1、什么是灭菌？什么是灭菌？什么是灭菌什么是灭菌什么是消毒什么是消毒影响灭菌的因素影响灭菌的因素灭菌的方式灭菌的方式EO灭菌的流程灭菌的流程有关有关EO的监测的监测GB18279-2000框架与内容框架与内容EO灭菌通则灭菌通则灭菌确认灭菌确认过程和监测过程和监测 产品放行产品放行EO灭菌确认策划灭菌确认策划确认报告确认报告复审报告复审报告如何进行灭菌？如何进行灭菌？灭菌确认和控制灭菌确认和控制的依据是什么？的依据是什么？如何编写如何编写EO灭菌确认方案灭菌确认方案及确认报告？及确认报告？第一部分第一章第一章 灭菌与消毒的基本知识灭菌与消毒的基本知识l一、灭菌与消毒概念一、灭菌与消毒概念l二、微生
2、物二、微生物l三、细菌三、细菌l四、简介芽胞四、简介芽胞l五、产品初始污染菌要求五、产品初始污染菌要求l六、指示物六、指示物 一、一、灭菌与消毒概念（灭菌与消毒概念（1）l1、灭菌、灭菌（sterilization）：灭菌是使产品无任何微生灭菌是使产品无任何微生物过程。灭菌目地是杀死污物过程。灭菌目地是杀死污染的微生物从而使非无菌产染的微生物从而使非无菌产品转成无菌产品。品转成无菌产品。一、一、灭菌与消毒概念（灭菌与消毒概念（2）l2、消毒、消毒（disinfection）：消毒是指用物理或化学方法消毒是指用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上有病原微杀灭或清除传播媒介上有病原微生物，使其达到无
3、害化。试验菌生物，使其达到无害化。试验菌杀灭率杀灭率99.9%以上，或对自然以上，或对自然界杀灭率界杀灭率90%以上可判为符合以上可判为符合消毒使用要求。消毒使用要求。一、一、灭菌与消毒概念（灭菌与消毒概念（3）l3、存活概率存活概率：存活概率取决于存活概率取决于：（：（1）微生物的数量）微生物的数量和种类；（和种类；（2）还取决于灭菌前和灭菌过程）还取决于灭菌前和灭菌过程中微生物所处的环境中微生物所处的环境。因此，被灭菌前产品的总体中任何单因此，被灭菌前产品的总体中任何单个产品的无菌程度只能用总体存在非无菌个产品的无菌程度只能用总体存在非无菌产品的概率来表示。产品的概率来表示。一、一、灭菌与
4、消毒概念（灭菌与消毒概念（4）l4、灭菌、灭菌特殊过程特殊过程 某些不能由随后产品检验和试验来充某些不能由随后产品检验和试验来充分证实，其结果的生产过程称之为分证实，其结果的生产过程称之为“特殊特殊过程过程”。灭菌就是一个特殊过程；因为其过程灭菌就是一个特殊过程；因为其过程的功效不能通过对产品的检验来证实，因的功效不能通过对产品的检验来证实，因此，灭菌过程需在用前确认，过程的性能此，灭菌过程需在用前确认，过程的性能需进行常规监测。需进行常规监测。二、二、微生物（微生物（1）l微生物概念：微生物概念：微生物是存在于自然界中的一群形体微生物是存在于自然界中的一群形体微小、构造简单、肉眼直接看不见，
5、必须微小、构造简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍，甚至几万倍才能观察到的低等生几千倍，甚至几万倍才能观察到的低等生物。一般由单细胞构成，也有简单的多细物。一般由单细胞构成，也有简单的多细胞，但具有一定的形态结构、生理功能，胞，但具有一定的形态结构、生理功能，并能在适宜的环境中快速的生长和繁殖。并能在适宜的环境中快速的生长和繁殖。二、二、微生物（微生物（2）l微生物分类：微生物分类：1、非细胞型微生物、非细胞型微生物 例如：病毒例如：病毒 2、原核细胞型微生物、原核细胞型微生物 例如：细菌例如：细菌 3、真核细胞型微生物、
6、真核细胞型微生物 例如：真菌例如：真菌 三、三、细菌（细菌（1）l1、细菌的形态：、细菌的形态：细菌的外形有球形、杆形、螺形三种基细菌的外形有球形、杆形、螺形三种基本形态。分别称为球菌、杆菌、和螺旋菌。本形态。分别称为球菌、杆菌、和螺旋菌。三、三、细菌（细菌（2）l2、细菌的基本结构、细菌的基本结构：四、四、简介芽胞（简介芽胞（1）l某些细菌在一定环境条件下，能在菌体内形某些细菌在一定环境条件下，能在菌体内形成一个园形或卵园形的小体，称为成一个园形或卵园形的小体，称为芽孢芽孢（spore）。l由于在菌体内部形成，一般叫做内芽孢。它由于在菌体内部形成，一般叫做内芽孢。它能保存细菌的全部生命活性。
7、芽孢形成以后，能保存细菌的全部生命活性。芽孢形成以后，菌体即成为空壳。以后在适当的条件下，芽菌体即成为空壳。以后在适当的条件下，芽孢有可发芽而形成新的菌体。孢有可发芽而形成新的菌体。四、四、简介芽胞（简介芽胞（2）l细菌芽孢对热、干燥、化学消毒剂、辐射等细菌芽孢对热、干燥、化学消毒剂、辐射等均有强大的抵抗力，其耐杀灭性要比增殖状均有强大的抵抗力，其耐杀灭性要比增殖状态高许多倍。芽孢在自然界中可存活长达数态高许多倍。芽孢在自然界中可存活长达数十年之久。有的芽孢能耐煮沸几小时，有的十年之久。有的芽孢能耐煮沸几小时，有的芽孢在芽孢在5%炭酸中数日不死。炭酸中数日不死。l由于芽孢致密耐热，因此当进行灭
8、菌时常以由于芽孢致密耐热，因此当进行灭菌时常以杀芽孢作为评价灭菌效果的依据。杀芽孢作为评价灭菌效果的依据。四、四、简介芽胞（简介芽胞（3）l芽胞的形态芽胞的形态 五、产品初始污染菌要求五、产品初始污染菌要求l产品初始污染菌通常用于描述产品初始污染菌通常用于描述材料材料或或产品产品中的中的活微生物群体。活微生物群体。l1、产品初始污染菌数：灭菌产品管道类内腔、产品初始污染菌数：灭菌产品管道类内腔10cfu/件数，外部件数，外部100cfu/件数，非管道类件数，非管道类100cfu/件数；敷料数件数；敷料数100cfu/gm；l2、生产、装配、包装车间空气细菌数要求、生产、装配、包装车间空气细菌数
9、要求:灭灭菌与消毒产品分别菌与消毒产品分别500cfu/m3和和2000cfu/m3，物体表面细菌总数分别物体表面细菌总数分别10和和20cfu/c（GB15980-2019）六、指示物六、指示物l1、“指示物指示物”指包括指示片、条、带、器等指包括指示片、条、带、器等各种形式的指示器件各种形式的指示器件。l2、环氧乙烷（灭菌）指示物、环氧乙烷（灭菌）指示物l3、生物指示物、生物指示物（我公司是以我公司是以枯草杆菌黑色变枯草杆菌黑色变种芽孢种芽孢（ATCC 9372）做为指示菌片）做为指示菌片）l4、拟定在日常临测中使用的接种载体和生物拟定在日常临测中使用的接种载体和生物指示物，试验微生物的额
10、定总数必须不少于指示物，试验微生物的额定总数必须不少于1 106。第二节第二节 介绍环氧乙烷介绍环氧乙烷l一、理化性质一、理化性质l二、灭菌机理二、灭菌机理l三、环氧乙烷贮存室要求三、环氧乙烷贮存室要求第二节第二节 介绍环氧乙烷介绍环氧乙烷l二、理化性质（二、理化性质（1 1）l环氧乙烷环氧乙烷（Ethylene OxideEthylene Oxide简称简称EOEO）又名氧化乙烷或氧丙烷。又名氧化乙烷或氧丙烷。EOEO的的分子式为分子式为C C2 2H H4 4O O，分子量分子量44.0544.05。EOEO的沸点为的沸点为10.810.8 lEOEO液体无色透明，具有芳香的醚味液体无色透
11、明，具有芳香的醚味lEOEO是易燃、易爆的有毒气体，与空气混合后形成的爆炸极限为是易燃、易爆的有毒气体，与空气混合后形成的爆炸极限为3%-100%3%-100%。lEOEO的蒸汽压比较大，因此对灭菌物品的穿透力很强的蒸汽压比较大，因此对灭菌物品的穿透力很强。lEOEO化学性质活泼化学性质活泼，温度高于温度高于40 开始引起聚合反应。故开始引起聚合反应。故EOEO钢瓶钢瓶应在阴凉干燥通风的地方保存并规定其有效期。应在阴凉干燥通风的地方保存并规定其有效期。第二节第二节 介绍环氧乙烷介绍环氧乙烷l二、理化性质（二、理化性质（2 2）l环氧乙烷还可以与惰性气体（如：二氧化碳环氧乙烷还可以与惰性气体（如
12、：二氧化碳C0C02 2，氮气，氮气N N2 2）相混）相混合成混合气体，常用的比例环氧乙烷占合成混合气体，常用的比例环氧乙烷占10%10%、20%20%、30%30%。l混合气体安全性好，灭菌时穿透性更好，有益于灭菌效果。混合气体安全性好，灭菌时穿透性更好，有益于灭菌效果。l环氧乙烷对人的毒害作用主要表现在直接接触和吸入。吸入环环氧乙烷对人的毒害作用主要表现在直接接触和吸入。吸入环氧乙烷气体能刺激呼吸道，量多时可发生急性中毒氧乙烷气体能刺激呼吸道，量多时可发生急性中毒 。l环氧乙烷气体或液体对皮肤也有毒害作用，若不慎将环氧乙烷环氧乙烷气体或液体对皮肤也有毒害作用，若不慎将环氧乙烷溅到皮肤上或
13、眼内，应立即用水冲洗。溅到皮肤上或眼内，应立即用水冲洗。第二节第二节 介绍环氧乙烷介绍环氧乙烷l一、灭菌机理（一、灭菌机理（1 1）lEOEO可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、芽孢、病可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、芽孢、病毒和真菌孢子，是一种广谱灭菌剂。毒和真菌孢子，是一种广谱灭菌剂。l灭菌机理主要是由于灭菌机理主要是由于EOEO能与微生物的蛋白质能与微生物的蛋白质上的上的DNADNA和和RNARNA发生非持异性烷基化作用发生非持异性烷基化作用。EOEO能与蛋白质上的游能与蛋白质上的游离羟基离羟基（-C00H-C00H）氨基氨基（-NH2-NH2）、硫氢基、硫氢基（-SH-SH）和羧和
14、羧基基（-0H-0H）发生烷化作用发生烷化作用，取代不稳定的氢原子而形成，取代不稳定的氢原子而形成带有羧乙根带有羧乙根（CHCH2 2CHCH2 20H0H）的化合物。蛋白质上的基团的化合物。蛋白质上的基团被烷基化，被烷基化，使蛋白质失去了在基本代谢中需要的反应使蛋白质失去了在基本代谢中需要的反应基基，阻碍了细菌蛋白质正常的化学反应和新陈代谢，阻碍了细菌蛋白质正常的化学反应和新陈代谢，从而导致微生物死亡。从而导致微生物死亡。第二节第二节 介绍环氧乙烷介绍环氧乙烷l一、灭菌机理（一、灭菌机理（2 2）lEOEO能抑制一些微生物酶的活性，包括磷能抑制一些微生物酶的活性，包括磷酸致活酶、肽酶、胆碱化
15、酶和胆碱脂酶。酸致活酶、肽酶、胆碱化酶和胆碱脂酶。EOEO 也可和也可和DNADNA ，和和RNARNA发生烷基化作用，发生烷基化作用，而导致微生物的灭活而导致微生物的灭活 。l注：注：EOEO 气体灭菌时对湿度有要求，相气体灭菌时对湿度有要求，相当于湿度底于当于湿度底于30%30%以下时，不可能达到以下时，不可能达到灭菌，即使延长灭菌时间也无效。灭菌，即使延长灭菌时间也无效。第二节第二节 介绍环氧乙烷介绍环氧乙烷l三、环氧乙烷贮存室的要求：三、环氧乙烷贮存室的要求：l安放安放EOEO或其它的混合灭菌气体钢瓶（罐或或其它的混合灭菌气体钢瓶（罐或筒）的贮存室必须是安全和通风的。筒）的贮存室必须是
16、安全和通风的。l环氧乙烷贮存室内的环境条件极易受到温环氧乙烷贮存室内的环境条件极易受到温度变化影响。故贮存室应有温度控制的设度变化影响。故贮存室应有温度控制的设备和措施。备和措施。第三节第三节 影响环氧乙烷灭菌的因素影响环氧乙烷灭菌的因素l一、预真空一、预真空l二、温度二、温度l三、微生物的含水量和灭菌环境的相对湿度三、微生物的含水量和灭菌环境的相对湿度 l四、浓度四、浓度 l五、五、被灭菌物品有机物、微生物量对灭菌作用的影响被灭菌物品有机物、微生物量对灭菌作用的影响 l六、材料、包装及装载六、材料、包装及装载l七、菌龄的影响七、菌龄的影响l八、环氧乙烷残留量八、环氧乙烷残留量 第二部分第一章
17、第一章 灭菌的方法灭菌的方法l一、蒸汽一、蒸汽l二、干热二、干热l三、环氧乙烷（三、环氧乙烷（EOEO）l四、射线辐照四、射线辐照l五、蒸汽五、蒸汽福尔马林福尔马林第二章第二章 环氧乙烷灭菌的流程环氧乙烷灭菌的流程预处理预处理抽真空抽真空加入加入EOEO气体气体灭灭菌菌循循环环处理处理灭菌灭菌通风通风加温加温加湿加湿保持保持放入空气放入空气 抽真空抽真空第三章第三章 有关有关EO的检测的检测l一、可用饱和硫代硫酸钠溶液一、可用饱和硫代硫酸钠溶液加入加入10%10%酚红溶液，用稀盐酸酚红溶液，用稀盐酸将将PHPH值调至微酸性，此时溶液值调至微酸性，此时溶液呈无色透明。呈无色透明。l二、用滤纸条浸
18、以试液贴于可二、用滤纸条浸以试液贴于可疑漏气部位，如滤纸变为粉红疑漏气部位，如滤纸变为粉红色则表明已有色则表明已有EOEO渗出。渗出。第三部分第一章第一章 标准的框架和内容简介标准的框架和内容简介l第一节第一节 标准的框架标准的框架l第二节第二节 标准通则标准通则l第三节第三节 EOEO灭菌确认灭菌确认l第四节第四节 过程控制和监测过程控制和监测l第五节第五节 产品放行产品放行第一节第一节 标准的框架标准的框架l一、正文一、正文 1 1、范围、范围 2 2、引用标准、引用标准 3 3、定义、定义 4 4、通则、通则 5 5、确认、确认 6 6、过程控制与监测、过程控制与监测 7 7、产品放行、
19、产品放行l二、附录二、附录(强制性要求强制性要求)(非强制性要求非强制性要求)附录附录A A附录附录B B附录附录C C附录附录D D指南指南指南指南指南指南指南指南第二节第二节 标准通则标准通则l需要灭菌的医疗器械应在保证生需要灭菌的医疗器械应在保证生物负载低的条件下进行生产。采物负载低的条件下进行生产。采用用GB/T19001ISO9001GB/T19001ISO9001或或GB/T19002ISO9002GB/T19002ISO9002质量管理体质量管理体系可以满足该要求，并建立书面系可以满足该要求，并建立书面程序和说明。程序和说明。第二节第二节 标准通则标准通则l一、人员一、人员 应由
20、有资格的人员负责设备维护，应由有资格的人员负责设备维护，EOEO灭菌的灭菌的确认和常规控及产品放行工作。负责下列工作的确认和常规控及产品放行工作。负责下列工作的人员应接受和具有必要的资历：人员应接受和具有必要的资历：微生物学试验；微生物学试验；设备安装、维护；设备安装、维护；物理性能鉴定；物理性能鉴定；日常灭菌操作日常灭菌操作 校准校准 灭菌过程设定灭菌过程设定 设备技术规格设备技术规格第二节第二节 标准通则标准通则l二、灭菌过程设定二、灭菌过程设定 制定灭菌工艺时，所有影响灭菌过程有效性的制定灭菌工艺时，所有影响灭菌过程有效性的因素都要考虑，这些因素应包括：因素都要考虑，这些因素应包括：产品
21、设计产品设计 ；包装包装 ；被灭菌物品摆放方式被灭菌物品摆放方式 ；预处理要求预处理要求 ；处理要求；处理要求；灭菌柜中的残留空气含量；灭菌柜中的残留空气含量；灭菌剂加入灭菌剂加入灭菌作用条件灭菌作用条件（温度、相对湿度、温度、相对湿度、EOEO浓度、时间浓度、时间）排出条件排出条件 通风要求通风要求 第二节第二节 标准通则标准通则l三、产品的适用性三、产品的适用性 产品需经产品需经EOEO灭菌的，在其设计时需考虑的方面：灭菌的，在其设计时需考虑的方面：不应改变不应改变产品结构产品结构；对对材料性能材料性能的影响及可能带来的的影响及可能带来的生物学危害生物学危害；EOEO残留水平残留水平将会影
22、响产品对灭菌的适用性；将会影响产品对灭菌的适用性；产品还有可能产品还有可能与与EOEO或稀释气体起反应或稀释气体起反应；产品设计应保证其产品设计应保证其有效性有效性和和安全性安全性不受灭菌影响不受灭菌影响 ；产品需产品需再次灭菌再次灭菌时，其物理、化学性能不受影响；时，其物理、化学性能不受影响；高的湿度和压力的变化可能影响高的湿度和压力的变化可能影响包装密封性能包装密封性能；根据产品的设计确定根据产品的设计确定灭菌剂最难达到的部位灭菌剂最难达到的部位 第二节第二节 标准通则标准通则l四、灭菌过程四、灭菌过程 灭菌过程应包括预处理和（或）处理、灭菌周期和灭菌过程应包括预处理和（或）处理、灭菌周期
23、和通风。灭菌过程中须考虑的物理性能因素有：通风。灭菌过程中须考虑的物理性能因素有：达到达到真空真空的的程度程度和和速度速度；柜的柜的泄漏率泄漏率（负压和正压下进行）（负压和正压下进行）；处理过程中蒸汽注入时产生的处理过程中蒸汽注入时产生的压力升高的程度压力升高的程度 ；加入灭菌剂时加入灭菌剂时压力升高的程度压力升高的程度和达到规定压力的速度，和达到规定压力的速度，以及用于检测以及用于检测EOEO浓度的参数的相互关系浓度的参数的相互关系 ；排除灭菌剂所要达到的排除灭菌剂所要达到的真空程度真空程度和和速度速度 ；加入空气时压力加入空气时压力升高的程度升高的程度和和达到的速度达到的速度 ；上面上面
24、的的重复次数重复次数以及重复中的任何变化以及重复中的任何变化 第二节第二节 标准通则标准通则l五、设备五、设备 标准中规定：标准中规定：应以文件写明应以文件写明EOEO灭菌所用设备灭菌所用设备（包括预处理区）（包括预处理区）的规范；的规范；灭菌剂使用前或使用中的贮存条件，应能灭菌剂使用前或使用中的贮存条件，应能保证灭菌剂的质量和成分持续符合规范保证灭菌剂的质量和成分持续符合规范 ；第二节第二节 标准通则标准通则l六、校准六、校准 标准中规定：标准中规定：应为灭菌过程确认和日常控制所用的所有应为灭菌过程确认和日常控制所用的所有控制、指示和记录食品建立一个有效的校准系控制、指示和记录食品建立一个有
25、效的校准系统，并形成文件，加以保存。统，并形成文件，加以保存。该系统应符合该系统应符合GB/T19001GB/T19001的的4.114.11或或GB/T19001GB/T19001的的4.124.12的要求；的要求；第二节第二节 标准通则标准通则l七、维护七、维护标准中规定：标准中规定：应按照书面程序去计划和进行防护。应规定应按照书面程序去计划和进行防护。应规定每次计划的维护程序和维护频次，并形成文件。每次计划的维护程序和维护频次，并形成文件。应对设备进行全面的维护并加以记录，否则应对设备进行全面的维护并加以记录，否则不能用于医疗器械灭菌不能用于医疗器械灭菌 ；应按应按GB/T19001GB
26、/T19001或或GB/T19002GB/T19002的的的规定，保存的规定，保存维护记录；维护记录；应由指定人员定期应由指定人员定期 评审维护计划、维护程序评审维护计划、维护程序和维护记录。和维护记录。第三节第三节 EO灭菌确认灭菌确认l确认程序必须形成文件并按确认程序必须形成文件并按GB/T19001GB/T19001的的4.114.11或或GB/T19002GB/T19002的规定保存确认记录。的规定保存确认记录。l确认包括试运行和性能鉴定的全过程。其关系图确认包括试运行和性能鉴定的全过程。其关系图示如下：示如下：确认确认性能鉴定性能鉴定试运行试运行微生物学鉴定微生物学鉴定物理鉴定物理鉴
27、定第三节第三节 EO灭菌确认灭菌确认l依据的标准：依据的标准：1 1、中国标准、中国标准2 2、欧洲标准、欧洲标准3 3、国标标准、国标标准4 4、产品标准、产品标准第三节第三节 EO灭菌确认灭菌确认l1 1、中国标准、中国标准lGB18297-2000 GB18297-2000 医疗器械、环氧乙烷灭菌确认和医疗器械、环氧乙烷灭菌确认和常规控制常规控制lGB16886.7-2019 GB16886.7-2019 医疗器械生物学评价医疗器械生物学评价EOEO灭菌残灭菌残留量留量lGB18282-2000 GB18282-2000 医疗保建产品灭菌、化学指示物医疗保建产品灭菌、化学指示物lGB18
28、28.1-2000 GB1828.1-2000 环氧乙烷灭菌用生物指示物环氧乙烷灭菌用生物指示物lGB15980-2019GB15980-2019一次性使用医疗用品卫生标准一次性使用医疗用品卫生标准lGB/T19633-2019GB/T19633-2019最终灭菌医疗器械的包装最终灭菌医疗器械的包装第三节第三节 EO灭菌确认灭菌确认l2 2、欧洲标准、欧洲标准lEN550:1994 EN550:1994 医疗器械环氧乙烷灭菌的验证医疗器械环氧乙烷灭菌的验证和常规控制和常规控制lEN1422:2019EN1422:2019医疗器械用环氧乙烷灭菌柜规医疗器械用环氧乙烷灭菌柜规范范lEN868-1
29、EN868-1 需灭菌医疗器械的包装材料和体系需灭菌医疗器械的包装材料和体系 第一部分第一部分 一般要求和测试方法一般要求和测试方法第三节第三节 EO灭菌确认灭菌确认l3 3、国标标准、国标标准lISO11135:1994 ISO11135:1994 医疗器械环氧乙烷灭菌的医疗器械环氧乙烷灭菌的验证和常规控制验证和常规控制lISO10993.7:2019 ISO10993.7:2019 医疗器械生物学评价医疗器械生物学评价 第第七部分七部分 环氧乙烷灭菌残留量环氧乙烷灭菌残留量lISO11607:2019ISO11607:2019最终灭菌医疗器械的包装最终灭菌医疗器械的包装 l4 4、产品标准
30、、产品标准第三节第三节 EO灭菌确认灭菌确认l标准中要求：标准中要求：1 1、必须证明预处理（若采用）、灭菌和通风设备、必须证明预处理（若采用）、灭菌和通风设备符合设备规范要求。符合设备规范要求。2 2、必须从校准所有用于控制、指示和记录灭菌过、必须从校准所有用于控制、指示和记录灭菌过程的仪器开始。程的仪器开始。l试运行目的：试运行目的：是是用于证明设备符合规范用于证明设备符合规范。一、一、试运行（灭菌设备）试运行（灭菌设备）l灭菌设备的以下几个方面应附合规范要求：灭菌设备的以下几个方面应附合规范要求：1 1、资质文件证据；、资质文件证据；2 2、计量器具校验、计量器具校验 ；3 3、灭菌设备
31、的安装、灭菌设备的安装 ；4 4、辅助设备；、辅助设备；5 5、电器控制系统、电器控制系统 ；6 6、报警系统、报警系统 ；7 7、计算机系统、计算机系统。一、一、试运行（空载试验）试运行（空载试验）l灭菌设备的试运行包括以下几个方面：灭菌设备的试运行包括以下几个方面：1 1、预处理；、预处理；2 2、处理、处理 ；3 3、灭菌、灭菌 ；4 4、通风；、通风；5 5、重新试运行、重新试运行 ；6 6、初始微生物监测、初始微生物监测 灭菌试运行在空柜内进灭菌试运行在空柜内进行，目的是建立影响灭行，目的是建立影响灭菌效果的参数的操作界菌效果的参数的操作界限，其获取的数据将用限，其获取的数据将用于随
32、后进行的性能鉴定于随后进行的性能鉴定二、二、性能鉴定性能鉴定l性能鉴定的目的是：用于证明按规定程序使性能鉴定的目的是：用于证明按规定程序使用经试运行的设备时能生产出合格的产品用经试运行的设备时能生产出合格的产品l灭菌设备的物理性能鉴定包括以下四个方面：灭菌设备的物理性能鉴定包括以下四个方面：1 1、预处理；、预处理；2 2、处理、处理 ；3 3、灭菌、灭菌 ；4 4、通风。、通风。二、二、性能鉴定性能鉴定l灭菌柜的性能鉴定主要包括以下几方面：灭菌柜的性能鉴定主要包括以下几方面：1 1、真空速率确认；、真空速率确认；2 2、泄漏速率确认、泄漏速率确认 ；3 3、灭菌柜加湿确认、灭菌柜加湿确认 ；
33、4 4、灭菌柜柜壁、空间温度均匀性；、灭菌柜柜壁、空间温度均匀性；5 5、灭菌柜载荷状态下温度均匀性确认；、灭菌柜载荷状态下温度均匀性确认；6 6、微生物性能鉴定；、微生物性能鉴定；7 7、灭菌柜通风确认、灭菌柜通风确认二、二、性能鉴定性能鉴定l微生物性能鉴定的通用方法：微生物性能鉴定的通用方法：1 1、方法、方法A A：存活曲线法；：存活曲线法；2 2、方法、方法B B：部分阴性法：部分阴性法 ；3 3、方法、方法C C：半周期法：半周期法 本方法是在除时间外所有其他过程参数不变情本方法是在除时间外所有其他过程参数不变情况下况下,确定无存活菌的确定无存活菌的EOEO最短作用时间最短作用时间应
34、再重复两次应再重复两次实验来证实该最短灭菌时间，两次灭菌重复试验均实验来证实该最短灭菌时间，两次灭菌重复试验均应表明生物指示物上无菌生长。应表明生物指示物上无菌生长。规定的作用时间应规定的作用时间应至少为最短灭菌时间的至少为最短灭菌时间的2 2倍倍。还要进行能让存活菌复。还要进行能让存活菌复苏的短周期运转，以证明复苏技术可靠性。苏的短周期运转，以证明复苏技术可靠性。二、二、性能鉴定性能鉴定l生物指示的放置生物指示的放置1 1、生物指示物应放于、生物指示物应放于产品中最难灭菌的产品中最难灭菌的位置位置。如果产品设计不能将生物指示物放于。如果产品设计不能将生物指示物放于其最难灭菌的地方，则应采用能
35、提供已知数其最难灭菌的地方，则应采用能提供已知数量活芽孢悬液给产品染菌。芽孢悬液应符合量活芽孢悬液给产品染菌。芽孢悬液应符合GB1828GB18281ISO11138-11ISO11138-1标准标准2 2、生物指示物或染菌产品应均匀地分布、生物指示物或染菌产品应均匀地分布于被灭菌物品中，但于被灭菌物品中，但放置点应包括灭菌条件放置点应包括灭菌条件下最难灭菌的地方下最难灭菌的地方 。二、二、性能鉴定性能鉴定l根据已鉴定的实践经验通常进行微生物鉴定根据已鉴定的实践经验通常进行微生物鉴定试验时，宜采用以下试验时，宜采用以下生物指示物数量生物指示物数量：1 1、灭菌柜室可用体积小于等于、灭菌柜室可用
36、体积小于等于5m5m3 3时至少时至少2020个；个；2 2、灭菌器柜室可用体积、灭菌器柜室可用体积5m5m3 3至至10m10m3 3时，每时，每增加增加1 m1 m3 3应增加应增加2 2个生物指示物；个生物指示物；3 3、灭菌器柜室可用体积大于、灭菌器柜室可用体积大于10m10m3 3每增加每增加2m2m3 3应增加应增加2 2个生物指示物。个生物指示物。三、三、确认证明确认证明l标准规定标准规定：1 1、应以文件形式出具确认报告，该报告应、应以文件形式出具确认报告，该报告应由负责编制、审核和批准人员签名并保存。由负责编制、审核和批准人员签名并保存。2 2、确认报告应包括或参考具体确认过
37、的产、确认报告应包括或参考具体确认过的产品和品和EOEO灭菌过程规范文件。确认报告还应包灭菌过程规范文件。确认报告还应包括下列各过程的相关参数和公差：括下列各过程的相关参数和公差：预处理；预处理；处理处理 ；灭菌灭菌 ；通风。通风。四、四、重新确认重新确认l标准规定标准规定：1 1、确认和随后的重新确认数据，应至少、确认和随后的重新确认数据，应至少每年复审一次。还应测定重新确认的程度每年复审一次。还应测定重新确认的程度（范围），并形成文件。确认和重新确认的（范围），并形成文件。确认和重新确认的评审，应形成文件，并保留重新确认记录。评审，应形成文件，并保留重新确认记录。2 2、所有重新确认的报告
38、，应形成文件。、所有重新确认的报告，应形成文件。该报告应由负责制定、审核和批准该原先确该报告应由负责制定、审核和批准该原先确认报告的工作人员签名。认报告的工作人员签名。第四节第四节 过程控制和监测过程控制和监测l应记录保留每一灭菌周期数据，以证明已达到灭菌过程应记录保留每一灭菌周期数据，以证明已达到灭菌过程规范。规范。l应保留应保留GB/T19001GB/T19001或或GB/T19001GB/T19001规定的所有记录。规定的所有记录。l用于监测灭菌过程的用于监测灭菌过程的EOEO灭菌指示物、复苏培养基条件灭菌指示物、复苏培养基条件应符合应符合GB1828GB18281ISO11138-11
39、ISO11138-1标准。标准。l应尽量在灭菌周期完成后立即将生物指示物从被灭菌物应尽量在灭菌周期完成后立即将生物指示物从被灭菌物品中取出并进行培养。品中取出并进行培养。l产品是否经过灭菌处理，应有明确标识产品是否经过灭菌处理，应有明确标识第四节第四节 过程控制和监测过程控制和监测l常规检测的生物指示物分布于灭菌物品中的数常规检测的生物指示物分布于灭菌物品中的数量应足够多。根据通常做常规检测的实践经验，量应足够多。根据通常做常规检测的实践经验，采用以下采用以下生物指示物数量生物指示物数量较为适宜较为适宜：1 1、灭菌柜室可用体积小于等于、灭菌柜室可用体积小于等于5m5m3 3时，至少时，至少1
40、010个；个；2 2、灭菌器柜室可用体积、灭菌器柜室可用体积5m5m3 3至至10m10m3 3时，每增时，每增加加1 m1 m3 3应增加应增加1 1个生物指示物；个生物指示物；3 3、灭菌器柜室可用体积大于、灭菌器柜室可用体积大于10m10m3 3每增加每增加2m2m3 3应增加应增加1 1个生物指示物。个生物指示物。第五节第五节 产品放行产品放行l一、传统的产品放行一、传统的产品放行：1 1、应以文件写明某一具体被灭菌周期要达到的标准，、应以文件写明某一具体被灭菌周期要达到的标准，这些标准应包括：这些标准应包括：a a）符合物理循环规范；）符合物理循环规范；b b）任何经处理的）任何经处
41、理的EOEO灭菌指示物培养后均不应发现有灭菌指示物培养后均不应发现有试验菌生长。试验菌生长。2 2、如果有下列情况发生，则任为产品不合格，应按、如果有下列情况发生，则任为产品不合格，应按相关的不合格品控制程序和纠正措施程序处理。相关的不合格品控制程序和纠正措施程序处理。a a）物理循环变量）物理循环变量超出超出文件规定的文件规定的公差公差；或；或b b）经灭菌后的生物指示物，其任何试样中显示）经灭菌后的生物指示物，其任何试样中显示有试有试验菌生长验菌生长。第五节第五节 产品放行产品放行l一、参数放行一、参数放行：1 1、参数放行是根据产品灭菌物理参数的测量、参数放行是根据产品灭菌物理参数的测量
42、和评价，而不是根据样品试验结果或微生物指和评价，而不是根据样品试验结果或微生物指示物判断灭菌的可靠性。示物判断灭菌的可靠性。2 2、与参数放行一起使用的灭菌过程的微生物、与参数放行一起使用的灭菌过程的微生物学鉴定，应提供微生物灭活的动力学数据。正学鉴定，应提供微生物灭活的动力学数据。正确应用方法确应用方法A A或或B B能提供这些数据，但能提供这些数据，但方法方法C C（半周期法）（半周期法）不能提供足够的灭活动力学信息，不能提供足够的灭活动力学信息，故故不能用于参数放行不能用于参数放行。第四部分第一章第一章 EO灭菌确认策划方案灭菌确认策划方案l一、环氧乙烷灭菌确认的目的：一、环氧乙烷灭菌确
43、认的目的：按照规定的程序评价灭菌周期所采用的工艺技术参数按照规定的程序评价灭菌周期所采用的工艺技术参数是否达到灭菌要求的方法。是否达到灭菌要求的方法。l二、确认人员组成：二、确认人员组成：l二、策划依据：二、策划依据：1 1、依据的标准、依据的标准2 2、灭菌产品、灭菌产品：a a）详细说明；详细说明；b b）产品适应性。）产品适应性。3 3、灭菌柜说明（技术参数和校准确认）、灭菌柜说明（技术参数和校准确认）4 4、使用、使用EOEO浓度浓度5 5、生物指示物时间、生物指示物时间6 6、确认时间、确认时间第一章第一章 EO灭菌确认策划方案灭菌确认策划方案l三、确认步骤和目的：（全部记录保存）三
44、、确认步骤和目的：（全部记录保存）1 1、试运行（预处理、处理、灭菌、通风、试运行（预处理、处理、灭菌、通风）目的：通过试运行证明设备符合规范要求。目的：通过试运行证明设备符合规范要求。确定设施能力、监测位置、相互关系和监测方式确定设施能力、监测位置、相互关系和监测方式2 2、物理性能鉴定、物理性能鉴定目的：确定灭菌过程参数（目的：确定灭菌过程参数（预处理、处理、灭菌、预处理、处理、灭菌、通风通风）。）。目前企业已经采用目前企业已经采用EOEO灭菌，灭菌过程中建立了参灭菌，灭菌过程中建立了参数，可以以原来灭菌条件为基础。结合数，可以以原来灭菌条件为基础。结合GB18279GB18279标准标准
45、进行确认，对灭菌参数作适当调整。进行确认，对灭菌参数作适当调整。第一章第一章 EO灭菌确认策划方案灭菌确认策划方案l物理性能鉴定：物理性能鉴定：（1 1）目前产品包装验证）目前产品包装验证（2 2）灭菌参数的确认：）灭菌参数的确认：绘制装载图、灭菌柜温度分布图绘制装载图、灭菌柜温度分布图温度：设定温度范围温度：设定温度范围5（3 3）增湿时间：设定湿度范围）增湿时间：设定湿度范围15%（4 4）真空、）真空、EOEO加入压力升高至设定压力值加入压力升高至设定压力值（浓度及时间）、灭菌时间。（浓度及时间）、灭菌时间。（5 5）、确定出最难达到的部位）、确定出最难达到的部位第一章第一章 EO灭菌确
46、认策划方案灭菌确认策划方案3 3、微生物性能鉴定、微生物性能鉴定 目的：确定灭菌时间目的：确定灭菌时间 应利用试运行和物理性能鉴定获得的结应利用试运行和物理性能鉴定获得的结果：温度的冷点，产品内最不容易灭菌的地果：温度的冷点，产品内最不容易灭菌的地方，灭菌柜最难灭菌的地方。特别重视关键方，灭菌柜最难灭菌的地方。特别重视关键的特性。的特性。第一章第一章 EO灭菌确认策划方案灭菌确认策划方案l灭菌确认参数：考虑灭菌确认参数：考虑（1 1）产品还是模拟替代品，必须证明模拟）产品还是模拟替代品，必须证明模拟替代品与产品等效。替代品与产品等效。（2 2）摆放方式与常规灭菌摆放方式相同。）摆放方式与常规灭
47、菌摆放方式相同。（3 3）包装与常规灭菌相同）包装与常规灭菌相同（4 4）生物指示物放置（可与温度监测位置）生物指示物放置（可与温度监测位置相同）及数量应说明，应放置产品中最难灭相同）及数量应说明，应放置产品中最难灭菌的地方。菌的地方。第一章第一章 EO灭菌确认策划方案灭菌确认策划方案（5 5）温度传感器放置点数，湿度传感器设置位置。）温度传感器放置点数，湿度传感器设置位置。（6 6）温度传感器放置产品小包装内。）温度传感器放置产品小包装内。l综上确定：综上确定：灭菌温度设定最高灭菌温度设定最高XX，最低，最低XX，EOEO浓度浓度mg/Lmg/L 灭菌湿度最高灭菌湿度最高X%X%，最低，最低
48、X%X%，灭菌压力确定值。，灭菌压力确定值。l测定灭菌作用时间可用：测定灭菌作用时间可用：A A、存活曲线法、存活曲线法 B B、部分阴性法、部分阴性法 C C、半周期法，找出存活菌的最短时间（半周期）、半周期法，找出存活菌的最短时间（半周期）重复至少重复至少2 2次，次，1 1次短周期，次短周期，1 1次全周期次全周期第一章第一章 EO灭菌确认策划方案灭菌确认策划方案4 4、通风、通风通风换气次数通风换气次数环氧乙烷残留量的测定环氧乙烷残留量的测定l四、确认的时间计划安排四、确认的时间计划安排按照按照“5W1H5W1H”按确认方案的项目具体安排按确认方案的项目具体安排由什么人来做？什么时候做
49、？由什么人来做？什么时候做？l五、策划方案制定人、审核人、批准人签名。五、策划方案制定人、审核人、批准人签名。第二章第二章 灭菌确认报告灭菌确认报告l如果所有灭菌确认试验均按试验如果所有灭菌确认试验均按试验计划完成，能达到预期效果，对计划完成，能达到预期效果，对数字记录进行分析、处理，形成数字记录进行分析、处理，形成确认报告。初步灭菌参数被确认确认报告。初步灭菌参数被确认为日常灭菌条件，否则重新运行为日常灭菌条件，否则重新运行整个过程的确认。整个过程的确认。第二章第二章 灭菌确认报告灭菌确认报告一、确认报告应包括或涉及以下内容：一、确认报告应包括或涉及以下内容：灭菌产品的详细说明（包括包装、灭
50、灭菌产品的详细说明（包括包装、灭菌器内被灭菌物品的放置形式）菌器内被灭菌物品的放置形式）灭菌器的技术规格灭菌器的技术规格 ；试运行数据试运行数据 ；物理性能鉴定和微生物性能鉴定的全物理性能鉴定和微生物性能鉴定的全部记录部记录 ；进行性能鉴定时所有仪表、记录仪等进行性能鉴定时所有仪表、记录仪等经过校准的证明；经过校准的证明；第二章第二章 灭菌确认报告灭菌确认报告复审和重新确认的规定；复审和重新确认的规定；确认方案；确认方案；所有程序的文件资料；（灭菌确认程所有程序的文件资料；（灭菌确认程序文件）序文件）所有人员的培训手册与记录所有人员的培训手册与记录 灭菌操作规程，包括过程控制范围灭菌操作规程，
