1、科蒂亚生物科蒂亚生物HPV E6、E7 mRNA 检测 -新一代宫颈癌风险评估方法1宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 主题主题一、宫颈癌简介一、宫颈癌简介 二、宫颈癌二、宫颈癌-E6-E6、E7 mRNA E7 mRNA 三、宫颈癌筛查指南及临床三、宫颈癌筛查指南及临床 问题问题 四、癌基因四、癌基因E6E6、E7 mRNAE7 mRNA检测检测临临 床应用床应用 2宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物哈拉尔德楚尔豪森哈拉尔德楚尔豪森（德国）：确定：“人乳头瘤病毒
2、（Human Papilloma virus，简称HPV）感染导致宫颈癌”获得2008年诺贝尔医学和生理学奖。一、宫颈癌简介一、宫颈癌简介3宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物HPV16nL1:主要衣壳蛋白，是疫苗的主要成分 L2:次要衣壳蛋白，是市售抗体的主要识别位点E4：结合并破坏细胞角蛋白网，形成挖空细胞的外观E2：负性调节E6和E7，维持凋亡和细胞周期的调控。通常在病毒发生整合（病毒整合时会破坏E2基因的结构）时失活HPV 的主要致癌基因n E6 通过抑制 p53而阻断凋亡n E7 通过抑制pRB使细胞周期失控XHPV的的
3、基基因因片片段段及及功功能能4宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物v 高危亚型高危亚型HPVHPV感染宫颈上皮细胞，将产生两种癌蛋白：感染宫颈上皮细胞，将产生两种癌蛋白：E6E6和和E7E7蛋白蛋白。癌蛋白可与宿主细胞的细胞周期调节蛋白。癌蛋白可与宿主细胞的细胞周期调节蛋白（抑癌蛋白抑癌蛋白如如P53P53、RBRB等）相结合，导致细胞周期控制等）相结合，导致细胞周期控制失常，发生失常，发生癌变癌变。（人民卫生出版社、妇产科学、（人民卫生出版社、妇产科学、20042004年年1 1月第月第6 6版）版）E6、E7 癌蛋白癌蛋白E6
4、、E7 癌基因癌基因 DNAE6、E7 mRNA癌细胞癌细胞结合抑结合抑癌蛋白癌蛋白P53、RB等等细胞细胞周期周期失控失控 致癌机理致癌机理5宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 感染发病情况感染发病情况6宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物v2003-2008年，在我国大型宫颈癌筛查中，我国城市、农村妇女高危型HPV感染率分别为15.2%和14.6%，但宫颈癌的发病率为50/10万（0.05%）v9 9.7%的 宫 颈 癌 和 H P V 感 染 有 关，但80%
5、HPV感染者2年内会自行消退，最后不到1的进展为CIN3+。感染发病情况感染发病情况7宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物正常正常宫颈宫颈感染感染HPVHPV宫颈上皮内轻宫颈上皮内轻度癌前病变度癌前病变(CIN)(CIN)宫颈上皮内中宫颈上皮内中度癌前病变度癌前病变(CIN)(CIN)宫颈上皮内高宫颈上皮内高度癌前病变度癌前病变(CIN)(CIN)原位癌原位癌浸润癌浸润癌依靠免疫力依靠免疫力80%80%自行消退自行消退06-18 6-18 个月个月至少至少2 2年后年后5-10 5-10 年后年后一过性感染一过性感染持续性感染持续
6、性感染62%62%转为正常转为正常16%16%进一步进展进一步进展22%22%维持原状维持原状54%54%转为正常转为正常30%30%进一步进展进一步进展16%16%维持原状维持原状100%100%20%20%3.2%3.2%1%1%0.35%0.35%二、二、HPV宫颈癌宫颈癌二、二、HPV宫颈癌宫颈癌 HPVHPV感染致宫颈癌模式图感染致宫颈癌模式图8宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物l 宫颈癌的真正病因是高危HPV的持续性/整合感染。l HPV感染是宫颈癌的必要条件，但非充分条件。l 如果没有mRNA,即使有高危HPV，仍
7、不会有宫颈癌。l 正确看待HPV感染的危害性，不可轻视,亦不可过度夸大。小结小结 返回返回9宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物高危高危HPV感染宫颈上皮细胞感染宫颈上皮细胞HPV L1 L2 DNAHPV L1 L2 mRNAHPV L1 L2 蛋白蛋白HPV 复制繁殖复制繁殖HPV 癌基因癌基因 E6/E7 DNAE6/E7 癌蛋白与抑癌癌蛋白与抑癌蛋白蛋白P53、RB等结合等结合E6/E7 mRNA宫颈细胞宫颈细胞CIN或癌变或癌变HPV病毒学检测病毒学检测细胞形态或细胞形态或组织学检测组织学检测癌基因学检测癌基因学检测E6
8、/E7 癌蛋白癌蛋白E6/E7 mRNA二、宫颈癌二、宫颈癌-E6-E6、E7 mRNA E7 mRNA 10宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物二、宫颈癌二、宫颈癌-E6-E6、E7 mRNA E7 mRNA HPV病毒学检测病毒学检测癌基因癌基因学检测学检测11宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物检测方法意义特点巴氏染色法直接看到病变的程度五级分类液基细胞学TBS分类；基本的筛查方法HPV病毒检测是否有病毒感染（潜在风险）1、ASCUS分流2、分型，16、183、
9、持续感染4、病毒载量E6/E7mRNA检测E6/E7癌基因表达情况检测致癌活动产物，预测病变趋势！阴道镜检宫颈表面病变程度直观、清晰宫颈活检宫颈上皮剖面病变程度病变分级；确诊的金标准 宫颈病变检测方法宫颈病变检测方法12宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 E6/E7 mRNA检测结果：检测结果：不仅观察是否不仅观察是否感染感染了了HPV病毒；病毒；而且观察病毒致癌基因而且观察病毒致癌基因E6、E7是否在是否在活动活动及活动及活动程度程度。E6/E7 mRNA检测检测13宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部
10、学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 20062006年欧洲生殖器感染及肿瘤研究组织年欧洲生殖器感染及肿瘤研究组织(the European(the European Research Organization on Genital Infection and Research Organization on Genital Infection and Neoplasia)Neoplasia)已取得共识，认为今后已取得共识，认为今后HPV E6/E7mRNAHPV E6/E7mRNA检测应检测应作为一个重点研究对象。作为一个重点研究对象。E6/E7 mRNA检测检测共识共识14宫颈癌基因宫
11、颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物数量越来越数量越来越多多；应用范围越来越应用范围越来越广广，涉及到到筛查、诊治、随后随访、特殊人群的使用等涉及到到筛查、诊治、随后随访、特殊人群的使用等 E6/E7 mRNA检测检测文章文章15宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 公共卫生研究结果证实可靠性公共卫生研究结果证实可靠性v以上以上三个大样本三个大样本的的对比实验采对比实验采的结果显的结果显示，以示，以HC2HC2和罗氏公司的和罗氏公司的DNADNA检测为对比对检测为对比对象象，分析
12、结果显示效果良好。，分析结果显示效果良好。v通过对多个文献中数据的比对分析，公通过对多个文献中数据的比对分析，公共卫生研究结果显示共卫生研究结果显示E6E6、E7 mRNAE7 mRNA与与DNADNA检检测一样可靠，并和宫颈测一样可靠，并和宫颈病变病变有着良好的相有着良好的相关性。关性。16宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物作者年代国别DNA敏感性mRNA敏感性DNA特异性mRNA特异性DNA阳性预测值mRNA阳性预测值DNA阴性预测值mRNA阴性预测值1Molden 2005挪威90%86%53%85%35%62%95%96
13、%2Lie 2005挪威95%77%36%78%82%92%67%52%3Andersson 2006瑞典70%61%39%66%55%59%56%48%4Castle 2007美国92%90%47%61%30%36%96%96%5Szarewski 2008英国100%74%28%73%36%52%96%87%6Dockter 2009法国95%91%47%56%29%32%98%96%7Cattani 2009意大利86%81%56%73%49%59%89%89%8Halfon 2010法国95%76%49%63%48%50%95%84%9Hovland 2010刚果100%81%86%9
14、7%28%57%100%99%10Ratnam 2010加拿大96%78%40%76%36%53%96%76%11王华 2011中国79%63%61%78%总计（平均值）90.7%76.2%49.2%73.3%42.8%55.2%88.8%82.3%l阳性判定对照标准为：活检标本组织病理阳性判定对照标准为：活检标本组织病理CIN2+CIN2+E6/E7mRNA检测与检测与HPV DNA检测比较检测比较17宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物v如何解决宫颈癌风险评估既敏感又特异？-是临床诊断难点、也是发展方向。v E6、E7 mRN
15、A检测检测特异性特异性和和阳性预测阳性预测值值高高vHPV DNA检测检测敏感性敏感性和和阴性预测值阴性预测值高。高。E6/E7mRNA检测与检测与HPV DNA检测比较检测比较18宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022 E6、E7 mRNA与液基细胞学联合检测共用一份标本，达到高敏感性的临床要求。E6、E7 mRNA与液基细胞学联合与液基细胞学联合19宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物三、宫颈筛查指南及临床问题三、宫颈筛查指南及临床问题 不建议此年龄阶段人，单不建议此年龄阶段人，单独用独用HPV检测作为筛查方
16、检测作为筛查方法法。不用不用HPV检测，作为此年龄阶检测，作为此年龄阶段段ASC-US的筛查管理。的筛查管理。不用不用HPV检测，作为此年龄阶检测，作为此年龄阶段人群的筛查。段人群的筛查。20宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物中国宫颈癌筛查指南（中国宫颈癌筛查指南（2011版）：版）：ASCUSvASCUSv普通人群普通人群v HPV检测与分流（检测与分流（AI）v 间隔间隔6个月连续个月连续2次重复细胞学检查（次重复细胞学检查（AI）v 单独使用阴道镜（单独使用阴道镜（AI）v v对对ASCUS常规使用常规使用LEEP是不可接
17、受的（是不可接受的（EIII）v v特殊人群特殊人群v青春期女性青春期女性v每年细胞学随访（每年细胞学随访（BII），连续），连续2年，年，12个月随访出现个月随访出现HSIL考虑阴道镜检查，考虑阴道镜检查，24月随访出现月随访出现ASCUS考虑阴道镜检查（考虑阴道镜检查（AII），随后常规筛查），随后常规筛查v v妊娠妇女妊娠妇女v不主张阴道镜常规检查不主张阴道镜常规检查Q:HPV（+）（）（-）后的处理？）后的处理？特殊人群：青春期女性和妊娠妇女的评估？特殊人群：青春期女性和妊娠妇女的评估？21宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚
18、生物vLSILvLSIL通常表明是通常表明是HPV感染，感染，其高危其高危HPV DNA阳性率为阳性率为76.8%，在，在LSIL人群中，人群中，初次阴道镜检查发现的初次阴道镜检查发现的CIN2及更高级的宫颈病变的发生率为及更高级的宫颈病变的发生率为12%-16%。v美国美国ALTS的数据表明，在高危的数据表明，在高危HPV DNA阳性的阳性的LSIL和和ASCUS的女性中，的女性中，CIN2、3的患病风险是相同的。这些证据支持对上述两个人群采用相同的管理方式，除了的患病风险是相同的。这些证据支持对上述两个人群采用相同的管理方式，除了特殊人群如绝经后女性。特殊人群如绝经后女性。v v普通人群普
19、通人群v推荐使用阴道镜检测与多点活检（推荐使用阴道镜检测与多点活检（AII）v对于没有发现病变（对于没有发现病变（BII）和不满意阴道镜检查（）和不满意阴道镜检查（AII）的女性，采集宫颈管样本是）的女性，采集宫颈管样本是更好的办法更好的办法v对于满意的阴道镜检查且转化区发现病变的女性采集宫颈管样本也是可接受的（对于满意的阴道镜检查且转化区发现病变的女性采集宫颈管样本也是可接受的（AII）v对于阴道镜检查和活检均未发现对于阴道镜检查和活检均未发现CIN2、3的的LSIL女性，可接受的阴道镜后管理方案女性，可接受的阴道镜后管理方案是，是，12个月时个月时HPV DNA检测或检测或6个月和个月和1
20、2个月时充分细胞学检查（个月时充分细胞学检查（AII）v如果如果HPV DNA检测阳性或重复细胞学报告检测阳性或重复细胞学报告ASCUS，推荐使用阴道镜（，推荐使用阴道镜（AI），发），发现现CIN，应根据，应根据CIN指南处理。指南处理。v对于对于LSIL患者的治疗，患者的治疗，缺少组织学证据的诊断学切除或者消融治疗都是不可接受的（缺少组织学证据的诊断学切除或者消融治疗都是不可接受的（EII）中国宫颈癌筛查指南（中国宫颈癌筛查指南（2011版）：版）：LSILQ：LSIL的病人要不要做的病人要不要做HPV检测？检测？风险如何评估？风险如何评估？22宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/
21、5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物中国宫颈癌筛查指南（中国宫颈癌筛查指南（2011版）：版）：LSILv青春期女性v推荐每年细胞学随访（AII）v在12个月随访时，重复细胞学结果LSIL，应考虑阴道镜检查。v在24个月随访时，细胞学出现ASCUS结果，应考虑阴道镜检查（AII）v对对LSIL青春期女性，青春期女性，HPV DNA检测是不可接受的（检测是不可接受的（EII），），如果已做了HPV DNA检查，其结果不影响管理。v绝经期女性v应较少采用侵入性的管理方法，采用HPV检测和分流可能更为合理。v可接受方案包括：“反馈性”HPV DNA检测，6个月到12个月重复细胞学
22、、和阴道镜（CIII）v如果HPV DNA检测阴性 或 阴道镜检查未发现CIN，12个月时重复细胞学是推荐的方法。v如果HPV DNA检测阳性 或 重复细胞学ASCUS，推荐使用阴道镜（AII）v如果HPV DNA检测阴性 或 重复细胞学结果为“无CIN或恶性病变”，推荐患者返回常规宫颈细胞学筛查。v妊娠期妇女vLSIL非青春期妇女，阴道镜检查是推荐的管理办法（BII）v患者推迟至产后6周行阴道镜检查也是可接受的办法（BIII）v对于细胞学、组织学或阴道镜检查未发现可疑的CIN2、3及癌症的妊娠期女性，产后随访时推荐的方法（BIII）v尽量避免宫颈管搔刮（EIII），不应进行额外的阴道镜和细胞
23、学检查（DIII）Q：青春期感染：青春期感染HPV女性的罹女性的罹患宫颈癌风险如何评估？患宫颈癌风险如何评估？Q：绝经和妊娠期妇女的罹患：绝经和妊娠期妇女的罹患宫颈癌风险如何评估？宫颈癌风险如何评估？23宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物中国宫颈癌筛查指南（中国宫颈癌筛查指南（2011版）：版）：HSILv 20-29岁女性岁女性HSIL发生率为发生率为0.6%，40-49岁发生率为岁发生率为0.2%，50-59岁发生率为岁发生率为0.1%v HSIL单次阴道镜检查发现单次阴道镜检查发现CIN2病变占病变占53%-56%，LEE
24、P术后术后的的HSIL女性中，女性中，CIN2的病变约占的病变约占53%-56%，大约，大约2%的的HSIL女性是浸润宫颈癌女性是浸润宫颈癌v HSIL女性具有相当高的女性具有相当高的CIN2及以上病变风险及及以上病变风险及HPV感染率，用感染率，用HPV检测作为细胞学分流工具是不合适的检测作为细胞学分流工具是不合适的v 阴道镜检查也会漏检相当数量的阴道镜检查也会漏检相当数量的CIN2、3病变，病变，HSIL女性阴道镜女性阴道镜检查和活检没有检出检查和活检没有检出CIN2、3并不意味着不存在并不意味着不存在CIN2、3v 许多人提议采用即诊断即治疗的方案管理许多人提议采用即诊断即治疗的方案管理
25、HSIL女性，女性，LEEP作为初作为初始手段，由于许多青春期和年轻女性始手段，由于许多青春期和年轻女性CIN2/3可以自发消退，该方可以自发消退，该方案可能案可能治疗过度或治疗不足。治疗过度或治疗不足。Q：细胞学：细胞学HSIL以上，病理学以上，病理学CIN2患患者如何进行风险评估？者如何进行风险评估？24宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物中国宫颈癌筛查指南（中国宫颈癌筛查指南（2011版）：版）：HSILv普通人群普通人群v即诊即治的即诊即治的LEEP或阴道镜检查加宫颈管评估都是可接受的管理办法（或阴道镜检查加宫颈管评估都是
26、可接受的管理办法（BII）v组织学未发现组织学未发现CIN2、3,阴道镜检查满意且宫颈管样本阴性的病例进行诊断性切除或阴道镜检查满意且宫颈管样本阴性的病例进行诊断性切除或在在1年内以年内以6个月为间隔进行阴道镜和细胞学检查是可接受的（个月为间隔进行阴道镜和细胞学检查是可接受的（BIII）v第二条下，重新复习细胞学、组织学和阴道镜也是可接受的管理方案；如果复习的结第二条下，重新复习细胞学、组织学和阴道镜也是可接受的管理方案；如果复习的结果有修订，根据修订结果处理（果有修订，根据修订结果处理（BII）v如果选择细胞学和阴道镜观察，对如果选择细胞学和阴道镜观察，对6个月或个月或12个月就诊时细胞学结
27、果为个月就诊时细胞学结果为HSIL的女性的女性行诊断性切除是推荐的（行诊断性切除是推荐的（CIII）v观察一年后，连续观察一年后，连续2次细胞学结果为次细胞学结果为“无无CIN或恶性病变或恶性病变”的女性，可以返回常规筛查的女性，可以返回常规筛查v诊断为诊断为CIN2、3的女性，应根据的女性，应根据CIN指南进行处理，下列情况下，消融术是不可接受指南进行处理，下列情况下，消融术是不可接受的（的（EII）n未进行阴道镜检查未进行阴道镜检查n未经组织学证明为未经组织学证明为CIN2、3n宫颈管评估出任何级别的宫颈管评估出任何级别的CINv对于对于HSIL女性采用重复细胞学检查或者女性采用重复细胞学
28、检查或者HPV DNA检测分流都是不可接受的管理方检测分流都是不可接受的管理方式（式（BII）Q：这部分病人如何评估她们的风险性？：这部分病人如何评估她们的风险性？Q：术后如何评估切缘细胞内的癌基因表达风险？：术后如何评估切缘细胞内的癌基因表达风险？25宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物中国宫颈癌筛查指南（中国宫颈癌筛查指南（2011版）：版）：HPV DNA返回返回 Q：上述问题怎么解决？：上述问题怎么解决？v 绝大多数绝大多数HPV感染可以自行清除感染可以自行清除v 30岁以前的女性是岁以前的女性是HPV感染的感染高峰期，此
29、后随着年感染的感染高峰期，此后随着年龄增长，龄增长，HPV感染逐渐下降，因此，感染逐渐下降，因此，HPV检测多用于检测多用于30岁以上女性的常规筛查。岁以上女性的常规筛查。v v 存在存在2个争议：个争议：v 细胞学和细胞学和HPV检测均为阴性的女性何时进行再次筛查？检测均为阴性的女性何时进行再次筛查？v 如何管理如何管理HPV阳性而细胞学阴性的人群？阳性而细胞学阴性的人群？26宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 主要问题主要问题 返回返回 v 30岁以下妇女，感染率高，清除率高，岁以下妇女，感染率高，清除率高，HPV（+）率高
30、，该如何评）率高，该如何评估风险？估风险？v HPV DNA（+）患者，直接镜检、活检？如何评估？）患者，直接镜检、活检？如何评估？v TCT结果：结果：ASCUS-HSIL，如何评估风险？，如何评估风险？n 未生育的妇女？未生育的妇女？n 直接镜检直接镜检&活检：过度检查活检：过度检查n 加大随访：可能会漏诊加大随访：可能会漏诊v 病检为病检为CIN1-3的患者，判断是否需要做预防性治疗？的患者，判断是否需要做预防性治疗？n 治疗过度？治疗过度？VS风险评估风险评估n 特殊病例：未生育女性特殊病例：未生育女性n 如何评估下一阶段的治疗措施？如何评估下一阶段的治疗措施？v 宫颈癌宫颈癌&CIN
31、II-III切除术后患者，如何评估手术及术后预估？切除术后患者，如何评估手术及术后预估？27宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物四、四、E6 E6、E7 mRNAE7 mRNA临床应用临床应用 E6E7和液基和液基细胞内细胞内E6/E7mRNA量化，与巴氏细胞学量化，与巴氏细胞学相比，可以更好的预测相比，可以更好的预测CIN2+病变病变结论指出结论指出E6/E7mRNA定量，可以有效地对定量，可以有效地对ASC-US/LSIL进行分流，包括进行分流，包括30岁以下女性。岁以下女性。28宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5
32、/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 E6E7和液基和液基在在LSIL人群，人群，mRNA比重复细胞学具有比重复细胞学具有更好的分类效果。更好的分类效果。29宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 跟踪随访跟踪随访CIN1在组织学鉴定结果为在组织学鉴定结果为CIN1或阴道镜检查为阴性的妇女或阴道镜检查为阴性的妇女中，中，HPV mRNA检测的预后价值：随访研究检测的预后价值：随访研究结论：结论：在管理那些阴道镜或组织学检测为阴性，高危型在管理那些阴道镜或组织学检测为阴性，高危型-HPV DNA检测为阳性妇女时，尤其
33、是为检测为阳性妇女时，尤其是为了降低那些阴性妇女的后续随访强度，作为一种预后的生物标记物，了降低那些阴性妇女的后续随访强度，作为一种预后的生物标记物，E6/E7 mRNA的过量表达检的过量表达检测看起来是一个很好的候选物。测看起来是一个很好的候选物。30宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 跟踪随访跟踪随访CIN2本文显示本文显示HPV RNA 检测与检测与DNA检测（检测（PCR）相比，敏感度相当，特异性较高。相比，敏感度相当，特异性较高。为为ASCUS或或LSIL的分流提供一种改进方法。的分流提供一种改进方法。用用HPV RN
34、A 和和DNA 检测预测检测预测CIN2+:对巴氏筛查为对巴氏筛查为ASCUS或或LSIL的那行进行的那行进行2年跟踪随访年跟踪随访31宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 阴道镜和活检结果差异后的复查阴道镜和活检结果差异后的复查 E6E7 mRNA检测在活检阴性女性阴道镜后检测在活检阴性女性阴道镜后随访中，具有更高的特异性比细胞学。随访中，具有更高的特异性比细胞学。结论：结论：活检阴性女性在进入常规筛查前需要随访，阴道镜后活检阴性女性在进入常规筛查前需要随访，阴道镜后E6E7 mRNA检测，与阴道镜后细胞学检测相比，不仅敏感，更
35、特异。总检测，与阴道镜后细胞学检测相比，不仅敏感，更特异。总之，之，E6E7 mRNA检测具有较高的阳性预测值检测具有较高的阳性预测值，阴道镜后，阴道镜后E6E7 mRNA（+），对），对40岁以上女性可以直接治疗。岁以上女性可以直接治疗。32宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 辅助制定治疗方案辅助制定治疗方案女性轻度宫颈病变分流：数据表明女性轻度宫颈病变分流：数据表明E6E7 mRNA检测是一种检测是一种“检测和治疗检测和治疗”方法。方法。结论：结论：40岁以上女性，若岁以上女性，若E6/E7 mRNA阳性结果或有相应的病阳性
36、结果或有相应的病变直接治疗的好处：减少随访次数、成本，和不必要的心里负变直接治疗的好处：减少随访次数、成本，和不必要的心里负担等。担等。33宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 E6/E7 mRNAE6/E7 mRNA检测与活检联合检测与活检联合活检结果E6/E7 mRNA检测结果解读临床处理建议CIN-未发现癌基因转录翻译立即用病理标本的石蜡切片做E6/E7mRNA检测。E6/E7mRNA（-），6个月细胞学及E6/E7mRNA检测；即时E6/E7mRNA（+）、6个月复查细胞学ASCUS或E6/E7mRNA(+)建议积极处理,
37、如冷冻、电灼或LEEP。+癌基因处于活跃状态，进展风险较大1、建议用病理标本的石蜡切片做E6/E7mRNA检测，作为 治疗的辅助指标。2、进行积极处理（如冷冻、电灼的病灶处理）或严格随 访。CIN、CINIII-癌基因处于不活跃状态，1、立即用病理标本的石蜡切片做E6/E7mRNA检测，作为 治疗的辅助指标。2、临床处理请参照指南。3、建议术后6个月进行细胞学及E6/E7mRNA检测。+癌基因处于活跃状态，进展风险较大1、建议用病理标本的石蜡切片做E6/E7mRNA检测，作为 治疗的辅助指标。2、临床处理请参照指南，建议积极处理及严格随访。3、建议术后6个月进行细胞学及E6/E7mRNA检测。
38、34宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 E6/E7 mRNAE6/E7 mRNA检测与细胞学联合检测与细胞学联合细胞学E6/E7 mRNA结果解读临床处理建议正常-没有HPV感染或癌基因没有进行转录翻译。1年后复查细胞学和E6/E7 mRNA。+HPV感染存在，癌基因已经开始转录翻译，未观察到细胞形态的改变。可抗病毒治疗，6个月后复查细胞学和E6/E7 mRNA。ASC-US-未发现癌基因转录翻译6-12个月复查细胞学和E6/E7 mRNA。+HPV感染存在，癌基因已经开始转录翻译，细胞形态处于转变期。阴道镜/活检。如无病变，进
39、行抗病毒治疗，半年后复查E6/E7 mRNA。如果E6/E7 mRNA（+），查细胞学，细胞学ASCUS，阴道镜检；如果E6/E7 mRNA（-），半年后查E6/E7 mRNA+细胞学。异常-癌基因此时处于不活跃状态。阴道镜/活检。如无病变，进行抗病毒治疗，半年后复查E6/E7 mRNA。如果E6/E7 mRNA（+），查细胞学，细胞学ASCUS阴道镜；如果E6/E7 mRNA（-），半年后查E6/E7 mRNA+细胞学。+HPV感染存在，癌基因已经开始转录翻译，细胞形态已经明显改变。处于细胞形态改变状态阴道镜/活检。无病变：抗病毒治疗，严密随访；CIN2+：相应手术治疗。l液基细胞学异常包括
40、结果为LSIL，ASC-H，HSIL。l此方案同样适用于术后随访患者。l活检后的临床处理参考2012年NCCN宫颈癌筛查指南或2011中国版宫颈癌筛查指南。35宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物 总结总结 高危高危HPV的持续性的持续性/整合感染，且整合感染，且表达表达E6、E7 mRNA是致癌的是致癌的关关键键，如果没有，如果没有E6、E7 mRNA,即使有高危即使有高危HPV，仍不会有宫颈癌。，仍不会有宫颈癌。不仅提示是否不仅提示是否感染感染了了HPV病毒；而且提示病毒致癌基因病毒；而且提示病毒致癌基因E6、E7是否在是否在
41、活动活动及活动及活动程度程度。1、宫颈癌的、宫颈癌的真正真正病因：病因：2、E6/E7 mRNA检测：检测：是继是继HPV DNA 检测的、检测的、最新一代最新一代宫颈癌风险评估方法！宫颈癌风险评估方法！与宫颈癌的相关性与宫颈癌的相关性更强更强，是判断罹患宫颈癌发生的，是判断罹患宫颈癌发生的高特异性高特异性风风险指标。险指标。36宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物组织病理学组织病理学 CIN/CIN/CINHPV E6/E7 mRNACIN/CIN/CINHPV E6/E7 mRNA，辅助确定，辅助确定 筛查间隔、否受手术及手术
42、类型筛查间隔、否受手术及手术类型流行病学流行病学 3030岁以下高感染、高转归女性，不适合做岁以下高感染、高转归女性，不适合做HPV DNA,HPV DNA,HPV E6/E7 mRNA HPV E6/E7 mRNA可选出致癌风险较大者，规避过度诊断治疗可选出致癌风险较大者，规避过度诊断治疗病毒学病毒学 HPV DNAHPV DNA（+）HPV E6/E7 mRNA HPV E6/E7 mRNA，选出有致癌活动的，选出有致癌活动的 HPV HPV感染者感染者细胞学细胞学 ASC-USASC-US以上以上HPV E6/E7 mRNAHPV E6/E7 mRNA，降低细胞学的漏诊率，降低细胞学的漏
43、诊率治疗学治疗学 手术后手术后HPV E6/E7 mRNAHPV E6/E7 mRNA，评估治疗效果并指导术后随，评估治疗效果并指导术后随 访。访。总结总结3、E6、E7 mRNA检测临床应用：检测临床应用：37宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物衷心感谢您的倾听，欢迎沟通交流指正！38宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022内部学习资料内部学习资料科蒂亚生物科蒂亚生物Amplification calculation:amplifier no.(6,20)x label probe no.(4;20)x tree no.(3;6-8)b-DNA 返回返回39宫颈癌基因宫颈癌基因EERNA检测检测11/5/2022
