1、HIV抗体检测技术规程抗体检测技术规程 HIVHIV病毒感染人体过程及免疫学机制病毒感染人体过程及免疫学机制o明确明确HIV感染者（诊断）感染者（诊断）n控制传播控制传播n及早医学干预及早医学干预n血液筛查血液筛查o流行病学调查、高危人群监测流行病学调查、高危人群监测o开展开展VCT的基础的基础o职业保护职业保护主要内容o HIV抗体检测的相关规范性文件o HIV抗体检测的方法和注意事项o HIV抗体确证实验的相关规程和结果解释o 目前我市HIV筛查实验室中存在的问题HIV抗体检测的相关规范性文件o 医疗机构临床实验室管理办法卫医发200673号 o 全国艾滋病检测工作管理办法卫疾控发2006
2、218号 o 全国艾滋病检测技术规范(2009年版)HIV抗体检测的相关规范性文件o 全国艾滋病检测工作管理办法卫疾控发2006218号 o 检测工作要求第十二条艾滋病检测实验室应在规定的职能范围内开展检测工作，遵守国家法律、法规和有关规范。检测技术及程序应符合全国艾滋病检测技术规范的要求。HIV抗体检测的方法和注意事项o HIV抗体检测的主要方法金标准o 包括初筛实验和确证实验 p初筛实验:p试剂必须经国家食品药品监督管理局注册批准，在有效期内的，批批检合格p敏感性和特异性好：p方法包括：ELISA，化学发光法和快速检测法（免疫层析，颗粒凝集等方法）p样本：血清、血浆；干血斑；唾液；尿液 H
3、IV抗体检测的方法和注意事项快速免疫层析明胶颗粒凝集法（PA）HIV ELISA试剂质量评估：http:/ 在有效期内使用o试验操作试验操作 形成良好的操作习惯形成良好的操作习惯：加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。严格按试剂说明书操作严格按试剂说明书操作:空白孔不加样品和酶标试剂 操作过程中集中精力操作过程中集中精力：避免加样错误注意事项注意事项o保证实验室温度，室温过低有可能造成吸光度值偏低。o ELISA试验的敏感性很高，如果操作不当很容易出现非特异性反应。在操作过程中，尤其应注意洗涤过程。洗涤彻底可减少假阳性的机会。o进行ELISA
4、试验时，必须用酶标仪进行测定，不得目测结果。使用酶标仪时，要避免酶标孔内产生气泡，影响判读结果。ELISA操作中的注意事项操作中的注意事项o 试剂准备试剂准备o 加样加样o 温育温育o 洗板洗板o 显色显色o 比色比色操作示范请看教学片操作示范请看教学片ELISA试验假阳性产生原因？o样品加错位置，标本搞错样品加错位置，标本搞错o洗板机设置不当，洗板时洗涤液溢出，污染其它孔洗板机设置不当，洗板时洗涤液溢出，污染其它孔o洗板机内部管道有真菌生长洗板机内部管道有真菌生长o实验中，实际孵育时间过长，温度过高实验中，实际孵育时间过长，温度过高o待测标本溶血或含有血细胞。待测标本溶血或含有血细胞。o待测
5、标本长菌或其它原因混浊。待测标本长菌或其它原因混浊。o其它原因：与试验操作无关其它原因：与试验操作无关HIV抗体筛查和复检的流程与2004版检测规范的不同报告HIV抗体检测阴性HIV感染产妇所生婴幼儿的抗体检测HIVHIV抗体确证实验的相关规程和结果解释抗体确证实验的相关规程和结果解释o 复检阳性或一阴一阳的样本 确认实验 送确认前，应核对身份，补充个人信息（姓名，身份证号等）填写”HIV抗体复检检测单”样本“三级包装”第一层：带盖的试管第二层：防水，防漏第三层：包装箱（内附缓冲材料）HIV抗体确认实验o 包括：免疫印迹实验免疫印迹实验(WB)条带免疫试验条带免疫试验(LIA)免疫荧光试验免疫
6、荧光试验(IFA)放射免疫沉淀试验放射免疫沉淀试验(RIPA)a 强阳性对照（强阳性对照（HIV-1和和HIV-2）b弱阳性对照（弱阳性对照（HIV-1）c阴性对照阴性对照d典型的典型的HIV-2血清阳性反应血清阳性反应HIV抗体确证实验的流程HIV抗体检测的样本保存o 用于抗体和抗原检测的血清和血浆样本：1周内 2-8保存 1周-20 保存o 筛查阳性样本：送确证o 筛查阴性样本：根据具体情况，至少1-2个月o 确证样品：保存10年以上目前我市HIV筛查实验室中存在的问题o 实验室布局不合理，没有严格分区；没有标识 o 个别实验室设备不全，没有安全柜o 仪器没有定期校准 o 没有HIV实验室生物安全管理制度和SOP
