢出和溢出和泼洒泼洒微生物气溶胶微生物气溶胶 针头和注射器针头和注射器锐器、碎玻璃锐器、碎玻璃动物的咬伤
28、或抓动物的咬伤或抓离心机事故离心机事故 产生微生物气溶胶的操作产生微生物气溶胶的操作接种环操作吸管操作针头和注射器操作培养和划线培养 混合微生物悬液、使用搅拌机、混合器、超声波仪和混合用的仪器 打开培养容器，感染性材料的溢出 真空 冻干和过滤 接种鸡胚和培养物的收取 v 硬件硬件:实验室设计建造 实验设备的配置 个人防护装备v 软件软件:标准化的操作程序 管理规程v 确保确保:工作人员 周围环境 实验因子微生物检验实验室安全管理要求 关于飞行安全的“海恩法则海恩法则”一起重大的飞行安全事故背后有2929个个事故征兆 每个征兆背后有 300300个个事故苗头 每个苗头背后还有10001000个个
29、事故隐患 几乎所有的灾难都是多个漏洞的叠加。只要认真落实已有的规则、规定，很多事故完全可以避免生物安全实验室v 一级屏障一级屏障:是操作者和被操作对象之间的隔离，也称一级隔离是操作者和被操作对象之间的隔离，也称一级隔离 如生物安全柜如生物安全柜：分3级-I、II、III级 个体防护装备个体防护装备：口罩、面具、眼镜，防护衣、帽、裤、鞋、靴、袜、手套、正压服等个个人人防防护护装装备备生物安全实验室二级屏障二级屏障:生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离 v实验室的设施结构v通风空调系统 v给水排水v电气和控制系统二级隔离的防护能力取决于二级隔离的
30、防护能力取决于实验室分区实验室分区和和定向气流定向气流 一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三个区个区 三项技术措施三项技术措施 样品隔离技术（机械、气幕样品隔离技术（机械、气幕）防止传染因子进入环境接触人体 定向流技术（三级负压系统）定向流技术（三级负压系统）防止传染因子扩散 消毒灭菌技术（物理、化学）消毒灭菌技术（物理、化学）灭活传染因子实验室生物安全生物安全柜与超净台生物安全柜与超净台 生物安全柜：提供了对样品、人、环境的保护生物安全柜：提供了对样品、人、环境的保护 超净台：仅提供对样品的保护超净台：仅提供对样
31、品的保护 洁净实验室与生物安全实验室洁净实验室与生物安全实验室 洁净实验室不能代替生物安全实验室洁净实验室不能代替生物安全实验室生物安全实验室不允许正压生物安全实验室不允许正压洁净实验室仅提供了对样品的保护洁净实验室仅提供了对样品的保护 生物安全实验室有洁净度的要求，但要求不高生物安全实验室有洁净度的要求，但要求不高v 法规法规 国务院病原微生物实验室生物安全管理条例 国务院424号令：2004年11月12日公布及实施l我国第一个具有法律效应的病原微生物生物安全的法规v 技术标准技术标准 国家标准实验室 生物安全通用要求 （GB19489-2008）生物安全实验室建筑技术规范 （GB50346
32、-2011）微生物和生物医学实验室生物安全通用准则（WS 233-2002）该标准参考美国CDC/NIH微生物和生物医学实验室生物安全手册1999年第四版制定 医学实验室安全要求ISO 15190：2003（E）医学实验室质量和能力的具体要求 (认可准则CNAL AC232004）ISO15189 我国生物安全相关法律法规微生物危害等级(国务院条例)病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例 分级依据分级依据 病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度 将病原微生物分为四类将病原微生物分为四类一类一类 是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现
33、或者已经宣布消灭的微生物二类二类 是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物 三类三类 是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物四类四类 是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物v 第一类、第二类第一类、第二类病原微生物统称为病原微生物统称为高致病性病原微生物高致病性病原微生物 各种病原微生物的危害等级分类参见各种病原微生物的危害等级分类参见卫生部人间传染的病原微生物名录（卫生部人间传染的病原微生物名录（2006.01
34、2006.01）微生物危害等级(GB 19489)GB 19489-2008GB 19489-2008实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求 （20042004年年1010月月1 1日实施）日实施）v 分级依据分级依据 微生物的致病性；传播方式和宿主范围；具有的有效预防措施；具有的微生物的致病性；传播方式和宿主范围；具有的有效预防措施；具有的有效治疗措施有效治疗措施v 分级分级 危害等级危害等级I I （低个体危害，低群体危害）危害等级危害等级 (中等个体危害，有限群体危害)危害等级危害等级 III III （高个体危害，低群体危害）危害等级危害等级 (高个体危害，高群体危害)微生物危
35、害等级各国病原微生物危险分级组织对 象低病原微生物危险性高WHO病原微生物1234美国病原微生物1234日本微生物病毒1 12a2a2b2b3a3a3b3b4a4a4b英国病原微生物CBA中国病原微生物4321实验室生物安全水平分级根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室生物安全防护水平（生物安全防护水平（biosafety levelbiosafety level，BSLBSL）分为分为4 4级级I I级防护水平最低，级防护水平最低，IVIV级防护水平最高级防护水平最高v BSL-1 BSL-1、BSL-2BSL-2、B
36、SL-3BSL-3、BSL-4BSL-4 表示实验室的相应生物安全防护水平表示实验室的相应生物安全防护水平v ABSL-1 ABSL-1、ABSL-2ABSL-2、ABSL-3ABSL-3、ABSL-4ABSL-4 表示动物实验室的相应生物安全防护水平表示动物实验室的相应生物安全防护水平 生物安全实验室的分级实验室分级处理对象危险等级BSL-1对人体和环境危害较低，不会引发健康成人疾病 级四类BSL-2对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的致病因子级三类BSL-3主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有预防治疗措施 级二类BSL-4对人体有高度危险性，通过气溶胶途径传播
37、或传播途径不明的微生物。尚无预防治疗措施级一类一级生物安全防护 适用于实验对象已知对健康成年人适用于实验对象已知对健康成年人无致病作用无致病作用，对实验室工作，对实验室工作人员和环境的潜在危害很小人员和环境的潜在危害很小例如：例如：枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌 Naegleria gruberiNaegleria gruberi（耐格里原虫）耐格里原虫）感染性犬肝炎病毒感染性犬肝炎病毒 大肠杆菌大肠杆菌二级生物安全防护 适用于实验对象对人和环境具有适用于实验对象对人和环境具有中等潜在危害中等潜在危害，具有有效，具有有效的疫苗或抗生素治疗有效。的疫苗或抗生素治疗有效。例如：例如：麻疹病毒麻疹病毒 沙
38、门氏菌沙门氏菌 弓形虫弓形虫 乙肝病毒乙肝病毒 三级生物安全防护 适用于实验对象是通过适用于实验对象是通过呼吸途径呼吸途径使人感染导致使人感染导致严重的严重的甚至是甚至是致死性疾病致死性疾病的感染性材料的感染性材料v 暴露于通过暴露于通过气溶胶途径气溶胶途径传播的致病菌传播的致病菌v 严重感染，有可能致命。严重感染，有可能致命。v 例如：例如：结核杆菌结核杆菌 圣路易脑炎病毒圣路易脑炎病毒 伯纳特考克斯体伯纳特考克斯体四级生物安全防护 适用于实验对象是危险的和新的感染性材料，表现出通过适用于实验对象是危险的和新的感染性材料，表现出通过气溶胶气溶胶途径传播实验室感染和致命疾病的途径传播实验室感染
39、和致命疾病的高度危险性高度危险性。感染可能致死感染可能致死 例如：例如：无名病毒（无名病毒（SNVSNV）埃博拉病毒埃博拉病毒 里夫谷热病毒里夫谷热病毒生物安全风险评估 微生物实验室生物安全风险评估：微生物实验室生物安全风险评估：评估风险大小 确定可接受的过程 评估目的评估目的 生物危害评估是对微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估 目的是为确定生物安全防护等级、实验标准操作规程提供重要依据 在危害评估的基础上，按不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备 防止工作人员发生感染，同时避免过分防护在群众中造成恐慌生物安全风险评估 评估内容评估内容 生物因子的种类（已知的、未知的、基因修饰
40、的生物因子的种类（已知的、未知的、基因修饰的 或未知传染性的生物材料）或未知传染性的生物材料）来源来源 传染性、致病性传染性、致病性 传播途径传播途径 在环境中的稳定性在环境中的稳定性 感染剂量、浓度感染剂量、浓度 动物实验数据动物实验数据 预防和治疗预防和治疗实验室操作规程和技术规范 实验室的运行规范实验室的运行规范 仪器设备的使用规范仪器设备的使用规范 针对感染性材料的试验操作规范针对感染性材料的试验操作规范 个人防护用品的使用规范个人防护用品的使用规范 实验室消毒规程实验室消毒规程 危险废弃物的处置规程危险废弃物的处置规程 尖锐器具的安全操作规程尖锐器具的安全操作规程 实验紧急情况处理规程实验紧急情况处理规程 Thank you!
